(整理)农药生物测定实验指导.
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(整理)农药⽣物测定实验指导.农药⽣物测定实验指导(⾃编试⽤1.0)主编:姜兴印副主编:赵春青张卫光制药⼯程专业⽤⼭东农业⼤学植物保护学院2008年9⽉棉铃⾍⼈⼯饲料制备⼀、实验⽬的学习棉铃⾍⼈⼯饲料制备技术和⽅法。
本⽅法还适合⽟⽶螟等⼈⼯饲料的制备。
⼆、实验⽤品和仪器设备仪器设备:天平、⾼压灭菌器、罐头瓶、电饭锅、筛⼦(40⽬)、量筒、搪瓷盘、温度计实验物品:⼩麦粉、⽟⽶粉、黄⾖粉、啤酒酵母粉、琼脂、棉叶、V C、棉油、苯甲酸钠、⼭梨酸钾、兽⽤链霉素、⽔等三、实验⽅法1. 配⽅:2. ⼩麦粉、⽟⽶粉、黄⾖粉、酵母粉和棉叶装⼊罐头瓶中,⾼压灭菌40min.(120℃)3. ⽔+琼脂煮开冷却⾄70℃,加⼊Vc、防腐剂、棉油混匀,再加⼊混合好的其他成分,充分混匀。
4. 倒⼊搪瓷盘,加盖冷却后放⼊冰箱中备⽤。
四、质量检查饲料冷却后观察颜⾊和固化成型情况。
五、实验报告农药⽣物测定药剂配制⼀、实验⽬的学习⽣物测定药剂配制的实验操作技术和⽅法。
⼆、实验⽤品和仪器设备电⼦天平、计算器、烧杯、移液管、吸⽿球、记号笔、容量瓶、量筒等。
实验原药:93%顺式氯氰菊酯,95%吡⾍啉实验制剂:50%多菌灵WP,2.5%功夫EC(w/w),33%施⽥补EC(w/v)三、实验⽅法1. 原药母液的配制与稀释(1)⽤丙酮配制2%顺式氯氰菊酯母液50mL,然后稀释成200mg/L 50mL 丙酮液。
(2)⽤丙酮配制1%吡⾍啉母液50mL,然后稀释成125mg/L 50mL丙酮液(3)将顺式氯氰菊酯和吡⾍啉按照5:2的⽐例混合,配制1.5%混剂50mL 丙酮液。
2. 制剂的稀释(1)50%多菌灵WP,稀释成200mg/L 100mL的⽔溶液(烧杯)。
(2)2.5%功夫EC,稀释成1000mg/L 100mL的⽔溶液(烧杯)。
(3)33%施⽥补EC,稀释成150mg/L 100mL的⽔溶液(烧杯)。
四、结果计算和处理将以上每⼀种母液配制和稀释需要原药和制剂的量计算,并详细描述配制和稀释过程。
1、标准目标昆虫:是指被普遍采用的,具有一定代表性和经济意义,以及抗药力稳定均匀的农药杀虫毒力和毒效指示试虫群体。
2、毒力:是指药剂本身对不同生物发生直接作用的性质和程度。
3、药效:是在田间或接近田间的条件下所测定的药剂对生物的作用效果。
4、致死中量的置信限:即致死中量的可靠范围,亦即供试昆虫种群致死中量真值的波动范围。
5、内吸杀虫剂:凡是可以通过植物根茎叶以及种子等部位渗入植物内部组织,随着植物体液传导植株,不妨碍植物的生长发育,而对害虫具有很高毒效的化学物质,称为内吸杀虫剂。
6、内吸杀虫作用:昆虫由于受内吸杀虫剂的毒杀作用而致死亡的过程,称之为内吸杀虫作用。
7、杀菌剂室内生物测定:将杀菌物质作用于细菌、真菌或其它病原物(包括线虫),根据其作用效果的大小来判断药剂毒力。
8、除草剂的生物测定:利用生物体(作物试材、杂草试材,主要指有害生物)对除草剂的反应,来测定除草剂的毒性及其效果的基本方法。
9、杀虫剂室内生物测定:在实验室条件下,以昆虫(包括螨类)对杀虫剂的反应来鉴别某一种农药或某一类化合物的生物活性测定的一种基本方法。
1、杀虫剂生物测定存在的问题(1)评判标准单一(2)人为地固定检查时间(3)无统一的标准试虫(4)一般用校正死亡率表示核心是没有系统评判生物测定结果的方法和标准。
2、影响杀虫剂毒力测定的主要因素分析(1)杀虫剂和溶剂杀虫剂:其理化性质是决定毒力的根本原因。
溶剂:对药剂本身的理化性质一般不产生影响,但不同溶剂会影响昆虫表皮。
(2)环境条件温度:影响到处理前---养虫;影响到处理过程中---挥发、吸收等;影响到处理后---昆虫的死亡率。
湿度:一般不影响杀虫剂的穿透性及作用速度,也不影响解毒过程,通常它只影响昆虫对杀虫剂的忍受力。
光照条件以及昆虫在药剂处理前后的食物供应,营养条件等也会影响到测定结果。
(3)供试昆虫:不同种类的昆虫敏感性不同;同种昆虫不同品系对杀虫剂的敏感性也不同;昆虫不同发育阶段对杀虫剂的敏感性也不同(卵期通常对杀虫剂的敏感性比较低,通常以为有杀虫卵作用的杀虫剂,有很多主要是杀了初孵幼虫);昆虫的性别与生殖对杀虫剂的敏感性(一般雌性昆虫对杀虫剂的敏感性比雄性昆虫低,但对有机磷杀虫剂来讲,则雌性个体比雄性个体感受性低。
农药生物活性测定实验指导游红编实验一供试目标昆虫的饲养——棉铃虫的饲养一、实验目的:1、明确标准目标昆虫饲养在生物测定中的意义;2、了解常见目标昆虫的饲养条件及方法;3、学习棉铃虫的饲养方法。
二、实验原理:杀虫剂生物测定必须使用大量、群体整齐、健康程度一致,龄期一致的标准目标昆虫,才能保证对杀虫剂毒力的反应准确。
因此,进行杀虫剂生物测定必须采用人工饲养标准目标昆虫,以保证供试昆虫的充分供应,这是农药毒力试验工作中的最基本的组成部分。
饲养目标昆虫的种类,除采用农作物害虫外,仓库害虫、卫生害虫及其他繁殖力强,便于饲养的昆虫也可采用,通过饲养条件的控制,促使供试目标昆虫尽量达到生理状况一致,以减少试验中的误差。
棉铃虫(Helicoverpa armigera H.)属鳞翅目夜蛾科。
食性杂,可长年饲养。
但因幼虫在三龄期以后有相互残杀习性,故必须单头饲养。
对该虫可采用天然植物饲料,如棉蕾铃、青豌豆、新鲜玉米和辣椒等。
