黄芩苷_环糊精包合物的制备与鉴定

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[ 4] 中国兽药典委员 会. 中 华人民共 和国兽药 典二 % % % 年 版二 部 [ S] . 化学工业出版社. 256.
试验号
1 2 3 4 5 6 7 8 9 均值 1
均值 2
均值 3
极差 R
A
1 1 1 2 2 2 3 3 3
45. 16
43. 12
40. 31
4. 85
表 2 黄芩苷 CD 包合 L 9( 34) 正交试验结果
因素
B
1 2 3 1 2 3 1 2 3
39. 33
C
1 2 3 2 3 1 3 1 2
45. 96 56. 74 45. 95 47. 02 53. 90 48. 38 34. 57 50. 25 40. 62
45. 84 43. 42
43. 90 41. 22
42. 77 42. 72
∀ 综合评分= 386. 76
6. 51
2. 68
0. 37
综合评分( 334)
42. 46 49. 08 43. 93 40. 49 44. 68 44. 20 35. 04 43. 75 42. 13
合物的衍射图差别较大。比如在扫描角度为 4. 5# 及 17. 1#处的 CD 基本特征峰同样也存在于混合 物中, 而黄芩苷包合物的衍射图则与之不同。上述 的 CD 特征峰消失, 却在 9. 5#及 13. 2#扫描角度 处出现新的衍射峰, 说明包合物已形成一种新的物 相, 从而判断包合成功。
测试条件: Co 射线, 管压 40 kV, 管流 15 mA, 扫描速度为 10#/ min, 时间常 数为 2 s, 衍射角 30#~ 50# 图 2 X 射线衍射 图
是新的图形, 证明已形成一种新的物相。 4 讨论 4. 1 黄芩苷 CD 包合物的制备方法 除了饱和 溶液法, 还可选用球磨法、超声法、组织 捣碎等方 法。 4. 2 包合机制 形成包合物的主要驱动力来自于
CD 分子空腔中的富焓水分子的释放, CD 疏水 性空腔中的水分子难以充分生成氢键, 即水分子形 成氢键的潜能未能充分释放, 故有相当大的焓值。 富焓水被极性比水小的客分子 ∃ 黄芩苷分子替代 而释放出来, 导致体系焓大大降低[ 6] 。此外, CD 分子中环张力的减小、非经典疏水性相互作用、氢 键以及溶剂表面张力的变化等都可对包合物的形
60
1. 5
3
7. 623
70
2
黄芩苷 CD 包合物。称取 CD1 份, 加一定量水
在规定温度下加热溶解, 制成溶液; 称取 2. 1 项下 制得的黄芩苷适量, 加入适量的乙醇溶解, 在恒温 磁力搅拌器上, 边搅拌边向 CD 溶液中滴加黄芩 苷乙醇液, 继续搅拌一定时间后, 取出, 自然冷却, 置冰箱中冷藏过夜。取出, 抽滤, 将沉淀分别用少 量水和乙醇洗涤, 60 减压干燥 1 h, 得到淡黄色 疏松粉末。
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环糊精包合物的制备与鉴定
[ 收稿日期] 2002 11 14
于生兰, 孙 玲, 张 龙, 张小华
( 江苏畜牧兽医学院药学系, 江苏泰州 225300) [ 文献标识码] A [ 文章编号] 1002 1280( 2003) 06 0011 04 [ 中图分类号] S 283. 6
2. 4 黄芩苷 CD 包合物的包合率 取干燥包合 物精确称量后, 用 HPL C 法测定其中黄芩苷含量, 计算黄芩苷的包合率。正交表中包合物收率、黄芩
苷含量、包合 率按 3 3 4 计 算得 综合 评分, 结 果见 表 2。 2. 5 黄芩苷包合物的鉴定
2. 5. 1 差示量热扫描法( DSC) DSC 是鉴定药物 和 CD 是否 发生包 合作用 的常用 方法[ 5] 。 CD 和黄芩苷的 DSC 扫描图分别见图 1 1、1 2, 简单 混合物的热分析曲线图 1 3 是 CD 与相应药物 的叠加, 而包合物图 1 4 却不同。
