抑菌实验
- 格式：ppt
- 大小：945.00 KB
- 文档页数：29
当前位置：文档之家 › 抑菌实验
合集下载
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
0.00% -10.00% -20.00% -30.00% 系列1 -40.00% -50.00% -60.00% -61.66% -70.00% -35.53% -45.27% 0.00% control 稀释1:1 -9.70% -19.10% 稀释1:2 稀释1:4 稀释1:8 稀释1:16
对 照 组 （校正） 0.438 0.3795 0.311 0.264 0.163
-400.00%
0.00% 稀释1:2 -43.48% 稀释1:4 -66.67% 稀释1:8 稀释1:16
系列1
-500.00%
* 1 0 0 %
-500.00%
-600.00%
注：数据以去离子水调零。
增殖率 实 验 组 （校正） 稀释1:1 稀释1:2 稀释1:4 稀释1:8 稀释1:16 注：放于37℃摇床4h 放于 7 摇床4
蔓月莓
蔓越莓，又称蔓越橘、小 红莓，英文名Cranberry， 红莓，英文名Cranberry， 目前在北美的一些地区被 大量种植。
樾橘可杀死泌尿系统里的 大肠杆菌，不让它们感染 膀胱内膜组织，也可帮助 肾脏排解毒素，保持肾脏 的健康。
实验目的
中药对泌尿系统感染细菌的抑制作用 实验用药物：A 实验用药物：A药 实验用细菌：大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、 克雷伯氏菌
二、细菌OD值试验 细菌OD值试验
1.配置菌液：将菌株接种于普通琼脂平板上, 置于37 ℃恒 1.配置菌液：将菌株接种于普通琼脂平板上, 置于37 温箱中培养24h 用接种环将菌株转移至4ml 培养基试管中, 温箱中培养24h , 用接种环将菌株转移至4ml 培养基试管中, 培养6 小时，再取0.1ml 菌液加入液体培养基100ml，稀释 培养6-8小时，再取0.1ml 菌液加入液体培养基100ml，稀释 1000倍。 1000倍。 2.设置实验组与对照组（设置一组平行组）： 2.设置实验组与对照组（设置一组平行组）： 实验组:1ml LB培养基+4ml 实验组:1ml LB培养基+4ml 药， 对照组:1ml LB培养基+4ml 对照组:1ml LB培养基+4ml 生理盐水。 3.将稀释1000倍的3种菌液各取0.1ml 分别加入各试管中， 3.将稀释1000倍的3种菌液各取0.1ml 培养4小时，测量600nm OD值。 培养4小时，测量600nm OD值。 4.分别在2小时，4小时，6小时测量。 4.分别在2小时，4小时，6
1ml LB + 4ml 药
1ml LB + 4 ml Saline
1:1
2 对 照 组 2 对 照 组
1:2
1:4
2 1:8 1:16 对 对 照 组 照 2 对 照 组
2 组 照 组 验 组 验 组
1:1
1
1:2
1 1:8 对 对 照 组
1:4
1 照
对
照
组
ห้องสมุดไป่ตู้
1 组
1:16
1 对 1:16
对
1:1
The End
注：数据以去离子水调零.
