噬菌体在肠杆菌科细菌分类鉴定中的敏感试验研究

通用医学检验科模拟题2021年(101)(总分98.XX02,考试时间120分钟)A1/A2题型1. 从混有杂菌的标本中分离葡萄球菌的首选培养基是A. 巧克力琼脂培养基B. EMB培养基C. 卵黄双抗培养基D. 高盐甘露醇培养基E. 卵黄甘露醇培养基2. 肺炎链球菌的主要致病因素是A. 鞭毛B. 菌毛C. 荚膜D. 外毒素E. 内毒素3. 与鉴别脑膜炎奈瑟菌和淋病奈瑟菌有关的试验是A. 葡萄糖发酵B. 乳糖发酵C. 果糖发酵D. 麦芽糖发酵E. 蔗糖发酵4. 正常人体内及体表多处有葡萄球菌存在而不引起人的疾病，其中最主要的带菌部位是A. 咽喉B. 皮肤C. 鼻腔D. 肠道E. 泌尿道5. 乙型溶血性链球菌的致病物质不包括A. 溶血素OB. 肠毒素C. 致热外毒素D. 溶血素SE. M蛋白6. 大叶性肺炎时痰液的性状多为A. 铁锈色B. 红色C. 烂桃样D. 棕褐色E. 黄色7. 人体患伤寒后的血清抗体变化，叙述不正确的是A. O与H抗体在体内的消长情况不同B. IgM类O抗体出现较早，持续约半年C. IgM类O抗体消失后不易受伤寒等病原菌的非特异抗原刺激而重新出现D. IgG类H抗体出现较早，持续约半年E. IgG类H抗体消失后易受非特异抗原刺激而重新出现8. 肥达氏反应，有诊断价值的结果是A. O凝集价≥1：80，H凝集价≥1：80B. O凝集价≥1：80，H凝集价≥1：160C. O凝集价≥1：160，H凝集价≥1：80D. O凝集价≥1：160，H凝集价≥1：160E. O凝集价≥1：160，H凝集价≥1：3209. DNA酶阳性的细菌是A. 黏质沙雷菌B. 肺炎克雷伯菌C. 产气肠杆菌D. 阴沟肠杆菌E. 大肠埃希菌10. 迁徒扩散生长的细菌可能是A. 普通变形杆菌B. 肺炎克雷伯菌C. 黏质沙雷菌D. 大肠埃希菌E. 伤寒沙门菌11. 细菌菌体抗原的特异性在于A. 脂类AB. 外侧多糖链C. 核心多糖链D. 内毒素E. 外毒素12. 肺炎患者痰标本为砖红色胶胨样，可能感染的细菌是A. 肺炎链球菌B. 葡萄球菌C. 肺炎克雷伯菌D. 铜绿假单胞菌E. 链球菌13. 耐热肠毒素的检测方法是A. 兔肠段结扎法B. 皮肤毛细血管通透性试验C. Elek法D. 乳鼠灌胃法E. 豚鼠眼结膜法14. 双歧杆菌、乳酸菌需要哪种培养A. 一般培养法B. 二氧化碳培养法C. 厌氧培养法D. 微氧培养法E. 专性需氧培养15. 我国院内感染最常见的菌属是A. 克雷伯菌属B. 肠杆菌属C. 哈夫尼亚菌属D. 沙雷菌属E. 枸橼酸菌属16. 沙门菌的H抗原是指A. 鞭毛B. 脂多糖C. 外膜蛋白D. 菌毛主要亚单位E. 荚膜多糖17. 所致的疾病似痢疾，腹泻呈脓血便，里急后重，称为志贺样大肠埃希菌的是A. 肠产毒型大肠埃希菌B. 肠侵袭型大肠埃希菌C. 肠致病型大肠埃希菌D. 肠出血型大肠埃希菌E. 肠聚集型大肠埃希菌18. 葡萄球菌感染可引起烫伤样皮肤综合征的是A. 溶血素B. 杀白细胞素C. 肠毒素D. 表皮剥脱毒素E. 毒素休克综合征毒素19. 判定致病性葡萄球菌的主要试验是A. 甘露醇发酵B. 耐热DNA酶测定C. 明胶液化D. 触酶试验E. 蔗糖发酵试验20. 金黄色葡萄球菌与表皮葡萄球菌共有的特点是A. 产生金黄色色素B. 有核糖核酸酶C. 甘露醇发酵D. 血浆凝固酶E. SPA21. 分离脑膜炎奈瑟菌的最佳培养基是A. 血平板B. EMB培养基C. 巧克力培养基D. 卵黄平板E. 麦康凯平板22. 关于脑膜炎奈瑟菌，叙述不正确的是A. 镜下呈肾形或豆形成双排列、坦面相对的革兰阴性球菌，具有荚膜B. 本菌是流行性脑脊髓膜炎的病原菌C. 本菌经空气传播，定植于人的脑皮质部位D. 人类是脑膜炎奈瑟菌的惟一宿主E. 本菌对外界环境的抵抗力弱，易自溶23. 肺炎患者痰标本为黄色脓痰、黏厚，可能感染了A. 肺炎链球菌B. 葡萄球菌C. 肺炎克雷伯菌D. 铜绿假单胞菌E. 链球菌24. 某医院新生儿病房发生剥脱性皮炎流行，为追踪引起剥脱性皮炎的金黄色葡萄球菌带菌者，应对医务人员及患儿做A. 细菌学涂片染色镜检B. 细菌分离培养和鉴定C. 血清中葡萄球菌抗体效价滴定D. 金黄色葡萄球菌噬菌体分型E. 血浆凝固酶试验25. 下列可用作B群链球菌鉴定的试验是A. 杆菌肽敏感试验B. 肝汁七叶苷水解试验C. cAMP试验D. 山梨醇发酵试验E. 6．5％NaCl生长试验26. 埃希菌属是A. 革兰阴性短杆菌，散布排列，大多有周鞭毛B. 革兰阳性，菌体染色不均匀，菌体一端或两端膨大C. 革兰阴性较粗大的杆菌，有明显的荚膜，无鞭毛D. 革兰阴性，弧形或逗点状，细菌一端有单鞭毛E. 革兰阴性双球菌，无鞭毛27. 能在SS琼脂上生长的大肠埃希菌菌落的颜色是A. 浅红B. 深红C. 黄D. 无E. 深灰28. 关于志贺菌A群Ⅰ型产生的志贺毒素的特性，叙述不正确的是A. 具有神经毒性B. 具有细胞毒性C. 具有肠毒性D. 由A和B亚单位组成E. 亚单位是毒素的活性部位，能抑制蛋白合成29. 对鉴别痢疾志贺菌与其他志贺菌最有价值的试验是A. 甘露醇利用试验B. 乳糖发酵试验C. 蔗糖利用试验D. 木糖利用试验E. β－半乳糖苷酶试验30. 在肠杆菌科的细菌鉴定中，如何选用选择性培养基主要取决于A. 标本类型B. 取材的时间C. 标本量的多少D. 临床要求E. 细菌的种类31. 关于痢疾志贺菌，叙述错误的是A. 在中国蓝培养基上形成红色小菌落B. 无鞭毛C. 可产生对Vero细胞有毒性作用的Vero毒素D. 可引起败血症E. 其胞质中存在与其侵袭性和耐药性有关的质粒32. 下列哪一项不是肠产毒型大肠埃希菌的特性A. 常见于婴幼儿和旅游者腹泻B. 致病物质包括不耐热肠毒素C. 致病物质包括耐热肠毒素D. 可以是轻度腹泻，也可呈严重的霍乱样症状E. 血性结肠炎33. 大肠埃希菌H抗原是A. 耐热蛋白质B. 不耐热蛋白质C. 多糖磷脂D. B+CE. A+B34. DNA酶阳性的菌属是A. 克雷伯菌属B. 肠杆菌属C. 哈夫尼亚菌属D. 沙雷菌属E. 大肠埃希菌35. 大多数肠道杆菌是肠道的A. 强致病菌B. 正常菌群C. 弱致病菌D. A+BE. B+C36. 关于感染伤寒沙门菌后人体免疫情况的描述错误的是A. 病愈后，有牢固的免疫力B. 主要是细胞免疫C. 血液中特异性抗体对胞内菌作用很大D. 胃肠炎的恢复与局部生成的分泌型IgA有关E. 可形成健康携带者37. 葡萄球菌A蛋白是一种细菌表面蛋白，其英文简称是A. HRPB. SPAC. SAPD. SSPE. ASP38. 我国流行的脑膜炎奈瑟菌菌株主要是A. Y群B. W-135群C. C群D. B群E. A群39. 可用荚膜肿胀试验分型的细菌是A. 肺炎链球菌B. 金黄色葡萄球菌C. 甲型溶血性链球菌D. 乙型溶血性链球菌E. 丙型溶血性链球菌40. 关于耐甲氧西林葡萄球菌，叙述不正确的是A. 已成为目前葡萄球菌医院感染的主要问题B. 耐药菌携带的耐药基因是mecAC. 在琼脂筛选试验中只要有1个菌落生长，就判为耐药D. 体外药敏试验表现为敏感的药物，临床疗效也一定好E. 在药敏培养基中加入2％～4％氯化钠可提高耐药菌的检出率41. 链球菌分类的根据是A. 在血液琼脂培养基中溶血的情况B. 产生色素的颜色C. 细菌的致病作用D. 鞭毛抗原的特异性E. 对营养的要求42. 下列关于金黄色葡萄球菌的描述正确的是A. 革兰染色阴性B. 能产生凝固酶C. 不发酵甘露醇D. 培养需要特殊培养基E. 血液为主要带菌部位43. 一位中年男性自述排尿困难、尿急、尿痛、尿频，有婚外性行为。

