高敏ELISA试剂盒
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Human IgE ELISA Kit产品编号 产品名称包装 PI479Human IgE ELISA Kit96次产品简介:碧云天的Human IgE ELISA Kit (Human IgE Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit),即人总免疫球蛋白E 酶联免疫吸附检测试剂盒,是一种用于特异性地高灵敏地定量检测人血清、血浆中的IgE 的ELISA 试剂盒。
本产品检测灵敏度高,特异性强,重复性好。
多次重复检测结果表明,最小检出量为14.3ng/ml ,本试剂盒采用特异性抗体识别人IgE ,与IgG 、IgA 没有交叉反应性,板内、板间变异系数均小于10%。
免疫球蛋白E (IgE)只能在哺乳动物身上发现。
IgE 存在于血液中,是免疫系统抵御细菌和病毒等外来物质入侵的重要工具。
IgE 是一类具有δ链的亲同种细胞抗体,是参与过敏性鼻炎、过敏性哮喘和湿疹等发病机制调节的主要抗体。
IgE 是组胺和白三烯等肥大细胞释放抗炎剂水平的主要调剂者。
尽管只有少量IgE 在血液中,但它还负责触发严重过敏反应。
IgE 在I 型超敏反应中起作用,I 型超敏反应表现为各种过敏性疾病,如过敏性哮喘、大多数类型的鼻窦炎、过敏性鼻炎、食物过敏,以及某些类型的慢性荨麻疹和特应性皮炎。
此外,有足够证据证明IgE 还参与免疫系统对寄生虫入侵的反应,并增加与癌症发病有关的白血细胞数量。
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA 法(Sandwich ELISA)检测样品中人IgE 的浓度,其原理见图1。
人IgE 特异的单克隆捕获抗体已预包被于酶标板上,当加入标准品或样品时,其中的人IgE 会与捕获抗体结合。
当加入辣根过氧化物酶标记人IgE 抗体后,辣根过氧化物酶标记人IgE 抗体与人IgE 结合,形成夹心的免疫复合物。
最后加入显色剂TMB 溶液,固相捕获的辣根过氧化物酶就会催化无色的显色剂氧化成蓝色物质,在加入终止液后呈黄色。
人白介素1β(IL-1β)ELISA试剂盒,高灵敏度+标准OD值!刚刚进入实验室的新手科研er一定会被ELISA试剂盒数以千计的种类、数以百家的品牌绕花眼,而实验老手们,可能也经常会被做实验时明明正常建模,标曲测定的数值和线性关系也正常,但就是结果出现各种问题所头疼,这个时候,大家就要思考一下,你所选择的ELISA试剂盒是不是最合适并且质量又可靠呢?人白介素1β(IL-1β)是大家做实验中比较常见的一种细胞因子,而它也与我们的常见的类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮性关节炎等息息相关,并且最近有研究表明,IL-1β的表达,还与口腔、胃支气管等多种病症相关,可研究价值巨大。
一般来说,OA患者滑液中IL-1β的含量平均为(90.51±5.03)pg/ml。
在实验过程中,我们通常采用ELISA法测定血清IL-1β的含量,这个时候,选择一款高灵敏度+完美标曲的ELISA试剂盒,就显得尤为重要。
我们推荐——Elabscience 人白介素1β(IL-1β)ELISA试剂盒,科研老手新手的“眼花头疼”问题统统解决!Elabscience 人白介素1β(IL-1β)ELISA试剂盒原理采用双抗体夹心ELISA法。
用抗人IL-1β抗体包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的人IL-1β会与包被抗体结合,游离的成分被洗去。
依次加入生物素化的抗人IL-1β抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。
抗人IL-1β抗体与结合在包被抗体上的人IL-1β结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。
加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。
用酶标仪在450nm波长处测OD 值,IL-1β浓度与OD450值之间呈正比,通过绘制标准曲线计算出样品中IL-1β的浓度。
标准情况下,Elabscience 人白介素1β(IL-1β)ELISA试剂盒的灵敏度为4.69pg/ml,检测范围为7.81—500 pg/mL,可以说是非常标准的皮克级高敏试剂,且与其它相关蛋白无明显交叉反应,也基本不存在背景干扰,可以说是新老科研er们均适宜了。
elisa试剂盒原理ELISA试剂盒(Enzyme-LinkedImmunosorbentAssay,又译作免疫夹配酶联免疫吸附测定法)是一种常用的生物化学技术,它能够快速、灵敏地检测固定量的抗原或抗体。