时间 2h 4h 6h
control 0.00% 0.00% 0.00%
稀释1:1 -21.43% -9.70% -28.98%
稀释1:2 -43.48% -19.10% -20.91%
稀释1:4 -66.67% -35.53% -53.16%
稀释1:8 0.00% -45.27% -55.41%
二、泌尿系组成
肾脏：产生 输尿管：运输 膀胱：储存、排出 尿道：排出
三、病原体
非特异性感染：80％由 肠杆菌引起， 80％ 10～15％ 10～15％由 球菌和克 杆菌引 起，仅2～5％是由变性杆菌所致 。 特异性感染：结核菌、滴虫、真菌、丝虫、 阿米巴、血吸虫、包虫等。
四、发病机制
细菌侵入机制：菌毛产生粘附素、溶血素、 抗血清、内毒素 防御机制： 正常菌群的“抑制平衡”、分 正常菌群的“抑制平衡” 泌粘蛋白、尿液的冲刷作用。
2 实 验 组
1:2
2 实 实 验 组
照
组
1:4
2 验 组 1:8 2 实 验 组 2 实 1
1:1 实 验 组
1
1:2
1 实 验 组
1:4
实
验
组
1:8
1 实 验 组
1:16
1 实
增殖率 实验组（校 正） 稀释1:1 稀释1:2 稀释1:4 稀释1:8 稀释1:16 注：放于37℃摇床2h 放于 7 摇床2 0.0165 对 照 组 （校正） 0.021 control 稀释1:1 稀释1:2 稀释1:4 稀释1:8 稀释1:16 0.00% -21.43% -43.48% -66.67% 0.00% -500.00%
0.00% control 稀释1:1 稀释1:2 稀释1:4 -10.00% -20.00% -30.00% 增殖率 -40.00% -50.00% -60.00% -70.00% -80.00% 菌数 4h 6h 稀释1:8 稀释1:16
0.00% 2h -10.00% -20.00% -30.00% 增殖率 -40.00% -50.00% -60.00% -70.00% -80.00% 时间 control 稀释1:1 稀释1:2 稀释1:4 稀释1:8 4h 6h
二、流行病学
泌尿系统感染感染非常多见。在不同年龄组的人群中， UTI的发生率不同。 UTI的发生率不同。
新生儿中男童多见，行包皮环切可显著降低感染率。 青少年和成年人群中女性的感染率远远高于男性。 在女性，年龄每增加10岁，感染率便增加1%，至65岁时 ，至65岁时 达10%。 有50%的女性一生中有至少一次尿路感染。 50%的女性
稀释1:16 -500.00% -61.66% -67.78%
0.00% control 稀释1:1 稀释1:2 稀释1:4 稀释1:8 稀释1:16 -100.00% -200.00% -300.00% -400.00% -500.00% -600.00% 菌数 2h 4h 6h 增殖率
注：数据以去离子水调零。
五、诱发因素
梗阻因素（结石、 梗阻因素（结石、肿
瘤）
机体抗病能力减弱 糖尿病、妊娠、 （糖尿病、妊娠、贫
血）
医源性因素 女性尿道解剖因素
五、感染途径
上行感染 ：绝大多数尿感 是由上行感染引起的 血行感染 淋巴道感染 直接感染 ：外伤或邻近肾 脏的脏器有感染时，细菌 可直接侵入肾脏引起感染
六、治疗方法
control 稀释1:1 稀释1:2 稀释1:4 稀释1:8 稀释1:16
0.00% -9.70% -19.10% -35.53% -45.27% -61.66%
0.3955 0.307 0.2005 0.1445 0.0625
注：数据以去离子水调零。
增殖率
增殖率 实 验 组 （校正） 稀释1:1 稀释1:2 稀释1:4 稀释1:8 稀释1:16 注：放于37℃摇床6h 放于 7 摇床6
1、一般治疗：多饮水，勤排尿，以减少细 一般治疗：多饮水，勤排尿， 菌在膀胱内的停留 。 2、抗生素治疗 （？）
细菌耐药 而由于中药的特殊性, 而由于中药的特殊性,细菌较少对中药产生 耐药性,并且中药具有毒副作用小,取材方便, 耐药性,并且中药具有毒副作用小,取材方便, 经济实惠的优点, 经济实惠的优点,因此研究和开发中药抗生 素对解决耐药菌株的问题具有重大意义, 素对解决耐药菌株的问题具有重大意义,这 也受到了众多学者的广泛关注。
实验方法
一、药敏试验 1.接种平板 1.接种平板
2．贴纸片 ：抗菌药物纸片直径约为6.00～ ：抗菌药物纸片直径约为6.00～ 6.35mm，先放于药物中浸泡，待平板上的 6.35mm，先放于药物中浸泡，待平板上的 水分被琼脂完全吸收后再贴纸片。把六张 纸片贴于平板上。每张纸片间距不少于 24mm，纸片中心距平皿边缘不少于15mm。 24mm，纸片中心距平皿边缘不少于15mm。 平行3 平行3次。
对 照 组 （校正） 0.8125 0.6625 0.6415 0.591 0.5385
control 稀释1:1 稀释1:2 稀释1:4 稀释1:8 稀释1:16
0.00% -28.98% -20.91% -53.16% -55.41% -67.78%