爾卜畜牧唾菌体对肠杆菌科细菌的治疗作用郝贺12，王海英3郭炳博U 译，石玉祥U 校(1.河北工程大学，河北邯郸〇56000;2.河北省禽病技术创新中心，河北部郸 056000; 3.河北中贝佳美生物科技有限公司，河北邯郸056000)肠杆菌科是一类革兰氏 阴性菌。

该类所有细菌都与腹 膜炎和其他腹腔内感染有关。

此外，大肠杆菌常引起泌尿器 官感染；肺炎克雷伯菌被认为 也是肺炎的重要病因；肠沙门 氏菌可引起胃肠炎；志贺氏菌株可引起志贺氏菌病，通常以 传染流行形式出现，且有相当 高的发病率和死亡率。

但耐药 性的存在是处理肠杆菌科感 染的一个严重问题，并有可能 诱发耐药物种产生。

目前迫切 需要寻找控制肠杆菌科感染 的替代方法，而噬菌体治疗是 有效的方法之一。

噬菌体治疗有着悠久的 历史，起源于20世纪初。

但自 从青霉素和其他抗生素被发 现以来，噬菌体治疗研究几乎停止。

然而，由于抗生素的滥 用，越来越多的致病菌对药物 产生了耐药性，对人类健康造 成了极大的威胁，抗生素不良 反应刺激了研究人员对噬菌 体治疗的研究，并取得了很大 的进展。

噬菌体疗法是利用噬 菌体来分裂致病细菌的治疗 方法。

噬菌体吸附到细菌后， 开始溶菌过程。

根据是否需要 溶血素，宿主细胞裂解机制可 分为两种基本模式。

一种模式 依赖于噬菌体K 和T 4等带有 双链DNA 的噬菌体产生的溶 菌酶来分裂细菌；另一种模式 不需要溶菌酶。

1大肠杆菌的噬菌体疗法据世界卫生组织估计，每年约有500万儿童死于急性 腹泻。

发展中国家1/3的儿童 腹泻病例是由大肠杆菌引起 的，大肠杆菌是所有细菌中致 病谱最广的细菌之一，给家禽 造成的死亡率也很高。

用噬菌体来治疗大肠杆菌 感染。

Smith 等人用噬菌体混 合物治疗犊牛、仔猪和羔羊腹 泻，取得有效成果。

Huff 等人 证实雏鸡感染大肠杆菌后，在 饮用水中添加109PFU /毫升噬 菌体悬浊液，死亡率显著下 降。

奥利维拉等人的研究证 实，噬菌体以lx l 09PFU /毫升 的剂量口服和喷雾，鸡的死亡 率平均降低25%，发病率平均 降低41.7%。

科技视野2020.18 畜牧业环境5摘　要：本实验以实验室保存的一株裂解性沙门氏菌（命名为SM1）作为宿主菌，采用双层平板法从鸡粪便及垫料中分离纯化出一株烈性沙门氏菌噬菌体，命名为SP2，测定其生理特性，包括最佳感染复数、pH稳定性、热稳定性和最适保存条件等。

结果显示该噬菌体的最佳感染复数（MOI）为1，效价为1012PFU/mL，最适生长温度和pH分别为30～40℃和5～9。

该实验结果为家禽业沙门氏菌的进一步噬菌体防治研究提供了材料。

关键词：沙门氏菌；噬菌体；生物学特性沙门氏菌属于肠杆菌科细菌，为革兰氏阴性菌，作为一种人畜共患病原菌[1]，可以导致食源性疾病的爆发，给养殖业带来巨大的损失，并严重危害公共卫生[2]。

近年来，随着沙门氏菌耐药性的逐步增加，使得沙门氏菌的防控变得更加困难[3]。

因此，开发新的防控沙门氏菌的办法迫在眉睫。

噬菌体被认为是治疗细菌感染和环境消毒的一种有效手段[4]，目前在人类的疾病治疗、食品安全及水产养殖方面都具有广泛的应用[5]。

噬菌体作为细菌的天敌，广泛存在于环境中，且数量巨大，能够专一高效地裂解宿主细菌，且副作用较小，应用噬菌体制剂是治疗细菌病的一种有效途径[6]。

按照繁殖过程的不同，噬菌体可分为烈性噬菌体和温和性噬菌体，其中烈性噬菌体可专一裂解细菌，不会对正常菌群产生影响，因此可利用烈性噬菌体抑制沙门氏菌。

本次实验利用沙门氏菌作为宿主菌，样品经宿主菌富集通过双层平板法从鸡新鲜粪便及垫料中分离到相应的噬菌体，并对其进行鉴定与初步研究。

1　材料1.1　菌株及噬菌体来源宿主菌为实验室分离鉴定并保存的沙门氏菌SM1，分离噬菌体的样品采集自长清区某养鸡场。

1.2　培养基配制LB液体培养基：胰蛋白胨10g，酵母浸粉5g，NaCl 10g，加蒸馏水至1 000mL，经121°C高压蒸汽灭菌20min备用。

LB固体培养基：胰蛋白胨10g，酵母浸粉5g，NaCl 5 g，琼脂15g，加蒸馏水至1 000m L，经121℃高压灭菌20min备用。

肠杆菌科细菌生化鉴定编码册1. Indole test（易感染性试验）：将细菌移植至特定培养基上，加入色氨酸，观察是否产生可溶于培养基中的indole，阳性结果显示为颜色变化或沉淀的形式。

