Applied Biosystems 7900HT Fast Real-Time PCR System 安装标准流程
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R-spondin1在促进人骨髓间充质干细胞成骨分化中的作用孙博;张弢;杨龙;李靖;任厚相;孙琦;王建吉;叶川【摘要】目的:研究Wnt信号通路激活剂R-spondin1在人骨髓间充质干细胞(hBMSC)成骨分化中的作用.方法:用0、5、10、20 μg/L R-spondin1处理hBMSC,利用荧光素酶实验检测R-spondin1对hBMSC中Wnt信号通路的作用,Western blot检测R-spondin1对Wnt信号通路下游靶基因β-catenin蛋白表达的影响;在成骨分化培养基中添加20 μg/L R-spondin1诱导hBMSC成骨分化,检测R-spondin1对早期成骨分化指标ALP活性及成骨分化晚期钙沉积、成骨分化标志物OSX、OCN和成骨分化关键转录因子RUNX2表达的影响.结果:R-spondin1增强hBMSC中Wnt信号通路,R-spondin1增强ALP活性和钙沉积,促进OSX、OCN及RUNX2的表达.结论:R-spondin1增强hBMSC中Wnt信号通路的作用,促进hBMSC成骨分化.【期刊名称】《贵阳医学院学报》【年(卷),期】2015(040)005【总页数】5页(P438-441,446)【关键词】R-spondin1;Wnt信号通路;人骨髓间充质干细胞;成骨分化;RUNX2【作者】孙博;张弢;杨龙;李靖;任厚相;孙琦;王建吉;叶川【作者单位】贵阳医学院,贵州贵阳550004;中国人民解放军第117医院骨科,浙江杭州311201;贵阳医学院,贵州贵阳550004;贵阳医学院,贵州贵阳550004;贵阳医学院,贵州贵阳550004;贵阳医学院,贵州贵阳550004;贵阳医学院,贵州贵阳550004;贵阳医学院,贵州贵阳550004【正文语种】中文【中图分类】R318.17骨缺损是临床上常见的骨骼系统疾病,严重危害患者的生活质量。
人骨髓间充质干细胞(human bone marrow mesenchymal stem cells,hBMSC)是成骨细胞的前体细胞,具有自我更新能力和多向分化潜能,在体外可定向分化为骨细胞,是骨再生工程理想的种子细胞,具有重要的临床应用前景[1]。
Code No.:DRR041ASYBR® Premix Ex TaqTM (Perfect Real Time) (200 次量)目内 容●制品说明 ●制品内容 ●适用的 Real Time PCR 扩增仪 ●保 存录页 码1 1 1 1 1 1 2 2 2 2 3 3 3●TaKaRa Ex TaqTM HS活性定义 ●纯 度●Real Time PCR 性能检测 ●试剂盒原理 ●试剂盒特长 ●操作注意 ●Real Time PCR 操作顺序 ●操作方法 ◆应用 Thermal Cycler Dice Real Time System 扩增仪的操作方法 ◆应用 ABI PRISM 7000/7700/7900 HT, 7300/7500/7500 Fast Real - Time PCR 的操作方法 ◆应用 Light Cycler Real Time PCR 扩增仪的操作方法 ◆应用 Smart Cycler II System Real Time PCR 扩增仪的操作方法 ◆应用 Mx3000P Real Time PCR 扩增仪的操作方法 ●PCR 反应条件说明 ●实验例 ●进行 RT-PCR 反应时的实验方法 ●引物设计说明 ●引物设计服务说明: 本公司提供用于基因表达定量分析的引物设计及合成服务 ●问 答4 5 7 8 9 9 11 1314 14◆特别提示: 本制品请于 4℃避光保存,避免冻结制品!●制品说明本制品是采用SYBR® Green I嵌合荧光法进行Real Time PCR的专用试剂。
制品中已经将DNA聚合酶、反 应用Buffer、dNTP、SYBR® Green I等试剂预混在一起,是一种 2×浓度的Premix Type试剂,进行实验 时,PCR反应液的配制十分方便简单。
制品中的DNA聚合酶使用了改良后的Hot Start法用 DNA聚合酶TaKaRa Ex TaqTM HS,与TaKaRa精心研制的Real Time PCR用Buffer组合使用,可以有效抑制非特异性的PCR扩增,大大提高PCR的扩增效率,进行高灵敏度的Real Time PCR扩增反应。
作物学报 ACTA AGRONOMICA SINICA 2012, 38(10): 1766−1774 /zwxb/ISSN 0496-3490; CODEN TSHPA9E-mail: xbzw@本研究由国家转基因生物新品种培育科技重大专项(2011ZX08009-003)和留学人员科技活动择优资助项目“农作物分枝机理及应用研究”资助。
*通讯作者(Corresponding author): 李学勇, E-mail: xueyong.li@, Tel: 010-********第一作者联系方式: E-mail: tottiwang@, Tel: 136********Received(收稿日期): 2012-03-01; Accepted(接受日期): 2012-06-10; Published online(网络出版日期): 2012-07-27. URL: /kcms/detail/11.1809.S.20120727.0844.011.htmlDOI: 10.3724/SP.J.1006.2012.01766水稻DUS 测试标准品种丛矮2号矮化多分蘖表型的遗传基础王 涛1 袁守江2 尹 亮2 赵金凤1 万建民1,3 李学勇1,*1中国农业科学院作物科学研究所 / 农作物基因资源与基因改良国家重大科学工程, 北京 100081; 2 山东省水稻研究所, 山东济南250100; 3南京农业大学 / 作物遗传与种质创新国家重点实验室 / 江苏省植物基因工程技术研究中心, 江苏南京 210095 摘 要: 水稻DUS 测试标准品种之一丛矮2号(cl2)具有矮化多分蘖的表型特征, 遗传分析表明该性状由1对隐性核基因控制, 已将其定位在第4染色体长臂InDel 标记C4-CL5和C4-CL4之间。
