蛙坐骨神经腓肠肌标本的制备及刺激与反应的关系
一、实验目的：
1．学习和掌握制备蛙类坐骨神经腓肠肌标本的方法
2．应用电刺激方法测定肌肉阈刺激、阈上刺激和最大刺激强度，了解刺激的种类、刺激强度与肌肉收缩的关系
二、实验原理：
1．蛙的离体组织易于控制和掌握，神经—肌肉标本常用来研究一些规律和特性
2．肌肉具有兴奋性，受到刺激表现出收缩反应
3．阈刺激才能引起反应。从阈刺激开始肌肉收缩，收缩强度随刺激强度增大而增大，直到最大强度后，肌肉收缩不再加强
三、实验用品：
动物：蛙
用品：生物信号处理器、张力转换器、蛙板、解剖器械、铁架台、任氏液、棉线以及图钉等
四、实验方法与步骤：
1．破坏蛙的脑和脊髓
2．从上部切断蛙的脊柱
3．剪除蛙的上半身以及内脏
4．除去蛙腿上的皮肤
5．分离蛙两腿，将其置于任氏液中
6．分离坐骨神经以及腓肠肌，腓肠肌从肌腱处剪开，脱离骨
7．连接装置，刺激腓肠肌：改变刺激强度（从弱到强，直到最大刺激），观察对肌肉收缩的影响；找出阈强度、最适刺激强度；记录信号
注意事项：
制备标本及实验中，随时用任氏液润湿神经和肌肉，防止干燥。
每改变一次刺激频率后，应休息0.5-1 min, 每次刺激不要超过3-4 秒，以免标本疲劳。
刺激时注意观察肌肉的反应
实验项目
1、刺激强度与反应关系
刺激腓肠肌：改变刺激强度（从弱到强），观察对肌肉收缩的影响；
2、找出阈上强度、最适刺激强度、最大刺激强度
刺激神经：改变刺激强度（从弱到强），观察对肌肉收缩的影响
刺激腓肠肌：改变刺激强度（从弱到强），观察对肌肉收缩的影响
记录肌肉与神经的阈强度、最适刺激强度，并比较二者的兴奋性；3、刺激频率与反应的关系
记录在最适刺激强度下，刺激频率与肌肉收缩的关系
五、实验结果观察与记录以及分析：
1、刺激强度与反应关系
结果在一定范围内，刺激强度越大，电位变化越大
分析在阈下刺激内，刺激强度越大，电位变化越大；阈刺激可使肌肉达到阈电位，之后去极化
2、找出阈强度、阈上强度、最适刺激强度、最大刺激强度
结果小于阈强度的刺激都未引起肌肉收缩，直到刺激达到阈强度，肌肉收缩；在刺激强度超过阈刺激后，增加刺激强度，肌肉兴奋性不变，肌肉收缩幅度不再加大
分析阈强度是引起细胞达到阈电位的最小刺激，骨骼肌具有“全或无”现象
3、刺激频率与反应的关系
结果给予骨骼肌单个刺激，可发生一次动作电位，引起肌肉一次短暂收缩；频率增加到一定程度，发生强直收缩。
分析神经肌肉间的兴奋传递，是电-化学-电的传递过程，神经末梢释
放的乙酰胆碱与受体结合后，触发动作电位，之后乙酰胆碱被胆酰脂酶分解，舍得神经肌肉间兴奋传递一呈现一对一关系。肌肉
4实验图像不准确分析
1、由于蛙的坐骨神经-腓肠肌标本在空气中放置时间较长，会影响它的活性，所以得到的数据并不是那么准确。
2、有些电压虽然增大了一点，但是它的收缩强度并没有太大的变化，可能是由于标本的生理活动受到了影响，也可能是因为那是它所能承受的最大刺激强度了。
六、思考题
1、用各种刺激检测标本兴奋性，为什么从中枢端开始
防止其他因素对实验的干扰，最快捷准确的方法，就是刺激中枢
2、刺激有几种形式
物理刺激和化学刺激
