四硫磺酸盐煌绿增菌液基础

⾷品微⽣物学检测技术思考题⾷品微⽣物学检测技术思考题1、试述微⽣物与⾷品安全的关系。

微⽣物引起⾷品腐败变质；微⽣物引起⾷物中毒；微⽣物制造⾷品、促进粮⾷⽣产。

2、对⾷品进⾏微⽣物检验有何意义？检验结果是衡量⾷品卫⽣质量的重要指标,也是判定被检⾷品能否⾷⽤的科学依据；可以有效地防⽌或减少⾷物中毒和⼈畜共患病的发⽣；保证产品的质量,避免不必要的损失。

3、⾷品微⽣物检验的范围包括哪些？⽣产环境的检验；原辅料的检验；⾷品加⼯、储藏、销售诸环节的检验；⾷品的检验。

4、⾷品卫⽣标准中的微⽣物指标有哪些？根据⾷品卫⽣要求,⾷品中需要检测的微⽣物种类、数量及其代谢产物的种类和数量称为⾷品卫⽣微⽣物学指标，是评判⾷品卫⽣质量的重要依据。

微⽣物学指标种类：菌落总数；⼤肠菌群数；致病菌；霉菌及其毒素；其他指标。

我国卫⽣部颁布的⾷品微⽣物指标最重要的是菌落总数、⼤肠菌群数和致病菌三项。

5、描述⾷品微⽣物检验的⼀般程序。

6、列表⽐较低倍镜、⾼倍镜及油镜在数值孔径、⼯作距离及镜头⼤⼩等⽅⾯的差别。

数值孔径（NA）⼯作距离镜头⼤⼩0.25 7-8mm 较⼤低倍镜0.65 0.4-0.5mm 中等⾼倍镜1.25 0.18-0.2mm 较⼩油镜7、要使视野明亮，除光源外，还可采取哪些措施？加⼤虹彩光圈,提升聚光程度.调节光圈⼤⼩,提升聚光器8、与普通光学显微镜⽐较暗视野显微镜和相差显微镜在结构和功能上有何特点？结构：暗视野显微镜聚光器下增加了环状光栅，观察⽬标是亮的，背影为暗的，提⾼观察物体的对⽐度；相差显微镜聚光器下增加了环状光阑和相位板，把透过标本的可见光的相位差（光程差）变成振幅差。

功能：暗视野显微镜可以观察活细胞的形态和运动性；相差显微镜可以观察活细胞的形态和运动性，以及活细胞内部结构相差显微镜：通过环形光阑和相位板把透过标本的可见光的相位差（光程差）变成振幅差，从⽽提⾼了各种结构间的对⽐度，使各种结构变得清晰可见。

9、简述监测⾼压蒸汽灭菌效果的⽅法及其特点。

新实施：GB 4789.4-2024沙门氏菌——的预增菌变化G B4789.420242024年3月，国家卫健委、市场监管总局联合发布了47项食品安全国家标准和6项修改单，其中包含《食品安全国家标准食品微生物学检验沙门氏菌检验》（G B 4789.4-2024）检验方法标准。

这一新标准对实验设备、材料和试剂、检验程序与操作步骤进行了修改，并将于2024年8月8日实施。

本文就该标准主要修订内容、操作注意事项进行解读。

主要变化及原因分析变化1：在“预增菌”步骤中新增了在检验乳粉样品时，须将样品倒入225m L B P W 培养基表面，静置60m i n后再进行预增菌。

乳粉类样品经过高温喷雾干燥，其中的沙门氏菌大多处于受损状态；乳粉相对干燥且水活度低，其中受损的沙门氏菌适应了干燥的环境。

在这种情况下，如果受损的沙门氏菌在B P W中快速混匀水化，受损的沙门氏菌会出现渗透压休克；采用浸泡法在室温条件下静置一段时间后再进行预增菌，可以促进受损沙门氏菌的复苏，提高检出率。

变化2：选择性增菌培养基由氯化镁孔雀绿大豆胨（R V S）增菌液代替亚硒酸盐胱氨酸（S C）增菌液，并且B P W接种量改为0.1m L到10m L R V S中，选择性增菌温度为42℃±1℃。

S C增菌液主要适用于伤寒沙门氏菌的选择性增菌，但通过近几年疾病监测发现，我国伤寒、副伤寒沙门氏菌的发病率从10例/10万下降到0.8例/10万左右，而非伤寒沙门氏菌近年来发病率达到560例/10万，在微生物引发的食源性疾病中排前2位。

从培养基成分上看，R V S中含有孔雀绿，能够抑制非沙门氏菌的生长，大豆蛋白胨有利于沙门氏菌的复苏；S C增菌液配置需要的亚硒酸氢钠具有一定毒性，在健康环保方面也存在安全风险，且原料不稳定，过度加热培养基容易变性导致功能失效。

变化3：T T B四硫磺酸钠煌绿增菌液（T T B）选择性增菌改为：低背景菌培养温度为36℃±1℃，高背景菌培养温度为42℃±1℃。

微生物实验室培养基配方大全一、糖发酵管成分：牛肉膏 5g蛋白胨 10g氯化钠 3g磷酸氢二钠2g0.2％滇麝香草酚蓝溶液 12mL蒸馏水 1000mLPH 7.4制法1. 葡萄糖发酵管按上述成分配好后,按0.5％加入葡萄糖,分装于有一个倒置小管的小试管内，121℃高压灭菌15min。

2. 其他各种糖发酵管可按上述成分配好后，分装每瓶1000 mL，121℃高压灭菌15min。

另将各种糖类分别配好10%溶液，同时高压灭菌。

将5mL糖溶液加入于100 mL培养基内，以无菌操作分装小试管。

蔗糖不纯，加热后会自行水解者，应采用过滤法除菌。

从琼脂斜面上挑取小量培养物接种，于36℃±1℃培养，一般观察2～3d。

迟缓反应需观察14~30d。

二、乳糖胆盐发酵管成分：蛋白胨 20g猪胆盐（或牛、羊胆盐）5g乳糖 10g0.04%滇甲酚紫水溶液 25mL蒸馏水 1000mL制法：将蛋白胨，胆盐及乳糖溶于水中，校正pH，加入指示剂，分装每管10 mL，并放入一个小倒管，115℃高压灭菌15min。

双料乳糖胆盐发酵管除蒸馏水外，其他成分加倍。

三、5％乳糖发酵管成分：蛋白胨 0.2g氯化钠 0.5g乳糖 5g2%溴麝香草酚蓝水溶液 1.2mL蒸馏水 100mLpH 7.4制法：除乳糖以外的各成分：溶解于50mL蒸馏水内，校正pH。