0.577 0.524 0.3005 0.2635 0.1735
0.00% -10.00% -20.00% -20.91% -30.00% 增殖率 -40.00% -50.00% -53.16% -60.00% -70.00% -80.00% -55.41% -67.78% -28.98% 系列1 0.00% control 稀释1:1 稀释1:2 稀释1:4 稀释1:8 稀释1:16
结果
1.药敏试验：大肠杆菌和金黄色葡萄球菌抑 1.药敏试验：大肠杆菌和金黄色葡萄球菌抑 菌圈直径小于10mm，属于低敏；克雷伯氏 菌圈直径小于10mm，属于低敏；克雷伯氏 并无抑菌圈出现。 2.细菌OD值： 2.细菌OD值： 1）细菌初始浓度越低，抑制效率越高； 2）作用时间6小时比作用时间4小时的效 ）作用时间6小时比作用时间4 果好。
抑菌圈直径（毫米） 抑菌圈直径（毫米） 20以上 20以上 15~20 10~14 10以下 10以下 0
敏感度 极敏 高敏 中敏 低敏 不敏
3. 判定结果：培养后 取出平板，测量抑菌 环的直径。抑菌环的 边缘以肉眼见不到细 菌明显生长为限。 药敏实验的结果，应 药敏实验的结果， 按抑菌圈直径大小作 为判定敏感度高低的 标准。 标准。
增殖率：（实验组 OD-对照组OD）/ 对照组OD*100%
增殖率
（ 0.0065 0.0115 实 验 0.0015 0.0045 组 0.001 0.001 O D 0.002 -0.0005 对 照 组 0.00% O 0.00% control D 稀释1:1 -21.43% ） -100.00% / 对 照 -200.00% 组 O -300.00% D
药物对泌尿系统感染 细菌的抑制作用
何帝铭
主要内容
1.实验背景 1.实验背景 2.实验目的 2.实验目的 3.实验方法 3.实验方法 4.结果 4.结果
实验背景
一、概念 泌尿系统感染(urinarytractinfection,UTI)是指 泌尿系统感染(urinarytractinfection,UTI)是指 从尿道口到肾脏的泌尿道任何部位发生的 从尿道口到肾脏的泌尿道任何部位发生的 细菌感染的总称 细菌感染的总称 。 泌尿系感染也可按病菌种类和病变性质分 为非特异性感染和特异性感染，按病程分 非特异性感染和特异性感染，按病程分 为急性亚急性和慢性，按发生条件分为原 急性亚急性和慢性，按发生条件分为原 发和继发
对 照 组 （校正） 0.438 0.3795 0.311 0.264 0.163
-400.00%
0.00% 稀释1:2 -43.48% 稀释1:4 -66.67% 稀释1:8 稀释1:16
系列1
-500.00%
* 1 0 0 %
-500.00%
-600.00%
注：数据以去离子水调零。
增殖率 实 验 组 （校正） 稀释1:1 稀释1:2 稀释1:4 稀释1:8 稀释1:16 注：放于37℃摇床4h 放于 7 摇床4
蔓月莓
蔓越莓，又称蔓越橘、小 红莓，英文名Cranberry， 红莓，英文名Cranberry， 目前在北美的一些地区被 大量种植。
樾橘可杀死泌尿系统里的 大肠杆菌，不让它们感染 膀胱内膜组织，也可帮助 肾脏排解毒素，保持肾脏 的健康。
实验目的
中药对泌尿系统感染细菌的抑制作用 实验用药物：A 实验用药物：A药 实验用细菌：大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、 克雷伯氏菌
二、细菌OD值试验 细菌OD值试验
1.配置菌液：将菌株接种于普通琼脂平板上, 置于37 ℃恒 1.配置菌液：将菌株接种于普通琼脂平板上, 置于37 温箱中培养24h 用接种环将菌株转移至4ml 培养基试管中, 温箱中培养24h , 用接种环将菌株转移至4ml 培养基试管中, 培养6 小时，再取0.1ml 菌液加入液体培养基100ml，稀释 培养6-8小时，再取0.1ml 菌液加入液体培养基100ml，稀释 1000倍。 1000倍。 2.设置实验组与对照组（设置一组平行组）： 2.设置实验组与对照组（设置一组平行组）： 实验组:1ml LB培养基+4ml 实验组:1ml LB培养基+4ml 药， 对照组:1ml LB培养基+4ml 对照组:1ml LB培养基+4ml 生理盐水。 3.将稀释1000倍的3种菌液各取0.1ml 分别加入各试管中， 3.将稀释1000倍的3种菌液各取0.1ml 培养4小时，测量600nm OD值。 培养4小时，测量600nm OD值。 4.分别在2小时，4小时，6小时测量。 4.分别在2小时，4小时，6
1ml LB + 4ml 药
1ml LB + 4 ml Saline
1:1
2 对 照 组 2 对 照 组
1:2
1:4
2 1:8 1:16 对 对 照 组 照 2 对 照 组
2 组 照 组 验 组 验 组
1:1
1
1:2
1 1:8 对 对 照 组
1:4
1 照
对
照
组
ห้องสมุดไป่ตู้
1 组
1:16
1 对 1:16
对
1:1
The End
注：数据以去离子水调零.