若连续大量饲养,须用人工饲养。
三、主要仪器及试材:1、试虫:棉铃虫;2、饲养用具:养虫室,培养皿(15cm),培养皿(5cm),养虫缸,纱布等。
3、饲料:(1)、饲料组成:熟大豆粉(g)20.0 玉米粉(g)30.0大麦粉(g)30.0 抗坏血酸(g) 1.0干酵母(g)8.0 琼脂(g) 3.5苯甲酸钠(g)0.8 棉油(ml) 0.536%醋酸(ml) 6.0 10%甲醛(ml) 1.0水(ml) 200(2)、配制方法:取总水量30%的水,加入玉米粉等成分搅拌;另取70%的水,以溶解琼脂,冷却至70℃时与上述成分混合搅拌;饲料均匀倒入培养皿(15cm)内,厚度1.0——1.5cm,冷却后备用。
四、实验方法与步骤:1、饲养条件:养虫室温度保持26——28℃,相对湿度60%——70%,12小时光照。
2、饲养方法:(1)、在培养皿(16cm)放入约0.3——0.5mm厚的饲料若干块,将附有卵块的纱布放入皿内,用黑布将皿口封住,布上压玻璃板,缸下部对着光源,孵化的幼虫可很快到饲料上取食。
农药学实验原理与方法一、实验原理农药学是研究农药的性质、作用机理、应用方法和安全使用等方面的科学。
农药学实验是通过一系列的实验手段和方法,对农药进行性质分析、毒性评价、效果测试等,以便更好地了解和应用农药。
1. 农药的性质分析农药的性质分析是对农药进行物化性质、化学结构和组成成分等方面的研究。
常见的性质分析包括:外观与颗粒度测定、溶解度测定、热稳定性测定、光谱分析等。
•外观与颗粒度测定:通过观察和测量农药样品外观特征,如颗粒大小、形状、颜色等,以及使用显微镜或粒径仪等设备测量其粒径大小,从而了解其物理状态和颗粒度分布情况。
•溶解度测定:通过将一定量的农药样品溶于不同溶剂中,并在一定温度下振摇或加热搅拌,然后测定溶解度,以评估其在不同介质中的溶解性能。
•热稳定性测定:将农药样品加热至一定温度,并观察其物理和化学变化情况,以确定其在高温条件下的稳定性和热分解特性。
•光谱分析:使用紫外-可见吸收光谱、红外光谱、质谱等仪器,对农药样品进行光谱扫描和分析,以确定其结构、功能基团和组成成分。
2. 农药的毒性评价农药的毒性评价是对农药对人体、动植物和环境等方面的毒性进行评估。
常见的毒性评价包括:急性毒性试验、慢性毒性试验、致突变性试验等。
•急性毒性试验:将一定剂量的农药给予实验动物(如小白鼠)进行口服或皮肤接触,观察其死亡率、临床症状和体重变化等指标,从而确定农药对实验动物急性毒力的强弱。
•慢性毒性试验:将一定剂量的农药长期给予实验动物进行饮食或皮肤接触,观察其生长发育、器官功能和繁殖能力等指标,以评估农药对实验动物慢性毒性的影响。
•致突变性试验:使用细菌、真菌或小鼠等生物体,暴露于一定剂量的农药中,通过染色体畸变、基因突变等指标,评估农药对遗传物质的致突变作用。
3. 农药的效果测试农药的效果测试是对农药在防治病虫害方面的效果进行评价。
常见的效果测试包括:杀虫活性测定、杀菌活性测定、除草活性测定等。
•杀虫活性测定:将一定剂量的农药喷洒或涂抹于受虫害植株上,观察和统计死亡率、危害程度、虫害数量等指标,以评估农药对目标昆虫的杀灭效果。
农药生物活性测定实验指导实验指导游洪扁1农药生物活性的测定实验一供试目标昆虫的饲养--棉铃虫的取食一、实验目的:1.阐明标准靶昆虫取食在生物测定中的意义;2.了解常见目标昆虫的取食条件和方法;3.学习棉铃虫的饲养方法。
二、实验原理:农药生物测定必须使用大量数量整齐、健康状况一致、年龄一致的标准目标昆虫,以确保对农药毒力的准确反应。
因此,有必要人为提高农药生物测定的目标昆虫标准,以确保被测昆虫的充足供应,这是农药毒性试验最基本的部分。
饲养目标昆虫的种类,除采用农作物害虫外,仓库害虫、卫生害虫及其他繁殖力强,便于饲养的昆虫也可采用,通过饲养条件的控制,促使供试目标昆虫尽量达到生理状况一致,以减少试验中的误差。
棉铃虫属于鳞翅目夜蛾科。
它的饮食很杂,可以长时间饲养。
然而,幼虫在三龄后有互相残杀的习惯,因此必须单独饲养。
这种昆虫可以用天然植物饲料喂养,如棉花芽、青豆、新鲜玉米和胡椒。
如果连续大规模喂食,必须使用人工喂食。
三、主要仪器及试材:1.试验昆虫:棉铃虫;2、饲养用具:养虫室,培养皿(15cm),培养皿(5cm),养虫缸,纱布等。
3、饲料:(1)、饲料组成:熟大豆粉(g)20.0玉米粉(g)30.0大麦粉(g)30.0抗坏血酸(g)1.0干酵母(g)8.0琼脂(g)3.5苯甲酸钠(g)0.8棉油(ml)0.536%醋酸(ml)6.010%甲醛(ml)1.0水(ml)200(2)、配制方法:取总水量的30%,加入玉米粉等成分搅拌;另取70%水溶解琼脂,冷却至70℃后与上述成分混合;饲料应均匀倒入培养皿(15cm),厚度为1.0-1.5cm,冷却备用。
四、实验方法与步骤:1.喂食条件:养虫室温度保持26――28℃,相对湿度60%――70%,12小时光照。
2、饲养方法:(1)、在培养皿(16cm)放入约0.3――0.5mm厚的饲料若干块,将附有卵块的纱布放入皿内,用黑布将皿口封住,布上压玻璃板,缸下部对着光源,孵化的幼虫可很快到饲料上取食。
农药学实验原理与方法一、农药主要实验原理1.农药的物理性质测定:包括密度、折射率、熔点、沸点等。
测定这些物理性质可以帮助判断农药的纯度和稳定性,以及用于农药配方和施用的参考数据。