它的原理建立在具有特异性的抗原与抗体发生免疫反应的基础上,并且利用酶联免疫吸附测定法将其特异性特性发挥到极致。
ELISA试剂盒的原理实际上是利用一种可用来衡量两种特定分子结合情况的“酶联免疫反应”,即抗体可以特异性地结合抗原(如病毒、细菌、细胞、植物体等),然后会把这种特异性关联变成数量上的增加。
这种数量上的增加是金属蛋白酶(enzyme)所带来的。
当抗原被特异性抗体结合时,同时伴随着金属蛋白酶在抗原上的结合,而金属蛋白酶又被某些特定物(如丙二醛或氯仿等)所诱导,从而使抗原上的特异性结合物产生数量上的增加。
ELISA试剂盒的工作原理以上就是ELISA试剂盒的基本原理,它主要利用酶联免疫吸附测定的特异性原理,将特定的抗原或抗体酶联到具有特异性的样品上,最后检测数量上的增加。
ELISA技术具有高灵敏度、简便快捷、操作可靠等优点,被广泛应用于疾病诊断、抗原定性与定量检测、免疫活性评价以及生物体病原学研究等诸多领域。
ELISA试剂盒的工作原理主要包括抗原与抗体的结合、酶的结合与产物的检测等环节。
首先呈现的是抗原及抗体的结合,抗原及抗体在液体相中可以特异性地结合;其后的酶的结合是将抗原及抗体结合后,利用具有特异性的金属蛋白酶,将酶与抗原结合,从而使得结合物数量上有所增加;最后一步是检测,也就是检测酶结合物产生的数量上的增加,从而获取结果。
ELISA试剂盒的优势如下:1、ELISA试剂盒测定结果灵敏,且能够进行大规模检测;2、较快,能将一个检测过程缩短到几个小时;3、机器操作简单,操作步骤以及参数设置较为容易;4、一次可进行大量检测,可降低成本;5、器具配置简单,耗材容易获得,操作较为方便;6、安全性较高,可大幅减少辐射风险;7、节省时间和成本,跨学科的分析。
ELISA检测试剂盒操作流程1.准备实验材料和试剂-检验样本:例如血清、尿液、细胞上清液等。
-ELISA试板:根据样本数量选择96孔或384孔的板。
- 试剂盒:包括标准品、washes缓冲液、检测抗体、底物等。
2.样本处理-对于血清等生物液体样本,可用离心将固体物质沉淀并分离下清液。
-样本需储存或运输途中应避免反复冻融。
3.实验板的板液处理-将实验板从包装中取出,将不需要的孔进行盖膜封闭。
- 根据试剂盒说明书,添加适量的板液(Coating Buffer)到每个孔中,使其充分覆盖孔内壁。
-封闭板液的孔,将实验板在2-8℃下放置静置一夜或在37℃下1-2小时孵育。
4.样本添加-倒掉盘液,用PBS或TBST洗板3次,去除残留物。
-将样本加到每个孔中,根据需要添加正样本、负样本和待测样本。
-注意每个样本的剂量和添加的体积,通过试剂盒说明书和实验设计标准控制。
5.抗体添加-清洗步骤同上,将洗板缓冲液加到孔中,重复3次。
-加入检测抗体,根据试剂盒说明书的建议将其添加到孔中。
-要确保抗体的浓度和添加的体积适宜。
6.洗涤-洗涤步骤同上,用洗涤缓冲液洗板,重复3次。
-每次洗涤时,将洗液完全加满孔,静置1分钟,然后倒出洗液。
-注意洗涤时间和洗涤次数的准确控制,以将非特异性结合物质彻底清除。
7.底物添加-清洗步骤同上,将洗液加到孔中,重复3次。
-加入底物,根据试剂盒说明书的建议将其添加到孔中。
-底物液体应完全覆盖孔底,防止反应过程中氧化。
8.反应停止-根据试剂盒说明书,将反应停止液加入到孔中,停止底物的反应。
-注意反应停止液的体积和浓度,以保证反应的准确停止。
9.色谱分析-用ELISA板读板仪读取各个孔的OD值。
-根据试剂盒说明书和实验设计的标准曲线确定样本中目标物质的含量。
-注意设置适当的控制组和标准曲线来保证测量结果的准确性。
总结:ELISA检测试剂盒的操作流程主要包括实验板处理、样本添加、抗体添加、洗涤、底物添加、反应停止和色谱分析。
超敏C反应蛋白ELISA超敏C反应蛋白ELISAELISA试剂盒规格:(1) 规格:96T 可以测90个样,5个标准孔,1个空白孔(2) 规格:48T 可以测42个样,5个标准孔,1个空白孔超敏C反应蛋白ELISAOperational matters needing attention1 reagents should be stored according to the label instructions, and return to room temperature before use. After thinning of the standard products should be discarded, can not be saved.2 in the experiment, the need for the slab should be immediately put back in the bag, sealed to