母液配制计算表

MS 培养基配方1、配置MS母液母液配置：加热都是用温水浴加热，全部都要避光保存，用装乙醇的棕色瓶来保存在4度即可表2.1大量元素母液药品20x g/L 500ml（20 x）KNO338g 19gNH4NO333 g 16.5gMgSO4•7H2O7.4 g 3.7gCaCl2 6.644g 3.322gKH2PO4 3.4g 1.7g溶于200ml蒸馏水,定容至500ml 需要加热才能完全溶解CaCL2.2H2O 4.4g/L表2.2微量元素母液药品100x g/L 500ml（100x g/L）KIH3BO3MnSO4.4H2OZnSO4.7H2ONa2MoO4.2H2OGuSO4.5H2O CoCl2.6H2O 0.083g0.6222.3 g0.86 g0.025 g0.0025 g0.0025 g0.0415 g0.31 g1.115 g0.43 g0.0125 g0.00125 g0.00125 g溶于100ml蒸馏水,定容至500ml表2.3有机母液药品100x 1L500ml(100x)肌醇10g5g烟酸0.05g0.025gVB60.05g0.025gVB10.1g0.05g甘氨酸0.2g0.1g表2.4铁盐母液药品100x g/L500mlFeSO4•7H2O 2.78g 1.39gNa2-EDTA. 2H2O 3.73g 1.865g铁盐配制将FeSO4·7H2O和Na2-EDTA.2H2O分别溶于100ml蒸馏水中，加热，（很重要）不断搅拌，溶解后，两液混合，加水定容至500ml，置于小口瓶中，贴上标签2、固体MS培养基材料•找到4种母液：大量元素，微量元素，有机微量元素，铁盐母液•蔗糖，琼脂锥形瓶MS培养基配方：母液都稀释至1xMS培养基配方（1L）母液体积或重量(1L) 200ml大量元素20x50mL 10ml铁盐100x 微量100x 10mL 2ml 10mL 2ml有机100x10mL 2ml 蔗糖15g（15g/L）3g琼脂8g（8g/L） 1.6gPH先调至 5.85-5.88，最终灭菌后pH接近5.81）。

培养基母液的配制方法一、实验目的1.了解无菌操作2.掌握培养基母液的配制方法二、实验原理配制培养及时，为了使用方便和用量准确，通常采用母液法进行配制，即将所选培养基配方中各试剂的用量，扩大若干倍后再准确称量，分别先配制成一系列的母液置于冰箱中保存，使用时按比例吸取母液进行稀释配制即可。

三、实验器材和药品器材：电子天平、烧杯、容量瓶、细口瓶、药勺、玻璃棒、电炉。

药品：NH4NO3、KNO3、CaCl2·2H2O、MgSO4·7H2O、KH2PO4、KI、H3BO3、MnSO4·4H2O、ZnSO4·7H2O、Na2MoO4·2H2O、CuSO4·5H2O、CoCl2·6H2O、FeSO4·7H2O、 Na2-EDTA·2H2O、肌醇、烟酸、盐酸吡哆醇(维生素B6)、盐酸硫胺素 (维生素B1)、甘氨酸。

四、实验步骤1、大量元素母液的配制各成分按照表1培养基浓度含量扩大10倍用天平称取，用蒸馏水分别溶解，按顺序逐步混合。

后用蒸馏水定容到 1000ml的容量瓶中，即为10倍的大量元素母液。

到入细口瓶，贴好标签保存于冰箱中。

配制培养基时，每配1L培养基取此液100ml。

表1 MS培养基大量元素母液制备注意：(1) 配制大量元素母液时，某些无机成分如Ca2+、SO42－、Mg 2+和H2PO4一等在一起可能发生化学反应，产生沉淀物。

为避免此现象发生，母液配制时要用纯度高的重蒸馏水溶解，药品采用等级较高的分析纯，各种化学药品必须先以少量重蒸馏水使其充分溶解后才能混合，混合时应注意先后顺序。

特别应将Ca2+、SO42一、Mg 2十和H2PO4一等离子错开混合，速度宜慢，边搅拌边混合。

(2)CaCl2·2H2O要在最后单独加入，在溶解CaCl2·2H2O 时，蒸馏水需加热沸腾，除去水中的CO2，以防沉淀。

植物组织培养母液配置一、实验目的学习配置培养基的母液，掌握配制方法，了解母液存储方法二、实验原理配置培养基时，为了使用方便和用量准确，通常采用母液法进行配置，即按培养基配方中各试剂的用量，扩大若干倍后再准确称量分别先配制成一系列的母液置于冰箱中保存，使用时按比例吸取母液进行稀释配置即可。