将乳糖溶解于另外50mL蒸馏水内，分别灭菌121 ℃ 15min，将两液混合，以无菌操作分装于灭菌小试管内。

在此培养基内，大部分乳糖迟缓发酵的细菌可于ld内发酵。

四、缓冲葡萄糖蛋白胨水（MR和VP试验用）成分：磷酸氢二钾 5g多胨 7g葡萄糖 5g蒸馏水 1000mL制法：溶化后校正pH，分装试管，每管1mL ，121℃高压灭菌15min。

甲基红（MR）试验：自琼脂斜面挑取少量培养物接种本培养基中，于36±1℃培养2～5d，哈夫尼亚菌则应在22～25℃培养。

滴加甲基红试剂一滴，立即观察结果。

细菌培养必须有适合细菌生长繁殖的培养基，不同种类的细菌对营养的要求有显著的差别。

培养基是用人工的方法，将多种营养物质根据各种细菌生长的需要而合成的一种混合营养料，培养基中一般含有可被细菌利用的氮源、碳源、无机盐和水等物质。

微生物对未经消化的蛋白质利用较差，而需要比较简单的含氮物质，如蛋白胨、蛋白、多肽类及氨基酸等。

某些细菌更需要类似维生素的辅助生长因素或某些特殊因子方能生长，因此一定要掌握细菌生长需要的条件去制备各种培养基。

培养基主要作为繁殖细菌、分离细菌、鉴定细菌、研究细菌和制造生物制品等之用。

随着微生物学的发展，培养基的种类与日俱增。

同一种类的培养基，又因原料品种的不同而质量上有差异。

因此用于特殊要求的合适培养基的选择，需要有丰富的工作经验。

为了保证工作质量，节约制备大量品种培养基的时间，目前趋向于采用现成的各种干粉培养基成品，用蒸馏水配制而成，使用方便。

下面介绍一些常用的培养基及制备方法。

(一) 普通培养基1. 营养肉汤肉水1000ml蛋白胨10gNaCl 5g制作方法：将上述后三种成分加入到肉水中，稍加温溶解之；用1mol/L的NaOH调pH值到7.4－7.6；滤纸过滤，分装；0.112MPa15－20分钟消毒灭菌。

用途：供一般细菌生长的液体培养基，生长后可检查其生长情况（混浊度、沉淀、菌膜等）；也是制作固体培养基的基础培养基。

肉水的制备：将500 g瘦牛肉，切成小块或绞碎，加1 000ml蒸馏水，浸泡一夜（夏季应置10℃左右以防腐败），煮沸约1小时，用纱布滤去肉渣，再用滤纸滤过，补足原有水量，装入烧瓶中消毒（0.112MPa20分钟），放冷暗处备用。

2. 营养琼脂成分：营养肉汤 1 000ml琼脂粉20-30g制作方法：将琼脂加入到营养肉汤中，加热使之融化；调pH值到7.4－7.6；用纱布过滤，高压灭菌（0.112MPa，20分钟）。

用途：一般细菌的分离、纯培养、观察菌落性状及保存菌种用；为特殊培养基的基础。

2019年第10期（总第267期) 试验研究1禽沙门氏菌鉴别培养基和PCR 检测方法的建立张富友 宋 艳 徐煜琳 鞠孜敬 崔治中 孙淑红*（山东农业大学动物科技学院 山东 泰安 271018）摘要 禽沙门氏菌是常见的一种人畜共患病原菌，快速准确地检测对于防控沙门氏菌病非常重要。

传统的沙门氏菌检测方法准确，但操作繁琐、费时费力。

本研究拟建立准确快速的检测技术。

选择疑似发生沙门氏菌病的某种鸡群3个批次共计119份未出壳死胚样品，分别经BPW 增菌，SC 和TTB 分别增菌后，再利用XLD 鉴别培养基培养后，利用PCR 方法进行沙门氏菌的分离鉴定。

同时，所有样品均按照国家标准检测方法(国标法)进行沙门氏菌的分离鉴定。

结果显示，本研究建立的沙门氏菌快速检测方法与国标法相比，沙门氏菌检出率均为41.2%，吻合率100%；血清分型试验显示，该49株沙门氏菌均为鸡白痢沙门氏菌；本研究建立的检测方法用时3~6d ，而国家标准检测方法需要6~9d 。

本研究表明，禽沙门氏菌鉴别培养基和PCR 检测技术可准确、快速地完成沙门氏菌的检测，而且成本更低。

该技术方法可用于种鸡群沙门菌感染状态评估和调查分析以及规模化种禽场沙门菌净化，对生产实践具有重要的指导意义。

关键词 禽沙门氏菌 鉴别培养 国家标准 PCR中图分类号：S852.61+2 文献标识码：A 文章编号：1007-1733(2019)10-0001-03 禽沙门氏菌病是由不同血清型的沙门氏菌引起的禽类不同类型传染病的总称，根据病原体的抗原结构不同可以分为鸡白痢、禽伤寒和禽副伤寒[1]。