编码为I。

2. Methyl Red test（甲基红试验）：将细菌移植至特定培养基上，加入甲基红指示剂，观察是否产生强酸性代谢产物，阳性结果显示为颜色变化。

编码为M。

3. Voges-Proskauer test（V-P试验）：将细菌移植至特定培养基上，加入V-P 试剂，观察是否产生丙酮酸和醛类代谢产物，阳性结果为红色沉淀。

编码为V。

4. Citrate utilization test（柠檬酸利用试验）：将细菌移植至特定培养基上，观察是否能够利用柠檬酸作为主要碳源，阳性结果为蓝色或绿色。

编码为C。

5. Urease test（尿素酶试验）：将细菌移植至含有尿素的培养基上，检测细菌是否产生尿素酶，阳性结果为颜色的变化或气泡的产生。

编码为U。

6. Catalase test（过氧化氢酶试验）：将细菌移植至含有过氧化氢的培养基上，检测细菌是否产生过氧化氢酶，阳性结果为气泡的产生。

编码为T。

7. Oxidase test（氧化酶试验）：将细菌移植至含有氧化酶试剂的培养基上，检测细菌是否产生氧化酶，阳性结果为颜色的变化。

编码为O。

8. Lactose fermentation（乳糖发酵）：将细菌移植至含乳糖的培养基上，检测细菌是否能够产生酸类代谢产物，阳性结果为pH下降。

编码为L。

9. Glucose fermentation（葡萄糖发酵）：将细菌移植至含葡萄糖的培养基上，检测细菌是否能够产生酸类代谢产物，阳性结果为pH下降。

编码为G。

10. Mannitol fermentation（甘露醇发酵）：将细菌移植至含甘露醇的培养基上，检测细菌是否能够产生酸类代谢产物，阳性结果为pH下降。

编码为M。

肠杆菌科生化鉴定实验
肠杆菌科是一类常见的革兰氏阴性细菌，可以通过一系列
生化鉴定实验来进行鉴定。

以下是一些常用的肠杆菌科生
化鉴定实验：
1. 硫代硫酸亚铁（TSI）琼脂糖培养基实验：在TSI琼脂
糖培养基上培养菌株，观察菌落的颜色和气体产生情况。

肠杆菌科细菌在该培养基上产生酸和气体，导致培养基中
的pH下降，产生黄色酸性反应。

2. 尿素水解试验：将菌株接种到尿素水解培养基上，观察
培养基的颜色变化。

肠杆菌科细菌中的一些种类能够产生
尿素酶，将尿素水解为氨和二氧化碳，导致培养基变为粉
红色。

3. 大肠杆菌甲醛试验：将菌株接种到含有甲醛的培养基上，观察培养基的颜色变化。

肠杆菌科细菌中的大肠杆菌能够
利用甲醛作为唯一的碳源，产生酸和气体，导致培养基变
为黄色。

4. 气体产生试验：将菌株接种到气体产生管中，观察管内
气体的产生情况。

肠杆菌科细菌中的一些种类能够产生气体，如氢气和二氧化碳。

5. 青霉素酶试验：将菌株接种到含有青霉素的培养基上，
观察菌落的形成情况。

肠杆菌科细菌中的一些种类能够产
生青霉素酶，使得培养基中的青霉素失活，导致菌落形成。

需要注意的是，肠杆菌科细菌的鉴定通常需要结合多个实验结果进行综合判断，单一实验结果可能不足以确定菌株的分类。

此外，不同的肠杆菌科细菌种类可能在生化反应上有差异，因此具体的实验步骤和判断标准可能会有所不同。

鸡肠道大肠埃希菌的分离鉴定及对噬菌体的敏感性测定邹玲;刘晓飞;任慧英【摘要】This study aimed to identify the lysis ability of phages for chicken pathogenic Escherichia coli to the normal E.coli in intestinal flora of chickens.E.coli in collected chicken cloacal swab samples were iso-lated and cultured on SS medium.Morphological observation and biochemical identification were done for 28 bacterial isolates.Single plaque and double layer plate method were used to detect the sensitivity of E.coli isolates to eight phages.The results showed that 28 bacterial isolates were Escherichia coli ,and only 1 isolate could be lyzed by 4 phages,the others were not sensitive.The results indicated that bacteri-ophage lyzing chicken pathogenic Escherichia coli could not lyze chicken normal intestinal E.coli.%研究确定鸡致病性大肠埃希菌的噬菌体能否裂解鸡肠道正常菌群中的大肠埃希菌，采集鸡肛拭子样本，通过 SS 培养基进行大肠埃希菌的分离培养，并对分离到的28株菌进行形态观察及生化鉴定。

一种对mcr-1阳性大肠杆菌具有裂解作用的噬菌体生物学特性钟希娜;何涛;葛展霞;王冉【摘要】本研究以携带多黏菌素耐药基因mcr-1的大肠杆菌SQ-P-E32为宿主菌,分析其对应的裂解性噬菌体的生物学特性.利用双层平板法,从江苏宿迁某猪场污水中分离对该菌具有裂解性的噬菌体,通过透射电镜和基因组酶切分析对噬菌体进行鉴定并命名为vB-EcoP-32,同时测定了该噬菌体的最佳感染复数、一步生长曲线、酸碱和温度耐受性、杀菌效力和裂解谱.结果表明,该噬菌体为短尾噬菌体科,其噬菌斑呈透明的圆形,外周无晕环;该噬菌体的最佳感染复数为100;潜伏期约为5 min,爆发期为55 min,裂解量为32;可耐受温度范围为30～60 ℃;当pH值为5～10时其效价稳定;当MOI=100.00时,其对大肠杆菌SQ-P-E32的裂解效果最好;vB-EcoP-32裂解谱较广,对猪源大肠杆菌(包括mcr-1阳性菌株)具有较好的杀灭作用.表明,噬菌体vB-EcoP-32在控制mcr-1阳性大肠杆菌感染方面具有较好的应用前景.%In this study a lytic bacteriophage which could infect Escherichia coli carrying the colistin resistance gene mcr-1 was analyzed for its biological characteristics.The bacteriophage was isolated on host strain E.coli SQ-P-E32 from the sewage of a swine farm in Jiangsu province. By observation of transmission electron microscope and genome digestion analy-sis,the phage was identified and designated vB-EcoP-32. Meanwhile, the optimal multiplicity of infection (MOI), one-step growth curve,temperature and pH tolerance,lytic effect in vitro of the isolated phage were investigated. Analyzation of the biological characteristics of phage vB-EcoP-32 revealed that it belonged to Podoviridae family,which could form trans-parentplaques on host strain. The optimal multiplicity of infection (MOI) of the phage was 100. Its latent period was five min while the burst period and burst size were 55 min and 32 PFU/cell,respectively. Phage vB-EcoP-32 was able to survive in a temperature range from 30 ℃ to 60 ℃ and was stable in a pH range from five to ten. Besides, it showed the best efficiency for reducing bacterial growth of E. coli SQ-P-E32 when at the MOI of 100.00. Moreover, the phage showed broad host ranges and had positive effect on E. coli isolates of swine origin(including the mcr-1-positive strains). These results indicated that phage vB-EcoP-32 could be considered as a potential antimicrobial candidate against mcr-1-positive E. coli infection.【期刊名称】《江苏农业学报》【年(卷),期】2018(034)002【总页数】7页(P452-458)【关键词】mcr-1阳性;大肠杆菌;噬菌体;生物学特性【作者】钟希娜;何涛;葛展霞;王冉【作者单位】江苏省农业科学院农业部食品质量安全监控重点开放实验室/江苏省禽产品安全性研究重点实验室,江苏南京210014;南京农业大学动物科技学院,江苏南京210095;江苏省农业科学院农业部食品质量安全监控重点开放实验室/江苏省禽产品安全性研究重点实验室,江苏南京210014;江苏省农业科学院农业部食品质量安全监控重点开放实验室/江苏省禽产品安全性研究重点实验室,江苏南京210014;江苏省农业科学院农业部食品质量安全监控重点开放实验室/江苏省禽产品安全性研究重点实验室,江苏南京210014【正文语种】中文【中图分类】S852.61+2大肠埃希氏菌(Escherichia coli, E. coli)俗称大肠杆菌，属于革兰氏阴性细菌肠杆菌科埃希氏菌属。