三、实验器材、试剂1器材电子天平烧杯（50ml 100ml 500ml 1000ml）量筒（1000ml 100ml 25ml）容量瓶（100 500 1000）2试剂NH4NO3,KNO3,KH2PO4,CaCl2·2H2O,MgSO4·7H2O,FeSO47H2ONa2-EDTA,MnSO4·4H2O,ZnSO4·7H2O,H3BO3,KI,Na2MoO4·2H2OCuSO4·5H2O,CoCl2·6H2O,肌醇，甘氨酸，盐酸硫胺素，盐酸吡哆醇，烟酸，蒸馏水四、实验步奏：一、母液的配置1、MS大量元素母液的配制一般将大量元素配制成10倍的母液，使用时再稀释10倍。

按照配方表中用量依次分别称取扩大10倍的：NH4NO3 、KNO3 ,KH2PO4 、MgSO4.7H2O 、CaCl2.2H2O 的量，所有药品称取完毕后用蒸馏水逐个溶解，待全部溶解后，最后定容至1000ml，转入1000ml细口试剂瓶中，贴上标签，注明母液名称、放大倍数、配制日期，置于冰箱中保存备用。

2、MS微量元素母液的配制一般将微量元素配制成100倍的母液，使用时再稀释100倍。

按照配方表中用量分别依次称取：MnSO4·4H2O、ZnSO4·7H2O 、H2BO3 、NaMoO4·2H2O、CuSO4·5H2O、 CoCl2·6H2O扩大100倍的量，用蒸馏水逐个溶解，待全部溶解后，用容量瓶定容至1000ml，转入1000ml细口试剂瓶中，贴上标签，注明母液名称、放大倍数、配制日期，置于冰箱中保存备用。

实验9：水培育苗配制技术一、实验目的1、了解营养液配制的原理。

2、掌握一种水培常用营养液的配制方法。

二、实验材料（以日本园式通用配方为例）1、大量元素Ca（NO3）2.4H2O、KNO3、NH4H2PO4、MgSO4.7H2O2、微量元素Na2Fe—EDTA、H3BO4、MnSO4.4H2O、ZnSO4.7H2O、CuSO4.5H2O、（NH4）6MO7O24.4H2O三、方法和步骤1、母液（浓缩液）配制以及用量：A液 Ca（NO3）2.4H2O ----189.00g、KNO3 -----161.80gB液 NH4H2PO4 -----30.60g、MgSO4.7H2O----- 98.60gC液 Na2Fe—EDTA----- 20.00g、H3BO4 -----2.86g 、MnSO4.4H2O -----2.13g、ZnSO4.7H2O ----- 0.22g、CuSO4.5H2O ----- 0.08g 、（NH4）6MO7O24.4H2O----- 0.02g2、母液的配制：按上述计算结果，准确称取化合物用量，按A、B、C种类分别溶于三个容器中，并注意物质一种一种的按顺序加入，前一种物质溶解后加入下一种物质，全部溶解后，定溶至1000ml，然后装入棕色瓶，并贴上标签，注明A、B、C母液。

3、工作营养液的配制：用上述母液配制50L的工作营养液，分别量取A母液和B母液各0.25L，C母液0.05L；在加入各母液的过程中，务必防止出现沉淀。

方法如下：（1）在贮液池内先放入相当于预配工作营养液体积40％水量﹪（即20L水），再将量好的A母液倒入其中，搅拌均匀。

（2）将量好的B母液慢慢倒入其中，并不断加水稀释，至达到总水量的80％为止（即再加20L水）。

（3）将C母液按量加入其中，然后加足水量不断搅拌均匀。

四、实验练习学生实际操作，按实验要求配置营养母液，配制工作营养液进行育苗（小麦）。

COD母液试剂配制
1.COD母液（5000mg/L）配制：
1)精确称取邻苯二甲酸氢钾 4.251g，置于小烧杯中，加入蒸馏
水充分搅拌，待完全溶解后，移入1L容量瓶中，定容至刻度，摇匀。

2)备注：若配制COD标准溶液（100mg/L），准确移取COD母液
20mL于1L容量瓶中，定容至刻度，摇匀，存放于冰箱冷藏。

若配制COD标准溶液（50mg/L），准确移取COD母液10mL于1L容量瓶中，定容至刻度，摇匀，存放于冰箱冷藏。

其它依此类推。

2.COD母液（10000mg/L）配制：
1)精确称取邻苯二甲酸氢钾8.502g，置于小烧杯中，加入蒸馏
水充分搅拌，待完全溶解后，移入1L容量瓶中，定容至刻度，摇匀。

