福建省猪流感血清学调查
杨得胜1 郑 健2 叶 玮2 许先明1 金颜辉1 关育芳1 黄 雁1 洪 英1 (1福建省动物疫病预防控制中心 福州 350003;2福州市畜牧兽医站 福州 350000)
中图分类号:S858128 文献标识码:A 文章编号:1003-4331(2007)07-0007-02
猪流感(sw ine Influenza,SI)是由A型流感病毒所引起的猪的一种急性、高度传染性呼吸道疾病。
临床特点为急性发热,传播迅速,发病率高,死亡率低,并且易继发感染其他病症,导致病情加剧和死亡,是危害养猪业的重要疾病之一。
同时由于猪流感病毒(SI V)能跨越种间屏障而传染给人类,在禽流感和人流感流行、传播和分子变异中的特殊作用,使得猪流感的公共卫生学意义日益突出[1-3]。
1 材料与方法
111 材 料
11111 猪血清样品 样品来自福建8个市25个未免疫SI猪场,其中规模场13个,其余为散养户。
规模场每场随机采取l0份血清样品,散养户为每个地区随机采集血清样品10份,共检血样262份。
11112 处理血清药品试剂 胰酶体积分数018%、高碘酸钾体积分数0123%、丙三醇体积分数1%、生理盐水体积分数0185%。
11113 标准抗原、标准阳性血清、标准阴性血清 流感HI诊断试剂,H1、H3亚型抗原(批号: 20060125)及相应阴阳性血清均由哈尔滨兽医研究所提供。
112 方 法
11211 血清中非特异性抑制因子的去除 试验采用胰酶———加热———高碘酸盐方法处理所有血清样品,以去除血清中非特异抑制因子。
其步骤为:先加0115m L胰酶溶液于013m L血清中,在56℃灭活30m i n后冷却至室温;加019mL的0123%高碘酸钾,混合,室温孵育15min;加019mL1%丙三醇盐溶液,混合,室温孵育15min;加0175m L0185%生理盐水并混合,置4℃保存备用。
血清的终稀释度为1∶10。
11212 红细胞凝集抑制(HI)试验 按常规微量法进行。
根据H A价配制4个H A单位或8个H A单位的病毒抗原使用液(即单位或8单位抗原),用
滴度除以8,即为8单位抗原稀释度,取8单位的抗原加入等量生理盐水即为单位抗原。
在微量反应板的第1孔加入25u L8单位抗原,第2～11孔加入25u L4单位抗原,第12孔加入25u L 生理盐水。
吸取25uL处理过的待检血清于第1孔内,充分混匀后吸25uL于第2孔,稀释至第10孔,弃去25uL;第11孔为抗原对照孔,第12孔作为生理盐水对照孔,同时设阳性和阴性对照。
室温(20～30℃)下作用20min。
每孔加入017%鸡红细胞悬液25uL,在微量振荡器上摇匀,室温静置30m in后观察结果。
以出现100%抑制红细胞凝集的血清最大稀释度作为该血清的血凝抑制(HI价)。
HI价小于或等于2log2(即40)判定HI试验阴性;HI价等于3log2(即80)结果为可疑,需重复试验;HI价大于或等于4log2(即160)为阳性。
2 结果及讨论
目前福建省大部分猪群都未注射SI疫苗,因此,猪群中抗流感病毒抗体可以客观地反应猪群受SI感染的情况。
我国猪流感的血清学和病原学调查结果都表明,在我国横跨南北的多个省市都有严重的猪流感流行,其主要亚型是HI N1和H3N2。
调查结果表明,福建省猪流感广泛分布(见表1),其中H1型猪流感在部分地区(宁德、龙岩和南平)存在感染,其他地区未检出H1阳性抗体。
H3型猪流感则广泛分布于全省,各地分布不均,其中以三明的感染抗体阳性率为最低(1/15),而泉州地区的感染抗体阳性率最高(24/29)。
另外,泉州地区(24/29)和莆田地区(24/30)的H3抗体阳性率远远高于其他地区。
李海燕等人检测到H3亚型SI V中国分离株属欧亚猪谱系,其H A基因来源于水禽流感病毒;Hl亚型SI V 广东分离株属经典美洲猪谱系,进一步证实在中国内陆存在“禽-猪-人”的流感病毒种间传播,并提出了在中国存在“(水)禽-猪-(水)禽”及“人-猪-人”的种间传播机制。