细菌感染已造成严重的社会经济损失。

由细菌引起的人脓毒血症是高收入国家的第十大死因[1]。

此外，医院是病原菌发生的自然场所，欧洲每年有410万患者受到与医疗卫生有关的感染。

在美国，医院感染每年导致10万人死亡。

食品工业也极易受到细菌污染。

2015年，180万人死于食用受感染的食物或水。

所有这些都需要迅速和可靠地检测和鉴定细菌。

传统的检测方法是先分离培养目标菌，然后进行生化鉴定。

该方法虽然便宜，但大多需要72 h 才能得到检测结果。

这在医疗、食品加工等行业由于检测耗时，显示出很大弊端。

随即，出现一些新的检测方法，如PCR 方法、DNA 芯片、酶联免疫吸附试验和质谱分析等[2-4]。

但以上方法都需要专业的设备，操作者具有一定的专业技能，而且费用昂贵。

另外，核酸为基础的各种分析方法在细菌死亡的情况下容易产生假阳性结果。

同时， PCR 方法敏感性很高，不同的菌株或突变体可能无法得到正确的鉴定。

基于免疫学的各类检测方法，在很大程度上又受到抗体的限制。

综上，近年来将生物传感器应用于细菌检测，被认为是一种很有发展前景的方法[5, 6]。

噬菌体是特异性感染细菌的一类病毒，它们对宿主细菌的天然亲和力可用于设计高度特异性的工具。

由于自然界存在大量形状和性质不同的噬菌体，因此可以设计检测几乎所有细菌菌株的生物传感器。

鉴于噬菌体对细菌具有高特异性，因此可以筛选到一些选择性检测目标细菌的噬菌体。

另外，与抗体不同，噬菌体的批量生产简单且廉价，通过感染细菌溶液即可获得大量的子代噬菌体。

这些优势使噬菌体成为生物传感器和其他分析中进行细菌识别的首选物质[7]。

在细菌检测中，基于噬菌体的生物传感器有几种可能的设计。

最直接的是利用野生型噬菌体，因为它们在自然界中无处不在。

也可对噬菌体进行基因工程改造，改造修饰后可更好地应用在一些特殊的细菌检测中[8]。

最初，利用噬菌体分型方法可对细菌种类进行鉴定。

该方法主要通过观察是否形成特性噬菌斑来判定。

中级卫生专业资格微生物检验技术主管技师（中级）模拟题2021年(24)(总分98.XX02,考试时间120分钟)A1/A2题型1. 关于病毒学检验中标本采集、处理与运送的原则是A. 标本必须新鲜，采集后立即送检B. 用于分离和鉴定的标本应在急性期采集C. 在检验容器上要贴好标签D. 用于分离和鉴定的标本应在病程初期采集E. 以上都是2. 使用超净工作台时应注意A. 工作台应放在洁净度较高的室内，且不受外界风力影响B. 净化工作台应单独使用专门开关和保险并设断相保护装置C. 使用前应提前10～20分钟打开紫外等消毒，以净化操作区D. 需定时检测工作台性能，并记录检测结果，根据结果调整过滤器E. 以上均应注意3. 天平在使用前必须A. 调至水平B. 固定C. 调零D. 干燥E. 以上都是4. 不属于肠出血性大肠埃希菌毒力因子的是A. 志贺样毒素B. 溶血素C. LEE毒力岛D. 热稳定毒素E. Vero毒素5. 细菌鞭毛染色常用的方法是A. 镀银法B. 革兰染色法C. 抗酸染色法D. 单染色法E. 碘染色法6. 烧杯的耐受温度A. 小于500℃B. 小于400℃C. 小于350℃D. 小于250℃E. 小于150℃7. 培养支原体常采用的方法是A. 采用普通培养基中加维生素、胆盐、酵母液B. 采用普通培养基中加胆盐、抗生素、马血清C. 采用普通培养基中加血浆、抗生素、胆盐D. 采用普通培养基中加胆固醇、马血清、酵母液、抗生素E. 以上都不对8. 下列说法正确的是A. 肺炎衣原体的天然动物宿主是鼠B. 肺炎衣原体寄生于人类C. 肺炎衣原体可引起性病D. 肺炎衣原体培养容易E. 肺炎衣原体肺炎以儿童常见9. 下列实验可用于乙脑早期诊断的是A. 电镜检查B. 补体结合试验C. 细胞培养分离病毒D. ELISA检测脑脊液中的乙脑特异性IgM抗体E. 中和试验10. 噬菌体用于细菌鉴定的原理正确的是A. 噬菌体广泛存在于自然界B. 噬菌体可以裂解某些细菌C. 噬菌体可以根据细菌某些受体来裂解目的菌D. 噬菌体可以根据不同细菌产生某种溶菌物质E. 噬菌体的某些基因与细菌交换11. 临床上治疗军团病的常用敏感药物为A. 糖肽类B. 青霉素类C. 大环内酯类D. 四环素类E. 喹诺酮类12. 可分离10000kbDNA的电泳是A. 区带电泳B. 脉冲场凝胶电泳C. 聚丙烯酰胺凝胶电泳D. 等电聚焦电泳E. 交叉定量免疫电泳13. 有抗原受体的细胞是A. 红细胞B. 血小板C. 单核-巨噬细胞D. 肥大细胞E. 浆细胞14. 细胞培养过程中，小牛血清的灭活温度一般为A. 4℃B. 37℃C. 45℃D. 56℃E. 60℃15. 不属于肠杆菌科的菌属是A. 变形杆菌属B. 沙雷菌属C. 耶尔森菌属D. 鲍特菌属E. 肠杆菌属16. 国内外临床检测或研究各种真菌的标准培养基为A. BCYE培养基B. 沙堡培养基C. SS培养基D. 虎红培养基E. 改良罗氏培养基17. 钩端螺旋体分离常用的实验动物是A. 家兔B. 羊C. 小白鼠D. 豚鼠E. 大白鼠18. 在鸡胚卵黄囊中生长良好的微生物是A. 钩端螺旋体B. 布鲁菌C. 葡萄球菌D. 沙眼衣原体E. 放线菌19. 普通光学显微镜在用油镜时可放大标本A. 200倍B. 500倍C. 2000倍D. 100倍E. 1000倍20. 有关病毒标本的采集和运送，不正确的方法是A. 发病早期或急性期采集标本B. 发病晚期采集标本C. 标本运送应放在带有冰块的保温箱中D. 标本采集后应立即送实验室检查E. 运输培养基中应含有抗生素21. 生物安全柜主要保护A. 工作人员B. 检测样品C. 实验室仪器D. 实验室空气E. A+B22. 试管凝集法检测军团菌时，凝集结果的判定，“-”现象为A. 上清液完全透明，菌体于管底呈伞状沉淀B. 上清液几乎完全透明，管底有伞状沉淀C. 上清液稍透明，管底有伞状沉淀D. 液体有勉强透明度，管底有稍微沉淀E. 液体均匀浑浊，管底无沉淀23. 将志贺菌从肠道杆菌中初步鉴别出来的生化反应是A. 靛基质试验B. 动力试验C. 尿素分解试验D. 葡萄糖发酵试验E. 半固体双糖含铁培养基接种试验24. HIV初次感染人体后，最早出现于病人血清中的抗体是A. 抗HIV核心蛋白p24抗体B. 抗包膜蛋白gp120抗体C. 抗p64抗体D. 抗p17抗体E. 抗p31抗体25. 细菌革兰染色结果的判断为A. 革兰阳性为紫色，革兰阴性为蓝色B. 革兰阳性为红色，革兰阴性为蓝色C. 革兰阳性为绿色，革兰阴性为红色D. 革兰阳性为紫色，革兰阴性为无色E. 革兰阳性为紫色，革兰阴性为红色26. 欲从环境中分离粪便污染指示菌，粪大肠菌群可采用A. 高营养培养基B. 鉴别培养基C. 选择培养基D. 增菌培养基E. 以上都可以27. 去除血清中细菌最佳的方法A. 巴氏消毒法B. 煮沸法C. 压力蒸汽灭菌法D. 紫外线消毒法E. 过滤除菌法28. 病毒感染力的滴定常用中和试验，关于中和试验错误的是A. 