avoid deterioration.3 other reagents should be packaged or covered. Do not mix different batches of reagents. Before use.4 use disposable suction head to avoid cross contamination, draw the termination solution and substrate A, B liquid, avoid using the belt with metal part of the sample.5 use a clean plastic container to configure the washing liquid. All samples of ingredients and mix well before use in the kit.6 wash the enzyme labeled plate should be fully dry, do not put water absorbent paper directly into the enzyme labeled reaction pore water.7 substrate A should be volatile, avoid long time to open the lid. Substrate B is sensitive to light and avoid prolonged exposure to light. Avoid hand contact, toxic. After completion of the experiment should be immediately read od.8 add reagents should be consistent in order to ensure that all reaction plate hole incubation time.9 according to the time specified in the instructions, the amount and the order of the increase in the temperature of the operation.操作步骤1.使用前,将所有试剂充分混匀。
elisa试剂盒原理elisa(外来酶联免疫吸附)试剂盒是一种以酶联技术为基础的免疫检测方法。
其原理是通过抗原-抗体间的特异性结合作用,构成抗原-抗体复合物,利用酶的特异性而形成的酶-抗体复合物,使得复合物具有了酶的催化效应,在定比浓度的颜料中产生一定吸光度(A 值),根据不同比例的抗原抗体分子以及酶反应产物,表现出不同程度的吸光度,通过比较试验吸光度与对照吸光度,计算出试验项目的质量,从而进行免疫诊断。
elisa试剂盒包含了抗原、抗体、活性介质和酶等组分,当抗原抗体相互结合时,就会形成抗原抗体复合物。
当复合物中含有活性介质时,它可以使一种特定的酶有活性,这种酶可以将抗原和抗体中的某一物质催化变成另一物质,产生具有一定的吸光度的产物,这就是elisa试剂盒的基本原理。
由于elisa试剂盒的容易操作、易于对药物反应性能进行管理和检测,以及检测准确、结果可靠等优点,它成为目前应用最为广泛的免疫学技术之一,是诊断疾病和检测抗原抗体的有力工具。
elisa技术主要包括抗原和抗体合成、夹心板绘制、抗体复合物检测、抗原抗体结合度测定、夹心板读数以及抗原抗体关系分析等步骤。
抗原和抗体合成是elisa试剂盒的基础,抗原的合成需要通过特定的生物学方法,进行生化合成抗原。
例如,采用抗原特异性酶联反应,利用酶联酶/核酸复合物,将酶联酶与酶联荧光物质连接,形成目标抗原,即抗原-酶联物,而抗体则是通过免疫学方法合成,一般有外源抗体和内源抗体。
夹心板绘制是elisa试剂盒的重要步骤,一般有二层夹心板和三层夹心板。
在elisa试剂盒中,夹心板上先用特定抗原和抗体涂敷,然后用供试物质涂及其他化学反应的物质,当抗原与抗体结合时,夹心板上就会形成抗体复合物,对比定比浓度中的抗原抗体,产生一定的吸光度信号,并检测出病毒抗原或抗体存在的情况。
抗原抗体结合度测定和夹心板读数是elisa试剂盒最重要的步骤,其测定抗原抗体复合物的程度,从而计算出试验项目的质量。
ELISA试剂盒操作方法ELISA(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay)是一种常用的免疫学试验技术,用于检测体内或体外的蛋白质、抗体、抗原等物质。
ELISA试剂盒是用于进行ELISA实验的一种常见装置。
下面将为您介绍ELISA试剂盒的操作方法。
1.准备工作a.预热-将试剂盒中的所有试剂预热到适当的温度,通常为室温至37°C之间。