时间 2h 4h 6h
control 0.00% 0.00% 0.00%
稀释1:1 -21.43% -9.70% -28.98%
稀释1:2 -43.48% -19.10% -20.91%
稀释1:4 -66.67% -35.53% -53.16%
稀释1:8 0.00% -45.27% -55.41%
二、泌尿系组成
肾脏：产生 输尿管：运输 膀胱：储存、排出 尿道：排出
三、病原体
非特异性感染：80％由 肠杆菌引起， 80％ 10～15％ 10～15％由 球菌和克 杆菌引 起，仅2～5％是由变性杆菌所致 。 特异性感染：结核菌、滴虫、真菌、丝虫、 阿米巴、血吸虫、包虫等。
四、发病机制
细菌侵入机制：菌毛产生粘附素、溶血素、 抗血清、内毒素 防御机制： 正常菌群的“抑制平衡”、分 正常菌群的“抑制平衡” 泌粘蛋白、尿液的冲刷作用。
2 实 验 组
1:2
2 实 实 验 组
照
组
1:4
2 验 组 1:8 2 实 验 组 2 实 1
1:1 实 验 组
1
1:2
1 实 验 组
1:4
实
验
组
1:8
1 实 验 组
1:16
1 实
增殖率 实验组（校 正） 稀释1:1 稀释1:2 稀释1:4 稀释1:8 稀释1:16 注：放于37℃摇床2h 放于 7 摇床2 0.0165 对 照 组 （校正） 0.021 control 稀释1:1 稀释1:2 稀释1:4 稀释1:8 稀释1:16 0.00% -21.43% -43.48% -66.67% 0.00% -500.00%
0.00% control 稀释1:1 稀释1:2 稀释1:4 -10.00% -20.00% -30.00% 增殖率 -40.00% -50.00% -60.00% -70.00% -80.00% 菌数 4h 6h 稀释1:8 稀释1:16
0.00% 2h -10.00% -20.00% -30.00% 增殖率 -40.00% -50.00% -60.00% -70.00% -80.00% 时间 control 稀释1:1 稀释1:2 稀释1:4 稀释1:8 4h 6h
二、流行病学
泌尿系统感染感染非常多见。在不同年龄组的人群中， UTI的发生率不同。 UTI的发生率不同。
新生儿中男童多见，行包皮环切可显著降低感染率。 青少年和成年人群中女性的感染率远远高于男性。 在女性，年龄每增加10岁，感染率便增加1%，至65岁时 ，至65岁时 达10%。 有50%的女性一生中有至少一次尿路感染。 50%的女性
稀释1:16 -500.00% -61.66% -67.78%
0.00% control 稀释1:1 稀释1:2 稀释1:4 稀释1:8 稀释1:16 -100.00% -200.00% -300.00% -400.00% -500.00% -600.00% 菌数 2h 4h 6h 增殖率
注：数据以去离子水调零。
五、诱发因素
梗阻因素（结石、 梗阻因素（结石、肿
瘤）
机体抗病能力减弱 糖尿病、妊娠、 （糖尿病、妊娠、贫
血）
医源性因素 女性尿道解剖因素
五、感染途径
上行感染 ：绝大多数尿感 是由上行感染引起的 血行感染 淋巴道感染 直接感染 ：外伤或邻近肾 脏的脏器有感染时，细菌 可直接侵入肾脏引起感染
六、治疗方法
control 稀释1:1 稀释1:2 稀释1:4 稀释1:8 稀释1:16
0.00% -9.70% -19.10% -35.53% -45.27% -61.66%
0.3955 0.307 0.2005 0.1445 0.0625
注：数据以去离子水调零。
增殖率
增殖率 实 验 组 （校正） 稀释1:1 稀释1:2 稀释1:4 稀释1:8 稀释1:16 注：放于37℃摇床6h 放于 7 摇床6
