2 实验二果蝇的形态培养和杂交方法

突变型：小翅（m）
突变型：卷翅（Cy）
突变型：残翅（vg）
野生型：眼睛颜色为砖红色，饱满圆形
突变型：白眼（w）
突变型：墨黑眼（se）
野生型：刚毛——头胸部以及复眼的周
围具有平直，先端略弯的长型粗黑硬毛
卷刚毛
野生型(翅膀有横隔脉)
突变型：无横隔脉（cv）
突变型：黄体（y）
突 变 型
再麻醉
– 观察或计数过程中，果蝇可能苏醒，可准备 一玻璃培养皿，内以胶带贴一小块棉球，滴 入适量乙醚，培养皿口朝下置于一旁备用， 如见果蝇翻身走动可将培养皿口朝下，盖于 果蝇上方待其麻醉后再移开。
果蝇形态观察
果蝇具有丰富的外表型态差异，包括眼色、 眼形、翅形，刚毛形状与数目，请利用 上课所提供的材料，比对下列图观察
黑 檀 体 (e)
果蝇常见突变性状
突变性状
棒眼 褐眼 卷曲翅 小翅 白眼 黑檀体 黑体 黄体 残翅 叉毛 猩红眼 墨色眼
基因符号
B bw Cy m w e b y vg
f st se
染色体号
性状特征
1
复眼呈狭窄垂直棒形，小眼数少
2
眼呈褐色
2
翅膀向上卷曲，纯合致死
1
翅膀小，长度不超过身体
1
复眼白色
3
三、实验材料、器具及试剂
1、材料
果蝇(Drosophila melanogaster) 的各个品 系
2、药品：乙醚，培养基 3、器具
显微镜、体视显微镜、麻醉瓶、白磁砖、 毛笔、镊子
四、果蝇的形态和生活史
外形 身体分为头、胸、腹三部分
头部有触角、复眼等 胸部有胸足，翅膀和刚毛等， 腹部有条纹和色斑等。
有，位于前腿跗节上
外观复杂，低倍镜下明显 看到生殖弧，肛上板及阴 茎（刚孵出的幼蝇更清楚）
果蝇雌雄外形判别 （体形大小）
雌
雄
腹部体节数目：
雌：6节，腹底部为产 卵管，呈现圆锥状凸出
雄：4节，腹底部为交尾 器，呈现黑色圆形外观
雄果蝇在前肢先端第二节具有性梳
野生型：
体色灰，翅膀呈圆卵型，静止时平放交叉 重叠，长度约为腹部长度的两倍
3、初步了解实验室饲养果蝇的常识方法和杂 交方法
二、实验对象
➢ 果蝇为完全变态的昆虫,具有生长迅速，生 活史短（12天）、突变性状多、已定位的 基因数多、染色体数目少（2n=8）。
➢ 繁殖率高、产卵量大（400～500/只）和饲 养简便等特点
➢ 在基因分离、连锁交换、染色体畸变以及 基因的表达与调控等方面，利用果蝇可进 行广泛而深入的研究
一、果蝇的形态观察：
果蝇品系 ＋
性梳的有无 体色 眼色 翅形 刚毛
雄蝇 雌蝇
W
m
vg
e
二、绘图
1、比较雌雄果蝇的腹部形状、环纹、性梳的区别
2、比较长翅、小翅、残翅的区别
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生活史
生活史与温度有密切的关系。 30℃以上造成果蝇不育或死亡。 10 ℃ 以下使生活史延长，生活力降低。 饲养果蝇的最适温度为20℃-25℃。 生活史分为卵、幼虫、蛹和成虫4个阶段，
在25℃的条件下，果蝇从卵到成虫约为 10天。
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五、果蝇的培养
1、培养基的配制
步骤
1. 洋菜1.5g ，红糖13g，玉米粉17g，水 150ml。取75ml水加入洋菜和红糖，另 75ml水中加入玉米粉，待洋菜完全熔化