b.样品处理-准备好待测样品,可以是血清、细胞上清液、组织提取物等。
如果样品中含有大量的蛋白质或杂质,可以进行样品处理,如稀释、蛋白质去除等。
c.标准品准备-试剂盒通常包含一系列浓度已知的标准品,用于制作标准曲线。
按照说明书的要求,用缓冲液或适当的稀释液将标准品稀释为不同浓度的工作液。
2.涂膜板的处理a.涂膜板选择-根据实验需求选择合适的涂膜板,通常有96孔、384孔等。
b.板钉定位-使用板钉或其他适当的方法将涂膜板固定在适当的工作台上。
c.预涂底物溶液加入-将试剂盒提供的预涂底物溶液加入涂膜板的孔中,注意保持各孔液面平整。
3.样品与试剂添加a.标准品和样品加入-按照实验设计的需要,将标准品和待测样品分别加入涂膜板的孔中。
b.阳性对照和阴性对照加入-根据试剂盒的要求,加入阳性对照和阴性对照。
c.洗涤液加入-在每次试剂或样品加入后,使用专用的洗涤液将孔洗涤,以清除无关物质。
4.反应与显色a.结合抗体加入-按照试剂盒说明书要求,加入适当的结合抗体,用于与待测物质结合形成复合物。
b.二抗加入-加入带有底物标记的二抗,与结合抗体结合形成复合物。
c.显色底物加入-加入含有适当底物的显色底物试剂,使底物与酶结合并发出信号。
5.反应停止与测量a.反应停止液加入-在适当的时间点,根据试剂盒的说明,加入反应停止液,停止底物的酶反应。
b.光密封膜或保护板加盖-加盖光密封膜或保护板,防止溶液蒸发或污染。
6.读取和数据处理a.读取吸光度-使用ELISA读板仪读取各孔的吸光度值。
elisa试剂盒的价格及规格品牌elisa试剂盒首选爱尚实验室,规格齐全,价格合理,完善的售后服务,ELISA试剂盒在国内有许多种叫法:例如:ELISA检测试剂盒、ELISA Kit、酶联免疫试剂盒、酶联免疫吸附测定试剂盒、酶联免疫分析试剂盒、酶免试剂盒等,比较常见的叫法是ELISA检测试剂盒、酶联免疫吸附测定试剂盒等ELISA试剂盒自从60-70年代问世以来,得到全世界科研工作者的认可及推崇,在欧美及中国获得很大的推广,尤其是国内生化领域的长足发展。
Elisa生物试验是一种敏感性高,特异性强,重复性好的实验诊断方法。
由于其试剂稳定、易保存,操作简便,结果判断较客观等因素,已广泛应用在免疫学检验的各领域中。
ELISA检测试剂盒适用于体外定性检测人血清或血浆中的抗人类戊型肝炎(HEV)病毒IgM 抗体ELISA检测。
原理免疫测定技术的基础在于抗原抗体之间的特异结合反应,所以任何优质的诊断试剂离不开优质的原料,如抗原抗体,酶等。
以前用于免疫测定的抗原通常为各种纯化抗原,而抗体则为纯化抗原免疫动物后获得的多克隆抗体和使用杂交瘤技术得到的单克隆抗体,而抗原或抗体的标记物如酶标结合物则通过各种化学合成方法制备。
近年来,随着分子生物学的发展,使用基因工程方法制备各种特殊的抗原或抗体及其酶结合物等免疫测定试剂几成为现实的新一代试剂,各种新型使用的测定方法也不断出现。
HBsAg试剂特点(检测模式:临床抗体夹心法):包被抗体为山羊多抗。
多抗具有高亲和性和对抗原各种表位的反应性。
酶表抗体为与HBsAg有不同结合位点的鼠复合单位,可测得HBsAg变异样品,提高检测的特异性(99.98%)提高检测的灵敏度,应用Parl Ehrich 学说(PEI)HBsAg标准品,对ad标准品的灵敏度为0.05ng/ml对ay标准品灵敏度为0.025ng/ml ELISA检测试剂盒应用定性夹心免疫检测技术,用合成的HEV多肽抗原包被微孔板板条,这些多肽是中国型HEV毒株核心氨基酸序列中抗原性很强的肽段,分别来自于该毒株的开放阅读框2和开放阅读框3。
小鼠高敏甲状腺素(u-T4)ELISA试剂盒简介
小鼠高敏甲状腺素(u-T4)ELISA试剂盒说明书产品简介:
英文名称:Mouse Ultrasensitivity Thyroxine,u-T4 ELISA Ki
产品规格:96T/48T
保存条件:2-8℃
有效期:6个月
性状:盒装液体
适应:科研实验
小鼠高敏甲状腺素(u-T4)ELISA试剂盒说明书操作步骤:
1.试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。
稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
2.实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
3.不用的其它试剂应包装好或盖好。
不同批号的试剂不要混用。
保质前使用。
4.使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。
5.使用干净的塑料容器配置洗涤液。
使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