2.农药的化学性质测定:包括水解动力学、光解动力学、稳定性、溶解度等。
测定这些化学性质有助于了解农药的降解过程和环境归趋,在研发和使用中能提供科学依据。
3.农药的毒理学测定:包括急性毒性、慢性毒性、刺激性、致敏性等。
通过动物实验,了解农药对生物的毒性程度和影响,以确定农药的安全使用剂量和毒性级别。
4.农药的生物学测定:包括杀菌、杀虫、杀螨、杂草毒性等。
通过室内和田间试验,评估农药对目标生物的杀灭效果和持效期,确定农药的使用方法和推荐剂量。
5.农药的效果评价:包括田间试验和防效测定。
通过对不同施用方法和剂量的试验,评估农药的防效和经济效益,为农民提供科学的农药应用建议。
二、农药主要实验方法1.农药的物理性质测定方法:常用的方法包括测定密度的比重瓶法、测定折射率的折光仪法、测定熔点的差热分析法、测定沸点的蒸馏法等。
2.农药的化学性质测定方法:常用的方法包括测定水解动力学的酶促反应法、测定光解动力学的紫外光照射法、测定稳定性的加热和存储法、测定溶解度的溶液测定法等。
3.农药的毒理学测定方法:常用的方法包括LD50(半数致死剂量)测定、动物器官毒理学测定、细胞毒理学测定、遗传毒理学测定、生殖毒理学测定等。
4.农药的生物学测定方法:常用的方法包括测定杀菌活性的接种法、测定杀虫活性的皮肤接触法、测定杀螨活性的药膜法、测定杂草毒性的土壤带菌法等。
5.农药的效果评价方法:常用的方法包括田间试验的小区试验法、防效测定的虫害指数法、经济效益评价的成本收益比法等。
实验过程中需要注意的几点:1.实验前需了解实验的目的和要求,设计合理的实验方案。
2.配置实验药液时应严格按照实验方案和农药使用说明书的要求进行,确保药液的浓度和质量符合实验要求。
3.必须采取必要的安全措施,如佩戴实验手套、护目镜等,避免接触和吸入农药。
农药室内生物测定技术与方法张宗俭(沈阳化工研究院农药生物测定中,沈阳110021)一、农药生物测定的含义及其用途农药生物测定是指利用靶标生物(昆虫、螨类、病原微生物、线虫、植物等)的活体或离体器官、组织、细胞或其代谢物等(如酶、蛋白质等)为试材,测试或鉴别生物活性物质的类型、反应症状或其活性大小的一种方法。
简单地说,农药生物测定技术就是利用靶标生物等对药剂的反应来鉴别农药毒力或药效的一种技术。
农药生物测定主要包括杀虫剂(杀螨剂)、杀菌剂(杀线虫或抗病毒剂等)、除草剂、杀鼠剂以及植物生长调节物质等的生物测定技术。
它涉及靶标生物、测试物质(药剂)、反应症状及强度、测试环境条件等多方面的因素。
一个好的生物测定技术或方法应具备易于操作、结果反应灵敏、重现性好、且使用物质的剂量与反应之间有良好的相关性。
农药生物测定技术与农药的使用和开发同时产生,经过长期不懈创新、完善和发展,已经成为研究生理活性物质、靶标生物以及反应强度三者关系的一项专门技术,被广泛应用于新农药的筛选以及作用特性和应用技术评价等研究之中。
纵观目前农药生物测定的研究概况,室内农药生物测定技术主要应用于以下几个方面:1.刨制农药生物活性筛选研究:随着农业生产的发展和人们对地球环境生态和人类健康等的要求不断提高,高效、低毒、环境友好型新农药的开发应用给人类社会和生产企业带来巨大的效益,但同时也由于新农药开发的难度与费用日益增加,如何利用生物测定技术快速高效地筛选新化合物,并准确评价其生物活性以及应用技术,估测其农药生物评价技术报告会市场前景及将来在市场上的占有率和利润额,是决定其创制农药研究成功与否的关键。
利用生物测定方法研究同一类结构或同一作用类型化合物的化学结构与生物活性关系的规律(sAR)以及与靶标作用位点的结合关系,为定向创制新农药和计算机辅助设计新化合物提供基础数据和理论依据。
生物活性筛选被称为农药创制的“眼睛”.对新农药开发研究起着举足轻重的作用。
农药室内生物测定试验准则杀虫剂8 下载提示:该文档是本店铺精心编制而成的,希望大家下载后,能够帮助大家解决实际问题。
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农药生物测定实验指导(研究生)实验一培养基的制作、灭菌和病原菌的接种、培养一、实验目的:1、熟悉并掌握微生物用培养基的制作及灭菌的原理及使用;2、熟悉并掌握微生物的接种、培养及保存方法。
二、实验原理:培养基是供微生物生长的基物,分液体和固体两种。
按成分又可分为天然培养基、半组合培养基和组合培养基。
培养真菌所用的培养基一般用马铃薯培养基,它是半组合培养基,制作比较简单,且能够完全满足微生物的营养要求。
灭菌是杀死所有微生物,保证培养基不被杂菌污染的重要手段之一。
灭菌的方法有四种:热力灭菌、过滤灭菌、化学灭菌和物理灭菌。
热力灭菌在微生物灭菌中占主要地位,分干热灭菌和湿热灭菌。
干热灭菌是利用热空气来灭菌,将玻璃器皿等放入烘箱中加热,一般用160-170℃处理1小时或150℃处理2小时,适用于经高温处理不易损坏的干燥物质。
湿热灭菌,即高压蒸汽灭菌,是将灭菌物放入灭菌锅内,维持一定的蒸汽压力,一般为1公斤/cm2左右(相当于121℃),维持半小时,以确保杀死所有微生物,适用于高温高压下不易分解变质的物质和玻璃器皿。
湿热灭菌比干热灭菌效率高。
病原菌接种培养是杀菌剂毒力测定经常进行的工作之一,因培养基性状不同,可采用不同的接种方法。
本实验是练习在固体培养基上接种。
固体培养基的接种方法分倾注和斜面两种接种方法。