研究发现福建省部分SI V 分离株属欧亚基因群系[4-5],而莆田和泉州地区是福建省水禽重要的养殖区域,其生猪场存在如此之高的3型猪流感抗体阳性率可能与此有关,但真正的原因仍需进行进一步的调查研究。
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福建畜牧兽医 增 刊 2007年
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4H A
HA HA
4H A
H
表1 不同地区猪流感血清学抗体检测结果
地区
血清亚型
H1 H3 监测数阳性数监测数阳性数
宁德394395
福州280389
莆田2803024
泉州2902924
漳州420428
龙岩284289
南平4184112
三明00151
由于样品采集时间集中在5月上旬,采集前正是冬春季节变换的时间,昼夜温差大,有利于疾病的发生。
而猪流感的发生通常都是暴发性的,猪群基本上同时发病。
全省猪群中H3的感染抗体阳性率明显高于H1抗体阳性率,与其他省份情况相似,但阳性率较低。
与2000年和2001年相比,福建省猪流感抗体阳性率呈现上升的现象,其中H1抗体阳性率在2000年时为219%,2001年达到了2611%,抗体阳性率大幅度的增高可能与当年猪流感的暴发有关,而到2006年又下降到了6181%。
其具体原因不得而知,提示我们应加强监测工作。
H3抗体阳性率由2000年的1519%,2001年的3119%升高到现在的35111%[6],说明H3猪流感在福建省内未得到有效控制,感染范围在逐步扩大。
高密度、多应激的集约化养猪,恶劣的养殖环境以及不完善的防疫及管理制度可能是许多老病久防不止,病情反复,新的疫病又不断出现和蔓延的根本原因[7]。
表2 猪流感血清学抗体检测结果
血清亚型
H1H3
监测数阳性数阳性率%监测数阳性数阳性率%
规模场127321331495436.24
散养户1081312.041133833.63
合计23516 6.812629235.11
表3 猪流感血清学抗体检测结果
血清亚型
H1H3
监测数阳性数阳性率%监测数阳性数阳性率%
沿海地区1664 2.411787039.33
山区691217.39842226.19
注:沿海地区包括宁德、福州、莆田、泉州和漳州;山区包括南平、三明和龙岩。
从养殖的规模来看(见表2),散养户感染H1猪流感抗体阳性率(1%)较规模场的(133%)要高,这可能是感染规模猪场的数量较少,在统计学上使得规模场抗体阳性率较散养户的偏低。
H3猪流感阳性率在规模场和散养户感染的情况大致相同,但规模场的阳性率稍高于散养户。
综合表2和表3可以看出,福建省规模猪场普遍存在抗H3亚型流感病毒抗体,与李海燕等人的调查一致。
从地理分布来看,福建省沿海地区猪场感染H1抗体阳性率(2141%)明显低于山区猪场(17139%),其中感染H1抗体阳性的猪场在沿海地区均集中于宁德,山区则分布于龙岩和南平;H3抗体阳性的猪场在沿海地区所占的比例比山区要高,但同时出现H1和H3抗体阳性率的猪场只有4个,且主要在龙岩(3/4)和南平(1/4),这可能是与福建省的地理环境、饲养方式和养猪业的分布相关,但具体的原因仍需进一步的调查。
由于猪流感是集约化养猪场普遍存在且难以根除的猪呼吸道病之一,其兽医传染病学意义显而易见。
猪流感病毒不仅危害猪群,而且可引起禽类(如火鸡)流感的发生,使其具有感染人的潜力并作为流感病毒的“混合器”。
回顾人类流感史不难发现,20世纪每次人流感大流行的前后都有猪流感的发生和流行。
猪流感病毒在“禽-猪-人”的种间传播链中起到非常重要的作用,在人和动物流感的病原学、生态学及流行病学中占有举足轻重的地位,具有重要的公共卫生意义[8]。
因此,了解SI V在福建省的流行情况并对其开展全面研究,不仅可促进福建省畜牧业的健康稳定发展,也是防止人类流感流行的重要环节。
参考文献:
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