6.洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
7.底物A应挥发,避免长时间打开盖子。
底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。
避免用手接触,有毒。
实验完成后应立即读取OD值。
8.加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
9.按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
ELISA检测试剂盒使用指南ELISA(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay)是一种常用的免疫学实验技术,用于检测体内特定抗原或抗体的存在和浓度。
ELISA检测试剂盒是用于进行ELISA实验的组合套装,包括抗体或抗原、酶标记物、底物、缓冲液等。
本文将介绍ELISA检测试剂盒的使用指南,以帮助用户顺利进行ELISA实验。
1.准备实验材料:-ELISA检测试剂盒:根据实验需要选择适当的ELISA检测试剂盒,确保其在储存和运输过程中无损坏。
-样本:准备需要检测的样本,如血清、尿液、组织提取物等。
确保样本的质量和浓度满足实验要求。
-微孔板:根据试剂盒的要求选择合适的微孔板,同时注意其质量有无污染。
-基本实验设备:如计量器、洗板机、显微镜等。
2.实验步骤:-取出储存在4℃的试剂,确保其达到室温(一般为20-25℃),再根据实验步骤进行下一步操作。
-预处理样本:根据试剂盒的说明书,进行样本的预处理,包括稀释、纯化、稳定化等步骤。
-加样:将样本按照试剂盒要求的体积加入微孔板中,通常每个孔需要加入100-200μL的样品。
-洗板:使用洗板机或手工操作,将孔中的杂质洗净。
洗板时应注意洗涤缓冲液的使用浓度和洗涤次数。
-加入特异性抗体:根据试剂盒的说明书,将稀释好的特异性抗体加入各孔中,确保操作的准确性和每孔的稀释倍数。
-洗板:重复第4步的操作,将未结合的抗体洗净。
-加入酶标记物:根据试剂盒的说明书,将稀释好的酶标记物加入各孔中,确保加入的量准确无误。
-洗板:重复第4步的操作,将未结合的酶标记物洗净。
-加入底物:将稀释好的底物加入各孔中,使其与酶标记物反应,生成可视化的颜色。
-终止反应:根据试剂盒的要求,在一定的反应时间后,加入终止剂停止反应。
终止剂的选择需符合试剂盒的要求。
-检测结果:使用酶标仪或目视观察检测孔中的颜色变化,通过测量吸光度或颜色强度来确定样本中目标物的浓度。
3.数据分析:-计算样本的结果:根据试剂盒的说明书,根据吸光度或颜色强度测量结果,计算样本中目标物的浓度。
ELISA试剂盒操作方法1.准备工作-将所需试剂和物质取出,并按照使用说明书中的要求进行储存和保存。
确保试剂完整无损,并严格遵守保存条件。
2.样品处理-根据试剂盒的要求,处理待测样品。
这可能涉及到稀释、离心、过滤等步骤,以确保样品符合试剂盒的要求。
注意避免样品的污染和损坏。
3.准备试剂和标准曲线-根据试剂盒的要求,准备所需的试剂和标准曲线。
试剂通常由酶标板和洗涤缓冲液组成。
标准曲线是用于确定未知浓度样品的参考标准。
4.酶标板涂层-先加入涂层抗体或抗原到酶标板的孔中,然后将其在室温下孵育一段时间。
这会使孔中形成抗原或抗体的层,以便后续的反应。
5.吸附溶液去除-将酶标板颠倒并用纸巾轻轻拍干,以将未吸收的溶液去除。
6.样品和标准品加入-根据试剂盒的要求,将样品和标准品加入到孔中。
同时留有几个孔作为空白对照。
注意将样品和标准品加入到正确的孔中,避免交叉污染。
7.孵育和洗涤-放置酶标板在孵育箱中(一般在37摄氏度)孵育一段时间,以促使样品中的目标物质与酶标记的抗体结合。
然后将液体从孔中洗涤掉,以去除未结合的物质。
8.酶标记的二抗加入-加入酶标记的二抗(通常是抗人IgG的辣根过氧化物酶)到酶标板中的每个孔中,使其与目标物质结合。
9.孵育和洗涤-将酶标板重新放回孵育箱中孵育,然后再次进行洗涤,以去除未结合的物质。
10.底物添加-向每个孔中加入底物,使其与酶发生反应,产生颜色的变化。
反应时间根据试剂盒的要求进行控制。
11.反应终止-加入反应停止液,停止酶的反应,防止进一步的颜色变化。
具体的反应停止方法要根据试剂盒的要求进行。
12.颜色的测定-使用酶标仪或光度计测量各个孔中颜色的强度,并将其与标准曲线上的标准值进行比较,以确定样品中目标物质的浓度。
以上是ELISA试剂盒的基本操作步骤。
不同的试剂盒可能略有不同的要求和步骤,因此在操作之前务必仔细阅读和遵守试剂盒的使用说明书。
ELISA检测试剂盒使用指南ELISA(酶联免疫吸附试验)是一种常用的免疫学实验方法,用于检测病原体、抗体或其他分子的存在和浓度。