对这2个标记之间一个已报道的多分蘖基因D17/HTD1进行测序, 发现cl2中的D17/HTD1基因编码区第1 796个碱基由C 突变为T, 从而导致第599位的氨基酸由脯氨酸变成亮氨酸。
支气管哮喘治疗效果观察及预防意义研究论文(共6篇)本文从网络收集而来,上传到平台为了帮到更多的人,如果您需要使用本文档,请点击下载按钮下载本文档(有偿下载),另外祝您生活愉快,工作顺利,万事如意!第1篇:支气管哮喘患者吸入糖皮质激素治疗依从性的研究支气管哮喘是临床常见的呼吸系统疾病,严重影响着患者的身体健康,需要长期、持续治疗。
糖皮质激素是治疗该疾病的有效药物,其对于改善患者临床症状和抑制病情的进展有着显著的效果。
但是在支气管哮喘患者吸入糖皮质激素治疗的过程中,需要得到患者的积极配合,严格执行医嘱,方能达到理想的治疗效果。
反之,患者对于治疗的依从性差,则会在一定程度上影响药物的治疗效果,这就需要采取针对性的护理干预措施,提高患者的治疗依从性。
本研究以我院收治的96例支气管哮喘患者作为研究对象,现报告如下。
1资料与方法一般资料本组研究对象为我院2014年7月~2016年4月期间收治的96例支气管哮喘患者,将其随机分为观察组和对照组各48例。
观察组男性患者27例,女性患者21例,年龄41~78岁,平均年龄(±)岁。
对照组男性患者28例,女性20例,年龄39~76岁,平均年龄(±)岁。
两组患者的基线资料对照相仿(P>),对比研究具有可行性。
方法治疗方法两组患者均接受雾化吸入糖皮质激素治疗,在常规抗感染、抗炎治疗的基础上,使用布地奈德气雾剂(普米克,阿斯利康制药有限公司,国药准字H20030410)200~1600μg/d,2~4次/d,根据患者的病情严重程度进行适当的调整。
同时吸入82激动剂予以配合,观察患者的临床疗效。
护理方法对照组患者接受病情监测和生活指导,而观察组则是在对照组的基础上,对临床护理工作内容予以补充,给予更为全面、综合的护理干预措施,具体如下:1)健康宣教:开展健康宣教活动,由护理人员向患者普及支气管哮喘的疾病知识,提高患者的认知程度。
同时向患者介绍吸入糖皮质激素治疗的方法、步骤、目的和预期效果,告知患者该治疗方法的安全性和有效性良好,增加患者对其的了解程度,消除心中的顾虑。
Invitrogen的ICFC系列产品促销1.QPCR及QRT-PCR系列产品Invitrogen公司专门为中国客户提供的定量PCR试剂盒,结合了 UDG 防止残余污染技术和SYBR® Green I 荧光染料(存在于SYBR® Green I荧光定量PCR试剂盒中),在美国接受了严格的质量监控,可提供极高灵敏度的目的序列定量检测,线性剂量低,反应浓度范围很大。
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applied biosystems 7900HT荧光定量PCR仪相对定量实验简易操作流程SDS 2.47900HT定量PCR仪相对定量实验简易操作流程1.双击桌面图标开启SDS software或从Start >All Programs > AppliedBiosystems > SDS 2.4> SDS 2.4开启软件。
2.进入SDS software后出现Login窗口,输入用户名和密码,或以administrator登入(无须键入密码),按OK进入软件。
3.点选或从“File”下选择“New”,出现如下窗口:Assay:选择△△Ct(RQ)Container:根据反应板类型,选择96-well Plate,384-well Plate或384-well Taqman Low Density ArrayTemplate:Blank Template (如有之前已设好的Template,点击Browse可导入模板) 。
Barcode:可使用扫瞄器记录样品板条形码,如果没有条码此项留空白。
3.1点击OK,即出现Plate Document。
①在Setup 窗口下点“Add Detector”即会弹出Detector Manager,②如有已设定的Detectors,选中待检测的Detector,③点击Copy to Plate Document,④点击Done完成添加。
3.2设定新的Detector:①在Detector Manager中点击“New”,②进入“AddDetector”窗口设置Detector,③点击“OK”完成detector设置。
Name:输入基因名称。
Reporter:选择所使用的报告荧光。
Quencher:如果使用MGB探针或SYBR染料则选None Fluorescent。
如探针淬灭基团为TAMRA则选择TAMRA。
3.3设置反应板:①选中放置样品的反应孔,②标记“Use”,③输入样本名称,④在“Task”栏中选择属性:目的基因“Target”,内参“Endogenous Control”。
地塞米松调节T细胞免疫应答保护小鼠急性炎性肝损伤的作用刘焕荣;陆芸;张正国;王健;王昱;刘光伟;薛峰【摘要】背景:在小鼠急性炎性肝损伤中,地塞米松(Dex)可通过抑制天然免疫细胞功能抑制肝损伤进展,然而T 细胞是否参与此保护作用尚少见报道。
目的:探讨 Dex 在急性炎性肝损伤中对 T 细胞免疫应答的调节效应。
方法:6只雄性C57BL/6J 小鼠随机分为实验组和模型组,在以脂多糖诱导急性炎性肝损伤模型前1 h,两组分别腹腔注射 Dex 5 mg/ kg 和等体积 PBS。
