第九章免疫学应用解析

第九章免疫学应用解析
第二节 免疫学诊断
一、体液免疫检测 （抗原或抗体的检测）
抗原-抗体反应包括沉淀反应、凝集反应、 溶解反应、补体结合反应和中和反应等。 抗原-抗体反应可 用已知的特异性抗体检测 未知的抗原；也可用已知的抗原检测未知 的抗体。
免疫荧光技术、免疫酶技术、同位素标 记技术、发光免疫分析等免疫标记技术提 高了抗原抗体反应的敏感性。
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单向免疫扩散
(Single Immunodiffusion)
是将一定量已知抗体混于 含抗体的凝胶
琼脂凝胶中制琼脂板，在 适当位置打孔后将抗原加 入孔中扩散。抗原在扩散 过程中与凝胶中的抗体相 遇，形成以抗原孔为中心 的沉淀环，环的直径与抗 原含量成正比相关。本法 常用于测定血清IgG、 IgM、IgA 和 C 3等的含量。
类似于轻症或隐性感染。如卡介苗、麻疹、风疹、脊灰疫 苗。 3、类毒素：外毒素经0.3%~0.4%甲醛处理后失去毒性但保持 抗原性的生物制品。如白喉、破伤风类毒素。 4、新型疫苗：亚单位疫苗、合成疫苗和基因工程疫苗。
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（二）人工自动免疫的注意事项
1、接种对象 2、接种剂量、次数和间隔时间 3、接种途径 4、接种后反应 5、禁忌症
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火箭电泳示意图
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补体结合反应
（Complement Fixation, CFT)
敏感性和特异性均较高，但该试验影响因 素较多，现在已有被其它新方法取代的趋势。
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免疫标记技术
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用荧光素、同位素或酶等示踪物质
标记抗体（或抗原）进行抗原-抗体反应。
第九章 免疫学应用
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第一节 免疫学防治
（一）人工自动免疫 给机体输入疫苗或类毒素等抗原物质，刺激机体产生特
异性免疫力。免疫力出现较慢但持久，多用于预防。 1、死疫苗：用物理、化学方法杀死病原微生物制备而成的疫
苗。如伤寒、霍乱、百日咳等。 2、活疫苗：通过毒力变异或人工选择法获得的减毒或无毒株。
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抗原-抗体反应的特点 抗原-抗体的结合是特异性结合 抗原抗体结合是分子表面的非 共价键结合 抗原抗体反应可分为两个阶段
特异性结合阶段
可见的反应阶段
抗原和抗体结合是否呈现可见的反应现
象，于两者的分子比例密切相关
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抗原抗体比例对反应现象的影响
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免疫电泳 （Immunoelectrophoresis)
是先将待侧血清标本作琼 脂凝胶电泳，血清中各蛋 白组分被分成不同的区带， 然后与电泳方向平行挖一 小槽，加入相应的抗血清， 把分成区带的蛋白抗原成 分作双向免疫扩散，在各 区带相应的位置形成沉淀 弧。该法常用于血清蛋白 种类分析，以观察Ig的异 常增多或缺失。
是用荧光素（常用的有异硫氰酸荧光素， FITC) 与抗体连接成荧光抗体，再与待 测标本的抗原反应，，置荧光显微镜下 观察，抗原抗体复合物散发出荧光，借 此对标本中的抗原作鉴定和定位。
包括直接荧光法、间接荧光法和补体法。
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直接荧光法：将荧光素直接标记抗体作标本染 色。该法的优点是特异性强，但其缺点是每检 测一种抗原必须制备相应的荧光抗体。
标记物质与抗体（或抗原）的化学连接
未改变抗体（或抗原）的免疫学特性，
同时标记物的性质依然存在，因而极大
的提高了反应的灵敏度，可以对微量物
质进行定量、定性或定位检测。免疫标
记技术主要有三种基本类型：免疫荧光
技术、免疫酶技术和同位素标记技术。
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免疫荧光显微技术 (Immunofluorescence Technique)
凝集反应 沉淀反应 补体溶血反应 和补体结合反应 中和反应 用标记抗体或抗原进行的抗原抗体反应
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凝集反应 (Agglutination)
细菌、红细胞等颗粒性抗原与相应抗体结 合后形成凝集 现象，称为凝聚反应。
1、直接凝集：将细菌或红细胞与相应的抗 体直接反应，出现细菌凝集或红细胞凝集 现象。又分为玻片法和试管法。
2、间接凝集：将可溶性抗原包被在红细 胞或乳胶颗粒表面，与相应抗体反应出现 颗粒凝集现象。
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血球凝集
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沉淀反应 血（清蛋P白r质e、c细ip胞it裂a解ti液o或n组) 织浸
液等可溶性抗原与相应抗体结合后出现 沉淀物，这一类反应称为沉淀反应。沉 淀反应可在液体中进行，如絮状沉淀。 大多沉淀反应是用半固体琼脂凝胶为介 质，进行琼脂扩散故也称免疫扩散。
抗原-抗体反应受多种因素影响
1 电解质：抗原-抗体反应通常应用0.85% 的氯化钠作为 稀 释液 ，以供给适应浓 度的电解质。
2 温度：一般常使用反应在37度水浴 或 孵育箱中进 行。
3.酸碱度：抗原-抗体反应适应的酸碱度
为PH6~8。抗原-抗体反应受多种因素影响
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抗原抗体的检测方法
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火箭电泳 （Rocket Electrophoresis)
火箭电泳也称免疫扩散，是把单向免疫 扩散同电泳结合在一起的方法。抗原在含有 定量抗体的琼脂中泳动，两者比例适宜时， 在较短时间内生成锥形的沉淀峰。在一定浓 度范围内，沉淀峰的高度与抗原含量成正比。 此法的特点是需时较短，故可用于快速沉淀 标本中抗原的含量。
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二、免疫学治疗
（一）人工被动免疫 是给机体输入抗体，使机体获得特异性免疫力。
维持时间短，一般2~3周，多用于紧急预防。如抗 毒素、人丙种球蛋白、人特异性免疫球蛋白。 （二）免疫增强剂
是增强、促进和调节机体免疫功能的生物或非 生物制剂。主要用于肿瘤、免疫缺陷病和传染病 的辅助治疗。 （三）过继免疫：分特异性和非特异性两种。 （四）免疫抑制剂
沉淀环
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双向免疫扩散 （Double Immunodiffusion)
是将抗原与抗体分别加入 琼脂凝胶的小孔中，二者 自由向周围扩散并相遇， 在比例合适处形成沉淀线。 如果反应体系中含两种以 上的抗原抗体系统，则小 孔间可出现两条以上的沉 淀线。本法常用于抗原或 抗体的定性 、组成和两种 抗原相关性分析的检测。