禽沙门氏菌在世界各地普遍存在，对养禽业危害很大[2]。

同时，部分血清型的沙门氏菌是人畜共患病原菌，防控禽沙门氏菌病对公共卫生有重要意义[3]。

目前国家标准检测方法(国标法)是用于禽沙门氏菌分离鉴定最常用的方法，该标准可保证检测结果的准确性，但是在疾病预防和疫情的应急处理中不能够适用。

四硫磺酸盐煌绿增菌液基础1. 简介四硫磺酸盐煌绿增菌液是一种用于培养细菌的基础培养基，其主要成分是四硫磺酸盐和煌绿。

四硫磺酸盐提供了细菌生长所需的营养物质，而煌绿则起到了抑制其他微生物的作用。

2. 组成四硫磺酸盐煌绿增菌液基础的组成如下：•四硫磺酸盐：提供细菌生长所需的营养物质，包括碳、氮、硫等元素。

•煌绿：具有抗菌作用，可以抑制其他微生物的生长。

•水：作为稀释剂和溶剂。

3. 制备方法制备四硫磺酸盐煌绿增菌液基础的方法如下：1.称取适量的四硫磺酸盐和煌绿，按比例加入适量的水中。

根据需要可调整浓度。

2.搅拌混合溶液，使其充分溶解均匀。

3.过滤溶液，去除杂质和固体颗粒。

4.将过滤后的液体装入无菌容器中，密封保存。

4. 应用四硫磺酸盐煌绿增菌液基础在微生物学实验中有着广泛的应用。

它可以作为一种培养基，用于培养细菌和其他微生物。

1.培养细菌：将待培养的细菌接种到四硫磺酸盐煌绿增菌液基础中，利用其中的营养物质支持其生长和繁殖。

煌绿的抑制作用可以防止其他微生物的污染。

2.抑制其他微生物：由于煌绿的抗菌作用，四硫磺酸盐煌绿增菌液基础可以被用于抑制其他非目标微生物的生长。

这对于纯化特定细菌株或者筛选特定微生物具有重要意义。

5. 注意事项在使用四硫磺酸盐煌绿增菌液基础时需要注意以下事项：1.无菌操作：为了避免外源性微生物的污染，制备和使用过程中必须进行严格的无菌操作。

2.保存条件：四硫磺酸盐煌绿增菌液基础应保存在阴凉、干燥的地方，避免阳光直射。

3.使用时间：为了保证培养基的质量和效果，建议在制备后不久使用。

6. 结论四硫磺酸盐煌绿增菌液基础是一种常用的微生物培养基，其通过提供营养物质支持细菌的生长和抑制其他微生物的污染。

在微生物学实验中，它被广泛应用于细菌培养和纯化工作中。

使用时需要注意无菌操作、保存条件和使用时间等事项，以确保培养基的质量和效果。

以上就是四硫磺酸盐煌绿增菌液基础的基本介绍和相关内容。

希望对您有所帮助！。

沙门氏菌常用培养基的配方及原理1、沙门氏菌简介沙门氏菌病的病原体。

属肠杆菌科，革兰氏阴性肠道杆菌。

已发觉的近一千种（或菌株）。

菌体大小（0.6～0.9)（1～3)微米无芽胞，一般无荚膜，除鸡白痢沙门氏菌和鸡伤寒沙门氏菌外，大多有周身鞭毛。

养分要求不高，分别培育常采纳肠道选择鉴别培育基。

生化反应对本属菌的鉴别具有重要参考意义。

不液化明胶，不分解尿素，不产生吲哚，不发酵乳糖和蔗糖，能发酵葡萄糖、甘露醇、麦芽糖和卫芽糖，大多产酸产气，少数只产酸不产气。

VP试验阴性，有赖氨酸脱羧酶。

DNA的G+C含量为50～53%。

对热反抗力不强，在60℃15分钟可被杀死。

在水中存活2～3周。

2、检测流程见表13、培育基原理微生物检测培育基3.1 缓冲蛋白胨水Buffered Peptone Water用途：用于沙门氏菌、阪崎杆菌前增菌培育（GB2023标准）配方：（g/L）用法：称取本品20.0g ,加热溶解于1000ml蒸馏水中,121℃高压灭菌15分钟备用。

3.2 四硫磺酸盐煌绿增菌液基础(TTB) Tetrathionate Broth Base用途：用于沙门氏菌选择性增菌培育，需加入煌绿和碘液。

配方：（g/L）用法：称取本品93.55g,溶解于1050ml 蒸馏水中,加热煮沸,临用前加入 20% 碘液 20ml,0.5% 煌绿 2ml,现配现用,不宜久置。

3.3 亚硒酸盐胱氨酸增菌液（SC）Selenite Cystine Broth用途：用于沙门氏菌选择性增菌培育（GB、SN标准）。

配方：（g/L）用法：称取本品23.0克,加热溶解于1000ml蒸馏水中,无菌操作分装于灭菌三角瓶或试管中备用。

当天制备当天使用，无需高压灭菌。

3.4 亚硫酸铋琼脂（BS）（GB4789）配方（g/L）：用法：将前三种成分加入300 ml蒸馏水（制作基础液），硫酸亚铁和磷酸氢二钠分别加入20 ml和30 ml蒸馏水中，柠檬酸铋铵和亚硫酸钠分别加入另一 20 ml和30 ml蒸馏水中，琼脂加入 600ml 蒸馏水中。

ttb增菌原理宝子们，今天咱们来唠唠TTB增菌这个超有趣的事儿。

TTB啊，全称是四硫磺酸钠煌绿增菌液。

它增菌就像是给那些小小的、不容易被发现的细菌们打造一个超级舒适的“豪华套房”，让它们在里面快快长大，这样咱们就能更容易地找到它们啦。

咱先来说说这四硫磺酸钠的作用。

这四硫磺酸钠在溶液里就像是一个严格又贴心的管家。

它会改变环境的化学性质，让那些细菌喜欢的营养物质变得更容易被吸收。

你想啊，就像咱们人要是到了一个到处都是美食，而且这些美食还特别容易吃到嘴里的地方，那肯定也会长得胖胖的，细菌也一样呢。

在正常的环境里，细菌可能要费好大的劲儿才能找到一点点营养，但是在TTB里，有了四硫磺酸钠这个管家的帮忙，营养物质就像是摆在细菌面前的大餐，它们可以大快朵颐。

而且啊，这个四硫磺酸钠还能对其他一些杂菌起到一定的抑制作用，就像是在细菌的“豪华套房”门口安排了一个保安，只让咱们想要的细菌进去享受大餐，那些不速之客就被挡在门外啦。

再说说这煌绿。

煌绿就像是一个活力小助手。

它能给细菌们注入一股活力。

你可以想象细菌们本来是有点懒洋洋的，但是煌绿一来，就像是给它们打了一针兴奋剂。

它刺激细菌们的新陈代谢，让它们体内的各种小机器都运转得更快。

就像咱们有时候早上起来没精神，喝了一杯咖啡就活力满满了，对于细菌来说，煌绿就是那杯神奇的咖啡。

而且啊，煌绿也能帮助抑制一些不必要的微生物生长，它和四硫磺酸钠就像是一对好搭档，一个负责管理营养和阻挡杂菌，一个负责给目标细菌加油打气，共同为目标细菌打造一个绝佳的生长环境。

在这个TTB的世界里，目标细菌就像是被宠爱的小宝贝。

它们在这样的环境里，不断地分裂繁殖。

原本可能只有几个小细菌，在TTB里待上一段时间后，就变成了一大群。

这时候咱们检测起来就容易多啦。

比如说咱们要检测食品或者环境里有没有某种特定的有害细菌，如果不经过TTB增菌，可能就像大海捞针一样困难，但是经过TTB这么一“照顾”，这些细菌就像是从一群小蚂蚁变成了一大群蚂蚁，一下子就变得显眼多了。