2)备注：若配制COD标准溶液（100mg/L），准确移取COD母液
10mL于1L容量瓶中，定容至刻度，摇匀，存放于冰箱冷藏。

若配制COD标准溶液（50mg/L），准确移取COD母液5mL于1L容量瓶中，定容至刻度，摇匀，存放于冰箱冷藏。

其他依此类推。

培养基母液配制培养基配制通常先根据各组分性质，配制成较浓的母液（母液浓度为培养基浓度的若干倍如50或100倍），贮存在冰箱中备用，以后配制培养基时根据用量量取。

由于培养基成分较多，如果每配制一次即进行多次称量（不少成分用量较微），不仅会造成较大的误差，而且会增加工作量，因而配制母液可使培养基配制方便准确。

配制大量成分母液通常为原培养基浓度的20、50或100倍，倍数不宜过高。

MS培养基母液及培养基配方法参考表2。

大量成分母液经常将CaCl2·2H2O单独配制保存，以免长期贮存发生沉淀。

若将全部大量成分配在一起时，为防止在混合时发生沉淀，须在各药品充分溶解后，按表1.2中化合物出现顺序混合，氯化钙最后加入，以免与硫酸镁形成沉淀.大量成分称量溶解后，在1000 ml容量瓶中定容，然后移入磨口瓶中，贴上标签，置于普通冰箱（4℃）贮存。

微量元素母液配制时，由于培养基中微量元素用量甚微，浓度为0.l~0.0001mg/l，所以母液浓度宜为原培养基配方中用量的100倍。

一般将微量元素分别称量溶解，定容在1000 ml容量瓶中后贮存在一个细口瓶中，但也有将KI分别配制，单独贮存在棕色瓶中。

配好后，贴上标签，贮存于4℃冰箱。

培养基中的铁盐母液一般单独配制。

目前常用的铁盐为硫酸亚铁和乙二胺四乙酸二纳的螯合物。

称取Na2-EDTA 3.73 g，FeSO4 ·2H2O 2.78 g，分别溶解（可加热），然后混合定溶于1000 ml容量瓶中。

转入细口瓶，贴上标签，4℃冰箱中保存。

氨基酸和维生素等有机成分母液可配制时，母液浓度通常为原培养基配方的50倍（或100）。

常用氨基酸和维生素为水溶性物质，可用蒸馏水溶解，但叶酸要先用少量稀碱或稀氨水溶解，然后用重蒸馏水定容。

配制好后，转入细口瓶，贴上标签，-20℃（或4℃）冰箱中保存。

植物生长调节物质如生长素类和细胞分裂素类可以根据需要，灵活设计其浓度，一般为 0.01、0.1、0.2、0.5或1 mg/l。

培训教程2――标液配制实验室已有的标准物质母液的浓度分别为：COD：5000mg/L; p：5000 mg/L；Ge：5 mg/L；Cu：1000 mg/L；Pb：1000 mg/L; Zn：1000 mg/L；Ni：1000 mg/L；Mn：1000 mg/L；六价Cr：1000 mg/L；氨氮：2000 mg/L；Cd：5 mg/L。

1.标液配制步骤1.1 根据要配制的标液浓度C和体积，选择所需的容量瓶(体积为V)和移液管。

计算所移液的标准物质母液的体积和稀释倍数：稀释倍数＝母液浓度/要配制的标液浓度C所移液的标准物质母液的体积＝所需的容量瓶体积V/稀释倍数例如要配制约50ml的1.00mg/L的Pb标液，则选择100ml的容量瓶，由Pb标母液稀释1000倍，一次稀释要取0.10ml（100/1000＝0.10ml），很难操作，要分两次稀释（如果要移取1ml以下的溶液进行稀释，则分两次进行稀释），先稀释100倍，再稀释10倍，即先从母液中移取1.00ml溶液与100ml容量瓶中，加蒸馏水至标线，摇匀，再从中移取10.00ml溶液与100ml容量瓶中，加蒸馏水至标线，摇匀即得。

浓度单位是mg/L，体积单位是ml。

进行移液，定容，具体操作见《培训教程1――实验室常用仪器的使用》。

2注意事项2.1 从母液中移取溶液要先把母液倒入洗净的烧杯或一次性塑料杯中（移液前先荡洗2～3遍），不能直接把移液管从母液中移取溶液；2.2 选择容量瓶时要比所需的体积大。

3 示例现需要100ml的50.00mg/LCOD标液，首先，选择250ml的容量瓶，由5000mg/LCOD标母液稀释100倍（5000/50＝100）得，要移取2.50ml（250/100＝2.50）COD标母液于250ml容量瓶中，加蒸馏水至标线，摇匀即得。