接种后的菌种,必须放在适温下培养,在培养期间注意观察菌种的生长情况和有无杂菌污染,温度要保持恒温,培养成熟的菌种必须很好地保存。
三.主要仪器及试材:1、实验器皿:培养皿、容量瓶、移液管、无菌水、PDA培养基[注:以上器皿须经灭菌。
]2、实验仪器:超净工作台、灭菌锅、培养箱、打孔器、酒精灯等。
四.实验方法与步骤:(一)、培养基的制作:1、培养基的组成(PDA):去皮马铃薯块200克葡萄糖(或蔗糖)10-20克琼脂17-20克水1000ml2、步骤:(1)、在大烧杯中加入1000ml的水,作上标记;(2)、称取去皮马铃薯200克,切成小块,放入盛有水的烧杯中,煮沸30分钟左右,将薯块捞出,留下汁液;(3)、称取17-20克琼脂(事先用水浸泡),加入烧杯中,煮溶后,称取葡萄糖(或蔗糖)10-20克,加入汁液中溶解。
农药室内生物测定试验准则全文1.概述在农业生产中,为了保障作物的健康生长和提高产量,人们经常使用各类农药来防治病虫害。
然而,农药的使用也带来了一定的环境和健康风险。
为了评估农药对环境和人体健康的影响,农药室内生物测定试验成为了一种重要的手段。
本文将详细介绍农药室内生物测定试验的准则和要求,以期为相关研究和实践提供参考和指导。
2.试验目的农药室内生物测定试验的主要目的在于评估农药对环境中生物的毒性和影响,为农药的安全使用提供科学依据。
具体包括以下几个方面:(1)评估农药对非靶标生物的毒性,包括对土壤微生物、水生生物、土壤动物等的影响;(2)评估农药对靶标生物的毒性,包括对作物、有害生物等的影响;(3)评估农药对生态系统的影响,包括对裙落结构、生态功能等的影响。
3.试验方法农药室内生物测定试验的方法应当符合以下几个原则和要求:(1)试验设计应当科学合理,包括试验方案的选择、生物样本的采集和处理等;(2)试验条件应当模拟实际环境,包括温度、湿度、光照等因素的控制;(3)试验操作应当规范和标准化,包括农药溶液的配制、生物暴露和取样等操作;(4)试验持续时间应当充分,能够反映农药长期使用对生物的影响;(5)试验结果应当科学可靠,包括生物体的生长、繁殖、生存等指标的测定和分析;(6)试验数据应当真实准确,包括数据的记录、整理和统计等过程。
4.试验评价农药室内生物测定试验的评价应当综合考虑各种因素,包括试验结果的可靠性、科学性、实用性等。
具体包括以下几个方面:(1)对农药的毒性进行分类和评价,包括急性毒性、慢性毒性、累积毒性等;(2)对生物样本的响应进行分析和解释,包括对生物体的影响机制、毒性剂量等方面的研究;(3)对试验结果的实际意义进行评估,包括对环境保护、风险评估等方面的影响;(4)对试验方法的改进和完善进行总结,包括对试验过程中存在的问题和不足进行反思和修正。
5.结论农药室内生物测定试验准则的制定和实施对于评估农药对环境和生物的影响具有重要意义。
昆虫乙酰胆碱酯酶活性的测定一、实验目的:了解乙酰胆碱酯酶的作用,掌握乙酰胆碱酯酶活性的测定方法。
二、实验材料试剂:0.05mo1/L, pH7.2磷酸盐缓冲液(PBS) ; ATCh液;称取ATCh75mg加pH7.2PBS 100m1即成。
DTNB液:称取DTNB13mg加pH7. 2PB S 1 OOml即成。
本试验选用残杀威杀虫剂作为抑制剂,在测试前按不同比例用乙醇充分溶解。
三、实验步骤1、样品制备:采用本所饲养的淡色库蚊Culex pipiens pallensCoquillett敏感品系蚊虫和室内选育的抗残杀威品系淡色库蚊作酶源。
将N龄幼虫或刚羽化3-4天未吸血雌性成蚊,放人1.5m1离心管中,加100[1 pH7.2PBS碾碎混匀,10000r/min离心15min,取上清液再加900pl pH7.2PBS稀释,待用。
2、实验方法:将100协1蚊虫混匀液,滴人%孔微滴定板孔中,每孔再加混有1 x 10-4mol/L的残杀威ATCh液1 OOmhZ,,放30 C孵育30分钟后,每孔再加100ul DTNB液,待反应5分钟后,用酶标仪(北京新技术研究所提供MB- III型)进行比色。
四、结果分析在410mu波长下读取光密度。
每只蚊虫可测4-10孔取其OD平均值。
昆虫中肠淀粉酶活性测定一、实验目的:了解中肠淀粉酶的作用,掌握中肠淀粉酶活性的测定方法。
二、实验方法1、肠液的提取:电刺激法取肠液,10K离心5min,上清液为酶液,用0 85%生理盐水稀释5倍备用。
2:测定步骤:α淀粉酶及(α+β) 淀粉酶的活性测定每个重复区用5个试管,同时做等量对照试管,每个试管加酶液1mL,在70℃恒温水浴中加热15min,取出后迅速用自来水冷却。
各管加入1mLpH5.6柠檬酸缓冲液,对照管加4mL0 4mol/LNaOH,纯化酶的活性。
将对照与测试管置于40℃(±0 5℃)恒温水浴中保温15min,各管加入40℃左右预热的淀粉液2mL,摇匀,立即放入40℃水浴中保温5min,取出后迅速加入4mL0 4mol/LNaOH,终止酶反应。
农药室内生物测定试验准则一、概述随着人口的激增和粮食需求的增加,农业生产中对农药的需求量也在不断增加。
而农药的使用不当往往会对环境和人体健康造成危害。
对农药的安全性进行评估就显得尤为重要。
而室内生物测定试验作为一种评定农药毒性的重要手段,其准则的制定对于保障农产品质量和人体健康具有重要意义。