国家⾷品沙门⽒菌检测（内含简图很有⽤）国家⾷品沙门⽒菌检验前⾔沙门⽒菌是肠杆菌科中⼀种重要的⼈畜共患病原菌，⾰兰⽒阴性，是细菌性⾷物中毒的重要致病菌。

⾎清型种类繁多，⽬前全世界已分离出2523 个⾎清型，我国已发现216个[1].。

与⼈类疾病有关的⾎清型主要集中于A~E 群，包括伤寒沙门⽒菌、（甲、⼄、丙型）副伤寒沙门⽒菌、⿏伤寒沙门⽒菌、猪霍乱沙门⽒菌、肠炎沙门⽒菌等，其中以⿏伤寒沙门⽒菌、肠炎沙门⽒菌及猪霍乱沙门⽒菌最为常见。

它不仅能导致鸡⽩痢、鸡伤寒、副伤寒、仔猪副伤寒等动物疾病，还能使⼈类发⽣伤寒、副伤寒、败⾎症、胃肠炎和⾷物中毒[2]。

根据国际惯例, 要求对易受沙门⽒菌污染的⾷品进⾏分类管理, 以使⼤多数⾷物不含沙门⽒菌, 从⽽有效预防沙门⽒菌引发的各种疾病。

20 世纪50 年代以来,国内外学者进⾏了⼤量的研究, 从以传统⽅法为基础发展到以免疫学为基础的或以分⼦⽣物学为基础的快速检测⽅法, 并在实践检验中不断取得新进展。

这些⽅法包括酶联免疫吸附试验法、免疫磁珠法、免疫荧光标记法、噬菌体裂解试验法、核酸探针法等[3]。

本实验采⽤的是传统标准检测⽅法，包括前增菌,选择性增菌,选择性平板分离,⽣化试验,⾎清学分型鉴定五个步骤。

1材料与⽅法1.1设备和材料1.1.1 恒温培养箱：36℃±1℃，42℃±1℃1.1.2 拍击式均质器。

1.1.3 电⼦天平：感量0.1g。

1.1.4 ⽆菌锥型瓶：容量500ml,250ml。

1.1.5 微量移液器及吸头。

1.1.6 ⽆菌培养⽫：直径90mm。

1.1.7 ⽆菌试管：3mm×5mm、10mm×75mm。

1.1.8 ⽆菌⽑细管。

1.1.9 三⾓烧瓶。

1.2培养基和试剂1.2.1缓冲蛋⽩胨⽔（BPW）：称取蛋⽩胨10g，NaCl 5g，Na2HPO4`12H2O 9g，KH2PO41.5g,加蒸馏⽔1L，搅拌加热煮沸⾄完全溶解，分装三瓶，121℃，灭菌20min。

品种名称：023030四硫磺酸钠煌绿增菌液基础(TTB)用途：用于沙门氏菌选择性增菌培养。

肉的污染肉及其制品的沙门氏菌检出率美国为20%—25%、英国为9.9%、日本检查进口家禽的污染率为10.3%，国内肉类沙门氏菌检出率在1.1%—39.5%。

蛋的污染我国蛋及其制品沙门氏菌检出率为3.9%-43.7%，由于吃蛋引起鼠伤寒病的病例报告逐渐有增加的趋势。

环境污染食品在加工、运输、出售过程中往往被沙门氏菌污染。

沙门氏菌在粪便、土壤、食品、水中可生存5个月至2年之久。

传播问题恢复期患者和无症状的带菌者也是常见的传染源。

图鉴：使用原理：蛋白胨和牛肉膏粉提供碳源、氮源和维生素满足细菌生长的需求;氯化钠可维持均衡的渗透压;碳酸钙能中和细菌产酸及吸收有毒的代谢产物;硫代硫酸钠和四硫磺酸钠结合可抑制肠道共生菌(四硫磺酸钠是在培养基加入碘和碘化钾时形成)，而具有四硫磺酸钠还原酶的细菌能在此培养基中繁殖;胆盐和煌绿可抑制大肠群菌和其它革兰氏阳性杆菌。

培养基配方(每升)：蛋白胨9g牛肉膏粉 4.5g氯化钠 2.7g碳酸钙 40.5g无水硫代硫酸钠31.9g牛胆盐5g最终pH7.0±0.2使用方法：1、称取本培养基93.6g，加入蒸馏水或去离子水1 L，搅拌加热煮沸至完全溶解，分装于三角瓶中，每瓶100mL。

2、将三角瓶放入灭菌锅中，121℃高压灭菌20min，冷至30℃，每100mL 基础培养基中加入四硫磺酸钠煌绿增菌液配套试剂(SR0040)2支，混合均匀。

3、在无菌环境中，移取前增菌液1ml转种于10ml TTB中。

4、将已接种的试管放入恒温培养箱中，42℃培养18-24h。

5、观察结果。

质量控制：质控菌株接种后于42℃培养18-24h，结果如下：菌名菌号生长状况培养特征伤寒沙门氏菌CMCC(B)50071 良好静置后混浊鼠伤寒沙门氏菌CMCC(B)50115 良好静置后混浊大肠埃希氏菌ATCC25922 不生长静置后清亮贮存：贮存于避光、阴凉干燥处，用后立即旋紧瓶盖。

两种不同增菌液和增菌温度对沙门氏菌增菌效果对比分析前言在GB4789.4沙门氏菌检验中，食品样品经过缓冲蛋白胨水（BPW）增菌后，第二次增菌就分为两步走：一步是转移至四硫磺酸钠煌绿（TTB），42℃18h-24h。

另一步转移至亚硒酸盐胱氨酸（SC），36℃ 18h-24h。

二次增菌后再分别转种至亚硫酸铋琼脂（BS）和木糖赖氨酸脱氧胆盐琼脂（XLD）（或HE琼脂、显色培养基）进行分离培养[1]。

至于为什么第二次增菌需要分两步进行，TTB和SC两种增菌液在增菌效果上有什么区别，如何最大可能地检出沙门氏菌，防止漏检，是我们每一位食品微生物工作人员应该了解的问题。

为了弄清楚两种不同增菌液对沙门氏菌检出效果的差异，我们回顾性调查了本科室2016-2020年食品样品中分离到的沙门氏菌样品的整个检验过程，现报告如下：1材料与方法1.1标本来源 2016年-2020年本科室从食品主动监测样品以及食物中毒样品中分离到沙门氏菌阳性的样本。

所有阳性菌株均送成都市疾病预防控制中心微生物实验室进行复核，以市疾控中心复核结果为准。

因市疾控中心实验室也有少许菌株未能全部分出血清型，本次调查未将这部分菌株纳入，只将有明确结果的菌株纳入本次调查范围。

1.2试剂及仪器 BPW、SC、TTB、BS、显色培养基均购自北京陆桥生物技术有限公司，科玛嘉显色培养基由郑州博赛生物技术股份有限公司提供，沙门氏菌属诊断血清由宁波天润生物药业公司提供，革兰阴性菌鉴定板由法国梅里埃公司提供，所有试剂都在有效期内使用。