结果的判定是要比较病毒受免疫血清中和后残余的感染力B. 必须在敏感动物、鸡胚和组织培养内进行C. 需设严格对照实验D. 主要影响因素为病毒、抗血清、孵育的温度和时间、动物和细胞的选择和质量E. 可取高滴度病人早期血清（发病两周内）用于中和试验29. 主要在非洲大陆的人与猴中流行的感染后有出血症状的烈性病毒性传染病的病原是A. 汉坦病毒B. 克里米亚刚果热病毒C. 埃博拉病毒D. 登革病毒E. 黄热病病毒30. 脉冲场凝胶电泳分辨力的极限不取决于A. 两个电场的均一程度B. 用于产生两个电场的电泳脉冲长度的比例C. 电脉冲的绝对强度D. 电脉冲的频率E. 两个电场的相对强度31. 沙眼衣原体直接涂片检查常用的染色方法是A. 革兰染色B. 姬姆萨染色C. 瑞氏染色D. 抗酸染色E. HE染色32. H链有5个功能区的免疫球蛋白是A. IgA+IgMB. IgM+IgEC. IgG+IgAD. IgG+IgEE. IgE+IgA33. 常用于观察活物体的存在及活物体的运动状态的显微镜是A. 普通光学显微镜B. 相差显微镜C. 暗视野显微镜D. 电子显微镜E. 生物显微镜34. 临床细菌学检验中，动物实验的主要用途是A. 用于分离和鉴定细菌，研制疫苗，制备免疫血清等B. 用于分离和鉴定细菌，测定细菌毒力，制备免疫血清等C. 用于分离和鉴定细菌，测定细菌毒力，研制疫苗等D. 用于分离和鉴定细菌，研制药物，制备免疫血清等E. 用于分离和鉴定细菌，测定细菌毒力，生物制药等35. 获得性免疫一般产生时间是A. 5～7dB. 5～10dD. 14～21dE. 21～28d36. 标记双链DNA的3'突出端时，常用T4噬菌体DNA聚合酶，是因为它的A. 3'-5'外切酶活性更高B. 聚合酶活性高C. 3'-5'外切酶和聚合酶活性高D. 5'-3'外切酶活性更高E. 3'-5'外切酶、5'-3'外切酶和聚合酶活性更高37. 根据光学丁道尔现象设计的显微镜是A. 相差显微镜B. 普通光学显微镜C. 暗视野显微镜D. 偏光显微镜E. 电子显微镜38. 暗视野显微镜要求载玻片和盖玻片需清洁无划痕，载玻片厚度为A. 2.5mmB. 2.2mmC. 2.0mmD. 1.8mmE. 1.0mm39. 关于补体结合试验错误的是A. 补体的某些组分对热很不稳定，采血后要尽快分离血清放低温保存B. 为保证补体的稳定性，含补体的血清每次试验前要用冷水溶解C. 补体可反复冻融D. 稀释后的补体仅限当天使用E. 试验中补体量过大会影响试验灵敏度40. 三级生物安全柜设计的生物安全等级为A. 1级生物安全实验室B. 2级生物安全实验室C. 3级生物安全实验室D. 4级生物安全实验室E. 5级生物安全实验室41. 试管凝集法检测军团菌时，抗体的阳性标准为A. ≥1：40B. ≥1：80C. ≥1：160D. ≥1：320E. ≥1：64042. 实验动物一般不选择A. 小白鼠B. 大白鼠C. 豚鼠D. 家兔43. 大多数光学显微镜的分辨距离为A. 0.2μmB. 0.1nmC. 0.1μmD. 0.2nmE. 0.2mm44. 关于健康人的外周血，叙述正确的是A. T与B细胞的比例约为2：1B. 浆细胞占细胞总数10%C. 数目最多的是淋巴细胞D. 可见巨噬细胞E. 可见肥大细胞45. 从环境样品中分离细菌的最好方法是A. 平板画线接种法B. 半固体穿刺接种法C. 肉汤管接种法D. 琼脂斜面培养基接种法E. 以上都是46. 关于病毒学检验中标本采集、处理与运送错误的是A. 诊断与病期不同采集的标本不同B. 要进行预处理才能用于接种C. 采集后立即送到病毒实验室D. 暂时不能检查或分离培养时，应将标本放入冻存液E. 暂时不能检查或分离培养时，应将标本存放在-20℃冰箱47. 汉坦病毒的血凝素抗原所在位置是A. 核蛋白B. 聚合酶蛋白C. G1糖蛋白D. G2糖蛋白E. G1和G2糖蛋白48. 各群志贺菌的侵袭相关基因都位于A. 质粒B. 染色体C. 前噬菌体D. 转座子E. 插入序列49. 聚光镜的位置可以升降，用以调节A. 分辨率B. 放大倍数C. 光线的强弱D. 折射率E. 光线方向50. 核酸电泳后常用的染色剂是B. 考马斯亮蓝C. 二甲苯青D. 溴酚蓝E. 硝酸银51. 人体感染病原体后，尿液标本应于A. 3d后B. 1周后C. 2周后D. 10d后E. 4周后52. 与分枝杆菌致病性有关的是A. 溶血素B. 内毒素C. 侵袭性酶D. 外毒素E. 其他菌体成分53. 冻干菌种待完全干燥后，需将安瓿中空气抽成真空，用真空火花检测器检测时，如为真空，火花颜色是A. 无色B. 蓝色C. 紫色D. 白色E. 绿色54. 流行性腮腺炎最具有流行病学意义的传染源是A. 亚临床型者B. 疾病潜伏期C. 疾病恢复期D. 疾病发作期E. 疾病晚期55. 鉴定多细胞真菌主要应用的检查方法是A. 革兰染色后镜检B. 墨汁负染色后镜检C. 血清学检查D. 生化反应检查E. 培养检查菌丝和孢子56. 检测细菌浓度用可见光分光光度计，测细菌波长光为A. 600nmB. 550nmC. 500nmD. 450nmE. 400nm57. 三级生物安全柜柜体完全气密，试验品通过双门的传递箱进出安全柜以确保不受污染，俗称手套箱，适用于A. 高风险的生物试验B. 低风险的生物试验C. 无风险的生物试验D. 高风险的化学试验E. 高风险的物理试验58. 下列主要用于核酸分离的方法是A. 盐析法B. 离子交换层析C. 琼脂免疫电泳D. 脉冲电泳E. 等电聚焦电泳59. 用液态培养基培养微生物时一般需使用A. 水浴振荡器B. 恒温水浴箱C. 二氧化碳培养箱D. 生物安全柜E. 微量振荡器60. 若出现心肌炎症状，应首先怀疑的病毒是A. 麻疹病毒B. 腮腺炎病毒C. 埃可病毒D. 柯萨奇病毒E. 冠状病毒61. 观察细菌的运动性，可用A. 半固体培养基表面划线培养B. 半固体培养基中穿刺培养C. 固体培养基涂布培养D. 固体培养基表面划线培养E. 液体培养基穿刺培养62. 细菌明胶液化试验原理是A. 某些细菌产生胞外酶，能使明胶分解为蛋白质B. 某些细菌产生胞内酶，能使明胶分解为蛋白质C. 某些细菌产生胞外酶，能使明胶分解为氨基酸D. 某些细菌产生胞内酶，能使明胶分解为氨基酸E. 某些细菌产生胞外酶，能使明胶分解为明胶酸63. 下列试剂可加入保存标本冻存液中的是A. EDTA和二甲亚砜B. Versen溶液和甘油C. 二甲亚砜和甘油D. SDS和甘油E. 胰酶和二甲亚砜64. 欲对血清培养基进行灭菌，宜选用A. 间歇灭菌法B. 巴氏消毒法C. 压力蒸汽灭菌法D. 流通蒸汽灭菌法E. 紫外线照射法65. 为缺陷病毒，必需在其他肝炎病毒的辅助下才能复制的肝炎病毒是A. 甲型肝炎病毒B. 乙型肝炎病毒C. 丙型肝炎病毒D. 丁型肝炎病毒E. 戊型肝炎病毒66. 有关蛋白质的聚丙烯酰胺凝胶电泳的说法，正确的是A. 5%聚丙烯酰胺所灌制凝胶的线性分离范围是36～94kDB. 