1、一般治疗：多饮水，勤排尿，以减少细 一般治疗：多饮水，勤排尿， 菌在膀胱内的停留 。 2、抗生素治疗 （？）
细菌耐药 而由于中药的特殊性, 而由于中药的特殊性,细菌较少对中药产生 耐药性,并且中药具有毒副作用小,取材方便, 耐药性,并且中药具有毒副作用小,取材方便, 经济实惠的优点, 经济实惠的优点,因此研究和开发中药抗生 素对解决耐药菌株的问题具有重大意义, 素对解决耐药菌株的问题具有重大意义,这 也受到了众多学者的广泛关注。
实验方法
一、药敏试验 1.接种平板 1.接种平板
2．贴纸片 ：抗菌药物纸片直径约为6.00～ ：抗菌药物纸片直径约为6.00～ 6.35mm，先放于药物中浸泡，待平板上的 6.35mm，先放于药物中浸泡，待平板上的 水分被琼脂完全吸收后再贴纸片。把六张 纸片贴于平板上。每张纸片间距不少于 24mm，纸片中心距平皿边缘不少于15mm。 24mm，纸片中心距平皿边缘不少于15mm。 平行3 平行3次。
对 照 组 （校正） 0.8125 0.6625 0.6415 0.591 0.5385
control 稀释1:1 稀释1:2 稀释1:4 稀释1:8 稀释1:16
0.00% -28.98% -20.91% -53.16% -55.41% -67.78%
0.577 0.524 0.3005 0.2635 0.1735
0.00% -10.00% -20.00% -20.91% -30.00% 增殖率 -40.00% -50.00% -53.16% -60.00% -70.00% -80.00% -55.41% -67.78% -28.98% 系列1 0.00% control 稀释1:1 稀释1:2 稀释1:4 稀释1:8 稀释1:16
结果
1.药敏试验：大肠杆菌和金黄色葡萄球菌抑 1.药敏试验：大肠杆菌和金黄色葡萄球菌抑 菌圈直径小于10mm，属于低敏；克雷伯氏 菌圈直径小于10mm，属于低敏；克雷伯氏 并无抑菌圈出现。 2.细菌OD值： 2.细菌OD值： 1）细菌初始浓度越低，抑制效率越高； 2）作用时间6小时比作用时间4小时的效 ）作用时间6小时比作用时间4 果好。
抑菌圈直径（毫米） 抑菌圈直径（毫米） 20以上 20以上 15~20 10~14 10以下 10以下 0
敏感度 极敏 高敏 中敏 低敏 不敏
3. 判定结果：培养后 取出平板，测量抑菌 环的直径。抑菌环的 边缘以肉眼见不到细 菌明显生长为限。 药敏实验的结果，应 药敏实验的结果， 按抑菌圈直径大小作 为判定敏感度高低的 标准。 标准。
增殖率：（实验组 OD-对照组OD）/ 对照组OD*100%
增殖率
（ 0.0065 0.0115 实 验 0.0015 0.0045 组 0.001 0.001 O D 0.002 -0.0005 对 照 组 0.00% O 0.00% control D 稀释1:1 -21.43% ） -100.00% / 对 照 -200.00% 组 O -300.00% D
药物对泌尿系统感染 细菌的抑制作用
何帝铭
主要内容
1.实验背景 1.实验背景 2.实验目的 2.实验目的 3.实验方法 3.实验方法 4.结果 4.结果
实验背景
一、概念 泌尿系统感染(urinarytractinfection,UTI)是指 泌尿系统感染(urinarytractinfection,UTI)是指 从尿道口到肾脏的泌尿道任何部位发生的 从尿道口到肾脏的泌尿道任何部位发生的 细菌感染的总称 细菌感染的总称 。 泌尿系感染也可按病菌种类和病变性质分 为非特异性感染和特异性感染，按病程分 非特异性感染和特异性感染，按病程分 为急性亚急性和慢性，按发生条件分为原 急性亚急性和慢性，按发生条件分为原 发和继发