鉴定仪器是法国梅里埃公司的VITEK2 Compact细菌鉴定及药敏系统。

1.3方法1.3.1试验方法按照最新的国家标准GB4789.4-2016 进行增菌、分离、鉴定和血清学分型。

1.3.2调查方法采用回顾性调查的方法，通过查阅2016-2020三年期间本科室从食品主动监测和食物中毒样品中所分离出的沙门氏菌原始检验记录，主要是查阅细菌在两种培养基中的生长情况记录以及转种后在BS和显色培养基上的分离情况记录，以及最后的生化和血清学鉴定结果记录，鉴定结果与市疾控中心反馈结果进行对比，血清学鉴定以市疾控中心的结果为最终结果。

表皮葡萄球菌产气肠杆菌鼠伤寒沙门氏菌单核增生李斯特氏菌大肠埃希氏菌金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌表皮葡萄球菌表面接触碟/表面接触皿金黄色葡萄球菌酿酒酵母菌脑心浸出液肉汤(BHI)品红亚硫酸钠液体培养基MFC肉汤CFU培养基基础4-甲基伞形酮葡糖苷酸(MUG)培养基蛋白胨胰蛋白胨胰酪蛋白胨酵母浸粉大豆蛋白胨酸水解酪蛋白明胶蛋白胨马铃薯浸粉琼脂粉琼脂粉动物组织胃蛋白酶消化物肉胃酶消化物牛肉浸粉牛肝浸粉牛肝浸粉牛心浸粉多价蛋白胨(多聚蛋白胨)月示蛋白胨玉米浸出粉一次性培养皿表面接触碟一次性培养皿（密理博浮游菌采样）表面接触碟/表面接触皿金属玻璃培养皿（可重复使用）金属玻璃表面接触碟嗜热脂肪肝菌芽孢菌片（ATCC7953枯草杆菌黑色变种芽孢菌片（ATCC9372）121度高压灭菌化学指示卡132℃压力蒸汽灭菌指示卡葡萄糖氯化钠L-半胱氨酸盐酸盐氧化酶试剂三磷酸腺苷二钠盐（ATP）费尔休林（无吡啶）SDS-PAGE凝胶配制试剂盒SDS-PAGE电泳液SDS-PAGE上样缓冲液5倍考马斯亮蓝R-250染色套装铜绿假单胞菌金黄色葡萄球菌表皮葡萄球菌大肠埃希氏菌大肠埃希氏菌产气肠杆菌乙型副伤寒沙门氏菌枯草芽孢杆菌白色念珠菌表面接触碟/表面接触皿黑曲霉生孢梭菌大豆酪蛋白肉汤培养基(胰酪胨大豆肉汤)大豆酪蛋白肉汤培养基(胰酪胨大豆肉汤)无菌大豆酪蛋白肉汤培养基(胰酪胨大豆肉? 大豆酪蛋白肉汤培养基(胰酪胨大豆肉汤)大豆酪蛋白消化液培养基大豆酪蛋白琼脂培养基大豆酪蛋白琼脂培养基无菌大豆酪蛋白琼脂培养基卵磷脂-吐温80营养琼脂培养基基础胰化大豆坚固绿琼脂(TSFA)营养肉汤(NB)营养琼脂(NA)0.5%葡萄糖肉汤培养基pH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液三糖铁琼脂培养基(TSI)三糖铁琼脂培养基R2A琼脂平板计数琼脂(PCA)TTC营养琼脂2216E琼脂2216E液体培养基嗜冷菌计数琼脂胰蛋白胨大豆肉汤(TSB)胰蛋白胨大豆琼脂(TSA)Dey/Engley中和肉汤基础Dey/Engley中和琼脂基础胰蛋白示磷酸盐肉汤胰蛋白示磷酸盐肉汤胰蛋白示磷酸盐肉汤标准Ⅰ号营养琼脂标准Ⅰ号营养肉汤标准Ⅱ号营养琼脂m-TGE肉汤表面接触碟/表面接触皿AC肉汤豆粉琼脂哥伦比亚血琼脂基础血琼脂基础脑心浸出液肉汤(BHI)脑心浸出液琼脂(BHIA)溴甲酚紫葡萄糖肉汤酸性肉汤溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培养基0.5%葡萄糖肉汤培养基SCDLP液体培养基基础SCDLP琼脂培养基基础Letheen琼脂基础Letheen肉汤基础改良Letheen琼脂基础改良Letheen肉汤基础Eugon 肉汤Eugon 琼脂小牛浸液肉汤小牛浸液琼脂溴甲酚紫蛋白胨培养液普通肉汤培养基细菌保存培养基细菌保存培养基(半固体)血液增菌培养基心浸液琼脂哥伦比亚肉汤TGC液体培养基TGC流体培养基改良TGC流体培养基(无指示剂)菌种培养基水琼脂培养基营养琼脂(pH6.0)营养琼脂,1.5%营养琼脂,1.5%改良平板计数琼脂(MPCA)CVT琼脂培养基酵母粉琼脂Eugon LT 100肉汤基础Eugon LT 100琼脂基础LT 100琼脂基础大豆酪蛋白琼脂培养基(含卵磷脂)哥伦比亚CNA 琼脂SLB培养基胰酪胨大豆琼脂大豆酪蛋白琼脂（灌装生产用）血琼脂基础2号酪胨琼脂（G.A）三糖铁（TSI）琼脂含0.05%聚山梨酯80的pH7.0氯化钠-蛋白液3%氯化钠碱性蛋白胨水TCBS琼脂3%氯化钠胰蛋白胨大豆琼脂3%氯化钠三糖铁琼脂氯化钠三糖铁琼脂3.5%氯化钠三糖铁琼脂我妻氏血琼脂基础四号琼脂基础庆大霉素琼脂基础嗜盐菌选择性琼脂氯化钠多粘菌素B肉汤（SPB）基础O/F试验用培养基（HLGB）碱性蛋白胨水（APW）氯化钠营养琼脂42℃生长试验用培养基mCPC琼脂基础（CC琼脂基础）碱性琼脂碱性胆盐琼脂氯化钠蔗糖琼脂培养基PAC斜面培养基BTB培养基氯化钠结晶紫增菌液T1N1琼脂T1N0肉汤T1N3肉汤精氨酸葡萄糖斜面琼脂（AGS）嗜盐性试验培养基基础霍乱双糖铁琼脂1%氯化钠碱性蛋白胨水气单胞菌鉴别琼脂气单胞菌培养基基础（Ryan）气单胞菌琼脂（胆盐氯酚红亮绿琼脂）氨苄青霉素麦康凯琼脂基础RS琼脂普通肉汤普通琼脂碱性蛋白胨水AHM鉴别培养基脱脂奶蔗糖蛋白胨培养基基础蔗糖胰蛋白胨肉汤APM培养基改良磷酸盐缓冲液CIN-1培养基基础改良Y培养基改良克氏双糖铁培养基改良的酵母浸汁-孟加拉红肉汤ITC肉汤基础SSDC培养基DYS耶尔森菌琼脂亚硫酸钠琼脂龙胆紫血液琼脂基础溶血琼脂基础赫氏琼脂赫氏增菌液木糖-明胶培养基克氏双糖铁琼脂(KI)葡萄糖琼脂尿素琼脂基础(pH7.2)动力-吲哚-尿素(MIU)培养基基础MIO培养基LIM培养基V-P半固体琼脂（VP）西蒙氏柠檬酸盐琼脂Korser氏柠檬酸盐肉汤Hugh-Leifson培养基(O/F试验用)硝酸盐肉汤动力-硝酸盐培养基(A法)动力-硝酸盐培养基(B法)基础SIM动力培养基缓冲葡萄糖蛋白胨水培养基(MR-VP培养基) 赖氨酸脱羧酶试验培养基精氨酸双水解酶试验培养基鸟氨酸脱羧酶试验培养基氨基酸脱羧酶试验对照培养基硫酸亚铁琼脂明胶培养基(营养明胶培养基)蛋白胨水培养基糖发酵培养基基础氰化钾(KCN)培养基基础甘露醇发酵培养基醋酸铅培养基基础溴甲酚紫琼脂基础(糖发酵基础)溴甲酚紫肉汤基础Andrade氏糖类肉汤基础葡萄糖半固体琼脂丙二酸钠培养基淀粉培养基石蕊牛乳培养基PEA琼脂基础葡萄糖铵琼脂培养基赖氨酸铁琼脂(LIA)硝酸盐蛋白胨水培养基含0.6%酵母浸膏的胰酪胨大豆肉汤（TSB-YE 含0.6%酵母浸膏的胰酪胨大豆琼脂（TSA-YE 李氏增菌肉汤（LB1,LB2）基础PALCAM琼脂基础Fraser肉汤增菌液基础牛津琼脂（OXA）基础LPM琼脂基础LPM琼脂基础（含七叶苷与柠檬酸铁铵）改良牛津培养基（MOX）基础EB肉汤增菌液基础改良UVM增菌液基础缓冲李斯特氏菌增菌肉汤基础改良McBride琼脂基础（MMA）葡萄糖肉浸液肉汤匹克氏肉汤基础KF链球菌琼脂培养基（KF培养基基础）脑-心浸萃液态培养基脑-心浸萃琼脂培养基胆汁液态培养基叠氮化钠葡萄糖肉汤Pfizer肠球菌选择性琼脂（PSE琼脂）胆汁七叶苷琼脂肠球菌琼脂（胆汁七叶苷叠氮钠琼脂）肠球菌肉汤牛心汤肉汤培养基选择性牛心汤增菌培养基牛心汤琼脂Todd-Hewitt肉汤Todd-Hewitt琼脂CATC琼脂葡萄糖肉汤乙基紫叠氮钠肉汤6.5%氯化钠葡萄糖琼脂变异链球菌培养基轻唾琼脂培养基（MS）基础叠氮钠血琼脂基础Slanetz and?Bartley 培养基TYC培养基滤膜肠球菌琼脂改良爱德华培养基基础VRE肉汤基础VRE琼脂基础Amies运送培养基Cary-Blair氏运送培养基Stuart运送培养基Amies运送培养基(含活性碳)改良运送培养基pH7.2磷酸盐缓冲液无菌检验用洗脱液胰蛋白胨生理盐水溶液(TPS)氯化钠胰蛋白胨稀释液蛋白胨-盐溶液酪胨-大豆卵磷脂-吐温20液体培养基基础杜氏磷酸缓冲液杜氏磷酸缓冲液(不含钙、镁离子)pH7.4磷酸盐缓冲液(PBS)0.1%蛋白胨水培养基胆盐乳糖培养基(BL)乳糖胆盐发酵培养基曙红亚甲蓝琼脂培养基(EMB)麦康凯琼脂培养基(MacC)4-甲基伞形酮葡糖苷酸(MUG)培养基乳糖发酵培养基乳糖肉汤水合乳糖肉汤乳糖亚硫酸盐培养基月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤(LST)煌绿乳糖胆盐肉汤(BGLB)EC肉汤伊红美蓝琼脂(不含乳糖)去氧胆酸盐琼脂(DC)结晶紫中性红胆盐琼脂(VRBA)品红亚硫酸钠琼脂乳糖蛋白胨培养液亮绿乳糖胆盐培养基MFC琼脂MFC肉汤LB琼脂(Miller)LB肉汤(Miller)LB肉汤(Miller)LB肉汤(Lennox)LB琼脂(Lennox)双倍乳糖胆盐(含中和剂)培养基基础伊红美蓝琼脂(EMB)品红亚硫酸钠液体培养基无盐麦康凯琼脂麦康凯琼脂中国蓝琼脂MEE肉汤结晶紫中性红胆盐葡萄糖琼脂(VRBDA) Tergitol-7琼脂LES-Endo 琼脂现隐肉汤EEM培养基Endo培养基m-Endo肉汤麦康凯肌醇阿东醇羧苄青霉素琼脂(MIAC)基溴甲酚紫乳糖琼脂阴沟肠杆菌分离琼脂(ECIA)A1培养基亮绿胆盐琼脂乳糖TTC琼脂基础mTEC琼脂表面接触碟/表面接触皿乳糖肉汤培养基乳糖莫能霉素葡萄糖醛酸琼脂胰化大豆硫酸镁琼脂(TSAM)胰蛋白胨胆汁琼脂(TBA)Honda氏产毒肉汤基础Elek氏培养基月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤-MUG (LST-MUG) MUGal肉汤基础Aliz-gal琼脂哥伦比亚-MUG琼脂培养基缓冲MUG琼脂结晶紫中性红胆盐-4-甲基伞形酮-β-D-葡? EC-MUG培养基表面接触碟/表面接触皿MUG营养琼脂培养基(NA-MUG)MMO-MUG培养基改良EC肉汤(mEC+n)基础山梨醇麦康凯琼脂(CT-SMAC琼脂基础)麦康凯(MAC)肉汤(CT-MAC肉汤基础)改良胰蛋白胨大豆肉汤(mTSB)基础山梨醇麦康凯半固体培养基改良月桂基硫酸盐胰蛋白胨(mLST)肉汤基础结晶紫中性红胆盐葡萄糖琼脂(VRBGA) NZCYM肉汤NZYM肉汤Luria肉汤基础表面接触碟/表面接触皿Luria琼脂基础2×YT培养基M9低盐培养基（5倍浓缩）M9CA肉汤麦康凯琼脂基础低限肉汤（不含葡萄糖）低限琼脂SOC培养基SOB培养基极品肉汤（TB培养基）极品肉汤（TB培养基）选择性APS肉汤基础选择性APS超级肉汤基础SB肉汤SB琼脂表面接触碟/表面接触皿Bolton肉汤基础Bolton增菌培养基基础（含氯化血红素）Skirrow琼脂基础（改良Skirrow琼脂基础）改良CCD琼脂基础改良CCDA培养基基础布氏肉汤改良布氏肉汤培养基布氏琼脂Campy-Cefex 琼脂培养基基础(改良Campy-C 改良Camp-BAP琼脂基础肉浸液肉汤甘露醇卵黄多粘菌素琼脂基础(MYP) NGKG琼脂基础酪蛋白琼脂酚红葡萄糖肉汤表面接触碟/表面接触皿溶菌酶营养肉汤基础胰酪胨大豆多粘菌素肉汤基础嗜热脂肪杆菌恢复琼脂培养基TGY肉汤培养基TGY琼脂培养基芽孢杆菌培养基基础溴甲酚紫琼脂（BPA）锰盐营养琼脂改良亚硫酸盐琼脂葡萄糖胰蛋白胨琼脂DTA培养基葡萄糖蛋白胨琼脂（DT培养基,不含中和剂? BBL琼脂培养基（双歧杆菌琼脂培养基）PYG液体培养基基础TPY液体培养基TPY琼脂培养基双歧杆菌生化管用基础培养基双歧杆菌BS培养基BLB培养基基础TOS丙酸盐琼脂(TOS MUP培养基基础) MRS肉汤MRS培养基（改良MRS培养基基础）MRS培养基（不含葡萄糖）MRS培养基（改良MRS培养基基础）MC培养基（改良MC培养基基础）改良番茄汁琼脂培养基（改良TJA培养基）乳酸杆菌选择性琼脂（LBS琼脂）表面接触碟/表面接触皿乳酸杆菌选择性肉汤（LBS肉汤）M17琼脂M17琼脂M17肉汤M17肉汤APT琼脂APT肉汤Raka-Ray 3号培养基溴甲酚紫平板计数琼脂含糖牛肉汤培养基含糖牛肉汤琼脂培养基含糖牛肉汤琼脂培养基（含碳酸钙）LAMVAB琼脂基础BL琼脂基础BCG牛乳培养基LAPTg肉汤LAPT肉汤Rogosa SL肉汤Rogosa SL肉汤Rogosa SL琼脂乳酸杆菌琼脂培养基乳酸杆菌肉汤培养基Elliker肉汤Elliker琼脂RSMA培养基脱脂乳培养基酸性番茄培养基（ATB培养基）Middle Brook 7H10琼脂基础Middle Brook 7H11琼脂基础Middlebrook 7H9 肉汤基础Lowenstein-Jensen培养基基础酸性L-J培养基基础碱性L-J培养基基础酸性L-J培养基基础碱性L-J培养基基础改良罗氏培养基基础Dubos肉汤基础Dubos油酸琼脂基础小川氏培养基基础苏通液体培养基基础苏通琼脂培养基基础溶菌酶多粘菌素琼脂基础戊烷脒多粘菌素琼脂基础碳酸氢钠琼脂基础指示选择性培养基基础PLET琼脂基础双抗巧克力琼脂基础巧克力血琼脂培养基基础淋病奈瑟菌琼脂培养基基础淋病奈瑟菌增菌培养基基础Thayer-Martin 选择性琼脂基础GC肉汤基础GC培养基基础Martin-Lewis琼脂基础脑膜炎奈瑟氏菌糖发酵琼脂基础布氏肉汤布氏琼脂肝浸液培养基胰蛋白胨琼脂培养基布鲁氏菌培养基基础马铃薯浸出液琼脂胰蛋白月示肉汤亚硫酸铋琼脂培养基四硫磺酸钠亮绿培养基(TTB)基础沙门、志贺菌属琼脂培养基(SS)胆盐硫乳琼脂培养基(DHL)结晶紫中性红胆盐葡萄糖琼脂结晶紫中性红胆盐琼脂(含葡萄糖和乳糖) 肠道菌增菌肉汤(EE肉汤)连四硫酸盐肉汤培养基基础亮绿琼脂培养基木糖赖氨酸脱氧胆盐琼脂(XLD)HE琼脂培养基麦康凯琼脂麦康凯肉汤伊红美蓝琼脂RV沙氏增菌肉汤去氧胆酸盐柠檬酸盐琼脂SS琼脂RV R10肉汤RVS肉汤氯化镁孔雀绿增菌液(MM)志贺氏菌增菌肉汤基础GN增菌液沙门、志贺氏菌增菌培养基改良MSRV培养基亚利桑那菌琼脂(SA)WS琼脂亮绿酚红琼脂亮绿琼脂培养基改良亮绿琼脂培养基MKTTn肉汤基础Muller -Kauffmann四硫磺酸钠肉汤基础BPL琼脂BPLS琼脂改良BPLS琼脂DCLS琼脂煌绿磺胺嘧啶琼脂(BGS琼脂)SBG磺胺增菌液SBG肉汤EF-18琼脂基础亚硒酸盐肉汤(SF)M-肉汤XLT4琼脂亚硒酸盐胱氨酸培养基缓冲蛋白胨水(BPW)顶层培养基(Ames试验)底层培养基(Ames试验)四硫磺酸钠煌绿（TTB）增菌液亚硒酸盐胱氨酸（SC）增菌液K氏培养基基础YSG琼脂培养基基础阿须贝氏（Ashby）培养基根瘤菌培养基YM根瘤菌培养基Ⅱ基础硅酸盐细菌培养基固氮（茎瘤）根瘤菌培养基基础联合固氮菌培养基光合细菌培养基Ⅰ胱氨酸乳糖无电解质培养基（CLED）包姜氏琼脂培养基基础纤维素分解菌培养基（纤维素刚果红培养基幽门螺杆菌琼脂培养基基础碎肉培养基基础Tinsdale琼脂基础亚碲酸钾血琼脂基础吡哆醇Y培养基Korthof培养基基础EMJH培养基基础发根农杆菌培养基（YEB）发根农杆菌液体培养基APA培养基基础MSE琼脂STAA 