它具有高灵敏度、高特异性、易操作和较低成本的优势,被广泛应用于生物医学研究、临床诊断和免疫学领域。
本篇文章将介绍ELISA检测试剂盒的使用指南,包括实验准备、试剂的使用步骤和结果解读。
一、实验准备1.阅读检测项目的说明书:在使用试剂盒前,仔细阅读说明书,了解试剂的使用方法、灵敏度和特异性等关键信息。
2.样本准备:根据实验要求,准备样本。
如果需要检测血清中的抗体水平,可以采集血液样本,离心分离血清;如果需要检测细胞培养上清中的分子,将上清收集,并使其清晰,避免细胞或杂质的污染。
3.样本预处理:根据实验需求,对样本进行必要的预处理。
例如,可以通过加热、稀释、酶解等方式来处理样本,以改变样本组分和浓度。
4.准备品质控制样品:制备阳性和阴性控制样品,用于评估试剂盒和实验操作的稳定性和准确性。
5.实验器材准备:准备所需实验器材,如酶标板、移液器、微孔板洗涤仪等。
确保器材的干净和完整,并按照说明书要求对其进行预处理。
二、试剂使用步骤1.试剂准备:根据说明书要求,将试剂从冰箱中取出,并在室温下放置一段时间使其恢复到室温。
确保试剂瓶盖紧闭,并避免暴露在直接阳光下。
2.实验操作:按照说明书的要求,将试剂加入到酶标板中,并根据实验设计进行标准曲线的设置。
标准曲线用于测量未知样品的数量,并计算出浓度。
3.孵育:根据试剂盒的要求,将酶标板放入孵育箱中进行孵育。
孵育温度和时间应根据实验要求进行调整。
4.洗涤:使用洗涤缓冲液对酶标板上的不特异性结合物进行洗涤。
洗涤过程应准确控制洗涤孔板次数和洗涤液的体积。
5.补液:在洗涤完成后,加入辣根过氧化物酶标况稀释液,促进酶标物与特异性结合物的反应。
6.孵育:根据试剂盒的要求,将酶标板放入孵育箱中进行二次孵育。
7.反应停止:根据试剂盒的要求,加入相应的停止液,停止酶反应。
ELISA试剂盒操作方法ELISA(酶联免疫吸附法)是一种常用的实验技术,用于检测目标物(如蛋白质、抗原或抗体)的存在和浓度。
ELISA试剂盒是ELISA实验的核心,包括特定的试剂和材料,用于执行特定的步骤和操作。
以下是一般ELISA试剂盒的操作方法,包含以下步骤:1.准备实验样品:收集所需分析物的样品(例如血清、细胞上清液或组织提取液等),并适当保存或稀释以便后续操作。
2.预处理步骤:根据实验的目的和试剂盒的要求,进行样品的预处理。
这可能包括去除干扰物质、离心、稀释或加热等处理步骤。
3.涂覆酶联免疫板:打开试剂盒中提供的酶联免疫板,将其放置在工作台上。
将涂覆物质(如抗体或抗原)加入到每个酶联免疫孔中,通常使用多通道移液器或微量移液器进行操作。
涂覆后,尽量避免泡沫和交叉污染。
4.触发剂孵育:将涂覆后的酶联免疫板放入孵育箱或板上孵育器中,在适当的温度下孵育一段时间。
此步骤的目的是固定涂覆物质,并优化其活性。
5.洗涤:将试剂盒中提供的缓冲液加入酶联免疫孔中,并倾斜孔盘轻轻敲打或使用洗板仪进行洗涤,以去除未结合的物质和杂质。
通常,洗涤液需要多次更换,充分洗涤以获得更好的准确性和灵敏度。
6. 过量引物(Block):加入试剂盒提供的阻断缓冲液至孔中,目的是防止非特异性结合的发生。
阻断时间可以根据试剂盒的要求进行调整。
7.加入样品和控制物质:将处理好的样品和控制物质,如阳性对照和阴性对照,加入到各个酶联免疫孔中。
注意要根据试剂盒的要求进行适当的稀释。
8.孵育和洗涤:将孔盘放回孵育箱或板上孵育器中,按照试剂盒的要求进行孵育。
完成孵育后,继续进行洗涤步骤,以去除未结合的物质。
9.检测剂加入:将检测试剂(通常是特异性抗体或酶标记物质)加入酶联免疫孔中。
如有需要,可以进一步稀释试剂以适应实验要求。
10.再次孵育和洗涤:将孔盘放回孵育箱或板上孵育器中,对要求进行的步骤进行孵育。
完成孵育后,进行洗涤步骤以去除未结合的物质。
本试剂盒只能用于科学研究,不得用于医学诊断人(Human Human))17-17-羟皮质类固醇(羟皮质类固醇(羟皮质类固醇(17-OHCS 17-OHCS 17-OHCS))ELISA 检测试剂盒使用说明书检测原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。
往预先包被17-羟皮质类固醇(17-OHCS)抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。
用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的17-羟皮质类固醇(17-OHCS)呈正相关。
用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。
样品收集、处理及保存方法1.血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2.血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。