变性的多肽与SDS结合而带正电荷C. SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳大多在不连续缓冲系统中进行D. 不连续缓冲系统中所有组分都含有0.2%的SDSE. 有效分离范围只取决于用于灌胶的聚丙烯酰胺的浓度67. 化学消毒剂的主要种类有A. 酚类，醇类，重金属盐类，氧化剂，表面活性剂，烷化剂B. 酚类，碱类，重金属盐类，氧化剂，表面活性剂，氢化剂C. 酸类，醇类，重金属盐类，氧化剂，表面活性剂，氢化剂D. 碱类，醇类，重金属盐类，氧化剂，表面活化剂，脂溶剂E. 酚类，酸类，重金属盐类，氧化剂，表面活性剂，脂溶剂68. 巢式PCR与普通PCR不同的是A. 普通PCR比巢式PCR特异性高B. 酶不同C. 底物不同D. 模板不同E. 前者用2对引物，后者用1对引物69. 关于空肠弯曲菌的叙述，不正确的是A. 革兰阴性菌B. 无芽胞C. 无鞭毛D. 为微需氧菌E. 菌体弯曲呈弧形、螺旋形等70. 构成细菌毒力的物质是A. 侵袭力和毒素B. 内毒素和外毒素C. 黏附素和侵袭力D. 酶和毒素E. 黏附力和毒力71. 大肠埃希菌在SS琼脂上生长呈A. 浅红色B. 紫红黑色C. 微黄色D. 无色E. 黑色72. 抗原抗体反应的主要特点是A. 阶段性B. 可逆性C. 特异性D. 不可逆性E. 非特异性73. 牛肉膏汤的特点是A. 可培养营养要求较高的细菌B. 可做有糖基的培养基C. 培养要求苛刻的细菌D. 可作无糖基的培养基E. 可培养厌氧细菌74. 关于PCR技术，下列叙述错误的是A. 是一种有细胞的分子克隆技术B. 是一种DNA扩增技术C. 具有快速、灵敏和特异性强等特点D. 可用于病毒的DNA检测E. 也可用于细菌等微生物DNA片段的检测75. 检测蛋白用可见光分光光度计，波长用A. 400nmB. 380nmC. 300nmD. 280nmE. 250nm76. 目前应用最为广泛的生物安全柜柜型为A. 一级生物安全柜B. 二级生物安全柜C. 三级生物安全柜D. 四级生物安全柜E. 以上都是77. PAGE通常采用的装置是A. 柱状装置B. 垂直装置C. 水平装置D. 平板装置E. 盘状装置78. 固体培养基中琼脂的浓度通常为A. 1.5%B. 3%C. 3.5%D. 5%E. 10%79. 结核分枝杆菌初次培养一般需要A. 10～30dB. 5～7dD. 3dE. 2d80. 食品中的副溶血性弧菌分离所用的培养基是A. 碱性琼脂平板B. SS琼脂平板C. 氯化钠琼脂平板和嗜盐菌型琼脂平板D. 麦康凯琼脂平板E. 伊红亚甲蓝琼脂平板81. ONPG试验主要用于A. 迟缓发酵木糖菌株的快速鉴定B. 迟缓发酵蔗糖菌株的快速鉴定C. 迟缓发酵乳糖菌株的快速鉴定D. 快速发酵木糖菌株的鉴定E. 快速发酵乳糖菌株的鉴定82. 不能用于人工增殖病毒的材料是A. 鸡胚B. 传代细胞C. 原代细胞D. 活体器官E. 实验动物83. 关于分离病毒的标本采集错误的做法是A. 用拭子采集的标本应立即浸泡于肉汤中B. 对于流感病毒等不稳定的病毒要尽快接种到动物或组织中C. 用于分离乙脑病毒的血液标本一般不加抗凝剂D. 用于分离麻疹病毒的血液标本加抗凝剂E. 一般使用柠檬酸钠之类的抗凝剂84. 人体中没有正常菌群存在的部位是A. 生殖道B. 咽喉C. 血液D. 鼻腔E. 肠道85. 用于分离纯化单链DNA的是A. 琼脂糖凝胶B. 交联葡聚糖凝胶C. 聚丙烯酰胺凝胶D. 聚苯乙烯凝胶E. 变性聚丙烯酰胺凝胶86. 有"第二艾滋病"之称的是A. 甲肝B. 淋病C. 流感D. 肺结核87. 婴幼儿腹泻最常见的病原体是A. 人类轮状病毒B. 肠致病性大肠埃希菌C. 柯萨奇病毒D. 沙门菌E. 志贺菌88. 豚鼠角膜试验是检测A. 肠致病性大肠埃希菌B. 肠产毒性大肠埃希菌C. 肠出血性大肠埃希菌D. 肠侵袭性大肠埃希菌E. 肠集聚性大肠埃希菌89. 用于治疗脑膜炎奈瑟菌感染，未产生耐药性的抗生素是A. 利福平B. 庆大霉素C. 青霉素D. 链霉素E. 红霉素90. 氯己定消毒剂的作用机制是A. 破坏菌体细胞壁B. 使蛋白变性C. 干扰细菌代谢D. 破坏细胞膜和抑制脱氢酶活性E. 破坏细菌酶系统91. 革兰染色中媒染剂（卢戈碘液）的作用是A. 增加摄取染料作用，不易脱色B. 促进脱色C. 破坏细菌细胞壁D. 固定细菌E. 杀死细菌92. 从外环境中检测出霍乱弧菌，为判断其致病力，需要检测A. 霍乱弧菌鞭毛基因B. 霍乱弧菌毒力基因C. 霍乱弧菌菌毛基因D. 霍乱弧菌菌体抗原E. 霍乱弧菌鞭毛抗原93. 检测核酸浓度用可见光分光光度计，波长用A. 400nmB. 380nmC. 300nmD. 280nmE. 260nm94. 生物安全柜柜内操作主要注意事项A. 缓慢移动原则B. 物品平行摆放原则C. 避免震动原则D. 无明火使用原则E. 以上都是95. Vero细胞是A. 人喉上皮癌细胞B. 人宫颈癌细胞C. 非洲绿猴肾细胞D. 人二倍体传代细胞E. 人胚肾细胞96. 食品卫生微生物检验的采样标签应包括A. 品名、来源、数量、采样方式、采样地点、采样人B. 品名、来源、数量、采样地点、采样人、采样时间C. 品名、来源、数量、采样人、采样地点D. 品名、数量、采样地点、采样方式、采样时间E. 品名、来源、数量、采样时间、采样地点97. 复制轮状病毒和连续传代时，为促进病毒的感染性，对其处理使用的物质是A. 胰蛋白酶B. 透明质酸酶C. 碱性磷酸酶D. 胃蛋白酶E. DNA酶98. 关于超低温冰箱的叙述，不正确的是A. 箱内温度可达-80℃B. 电源线不可使用串列结线C. 机器空气过滤网至少1年清洗1次D. 每次取放物品前应戴干手套E. 勿将盛水的容器放入箱内99. 氧化酶试验主要用于A. 肠球菌属与假单胞菌的鉴别B. 肠杆菌科与厌氧菌的鉴别C. 肠球菌属与芽孢杆菌的鉴别D. 肠杆菌科与假单胞菌的鉴别E. 肠杆菌科与芽孢杆菌的鉴别100. HA V是甲型肝炎的病原体，它可以感染的宿主是A. 人类和猪马牛羊B. 人类和袋鼠C. 人类和非人类灵长类动物D. 人类和家禽E. 以上都可以101. 在病毒的提纯过程中，将大部分细胞碎块和其他杂质去除的最有效最常用的方法是A. 4℃静置1天B. 过滤C. 低速离心D. 高速离心E. 密度梯度离心102. 小肠结肠炎耶尔森菌的特征不包括A. 25℃培养时有动力B. 37℃培养时无动力C. 具有嗜冷性D. 硫化氢阳性E. 小肠结肠炎耶尔森菌仅对人致病103. 组成人体蛋白质的氨基酸有A. 200余种B. 40余种C. 30种D. 20种E. 10种104. 关于分辨率的描述，不正确的是A. 人裸眼的分辨率为0.2mmB. 光学显微镜的分辨率可达0.2μmC. 电子显微镜的分辨率可达0.02nmD. 电子显微镜的分辨率可达0.2nmE. 扫描隧道显微镜的分辨率可达到原子水亚105. 对表皮葡萄球菌的描述，正确的是A. 产生凝固酶B. 菌落大多呈柠檬色C. 属条件致病菌D. 