Abstract: Baicalin cyclodex t rin ( baicalin CD) inclusion w as prepared w it h t he method of elect ric stirring, and t he baicalin content in t he inclusion w as det ermined by HPL C. T he DSC and X ray g raphs of the pure mix ture and t he inclusion of baicalin CD w ere clearly dif ferent . It showed t hat t he inclusion of baicalin CD w as formed and a new physical phase w as formed betw een baicalin and CD. Key words: Baicalin; CD; inclusion compound
Preparation and identification of baicalin cyclodextrin inclusion
YU Sheng lan, SUN L ing , ZHANG L ong, ZHANG Xiao hua
( Phar macology Depart men t , Jiangsu A ni mal H usbandry and Ve teri nary Col lege , T aiz hou , Jia ngsu 225300; Chi na)
黄 芩 苷 ( Baicalin ) 是 中 药 黄 芩 ( Scutell ar ia baicalensis Georgi ) 的主 要成 分, 现代 药理 研究表 明: 黄 芩 苷 具有 较 强 的 抗菌、抗 病 毒、消 炎 等作 用[ 1] 。但黄芩苷具有水溶性小( 160 g / mL ) , 性质 不稳定, 易氧化变质, 吸收差, 具有一定苦味等特 点, 使其在临床上 的应用受到一 定影响[ 2] 。目前 有关中药黄芩的产品主要是水提酸沉后的初级产
[ 摘 要] 本文描述了黄芩苷 环糊精包合物的制备和鉴定方法。用溶液 电动搅拌法制备黄 芩苷 环糊精包合物, HPL C 法测定其含量。黄芩苷 环糊精包合物与物理混合物的差示量热 扫描( DSC) 及 X 射线衍射扫描图谱均有明显差异, 证明黄芩苷与 环糊精包合成功。 [ 关键词] 黄芩苷; 环糊精; 包合物
于生兰( 1970 年~ ) , 女, 硕士研究生, 研究方向为新药的研制与开发。
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表 1 黄芩苷 CD 包合因素、水平表
水平
CD: 黄芩苷( w / w ) A
包合温度/ B
搅拌时间/ h C
1
2. 541
50
1
2
5. 082
3 结论 3. 1 黄芩苷 CD 包合物的包合率 根据 L 9( 34 ) 表进行的正交设计试验结果, 2# 试验的结果最好, 由此得到制备黄芩苷 CD 包合物 的较佳工艺条 件为 A1B2C2, 即 CD黄芩苷( w / w ) = 2. 541, 包合 温度 60 , 搅拌时间 1. 5 h。取其得到的干燥包合 物精确称量后, 用 HPL C 法测定其 中黄芩苷含量 为 25. 79% , 计算出黄芩苷包合率为56. 74% 。 3. 2 差示量热扫描法 由图 1 可知, 黄芩苷 CD 包合物与混合物图谱有 明显的不同, 显示包合成 功。 3. 3 X 射线衍射法 包合物的衍射图谱既不同 于黄芩苷, 也不同 于 CD 及两者的混 合物, 完全
43. 47
空白
1 2 3 3 1 2 2 3 1
43. 09
包合物收率/ % 黄芩苷含量/ % 包合率/ %
57. 78 62. 15 65. 29 59. 21 63. 01 71. 75 64. 48 70. 57 80. 41
