BCA法测定蛋白浓度(经典)
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PIERCE的BCA(bicinchoninic acid)蛋白质检测试剂是当前比Lowry法更优越的专用于检测总蛋白质含量的产品。
该方法以快速灵敏、稳定可靠且对不同种类蛋白质变异系数甚小而深受专业人士的青睐。
其中MicroBCA产品可检测到μg/ml的微量蛋白,是目前已知的最灵敏的蛋白质检测试剂之一。
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1.主要特点:
·准确灵敏:BCA试剂的蛋白质测定范围是20-2000μg/ml,采用加强方法可检测到5μg/ml;MicroBCA试剂测定范围是μg/ml。
·快速:45分钟内完成测定,比经典的Lowry法快4倍而且更加方便。
·经济实用:除试管外,测定可在微孔板中进行,大大节约样品和试剂用量。
·不受样品中离子型和非离子型去污剂影响。
·检测不同蛋白质分子的变异系数远小于考玛斯亮蓝。
2.基本原理:
碱性条件下,蛋白将Cu++还原为Cu+, Cu+与BCA试剂形成紫颜色的络合物,测定其在562nm处的吸收值,并与标准曲线对比,即可计算待测蛋白的浓度。
BCA分子式:
原理图:
用PIERCE的BCA试剂盒所得的标准曲线:
MicroBCA蛋白标准曲线
BCA蛋白标准曲线
蛋白质检测流程:
4.产品信息:。