二、浸叶法1. 浸叶法的原理浸叶法是一种常用的室内生物测定试验方法,其原理是将待测农药溶液浸渍在叶片上,通过观察叶片的生物学指标来评定农药的毒性。
2. 浸叶法的操作步骤(1)准备好需要进行测定的植物叶片,保证叶片的新鲜度和完整性。
(2)将待测的农药溶液配置好,浓度和溶剂的选择需符合试验标准。
(3)将叶片放置在农药溶液中浸泡一定的时间,然后取出叶片进行观察和记录。
(4)观察叶片在浸叶后的生长状态、叶片颜色变化,以及叶片的生理生化指标的变化情况。
(5)根据观察结果进行数据统计和分析,从而得出对农药毒性的评定结论。
3. 浸叶法的注意事项(1)在进行浸叶法实验时,需保证试验环境的稳定性和一致性,以减少外界因素对实验结果的影响。
(2)叶片的选择和处理需要严格按照标准操作,以保证实验的准确性和可比性。
(3)在配置农药溶液时,需注意溶剂的选择和浓度的控制,以避免实验结果的失真。
4. 浸叶法的优缺点(1)浸叶法的优点在于操作简便,结果直观,能够客观地反映农药对植物的毒害程度。
(2)浸叶法的缺点在于只能评定农药对植物的毒性,而无法评定对其他生物的影响,且叶片的处理和测定会受到多种因素的影响,容易产生误差。
5. 浸叶法的相关标准浸叶法在农药室内生物测定试验中的应用,需严格按照相关标准进行操作。
包括但不限于《农药生态毒理学准则》、《农药毒性测定试验方法》等。
三、结论农药室内生物测定试验准则的制定和实施,对于评定农药的毒性和安全性有着重要意义。
浸叶法作为其中一种常用的试验方法,在实施时需符合严格的试验标准,以保证试验结果的准确性和可比性。
农药生物测定标准
农药生物测定的标准通常是指用于评估农药对生物的毒性效应的参考方法或准则。
这些标准的制定旨在确保农药的使用安全,并对环境和人类健康产生最小的潜在风险。
农药生物测定的标准可以包括以下内容:
1. 毒性测定方法:包括急性毒性、亚急性和慢性毒性测定方法,用于评估农药对不同物种的短期或长期暴露的毒性效应。
这些方法通常包括了不同暴露路径和剂量水平的考虑,以及对动物行为、生理和病理变化的观察。
2. 致畸、致突变和致癌性评估方法:用于评估农药对生殖和发育过程的潜在毒性,并确定其对基因的突变和突变的潜在致癌性。
3. 生态毒理学评估方法:用于测定农药对非靶标生物(如鱼类、昆虫、蘑菇等)的毒性效应的方法。
这些方法通常包括了对生物种群和群落的潜在影响的考虑。
4. 农药残留检测方法:用于检测农产品中农药残留物的含量的方法。
这些方法通常包括了样品准备、提取、纯化和测定的步骤。
5. 毒性数据评估及风险评估方法:用于评估农药毒性数据和相关信息的方法,以确定农药的安全使用水平和潜在风险。
这些标准通常由国际标准化组织、国家农药监管机构和国际农药制造商协会等机构制定和颁布。
不同国家和地区的农药生物测定标准可能存在一定的差异,但都共同追求保护环境和人类健康的目标。
农药学实验原理与方法引言:农药是指用于农田、果园、林地、牧场等作物和动植物病虫害防治的化学药剂和生物制剂。
农药学是研究农药及其应用的科学,实验是农药学研究的重要组成部分。
本文将介绍农药学实验的原理与方法,帮助读者更好地理解农药学领域中实验的进行。
一、实验原理1.农药的毒性测定原理农药的毒性测定是指通过实验方法,确定农药对害虫或其他有害生物的毒杀效果。
主要包括急性毒性、亚慢性毒性和长期毒性的测定。
急性毒性实验是测定农药对其中一种害虫或其他有害生物的瞬时毒杀效果,以LD50或LD100为指标。
亚慢性毒性实验是测定农药对其中一有害生物的长期效果,例如对昆虫的繁殖和发育的影响。
长期毒性实验是通过观察农药对其中一生物(如小鼠等)的长期毒副作用,以确定农药在长期使用中可能带来的危害。
2.农药的残留分析原理农药的残留分析是指通过实验方法,测定农产品、环境介质中农药的残留量。
常用的残留分析方法包括色谱法、气相色谱质谱联用法和高效液相色谱法等。
残留分析的目的是评价农药在农作物、水体、土壤等环境中的残留情况,并制定相应的农药使用标准,确保农产品质量和环境安全。
3.农药对非靶生物的毒性测定原理农药对非靶生物的毒性测定是指通过实验方法,评价农药对非目标物种的毒害效应。
非靶生物包括土壤微生物、蜜蜂、鱼类等。
这些生物对农药的毒害可能会对农田生态系统产生不良影响。
故而,通过实验确定农药对非靶生物的毒性水平很重要。
二、实验方法1.急性毒性实验方法(1)LD50测定法:将特定浓度的农药溶液注入实验动物体内,观察不同浓度农药对实验动物的生理和行为变化,并测定致死浓度。
根据LD50的值可以判断农药的毒性水平。
(2)LD100测定法:将农药溶液直接注入实验动物体内,观察不同浓度农药对实验动物的生理和行为变化,并测定致死浓度。
与LD50相比,LD100法更能准确评估农药的毒杀效果。
2.残留分析方法(1)色谱法:将农产品样品中的农药提取,并使用色谱仪进行分离和定量测定。
农药室内生物测定试验准则书农药是农业生产中常用的一种防治农作物病虫害的工具,但同时也带来了一定的安全隐患。
为了确保农药的安全性,准确评估其对环境和人体健康的影响,进行室内生物测定试验是必不可少的。
室内生物测定试验是一种通过模拟真实环境条件,在实验室中对农药进行毒性评价的方法。
它通过观察和测量农药对特定生物体的影响,来确定其对环境和人体的潜在风险。
首先,室内生物测定试验需要选择适当的实验生物体。
通常选择的实验生物体包括小鼠、大鼠、兔子、鸟类等。