3000转离心30分钟取上清。
3.细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4.组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。
3000转离心10分钟取上清。
5.保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
自备物品1.酶标仪(450nm)2.高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3.37℃恒温箱操作注意事项1.试剂盒保存在2-8℃,使用前室温平衡20分钟。
从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
2.实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。
3.浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白;按照说明书操作时样本已经稀释5倍,最终结果乘以5才是样本实际浓度。
4.严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
5.所有液体组分使用前充分摇匀。
elisa试剂盒原理ELISA(又称酶连结免疫吸附试验)是一种常用的免疫分析研究手段,是一种用于检测特定抗原或抗体的生化分析方法,由分子生物学家Edward Kabat在1970年提出,通过酶连结表面抗原(ELISA)来检测抗原特异性抗体,可以在几小时内检测得到大量特异性抗体,目前ELISA试剂盒在生物化学、分子生物学、药物研究、免疫学以及肿瘤等学术研究中以及临床上发挥着重要的作用。
ELISA仪器可以检测出抗原特异性抗体,有两种形式,沉淀式和双抗原ELISA。
沉淀式ELISA试剂盒利用抗原结合试剂盒中的特异性抗体,将抗原特异性抗体沉积在反应物磁珠或磁芯上,这种方法通常用于特定的病毒检测。
双抗原ELISA试剂盒中,两种特异性抗体分别结合在抗原特异位点上,由于它们之间的特异性结合,使抗原结合试剂盒的两种特异性抗体的吸附形成一个特异性抗体复合物,这种方法通常用于细胞因子的检测。
ELISA试剂盒的原理是,当被检测物质被抗体识别时,抗体可通过两种方式与目标物质结合,一是特异性结合,二是特异性抗体-受体结合(一种特殊的蛋白质-蛋白质相互作用)。
当特异性结合或抗体-受体结合发生时,抗体与特定抗原的结合会形成一个复合物,这个复合物可与另一种特定的抗体结合能力非常弱,把特定抗原与第二种特异性抗体结合在一起形成一个抗原复合物,从而形成一个复合体。
ELISA试剂盒有两种,一种是发光ELISA(FELISA),另一种是酶标ELISA(ELISA),原理是将一种特定抗体和一个特定抗原结合后,形成一个抗原-抗体复合物,再加上酶,并利用酶的活性将反应物矿化,产生定量的发光信号,来检测与抗原结合的抗体的数量。
酶标ELISA依赖于特定的色素,将抗原及抗原特异性抗体复合物标记在特定的位置,然后加入能够将特定的色素变色的酶,最终可以根据变色程度来判别待检样本是否携带抗原。
ELISA试剂盒有三个主要部分,即抗原、特异性抗体和酶,各种ELISA试剂盒可以检测出不同的抗体和抗原,比如病毒抗原特异性抗体、细胞因子以及艾滋病抗原等抗体,ELISA试剂盒在检测用途、研究和临床诊断上都有不错的效果。
elisa试剂盒原理Elisa试剂盒原理。
Elisa试剂盒是一种常用于生物化学和免疫学领域的实验室技术,它通过检测样本中特定蛋白质的存在来进行定量和定性分析。
Elisa试剂盒原理是基于酶联免疫吸附实验(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay),下面我们将详细介绍Elisa试剂盒的原理及其应用。
首先,Elisa试剂盒的原理基于抗原与抗体的特异性结合。
在Elisa试剂盒中,将待测样本加入到包被有特定抗原的微孔板中,如果样本中含有目标蛋白,它将与微孔板上的抗原结合。
然后,将酶标记的二抗加入到微孔板中,它将与待测样本中的抗体结合。
最后,加入底物后,酶会催化底物的变色反应,产生可测量的信号。
其次,Elisa试剂盒的原理包括直接和间接两种方法。
直接Elisa通过将酶标记的一抗直接与待测样本中的抗原结合来进行检测。
而间接Elisa则是先将待测样本加入到微孔板中,然后再加入酶标记的二抗来检测抗体与抗原的结合。
这两种方法在实验室中都有广泛的应用,可以根据具体实验要求来选择合适的方法。
此外,Elisa试剂盒的原理还涉及到标准曲线的绘制。