遗传育种学实验
实验二 果蝇的形态、培养及杂交
一、实验目的 二、实验原理 三、实验材料、器具及试剂 四、果蝇的形态和生活史 五、果蝇的培养 六、杂交方法 七、作业
一、实验目的
1、了解果蝇生活史，观察各发育阶段的形态 特征。
2、掌握用肉眼（借以放大镜、显微镜）鉴别 雌雄果蝇的方法，认识一些常用突变性状。
性别区分为进行果蝇杂交试验所必须，务 必熟悉。
1）雌雄果蝇的区别： 2）果蝇的形状观察
雌雄果蝇主要特征
性别 形态特征
雌 蝇（♀）
体型
较大
腹部末端 稍尖，无黑斑
背部条纹 5条腹片数 性梳 Fra bibliotek生殖器６片
无
外观简单，低倍 镜下明显看到阴 道板和肛上板
雄 蝇（♂）
较小 钝圆，有黑斑
3条，最后一条宽且延伸 至腹面，呈明显黑斑) ４片
后，将调好的玉米粉倒入，不断搅拌， 煮沸数分钟，待成稀粥状，滴1ml丙酸， 离火，搅拌均匀即可。
2. 分装：将热的玉米培养基倒入已消毒的
培养瓶中，厚度为1-2cm，注意勿将培养
基沾在瓶口处。待冷却后，用棉球擦去
瓶壁上的水珠，，再撒上少量酵母粉，
并插一个三角形纸签，最后塞上消毒过
的棉塞，即可用来培养果蝇。
身体呈乌木色，黑亮
2
体黑色，比黑檀体深
1
全身呈浅橙黄色
2
翅明显退化，部分残留，不能飞
1
毛和刚毛分叉且弯曲
3
复眼呈明亮猩红色
3
羽化时眼呈褐色并深化成墨色
步骤和方法
果蝇生活史四个时期的观察 果蝇成虫外形的观察和雌雄性鉴别 突变型的诱变及观察 将所要观察的果蝇轻度麻醉，观察后再分别装
入原培养瓶中饲养，贴上标签，写明品系、日 期、实验者姓名。饲养两周后供下次实验使用
思考（杂交实验中要注意事项）：
1) 雌体亲本必须是处女蝇，为什么？ 2)为什么当子蝇开始孵化以前(即杂交后
一星期内)，须倒出亲体？ 3)子代计数为什么要在杂交后20天之内
进行？
七、作业
1、解剖镜下观察比较雌雄果蝇成体的外 形和背腹面，并用显微镜观察其第一对 足的形态及区别。
2、观察几种果蝇品系的外部形态，包括 体色、翅形、眼形和眼色、刚毛等。
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六、杂交方法
1、麻醉取种：
对果蝇进行检查时，用乙醚麻醉。取一麻醉瓶，瓶口应 与培养瓶大小相仿，取一棉花塞，在塞入瓶口的一面 滴加3滴乙醚（注意不要让乙醚流进瓶内，麻醉瓶要保 持干燥，否则会粘住果蝇翅膀，影响观察）。
麻醉果蝇时，1）先轻拍长有果蝇的培养瓶的瓶壁，使果 蝇全部震落在培养瓶底部，2）然后迅速打开培养瓶的 棉塞，扣上麻醉瓶，3）将两瓶倒过来，把果蝇倒入去 盖的麻醉瓶中，4）拿掉培养瓶，并立即用滴好乙醚的 棉塞盖好麻醉瓶，待果蝇全部昏迷后，倒在白瓷板上 进行观察。
– 注意：过度麻醉将导致果蝇死亡。
果蝇操作方法 进行杂交试验时，为避免麻醉的果蝇直接掉
落于培养基表面而粘着于培养基表面致死，可将 培养瓶横放，将麻醉的果蝇用毛笔扫于瓶壁，待 其苏醒后再将培养瓶正立 果蝇计数
取一白纸，沿对角线对折然后展平，平置于 桌面，将麻醉的果蝇倒于对角线折痕上，以尺、 毛笔或解剖针拨弄果蝇使其均匀分散于对角线折 痕上，然后沿对角线将雌雄果蝇分类拨入各侧。