这些生物体代表了不同的物种,在体内代谢和反应机制上有所差异,能够综合评估农药对多种生物体的毒性。
其次,在进行室内生物测定试验时,需要注意实验条件的控制。
温度、湿度、光照等环境条件应与实际使用情况相符合,以保证实验结果的准确性和可比性。
同时,试验中要使用适量的样品和农药浓度,以模拟实际使用时的情况,更好地评估农药的毒性。
室内生物测定试验中,观察指标的选择也很重要。
常用的观察指标包括生长指标、生理指标和生化指标等。
通过测量实验生物体在农药作用下的生长情况、呼吸、代谢等指标,可以了解农药对其生理和生化过程的影响,从而推测其对环境和人体的影响。
此外,室内生物测定试验中还需要进行毒性评价和风险评估。
毒性评价是通过对实验结果的分析和对比,确定农药对实验生物体的毒性程度。
风险评估则是将毒性评价的结果与实际使用情况相结合,评估农药在实际环境中的潜在风险。
通过这些评估,可以为农药的安全使用提供科学依据。
最后,室内生物测定试验的结果需要进行数据统计和分析。
通过对实验数据的处理,可以获得农药的毒性参数,如半数致死浓度(LC50)、半数致残浓度(EC50)等。
这些参数可以用于毒性评价和风险评估,进一步指导农药的使用和管理。
综上所述,室内生物测定试验是一种重要的农药安全评估方法。
它通过模拟真实环境条件,在实验室中对农药进行毒性评价,从而确定其对环境和人体的潜在风险。
在进行室内生物测定试验时,需要选择适当的实验生物体,控制实验条件,选择合适的观察指标,并进行毒性评价和风险评估。
农药室内生物测定试验准则书概述1. 引言1.1 概述本篇长文旨在介绍农药室内生物测定试验准则书,探讨其背景信息、实验设计要点和数据分析要点。
农药的使用对于现代农业起到了重要的促进作用,但同时也带来了环境和健康风险。
为了确保农药的安全性和可持续发展,在农产品生产过程中进行有效的检测和评估是非常必要的。
1.2 文章结构本文分为五个主要部分进行叙述。
引言部分概括性地介绍了文章内容,并明确了文章结构。
接下来的正文将详细讨论农药室内生物测定试验准则书的背景信息、实验设计要点和数据分析要点。
结论部分总结了全文内容,并展望了准则书的应用前景以及可能面临的挑战和解决方案。
最后,结束语部分再次总结全文内容并鼓励未来研究和发展方向。
1.3 目的本篇文章旨在向读者介绍并提供关于农药室内生物测定试验准则书的详尽信息。
通过深入研究背景信息、实验设计要点和数据分析要点,读者将能够了解到农药室内生物测定试验准则书的重要性以及其在农产品生产中的应用价值。
同时,文章也提供展望和建议,鼓励未来研究和发展方向,使农药的使用更加安全可靠。
正文部分:农药室内生物测定试验准则书的制定和实施对于农药研发和使用具有重要意义。
在这一节中,我们将详细讨论相关的内容。
2.1 农药室内生物测定试验的定义与意义农药室内生物测定试验是指在实验室环境中,通过对作物或其害虫进行人工饲养或培养,并使用合适的方法、指标和仪器来评估农药对目标生物的毒性、影响及效果等方面的测试。
这项试验可以为评价农药对目标有害生物的控制效果提供可靠依据。
在现代化农业中,对于不同类型和目标有害生物,选择适用的农药成为了保证产量和质量的关键。
因此,建立科学严谨的农药室内生物测定试验准则书可以规范化、统一化评估方法,并为不同地区和行业提供参考依据。
这样能够确保农药研发过程中数据结果比较准确,在合理剂量下更好地保护作物并最大限度地减少环境污染。
2.2 农药室内生物测定试验的基本内容农药室内生物测定试验的基本内容涉及到实验设计、样品处理、测量指标和数据分析等方面。
农药生物测定田间试验一个新药物的发现,必须两个系统的同时运转一个系统是化学系统,一个系统是生物学系统农药生物测定与田间药效试验西南大学植保学院丁伟教授联系电话:68250218一、农药室内生物测定1.生物测定(bioassay)是由biological和assay组合而成,通常是指具有生理活性的物质对某种生物产生效应的一项测定技术。
但是,从更广的范围来理解生物测定,则可概括为:“对生物的任何刺激所产生的效应的测定,包括来自物理、化学、生物、生理及心理等方面的刺激对生物活体产生的反应。
”总之,生物测定是研究作用物、靶标生物和反应强度三者关系的一项专门技术。
2.生物测定的一般模式3.农药生物测定(pesticidebioassay)指在一定条件下利用靶标生物测定其对某些化合物的反应的量度,进而鉴别某种化合物生物活性的基本技术与方法。
靶标生物:通常指有害生物,包括昆虫、螨类、病菌、杂草、鼠类等。
包括这些生物的整体或离体的组织、细胞等。
待测化合物:可以是已经成为农药的化合物,包括杀虫(杀螨)剂、除草剂、杀菌剂、杀鼠剂、杀线虫剂乃至卫生杀虫剂等;也可以是待筛选的化合物(已知物和未知物)。
生物反应:指靶标生物对杀虫、杀菌、除草等作用的反应,可以延伸为凡是干扰破坏有机体正常生长、发育、行为、代谢等效应的反应,如植物生长调节、昆虫生长调节、信息传递物质等。
生物反应用死亡率、抑制率、反应率等指标来表示。
量度:指反应的强度或者大小的指标。
要运用特定的实验设计,以生物统计为工具,借助于数学的方法,来给生物反应以量化表达。
生物活性:指药物或某一个化合物对生物体产生的效应。
如果有,则这个药物或化合物有生物活性,如果不产生效应,则这个药物或化合物就没有生物活性。