革兰阴性球菌E. 培养所用培养基需加入血液、血清等106. 耐高盐、可在含8%NaCl胨水中生长的弧菌是A. 溶藻弧菌B. 霍乱弧菌C. 水弧菌D. 创伤弧菌E. 副溶血性弧菌107. 革兰染色中复染剂的作用是A. 杀死细菌B. 增加染料摄取C. 调节pHD. 使细菌再着色E. 固定细菌108. 牛奶、某些酒类等消毒常用的方法是A. 70.7℃，10～30sB. 71.7℃，15～30sC. 72.7℃，15～20sD. 73.7℃，20～30sE. 74.7℃，5～15s109. 血清制品常用防腐剂是硫柳汞，其常用浓度为A. 0.02%B. 0.01%C. 0.2%D. 0.1%E. 1%110. 下列不需要用到革兰染色的选项是A. 细菌分类B. 选择药物用于治疗C. 鉴定细菌的依据D. 制作菌苗用于预防E. 决定细菌的染色性111. 病毒病的常规实验室诊断是指A. 病毒的分离和鉴定B. 病毒的形态学检查C. 病毒的免疫学鉴定D. 病毒的分子生物学鉴定E. 以上都是112. 检测颜色用可见光分光光度计，波长用A. 450nmB. 380nmC. 350nmD. 300nmE. 280nm113. 离心机按照转速和离心力场的不同可分为普通转速、高速、超速、超高速离心机，离心机如果天平没有完全平衡，可以促成A. 转轴变形B. 离心不全C. 试管破裂D. 自动停机E. 以上都是114. 有关超速离心机的说法，正确的是A. 转速在5000～10000转B. 不能在低温下操作C. 有电控设备D. 不能用来分离核酸E. 不能用来分离蛋白115. 适合于登革病毒的分离和培养的细胞是A. C6/36细胞B. Hela细胞C. 人胚肾细胞D. Vero细胞E. Hep-2细胞116. 关于肺炎克雷伯菌的特性，正确的是A. 革兰阳性杆菌B. 有鞭毛C. 营养要求高D. 在普通培养基上常形成粗糙型菌落E. 有荚膜117. 普通光学显微镜最高可分辨A. 0.10μmB. 0.15μmC. 0.20μmD. 0.25μmE. 0.30μm118. 胆汁溶菌试验是鉴别A. 肺炎链球菌与甲型链球菌的方法B. 表皮葡萄球菌与金黄色葡萄球菌的方法C. 大肠杆菌与沙门菌的方法D. 蜡样芽孢杆菌与枯草芽孢杆菌的方法E. 乙型链球菌与肠链球菌的方法119. 病毒的形态学检查方法不包括A. EMB. ELISAC. 光学显微镜D. 超过滤法E. 超速离心法120. 实验室内仪器应符合标准要求，保证准确可靠，计量器具使用前计量器具需A. 计量部门检定合格B. 生产厂家检定合格C. 使用部门检定合格D. 经营公司检定合格E. 以上都可以121. 阿氏液中起主要作用的成分是A. 氯化钠B. 葡萄糖C. 枸橼酸钠D. 枸橼酸E. 氯化钙122. DNA电泳迁移率的对数与凝胶浓度A. 成对数关系B. 成共线性关系C. 成复合曲线关系D. 成线性关系E. 成指数关系123. 暗视野显微镜比普通光学显微镜的分辨率A. 稍大B. 小C. 相同D. 稍小E. 很大124. Ig分类决定于A. FabB. 绞链区C. VLD. Fc区特点E. VH125. 传染病患者排出病原体的整个时期称为A. 潜伏期B. 发病期C. 症状明显期D. 传染期E. 恢复期126. 利用琼脂糖凝胶电泳分离DNA片段时，描述正确的是A. 凝胶浓度的高低不影响分辨率B. 凝胶浓度越高、孔径越小，分辨率越强C. 凝胶浓度越低、孔径越小，分辨率越强D. 电压越高，电泳速度越慢E. DNA分子由正极泳向负极127. 苯扎溴铵消毒剂的作用机制是A. 破坏细菌的酶B. 改变细菌的通透性C. 干扰细菌代谢D. 使菌体蛋白变性E. 造成菌体内物质分解破坏128. 痰标本的预处理一般采用的物质是A. 6%NaOHB. 10%HClC. 0.9%NaClD. 14g/L柠檬酸钠E. 40g/LNaOH129. 观察细胞培养的情况可采用A. 暗视野显微镜B. 相差显微镜C. 电子显微镜D. 倒置显微镜E. 普通光学显微镜130. 组织细胞对病毒的易感性取决于细胞支持病毒复制的能力以及A. 病毒是否产生毒素B. 细胞是否处于感受态C. 组织中易感细胞数目D. 病毒的特殊结构E. 病毒的核酸组成131. PAGE原理是凝胶介质形成立体多孔网状结构，分离条带上边是A. 质粒B. 噬菌体C. 大分子D. DNAE. 小分子132. 有电源的天平，接通电源后开启显示器开始操作通常需预热A. 1小时后B. 半小时后C. 2小时后D. 3小时后E. 以上都是133. 关于电泳的叙述，不正确的是A. 必须有冷却装置B. 一般采用稳定直流电压和电流C. 可用于核酸的分离D. 可用于蛋白的分离E. 核酸分子由负极向正极移动134. 用于测定HIV感染的方法中最简便的是A. 测定HIV抗体B. 分离培养HIVC. 测定HIV抗原D. 测定HIV-RNAE. HIV基因测序135. 使用显微镜在玻片中搜索细菌，步骤不正确的是A. 先用高倍镜找到需要观察的部位B. 移开物镜，在观察部位滴1滴香柏油C. 转到油镜头D. 一面观察，一面缓缓将镜头下移，直到视野清晰E. 将玻片相隔一定距离平行移动136. 关于荚膜染色法下列描述正确的是A. 荚膜与染料亲和力强很容易着色B. 荚膜与染料亲和力弱，不易着色C. 荚膜含水量高低与染色有关D. 荚膜的厚度与染色有关E. 荚膜容易着色可用革兰染色137. 检测霍乱弧菌流行株用的探针是A. 不耐热肠毒素(LT)基因B. 霍乱肠毒素(CT)基因C. 耐热肠毒素(CT)基因D. 霍乱肠毒素(LT)基因E. 以上都对138. 病毒的分子生物学鉴定包括病毒核酸和蛋白质测定，蛋白质测定可使用A. 免疫测定技术、电泳技术和质谱技术等B. 免疫测定技术、探针技术和质谱技术等C. 免疫测定技术、电泳技术和聚合酶链反应技术等D. 免疫测定技术、电泳技术和杂交技术等E. 免疫测定技术、电泳技术和探针技术等139. 超净工作台采用层流技术净化空气，是微生物实验室通常使用的无菌操作台，洁净度可达A. 百级B. 千级C. 万级D. 十万级E. 百万级140. 能形成带菌免疫的细菌是A. 金黄色葡萄球菌B. 结核分枝杆菌C. 伤寒沙门菌D. 铜绿假单胞菌E. 痢疾志贺菌141. 立克次体由卵黄囊接种感染鸡胚以后，多选择性地繁殖部位是A. 卵黄囊中B. 卵黄囊膜组织中C. 尿囊膜D. 胚液中E. 羊毛膜142. 常用于治疗小肠结肠炎耶尔森菌感染的药物是A. 链霉素和庆大霉素B. 青霉素C. 红霉素D. 万古霉素E. 四环素143. 免疫活性细胞是A. 单核细胞B. 中性粒细胞C. NK细胞D. 嗜酸性粒细胞E. T细胞+B细胞144. 耐盐菌是指A. 只能在低盐培养基上生长的细菌B. 只能在高盐培养基上生长的细菌C. 在高盐、无盐培养基上均能生长的细菌D. 在高盐、低盐培养基上均不能生长的细菌E. 在低盐、无盐培养基上均不能生长的细菌145. PCR反应总是阴性结果（无产物）时，应采取的改进措施不包括A. 纯化模板B. 重新设计引物。