建模12 h 后处死小鼠,行临床评分并检测肝功能;分离脾脏单个核细胞,分析 T 细胞活化情况以及各 T细胞亚群的细胞因子表达、分泌和转录因子表达。
结果:实验组小鼠临床评分和血清转氨酶水平均明显低于模型组,脾脏 CD44+ CD62L - T 细胞(活化或记忆性 T 细胞)比率显著降低,Th1型细胞因子 IFN-γ表达、分泌减少,Th2型细胞因子IL-4表达、分泌增加,调节性 T 细胞(Treg 细胞)比率、Th2/ Th1、Treg/ Th1比值增加;同时,Th1细胞特异性转录因子表达下调,Th2、Treg 细胞特异性转录因子表达上调。
结论:Dex 通过抑制 T 细胞活化并调节 T 细胞亚群分化(抑制Th1细胞分化,促进 Th2、Treg 细胞分化),在急性炎性肝损伤中起一定保护作用。
%Background:Dexamethasone can protect mice against the acute inflammatory liver injury by inhibiting innate immune cell function. However,the roles of T cell in this protective effect remain unknown. Aims:To investigate the regulatory effect of dexamethasone on T cell immune response in acute inflammatory liver injury. Methods:Six maleC57BL/ 6J mice were randomly divided into 2 groups. One hour before induction of acute inflammatory liver injury by lipopolysaccharide,dexamethasone 5 mg/ kg and PBS were given intraperitoneally in experimental group and model group,respectively. All the mice were sacrificed 12 hours after model construction. The clinical score and liver function parameters were assessed;splenic mononuclear cells were isolated for measurements of T cell activation,as well as cytokineexpression,secretion, and transcriptional factor expression for different T-cell subsets. Results:Clinical score and serum levels of transaminase were significantly lower in experimental group when compared with the model group. Meanwhile,percentage of CD44 +CD62L - T cells(i. e. activated or memory T cells)from spleen was significantly decreased in experimental group. Among splenic T cell population,expression and secretion of IFN-γ,a Th1-type cytokine,was decreased;expression and secretion of IL-4,aTh2-type cytokine,percentage of regulatory T cells(Treg cells),and ratios of Th2 / Th1 and Treg/ Th1 were increased;transcriptional factor specific for Th1 cells was down-regulated,and those for Th2 and Treg cells were up-regulated. Conclusions:Dexamethasone inhibits T cell activation and directs the reciprocal T cell lineage differentiation (repressing Th1 cell differentiation,promoting Th2 and Treg cell differentiation),which may contribute to the protection against acute inflammatory liver injury.【期刊名称】《胃肠病学》【年(卷),期】2015(000)006【总页数】5页(P324-328)【关键词】肝损伤;地塞米松;淋巴细胞活化;细胞分化;Th1-Th2 平衡【作者】刘焕荣;陆芸;张正国;王健;王昱;刘光伟;薛峰【作者单位】上海交通大学医学院附属仁济医院肝脏外科 200127; 复旦大学基础医学院免疫学系;复旦大学基础医学院免疫学系;复旦大学基础医学院免疫学系;复旦大学基础医学院免疫学系;复旦大学基础医学院免疫学系;复旦大学基础医学院免疫学系;上海交通大学医学院附属仁济医院肝脏外科 200127【正文语种】中文* Email:*****************背景:在小鼠急性炎性肝损伤中,地塞米松(Dex)可通过抑制天然免疫细胞功能抑制肝损伤进展,然而T细胞是否参与此保护作用尚少见报道。