4.农药生物测定的知识体系(1)供试对象的准备(包括靶标生物的饲养技术和待测化合物的选择);也包括组织培养、细胞培养、药剂配制、剂量计算等内容(2)生物测定的操作技术与方法(包括室内生测、小区实验和田间药效实验三个方面);(3)影响农药生物测定的因素分析;(药剂、生物体、环境、操作方法)(4)农药生物测定结果的评价与表达。
农药生物测定实验指导(自编试用1.0)主编:姜兴印副主编:赵春青张卫光制药工程专业用山东农业大学植物保护学院2008年9月棉铃虫人工饲料制备一、实验目的学习棉铃虫人工饲料制备技术和方法。
本方法还适合玉米螟等人工饲料的制备。
二、实验用品和仪器设备仪器设备:天平、高压灭菌器、罐头瓶、电饭锅、筛子(40目)、量筒、搪瓷盘、温度计实验物品:小麦粉、玉米粉、黄豆粉、啤酒酵母粉、琼脂、棉叶、V C、棉油、苯甲酸钠、山梨酸钾、兽用链霉素、水等三、实验方法1. 配方:2. 小麦粉、玉米粉、黄豆粉、酵母粉和棉叶装入罐头瓶中,高压灭菌40min.(120℃)3. 水+琼脂煮开冷却至70℃,加入Vc、防腐剂、棉油混匀,再加入混合好的其他成分,充分混匀。
4. 倒入搪瓷盘,加盖冷却后放入冰箱中备用。
四、质量检查饲料冷却后观察颜色和固化成型情况。
五、实验报告农药生物测定药剂配制一、实验目的学习生物测定药剂配制的实验操作技术和方法。
二、实验用品和仪器设备电子天平、计算器、烧杯、移液管、吸耳球、记号笔、容量瓶、量筒等。
实验原药:93%顺式氯氰菊酯,95%吡虫啉实验制剂:50%多菌灵WP,2.5%功夫EC(w/w),33%施田补EC(w/v)三、实验方法1. 原药母液的配制与稀释(1)用丙酮配制2%顺式氯氰菊酯母液50mL,然后稀释成200mg/L 50mL 丙酮液。
(2)用丙酮配制1%吡虫啉母液50mL,然后稀释成125mg/L 50mL丙酮液(3)将顺式氯氰菊酯和吡虫啉按照5:2的比例混合,配制1.5%混剂50mL 丙酮液。
2. 制剂的稀释(1)50%多菌灵WP,稀释成200mg/L 100mL的水溶液(烧杯)。
(2)2.5%功夫EC,稀释成1000mg/L 100mL的水溶液(烧杯)。
(3)33%施田补EC,稀释成150mg/L 100mL的水溶液(烧杯)。
四、结果计算和处理将以上每一种母液配制和稀释需要原药和制剂的量计算,并详细描述配制和稀释过程。
五、实验报告撰写实验报告。
杀虫剂毒力测定-微量点滴法一、实验目的学习微量点滴法测定杀虫剂触杀毒力的实验操作技术和方法,学习和使用微量点滴仪。
二、实验用品和仪器设备生化培养箱、电子天平、计算器、微量点滴仪、烧杯、移液管、养虫盒、镊子、滤纸、记号笔、容量瓶等。
实验药剂:顺式氯氰菊酯,2.5、5.0,10,20,40mg/L实验材料:玉米螟5龄幼虫三、实验方法1. 药剂配制与稀释用丙酮配制1%顺式氯氰菊酯母液,然后稀释成系列浓度。
2. 试虫选取与称重选择个体大小一致的5龄幼虫,每个处理浓度3次重复,每个重复20头幼虫,电子天平称重求平均虫重。
3. 微量点滴仪的使用方法和注意事项4. 药剂点滴点滴部位:幼虫前胸背面,点滴量1.0uL左右,以溶剂处理为对照。
5. 点滴后的幼虫放置在养虫盒内,5头/盒,饲喂人工饲料,置于28℃的生化培养箱中。
四、结果检查和处理处理48h后检查死亡数,用毛笔尖端或尖头镊子轻轻触动虫体,以不能正常值。
爬行者为死亡。
计算死亡率和校正死亡率,并求毒力回归方程和LD50五、实验报告撰写实验报告,并对实验结果进行讨论分析。
杀虫剂毒力测定-浸渍法一、实验目的学习浸渍法(浸虫和浸叶法)测定杀虫剂触杀毒力和胃毒毒力的实验操作技术和方法。
二、实验用品和仪器设备生化培养箱、电子天平、计算器、浸虫器、烧杯、移液管、养虫盒、镊子、滤纸、记号笔、容量瓶等。
实验药剂:80%氟虫腈WG实验材料:小菜蛾3龄幼虫,甘蓝叶片三、实验方法1. 药剂配制与稀释将药剂稀释1.0×105×,2.0×105×,4.0×105×,8.0×105×,以清水为对照。
2. 采用浸渍法先将甘蓝叶片在不同浓度的药液中处理3-5s,放在报纸上晾干,放在养虫盒里,每盒1片。
3. 用浸虫器将小菜蛾幼虫在药液中浸渍处理3-5s,每一浓度处理30头,分为3次重复,每一重复10头幼虫放在1个养虫盒内。
4. 28℃生化培养箱饲养。
四、结果检查和处理处理3d后检查结果,用毛笔尖端或尖头镊子轻轻触动虫体,以不能正常爬值。
行者为死亡。
计算死亡率和校正死亡率,并求毒力回归方程和LC50五、实验报告撰写实验报告,并对实验结果进行讨论分析。
杀虫剂触杀毒力测定-滤纸片药膜法一、实验目的学习滤纸片药膜的准备方法和利用药膜测定杀虫剂对鳞翅目初孵幼虫的毒力。
二、实验用品和仪器设备电子天平、计算器、烧杯、移液管、吸耳球、记号笔、容量瓶、量筒、滤纸、大头针、泡沫板、毛笔、培养皿、秒表、丙酮、石油醚、缝纫机油等。
实验原药:90%辛硫磷原油实验材料:玉米螟初孵幼虫三、实验方法1.混合溶剂的配制丙酮:石油醚:缝纫机油=1:3:12.原药母液的配制用混合溶剂配制1%辛硫磷母液50mL。
3.药膜的制备取直径9cm滤纸,放于用三根大头针做成的支架上,吸取1mL1%辛硫磷母液,从滤纸中心向外均匀环形滴加,使其充分湿润,待溶剂挥发后,放于直径9cm的培养皿内备用,以混合溶剂处理为空白对照。
4.初孵幼虫的处理用软毛笔迅速挑取玉米螟初孵幼虫30头于滤纸上,并立即计时,培养皿的一侧加一微光源,玉米螟由于有趋光性,会迅速爬向光照得一方,不断转动培养皿,使玉米螟保持爬动,以不能爬动的为死虫,观察幼虫击倒时间及头数,重复3次。