22. 47 25. 79 19. 88 13. 06 14. 07 11. 09 6. 22 8. 26 5. 86
环糊精( CD) , 上海化学试剂公司, 纯度> 95% , 重结晶; 黄芩苷对照品, 批号 0715 9909, 中国药 品生物制品检定所提供。 2 方法与结果 2. 1 黄芩苷的提取与精制[ 3] 黄 芩饮片分别加 10 倍、8 倍量水煎煮两次, 每次 1 h, 过滤, 滤液加
5% HCl 调 pH 为 1~ 2, 然后置 80 恒温水浴锅中 保温 30 m in, 离 心, 沉 淀加 适 量水 搅匀, 加 40% NaOH 调 pH 为 7, 再加等量乙醇过滤, 滤液加 10% H Cl 调 pH 为 2, 充分搅拌, 置 80 恒温水浴锅中 保温 30 min, 趁热过滤, 沉淀分别用水、50% 乙醇 洗涤, 再用 95% 乙醇重结晶, 干燥, 粉碎过 160 目 筛即得。 2. 2 黄芩苷的含量测定[ 4] 2. 2. 1 色谱条件 用十八烷基硅烷键合硅胶为填 充剂; 甲醇 水 磷酸( 47530. 2) 为流动相; 检测波长 为 280 nm。 2. 2. 2 供试品溶液的制备 精密称取 2. 1 项下制 得的黄芩苷粉末适量, 加甲醇制成每 1 mL 中含 60 g 的溶液, 即得。 2. 2. 3 对照品溶液的制备 精密称取在 60 减 压干燥 4 h 的黄 芩苷对照品 适量, 加 甲醇制成 每 1 mL中含 60 g 的溶液, 即得。 2. 2. 4 测定法 分别吸取对照品溶液与供试品溶 液适量, 注入 L C 10A 型高效液相色谱仪( 自动进 样 20 L) , 测定含量。
DSC 条件 : 升温速度 10 / min, 温度范围 50~ 280 , 测定气体为空气。 图 1 DSC 扫描图谱
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2. 5. 2 粉末 X 射线衍射法 X 射线衍射法常用 于鉴定晶体化合物, 各晶体物质在相同的角度处具 有不同的晶面间距, 从而显示不同的衍射峰。对黄 芩苷、 CD、黄 芩苷 CD 包合物及 物理混合 物 4 种物质进行测试, 结果如图 2。从图中可以看出, 混合物图谱为黄芩苷和 CD 的衍射峰叠加, 与包
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成产生作用[ 7] 。 本文采用溶液 电动搅拌法制备黄芩苷 CD
包合物, 工艺简单, 操作方便, 适合于兽药生产企业 规模生产, 有助于改善黄芩制剂在兽医临床中的应 用。
参考文献
[ 1] 吴立军. 中药 化学 [ M ] . 北 京: 中 国医 药科技 出版 社, 2001. 113 114.
2. 3 黄芩苷 CD 包合物的制备 采用正交设计 试验法。由探索试验可 知 CD 与黄芩苷的 混合 比( A) 、包合温度( B) 、搅拌时间( C) 对黄芩苷的包 合率有一定影响, 故以这 3 个影响因素的 3 个水平 采用 L 9( 34) 表进行正交设计试验, 见表 1。
分别按正交试验表( 表 2) 各行所列条件制备
品, 如银黄制剂、双黄连制剂等, 其产品存在着性质 不稳定、剂量不够准确、适口性差, 液体制剂易出现 混浊等缺点。为使黄芩中主要有效成分黄芩苷得
到充分有效地利用, 本文根据 环 糊精的包合特 点, 将黄芩苷作为客体, 用溶液 电动搅拌法制备黄 芩苷 环糊精包合物, 并进行了鉴定。 1 仪器和材料 1. 1 仪器 85 2 控温磁力搅拌器, 金坛市节能 分析仪器厂; Perkin Elmer DSC 7 量热仪, 美国 PE 公司; T hermo ARL X 衍射仪, 瑞士; L C 10A 高效液相色 谱仪、T VP 微机 控制处 理器, 日本岛 津。 1. 2 材料 黄芩饮片, 购自泰州市医药公司, 产地 为河北承德, 经南京中医药大学陈建伟教授鉴定;