一、MS培养基母液注意：1．大量元素按照使用时高10倍的数值称取，分别将各种化合物称量后，除CaCl2·2H2O单独配制外，其余化合物混合在500ml 烧杯中加适量蒸馏水溶解，用玻璃棒搅拌促溶，倒入1000ml容量瓶中用蒸馏水定容至刻度，置小口瓶中保存，贴上标签注明化合物名称（或编号），浓缩倍数，配制日期和配制者姓名，CaCl2·2H2O配制同上置于另一小口瓶中。

2．微量元素母液的配制按要求浓缩100倍的数值称取，分别将各种化合物称量除铁盐（FeSO4·7H2O和Na2-EDTA.2H2O）作为一组单独配制外，其余化合物可混合置于烧杯内加少量蒸馏水溶解后，定容在1000ml容量瓶中，置小口瓶中保存，贴上标签。

3．铁盐配制将FeSO4·7H2O和Na2-EDTA.2H2O分别溶于450ml蒸馏水中，加热，（很重要）不断搅拌，溶解后，两液混合，调PH至5.5加水定容至1000ml，置于小口瓶中，贴上标签。

4．有机物母液配制，按母液要求浓缩50倍，除蔗糖按3%单独临时称量外，其余分别称量后，溶解，定容在500ml容量瓶中，置于小口瓶中保存，贴上标签。

5．母液最好在2~4℃的冰箱中贮存，特别是有机类物质，贮存时间不宜过长，无机盐母液最好在一个月内用完，如发现有霉菌和沉淀产生，就不能再使用。

1．制备母液和营养培养基时，所用蒸馏水或无离子水必须符合标准要求，化学药品必须是高纯度的（分析纯）。

2．称量药物采用高灵敏度的天平，每种药品专用一药匙。

．生长调节剂母液配制：为了操作方便，节约时间，生长调节剂也可如同配制母液一样，先配成原液，这样配制培养基时只要稍加计算，按需要量取即可。

不同药品在配制时若不溶于水，可用少量不同的溶剂先溶解，萘乙酸（NAA），吲哚乙酸（IAA）,赤霉素（GA3），2，4-D等生长素和玉米素（ZT）可先用少量95%酒精溶解，然后加水，如溶解不完全再加热。

实验二培养基母液的配制及保存一、目的要求了解并掌握植物组织培养中MS培养基母液、生长调节剂母液配制与保存的基本知识及操作规范，能根据配方准确计算各种药品的称取量。

二、基本原理在配制培养基之前，为了使用方便、简化操作、用量准确，减少每次配药称量各种化学成分所花费的时间和误差，常常将配制培养基所需无机大量元素、微量元素、有机物、铁盐、激素等分别配制成比需要量大若干倍的浓缩母液，置于冰箱内保存。

当配制培养基时，按预先计算好的量分别吸取各种母液即可。

本实训以MS培养基为例，学习培养基母液的配制方法。

三、试剂与主要用具1．仪器、用具电子天平(感量0.01g和0.0001g)、药匙、玻璃棒、称量纸、吸水纸、滴管、洗瓶、标签纸、烧杯（50ml、100ml、200ml）、容量瓶（100ml、200ml、500ml、1000ml）、试剂瓶（100mL、200mL、500ml、1000ml）、量杯、量筒、移液管、移液枪、洗耳球、电炉、冰箱等。

2．试剂（1）95%乙醇、1mol/L NaOH、1mol/L HCl（2）MS培养基各成分试剂（3）植物生长调节剂：2，4-D、6-BA、IAA、NAA等（4）洗涤剂、蒸馏水四、方法步骤1．大量元素母液的配制按照MS培养基配方的需要量，将各种化合物称量扩大10倍，用电子天平称取，并分别用少量蒸馏水溶解，如溶解速度慢，可稍加热。

完全溶解后，按表4-1顺序依次混合已溶解的化合物溶液，并搅拌，以免产生沉淀，注意最后加入氯化钙溶液，混匀，用量筒定容到500ml，倒入试剂瓶中并贴好标签。

保存于4℃冰箱待用。

表4-1 MS培养基大量元素母液（10倍）的配制剂量2．微量元素母液的配制按照MS培养基配方需要量，将微量元素各种化合物（如表4-2）扩大100倍，用万分之一的电子天平分别准确称取，用少量蒸馏水溶解，也可以混合溶解，混合后定容到500mL。

将配制好的母液倒入试剂瓶中，并贴好标签，保存于4℃冰箱中。

配制2升MS+琼脂0.6%+蔗糖3%的固体培养基，阐述母液配制，培养基配制的全过程（1）母液配制：1确定制备的培养基为MS+琼脂0.6%+蔗糖3%为大量元素培养基，应注意溶解和添加顺序，防止沉淀。

