小鼠背部皮肤取材-福尔马林固定
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1、选取实验组(敲除鼠)和对照组(WT or Gene+/-小鼠),各个年龄阶段均选2只左右;
2、麻醉小鼠;
3、立刻用剃毛器将小鼠背部皮肤毛发剃去,;如图1,左为剃毛前,右为剃毛后;
4、用碘伏酒精涂抹取皮部位后,用镊子捏起小鼠背部皮肤,用手术剪刀剪取位于头颈部到
尾部之间三分一处的背部皮肤(如图2,红色长方形选框为取皮区域,宽约0.25cm、长约0.5cm左右,白色竖线为小鼠腹中线);取完皮后,用碘伏酒精涂抹取皮部位,放回饲养笼继续饲养;
5、将获得的背部皮肤以真皮面朝下的方式平铺在滤纸上(由于真皮面脂肪的粘附性,真皮
会吸附于滤纸上),一定要将皮肤铺平(如有皱缩会影响后续的切片!);
6、将带有长方形皮肤样本的滤纸区域剪下来,置于包埋盒(如图3)中,并在包埋盒上用
铅笔记录皮肤对应的小鼠信息(如基因敲除信息、年龄、性别、取皮时间等),然后将包埋盒浸没于10%的中性福尔马林中固定保存(小鼠皮肤样本固定时间为24-48h为宜,尽量别超过1周);
7、装有皮肤样本的包埋盒可以置于含有10%中性福尔马林的容器中邮寄。
图1
图2
图3