在实验中,我们通常会加入一系列已知浓度的标准样品,然后根据这些标准样品的反应值绘制标准曲线。
通过比较待测样本的反应值与标准曲线,我们可以确定待测样本中目标蛋白的浓度,从而进行定量分析。
最后,Elisa试剂盒的原理在临床诊断、药物研发和生物学研究中有着广泛的应用。
在临床诊断中,Elisa试剂盒可以用于检测疾病标志物,如肿瘤标志物、感染性疾病的抗体等。
在药物研发中,Elisa试剂盒可以用于药物的药代动力学研究和药效学评价。
在生物学研究中,Elisa试剂盒可以用于检测细胞因子、蛋白质相互作用等。
总之,Elisa试剂盒原理是基于抗原与抗体的特异性结合,通过酶标记的二抗和底物的反应来进行定量和定性分析。
它在实验室和临床中有着广泛的应用,为科研和医学领域提供了重要的技术支持。
ELISA检测试剂盒使用指南ELISA检测试剂盒使用指南1.简介:1.1 本文档旨在提供ELISA检测试剂盒的详细使用指南,以帮助用户正确、高效地进行ELISA检测。
1.2 ELISA(酶联免疫吸附试验)是一种常用的免疫测定方法,用于检测体液中特定抗原或抗体的存在与浓度。
1.3 本文档将涵盖ELISA检测试剂盒的准备、样本处理、试剂操作、结果读取等详细步骤。
2.准备:2.1 确保实验室环境整洁,无污染。
2.2 检查所需试剂、仪器和设备是否完整,并检查有效期和储存条件。
2.3 根据实验需要,准备所需样本和质控品,并储存于适当的条件下。
3.样本处理:3.1 根据实验目的选择合适的样本类型,如血清、血浆、尿液等。
3.2 根据试剂盒说明书的要求,对样本进行适当的稀释和预处理。
3.3 严格控制操作条件,避免样本污染和交叉污染。
4.试剂操作:4.1 根据试剂盒说明书,将所需试剂从冰箱中取出,并在室温下适当恢复。
4.2 严格按照说明书的要求,对试剂进行稀释和混合。
4.3 操作过程中注意洁净实验台面,避免试剂交叉污染。
5.检测步骤:5.1 将适量的稀释后的样本、质控品和标准品分别装入试管中。
5.2 添加适量的酶标记抗体或底物,并充分混匀。
5.3 按照试剂盒说明书的要求,进行孵育和洗涤步骤。
5.4 添加底物并进行反应,控制反应时间。
5.5 停止反应,并使用酶标仪测量吸光度。
6.结果读取:6.1 根据试剂盒说明书,根据吸光度值和标准曲线,计算样本中目标物质的浓度。
6.2 将测量结果记录,并进行统计和分析。
6.3 评估实验结果的可靠性,并进行结果的解释和报告。
7.注意事项:7.1 严格按照试剂盒说明书的要求进行操作,避免任何操作步骤的误差和误操作。
7.2 注意实验室安全,避免接触有害化学物质,正确使用防护设备。
7.3 在实验过程中遵循生物安全操作规范,避免潜在的感染风险。
此外,本文档涉及附件,请在附件部分查看相关详细信息。
过敏原特异性抗体IgE ELISA 检测试剂盒说明书【用途】定性和定量检测过敏原特异性人IgE。
过敏反应是一种特殊的病理性免疫反应,是人体对一种或多种原本无害的物质产生不正常的反应。
其主要原因是患者吸入或食入含有过敏性物体刺激机体,触发细胞大量分泌药理活性物质,引起一系列过敏症状,例如过敏性哮喘,过敏性鼻炎,湿疹、发痒、流泪、皮炎以及肠胃道过敏症等。
同时产生相当量的E型免疫球蛋白(Immunoglobulin E 即Ig E),引起人类过敏反应的过敏原种类繁多,如能从中查到引起机体过敏的物质,就能很好地预防和治疗过敏反应。
本检测盒是一种用酶联免疫法(ELISA)快速、精确测定体内引起过敏反应的特异E型免疫球蛋白的体外诊断工具。
它可定性和定量地测定人体抗特种过敏原的E型免疫球蛋白在血清中的水平,从而帮助医生正确地诊断引起病人过敏反应的过敏原。
本过敏原检测盒适合于广泛的过敏原检测,特别适用于少儿患者,同时也非常适用于湿疹以及其他皮肤病患者和对皮试过敏的患者。
【检测原理】本试剂盒采用酶免ELISA法。
当具有过敏抗原固化于表面的载体与病人血清培养在一起后,血清中特异性IgE(一抗)就会特异地结合到抗原上,此特异结合的抗体可被酶联的二抗所识别,加入显色剂后,二抗所联的酶使显色剂呈蓝色,加终止液后呈黄色。
显色的深度与血清中特异性IgE成正比;能定性/半定量地检测血清中特异性IgE的浓度。
【检测盒组成】过敏原包被微孔酶标板(Coated Wells) 96wells HRP酶联二抗12 ml浓缩洗涤液(15X)(Washing Conc.) 40ml×1 TMB单组分显色液12 ml硫酸终止液(Stop Solution) 12ml 样本稀释液(Sample Diluent) 12 ml【检测动态范围】0.35 ~100 IU/ml (0.84ng ~ 240 ng/ml)。
【重现性】CV 10%~15%【重现性】0.30IU/ml (0.72ng/ml)【注意事项】1.严格按照规定的时间和温度进行温育以保证准确结果。