四、结果计算和处理计算各个处理幼虫的击倒率和校正击倒率,求得毒力回归方程和击倒中时(KT50)。
五、实验报告撰写实验报告,并对实验结果进行分析和讨论。
杀螨剂毒力测定-浸玻片法一、实验目的学习浸玻片法测定杀螨剂的实验操作技术和方法。
本方法适合测定螨体背部刚毛较短的各种雌成螨。
二、实验用品和仪器设备生化培养箱、电子天平、计算器、双目解剖镜、烧杯、移液管、载玻片、双面胶带、零号毛笔、记号笔、搪瓷盘、吸水纸、薄海绵、剪刀等。
实验药剂:2.5%功夫乳油,2000×、4000×、8000×、16000×、32000×实验材料:山楂叶螨三、实验方法1. 将双面胶带剪成2cm长,贴在载玻片的一端。
2. 用零号毛笔挑起3-4日龄的雌成螨,迅速将其背部粘在胶带上,每行粘10头,粘2-3行。
3. 双目解剖镜仔细观察粘在胶带上的螨,用毛笔除去粘在胶带上不规则的螨,如足、腹面、头部等粘在胶带上,只保留符合规定的雌成螨。
25℃,相对湿度80%左右的条件下放置4h后,再用解剖镜观察,足能够正常活动的个体符合实验要求,去除不合格的其它个体,并记录存活个体数。
4. 用水将实验药剂配制成5个系列浓度,置于100mL烧杯中,用手持玻片无螨的一端,将粘有螨的一端在药液中浸渍5s,取出后用吸水纸吸去多余的药液。
对照用清水处理。
每个处理重复3-4次。
5. 在搪瓷盘中铺设厚度为1.0cm的海绵或吸水纸,其上铺蓝布,加水湿透海绵(或吸水纸)和蓝布,不要积水。
将玻片平放在上面,置于25℃的生化培养箱中。
四、结果检查和处理处理24h后检查死亡数,用毛笔尖端轻轻触动螨足,以不动者为死亡。
计算值。
死亡率和校正死亡率,并求毒力回归方程和LC50五、实验报告撰写实验报告,并对实验结果进行讨论分析。
杀菌剂室内毒力测定-生长速率法一、实验目的学习生长速率法测定杀菌剂室内毒力的实验操作技术和方法。
二、实验用品和仪器设备生化培养箱、电子天平、计算器、直尺、培养皿、烧杯、移液管、打孔器(直径0.5cm)、移菌环、酒精灯、记号笔、容量瓶、三角瓶(50mL、250 mL)、超净工作台、PDA培养基、微波炉、高压灭菌器、电饭煲、马铃薯、葡萄糖、琼脂等。
实验药剂:95%乙霉威原药实验材料:灰葡萄孢菌三、实验方法1. PDA培养基的制备和灭菌,培养皿、移液管、三角瓶(50mL)灭菌。
2. 灰葡萄孢菌的培养PDA平板培养灰葡萄孢菌,菌落生长达2/3皿。
3. 药剂配制与稀释先将原药用丙酮配制1%母液,再用丙酮稀释成25、50、100、200、400mg/L,以丙酮为对照。
4. 带药PDA平板的制备和接菌在无菌的超净工作台上,50mL三角瓶中准确加入4.0mL药液,再加入冷却至50℃左右融化的PDA培养基至50mL刻度线,迅速摇匀后平均倒入到3个直径9cm的培养皿中,制备成带药平板,每个浓度3次重复。
以丙酮为对照。
用灭菌的打孔器在灰葡萄孢菌菌落的边缘打取菌饼,接入到带药平板中央。
25℃生化培养箱培养。
四、结果检查和处理处理3d后检查结果,用直尺测量菌落直径,计算各处理的抑制率,并求毒值。
力回归方程和EC50五、实验报告撰写实验报告,并对实验结果进行讨论分析。
杀菌剂毒力测定-圆叶片法一、实验目的学习利用圆叶片法测定杀菌剂对黄瓜霜霉病菌生物活性的基本要求和方法。
二、实验用品和仪器设备光照生化培养箱、电子天平、计算器、烧杯、移液管、容量瓶、培养皿、玻棒、镊子等。
实验药剂:霜霉威,烯酰吗啉等试验菌种:黄瓜霜霉病菌(pseudoperonospora cubensis)。
实验材料:黄瓜叶片三、实验方法1. 黄瓜霜霉病菌孢子悬浮液的制备室内用无菌水洗涤黄瓜霜霉病病叶的孢子,经过离心除去孢子梗等杂质,并稀释成1×105个孢子/mL孢子悬浮液,保存于4℃冰箱中备用。
2. 药剂配制在预试试验的基础上,将试验药剂用0.1%吐温80水溶液稀释成5-7个系列浓度。
3. 圆叶片处理用2.0cm打孔器在无病黄瓜叶上打取圆叶片,在药液中浸渍5min后取出晾干,放在培养皿内,皿内用滤纸保湿,每片圆叶片叶背面向上,中心滴加10ul 孢子悬浮液,置于19℃生化培养箱内培养,光照黑暗12h交替。
每个浓度重复4次,以0.1%吐温80水溶液浸渍圆叶片并滴加孢子悬浮液的处理为对照。
四、结果检查和处理7d后检查病斑长、短轴,计算防效,并用DPS数据处理软件对结果进行处理,求毒力回归方程和EC50 和EC90。
五、实验报告撰写实验报告,并对实验结果进行讨论分析。
杀菌剂毒力测定-盆栽法一、实验目的学习利用盆栽法测定井冈霉素对小麦纹枯病的毒力。
二、实验用品和仪器设备光照生化培养箱、电子天平、计算器、烧杯、移液管、容量瓶、花盆(大号塑料杯)、玻棒、土壤等。
实验药剂:井冈霉素,100,50,25,12.5mg/L ;CK 试验菌种:小麦纹枯病菌,PDA 平板培养的菌丝。
实验材料:小麦种子 三、实验方法1. 配制井冈霉素各浓度的水溶液,并将提前选择好的小麦种子在药液中浸泡1h ,取出晾干。
2. 将过筛的风干土壤装入花盆内4/5,并浇水湿透,加入PDA 平板培养的小麦纹枯病菌,每皿菌种平均加入到12个花盆内土壤的表面。
3. 播种,5粒/盆,覆盖1.5cm 厚度的风干土壤。
4. 光照生化培养箱内20℃培养21d ,光照:黑暗=10h :14h ,定期浇水,保持湿度。