两株乳杆菌噬菌体的分离鉴定及抗噬菌体菌株的筛
选开题报告
题目：两株乳杆菌噬菌体的分离鉴定及抗噬菌体菌株的筛选
研究背景：
乳杆菌属于一类广泛存在于自然界中的细菌，在乳制品行业中具有非常重要的地位。

乳制品作为一类易腐败的食品，其品质与安全问题一直备受人们关注。

乳杆菌噬菌体是一类可以针对乳杆菌进行特异性攻击的特殊病毒，其在乳制品工业中具有很大的应用前景。

通过对乳杆菌噬菌体的筛选和鉴定，可以发掘具有高效抑菌能力的噬菌体菌株，进一步提升乳制品的品质和安全。

研究内容：
本研究将分别从两个来源处，分离得到两株乳杆菌噬菌体，并对噬菌体进行鉴定，通过电子显微镜观察噬菌体的形态结构特征，通过PCR 等技术进行基因测序，分析噬菌体的基因组序列信息，确定其属于哪一类噬菌体。

同时，基于乳杆菌菌株的不同敏感性，本研究还将对不同的血清型和基因型乳杆菌进行感受性测试，筛选出具有高效抑菌能力的噬菌体菌株。

研究意义：
本研究将有助于深入了解乳杆菌噬菌体的形态结构和基因组序列特征，发现新的乳杆菌噬菌体菌株，为乳制品工业的发展提供新的技术支持。

同时，本研究还将为乳制品的质量控制提供新的方向，筛选出具有高效抑菌能力的噬菌体菌株，可有效地控制乳制品中的菌落数量，提高产品的安全性和品质。

细菌的噬菌体分型实验二细菌的噬菌体分型第一部分肠杆菌科噬菌体的分离、纯化与增殖噬菌体广泛存在于自然界。

凡是有细菌存在的地方，一般都能找到相应的噬菌体。

例如，土壤、肥料、腐烂有机物、粪便和阴沟污水等常是各种细菌的栖息地，从中能分离到相应的噬菌体。

从自然界分离某一噬菌体需要经过以下步骤:培养宿主菌(或叫做敏感菌);采集含噬菌体的样品;噬菌体富集培养;制备噬菌体裂解液;验证噬菌体的存在;噬菌体的纯化;噬菌体的增殖;噬菌体的效价测定和保存。

下面以大肠杆菌噬菌体为例详细介绍噬菌体的分离和纯化方法。

1( 噬菌体的分离(1)制备菌悬液:取大肠杆菌斜面一支，加4ml无菌水洗下菌苔，制成菌悬液。

(2)增殖培养:于10ml三倍浓缩的肉膏蛋白胨液体培养基的三角烧瓶(1支5ml吸管)中，加入污水样品20ml(1支5ml吸管)与大肠杆菌悬液0.2ml(1支1ml吸管)，37?培养12h,24h以增殖噬菌体。

(3)制备裂解液:将以上增殖的混合培养液2500r/min离心15 min(1支5ml吸管)。

将上清液倒入无菌平皿，针管抽取液体，在针栓式滤器上过滤除菌。

所得滤液倒入灭菌瓶内，取少量滤液作无菌试验，即将它接入牛肉膏蛋白胨培养液中(1支5ml吸管、1支1ml吸管、1支无菌带帽华氏管)，置于37?培养过夜，以作无菌检查。

(4)噬菌体确证试验:滤液经37?培养过夜，若无细菌生长则表明已经彻底除菌。

需进一步证明噬菌体的存在。

于已烘干的肉膏蛋白胨琼脂平板(平皿1个)表面加一滴大肠杆菌悬液(1支1ml吸管)，再用灭菌玻璃涂布器将菌液涂布成均匀的一薄层。

放置数分钟，待琼脂表面干燥，在菌层的表面布点5个,7个，每点滴加上述滤液1小滴(1ml枪1把和枪头10个)，同时选择其中一点不加滤液只滴加一小滴生理盐水为对照，再放置数分钟，使液滴被琼脂吸干。

倒置平板，37?培养过夜。

次日观察结果，若平板上滴加滤液的部位出现噬菌斑，而在对照滴中处无噬菌斑，则表明该滤液中肯定含有大肠杆菌相应噬菌体。

2株可感染大肠埃希菌工程菌的噬菌体的鉴定与分析邢颖;朱芷葳;张利环;侯燕平;范华;李慧锋【摘要】大肠埃希菌来源的基因工程菌是应用最为频繁的工程菌,但在基因工程菌规模化制备生物活性制剂的过程中常常会被噬菌体感染.通过对鸡粪中噬菌体大量筛选及鉴定,对工程菌防御相应噬菌体感染机制开展基础研究.实验以大肠埃希菌工程菌为宿主菌(CICC编号:10424),采用双层琼脂平板法从鸡场粪样中分离噬菌体,结果获得2株噬菌体,对其进行形态学鉴定.经透射电镜观察发现一株(CX)为短尾噬菌体,其头部外廓呈长六角形,非收缩性尾部,其噬菌斑清晰透亮,周围无晕环,裂解性较强;另一株(B1X)为长尾科噬菌体,其噬菌斑呈双层环状,中心澄清透明,直径约0.8～1.3 mm,外环呈半透明,云雾状区域,宽约0.8～1.3mm.可进一步研究这2株噬菌体的侵染机制.【期刊名称】《微生物学杂志》【年(卷),期】2015(035)006【总页数】5页(P64-68)【关键词】噬菌体;大肠埃希菌;双层平板法;工程菌【作者】邢颖;朱芷葳;张利环;侯燕平;范华;李慧锋【作者单位】山西农业大学生命科学学院,山西太谷030801;山西农业大学生命科学学院,山西太谷030801;山西农业大学生命科学学院,山西太谷030801;山西农业大学实验教学中心,山西太谷030801;山西农业大学实验教学中心,山西太谷030801;山西农业大学生命科学学院,山西太谷030801【正文语种】中文【中图分类】Q939.121噬菌体作为细菌病毒，最早由英国细菌学家Twort[1] 和加拿大细菌学家D′Herelle[2]分别于1915年和1917年发现，在自然界中广泛存在，凡是有细菌的场所，就可能有相应噬菌体的存在，其对维持自然界微生物的动态平衡起着重要作用。

据估计，在生物圈内噬菌体种类繁多，形态各异，高达1031多种，而目前已经被描述的却仅有5 000多种，分离和鉴定新的噬菌体物种仍然任重道远[3]。

乳杆菌噬菌体的分离鉴定及⽣物学特性分析乳杆菌噬菌体的分离鉴定及⽣物学特性分析乳杆菌作为公认的安全级微⽣物,具有促消化、抗菌、增强免疫⼒等多种益⽣功能,⼴泛应⽤于⾷品⼯业、医药⼯程和畜牧业,其中植物乳杆菌、⼲酪乳杆菌和戊糖乳杆菌较为常⽤。

在发酵⼯程中,噬菌体的污染可造成不可忽视的后果,严重影响产品品质,甚⾄导致发酵失败。

本研究通过噬菌体富集法从酸菜中分离出两株烈性乳杆菌噬菌体,分别命名为LpeD和Lpa804,并对这两株噬菌体进⾏了⽣物学特性的鉴定。

通过电镜观察,噬菌体LpeD和Lpa804均具有典型的⼆⼗⾯体头部和⾮收缩性尾部,均属于尾噬菌体⽬、长尾噬菌体科。

根据宿主范围测定结果,噬菌体Lpa804可感染植物乳杆菌(L.plantarumPA106和L.plantarum SC),⽽噬菌体LpeD可感染戊糖乳杆菌(L.pentosus KLDS1.0413)和植物乳杆菌(L.plantarumKLDSl.0344)。

⼀步⽣长曲线的测定结果显⽰,噬菌体LpeD的潜伏期为15min,裂解期为90min,裂解量为194PFU/cell;噬菌体Lpa804的潜伏期为30min,裂解期为105 min,裂解量为221 PFU/cell。

理化因素对噬菌体的影响结果表明,噬菌体LpeD和Lpa804均对热敏感,LpeD 在56℃作⽤2 min全部失活,Lpa804在63℃作⽤2 min全部失活。

噬菌体LpeD 和Lpa804在pH 4-12的环境中较为稳定,显⽰了较强的酸碱耐受性。

紫外线照射并不能使噬菌体LpeD和Lpa804完全灭活,⼆者在紫外线照射20 min后均仍有部分噬菌体颗粒存活。

噬菌体LpeD和Lpa804对⼄醇和异丙醇较敏感,35%⼄醇作⽤10 min可使LpeD全部失活,25%⼄醇作⽤10 min可使Lpa804全部失活。

35%异丙醇作⽤10 min可使LpeD全部失活,25%异丙醇作⽤10 min可使Lpa804全部失活。