2确定各母液的浓缩倍数，大量母液一般为浓缩10倍有机母液浓缩100倍，即所需配制的大量母液为200ml 微量元素20ml，铁盐20ml，有机元素20ml。

3根据公式：药品称取量（mg）=配方用量x浓缩倍数x母液体积计算出各药品的用量，即琼脂12g、蔗糖60g4用普通天平（1/100）称量药品，称号后的药品要分别放置。

5将药品分别放入烧杯中，分别溶解，经充分溶解后再混匀。

6将混合后的溶液移入容量瓶中，进行定容。

7混合均匀后，将母液转入试剂瓶。

8在试剂瓶上贴上标签，注明母液名称，浓缩和配制日期。

9放入冰箱中低温（2~4度）保存。

（2）培养基的配制：1根据配方计算所需的各母液，琼脂及蔗糖的量分别为大量：200ml 微量20ml 铁盐20ml 有机20ml 琼脂12g 蔗糖60g。

2在容器内装相当于1/3左右的纯水，加入称好的琼脂粉，并将其加热溶解再次加入大量元素、微量元素、铁盐、有机物母液，最后加入称量的蔗糖并搅拌均匀。

3加水定容至2L，再搅拌均匀。

4调整培养基的pH5将配制好的培养基尽快分装。

6将分装后的培养基进行封口7用高压灭菌锅进行灭菌。

现在需要你配制2升MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L+琼脂0.6%+蔗糖3%的固体培养基，已知大量元素母液10倍，微量元素母液100倍，铁盐50倍，有机物母液50倍，6-BA母液1mg/ml，NAA母液0.1mg/ml，请你阐述培养基的配制及灭菌的全部过程。

1根据配方计算所需的各母液，琼脂及蔗糖的量分别：为大量元素母液200ml，微量元素20ml，有机物40ml，6-BA4ml，NAA2ml，琼脂12g，60g.2在容器内装相当于1/3左右的纯水，在依次加入称好的琼脂粉，并将其加热溶解再次加入大量元素、微量元素、铁盐、有机物母液，6-BA，NAA，蔗糖。

培养基母液配制培养基配制通常先根据各组分性质, 配制成较浓的母液（母液浓度为培养基浓度的若干倍如50或100倍）, 贮存在冰箱中备用, 以后配制培养基时根据用量量取。

由于培养基成分较多, 如果每配制一次即进行多次称量（不少成分用量较微）, 不仅会造成较大的误差, 而且会增加工作量, 因而配制母液可使培养基配制方便准确。

配制大量成分母液通常为原培养基浓度的20、50或100倍, 倍数不宜过高。

MS培养基母液及培养基配方法参考表2。

大量成分母液经常将CaCl2·2H2O单独配制保存, 以免长期贮存发生沉淀。

若将全部大量成分配在一起时, 为防止在混合时发生沉淀, 须在各药品充分溶解后, 按表中化合物出现顺序混合, 氯化钙最后加入, 以免与硫酸镁形成沉淀.大量成分称量溶解后, 在1000 ml容量瓶中定容, 然后移入磨口瓶中, 贴上标签, 置于普通冰箱（4℃）贮存。

微量元素母液配制时, 由于培养基中微量元素用量甚微, 浓度为~l, 所以母液浓度宜为原培养基配方中用量的100倍。

一般将微量元素分别称量溶解, 定容在1000 ml容量瓶中后贮存在一个细口瓶中, 但也有将KI分别配制, 单独贮存在棕色瓶中。

配好后, 贴上标签, 贮存于4℃冰箱。

培养基中的铁盐母液一般单独配制。

目前常用的铁盐为硫酸亚铁和乙二胺四乙酸二纳的螯合物。

称取Na2-EDTA g, FeSO4 ·2H2O g, 分别溶解（可加热）, 然后混合定溶于1000 ml容量瓶中。

转入细口瓶, 贴上标签, 4℃冰箱中保存。

氨基酸和维生素等有机成分母液可配制时, 母液浓度通常为原培养基配方的50倍（或100）。

常用氨基酸和维生素为水溶性物质, 可用蒸馏水溶解, 但叶酸要先用少量稀碱或稀氨水溶解, 然后用重蒸馏水定容。

配制好后, 转入细口瓶, 贴上标签, -20℃（或4℃）冰箱中保存。

植物生长调节物质如生长素类和细胞分裂素类可以根据需要, 灵活设计其浓度, 一般为、、、或1 mg/l。