琼脂基础三丁酸甘油酯琼脂基础TYM培养基基础PS琼脂真杆菌选择性琼脂基础氧化亚铁硫杆菌培养基碳琼脂基础果蝇培养基BAT琼脂BAT肉汤黄原胶液体发酵培养基（淀粉）黄原胶液体发酵培养基（蔗糖）黄原胶液体发酵培养基（葡萄糖）BYP琼脂培养基基础布氏菌疫苗液体培养基布氏活菌苗琼脂培养基鸡副嗜血杆菌疫苗培养基链球菌疫苗培养基猪丹毒疫苗培养基肺疫疫苗培养基马丁肉汤马丁琼脂仔猪副伤寒疫苗培养基改良Minca培养基基础鸡毒支原体疫苗培养基猪肺炎支原体培养基副猪嗜血杆菌疫苗培养基细菌总数显色培养基TBX显色培养基大肠杆菌/大肠菌群显色培养基大肠菌群显色培养基沙门氏菌显色培养基李斯特氏菌显色培养基弧菌显色培养基金黄色葡萄球菌显色培养基念珠菌显色培养基大肠埃希氏菌O157显色培养基阪崎肠杆菌显色培养基尿道感染显色培养基mEI琼脂肠球菌显色培养基大肠杆菌/大肠菌群液体显色培养基霉菌和酵母菌显色培养基志贺氏菌显色培养基蜡样芽胞杆菌显色培养基BCYE琼脂基础（BCYE鉴别琼脂基础）活性炭酵母琼脂(CYE)BCYE-Cys琼脂基础GVPC琼脂基础硝酸铁琼脂胰蛋白胨酵母浸粉肉汤无机盐淀粉琼脂甘油天门冬素琼脂基础酪氨酸琼脂培养基基础高氏合成一号琼脂培养基酵母膏-麦芽膏琼脂黄豆粉液体培养基黄豆粉琼脂培养基淀粉铵盐培养基淀粉酪蛋白琼脂（SCA）改良高氏合成一号液体培养基B12测试培养基B12琼脂培养基B12肉汤培养基生物素测定培养基维生素B12测定用培养基烟酸测定用培养基叶酸测定培养基泛酸测定培养基游离生物素测定培养基肌醇测定培养基溴化十六烷基三甲铵琼脂培养基绿脓菌素测定用培养基(PDP)基础溴十六烷三甲铵琼脂基础假单胞菌琼脂培养基F基础假单胞菌琼脂培养基P基础绿脓菌素测定培养基(PDP)基础十六烷基三甲基溴化铵培养基金氏B培养基NAC琼脂培养基NAC液体培养基乙酰胺肉汤乙酰胺琼脂假单胞菌琼脂培养基基础/CN琼脂基础假单胞菌CFC选择性培养基基础假单胞菌分离琼脂洋葱假单胞菌琼脂基础（PC）卵黄氯化钠琼脂培养基基础甘露醇氯化钠琼脂Baird-Parker琼脂培养基基础Vogel-Johnson琼脂基础甘露醇卵黄培养基基础兔血浆纤维蛋白原（RPF）琼脂培养基基础7.5%氯化钠肉汤10%氯化钠胰酪胨大豆肉汤10%氯化钠胰蛋白胨大豆肉汤蛋白胨氯化钠溶液Chapman琼脂培养基Chapman Stone琼脂培养基肠毒素产毒培养基（不含琼脂）葡萄球菌增菌肉汤基础葡萄球菌培养基110改良GC肉汤基础RSA筛选琼脂基础甲苯胺蓝-DNA琼脂DNA酶试验琼脂表面接触碟/表面接触皿含甲苯胺蓝的DNA酶试验琼脂含甲基绿的DNA酶试验琼脂改良马丁培养基改良马丁琼脂培养基玫瑰红钠琼脂培养基酵母浸出粉胨葡萄糖琼脂培养基(YPD)沙氏葡萄糖液体培养基沙氏葡萄糖琼脂培养基1%吐温80-玉米琼脂培养基基础1%吐温80-玉米琼脂培养基基础沙氏琼脂培养基(SDA)沙氏葡萄糖肉汤马铃薯葡萄糖琼脂马铃薯葡萄糖肉汤马铃薯葡萄糖肉汤马丁培养基孟加拉红培养基（虎红培养基）沙氏液体培养基（含氯霉素）沙氏琼脂培养基（含氯霉素）沙堡琼脂培养基沙堡液体培养基表面接触碟/表面接触皿TTC-沙保弱培养基沙氏脑心浸液琼脂基础马铃薯-葡萄糖-琼脂培养基（含氯霉素）马铃薯-葡萄糖-琼脂培养基（不含氯霉素）马铃薯葡萄糖琼脂表面接触碟/表面接触皿马铃薯葡萄糖半固体琼脂马铃薯葡萄糖半固体琼脂马铃薯蔗糖琼脂马铃薯蔗糖水麦芽汁琼脂基础麦芽汁肉汤麦芽浸膏汤麦芽汁琼脂培养基麦芽汁琼脂培养基（含氯霉素）Wort肉汤基础Wort琼脂基础MEA培养基MBB肉汤察氏琼脂察氏肉汤高盐察氏培养基霉菌琼脂培养基霉菌液体培养基霉菌液体培养基玉米粉琼脂WL营养肉汤WL营养琼脂（WL鉴别培养基基础）葡萄糖蛋白胨培养基（G.P）葡萄糖蛋白胨肉汤葡萄糖蛋白胨琼脂YM肉汤YM琼脂表面接触碟/表面接触皿产毒培养基酵母粉葡萄糖氯霉素琼脂（YGC）Candida Elective 琼脂DTM培养基基础DRBC培养基M-绿色酵母菌和霉菌肉汤Littman琼脂基础BIGGY琼脂BIGGY琼脂无菌试验用真菌培养基桔汁琼脂（OSA）桔汁肉汤（10倍浓缩）麦氏（Meclary）琼脂营养盐培养液营养盐琼脂培养基DG-18琼脂基础改良DG-18琼脂基础念珠菌BCG琼脂基础HC琼脂基础HC琼脂基础赖氨酸培养基（LYS）赖氨酸培养基（LYS）BMGY/BMMY培养基基础MMN培养基MMN琼脂酵母浸膏葡萄糖土霉素琼脂培养基基础OGY琼脂基础MYGP培养基基础植物胨酵母琼脂表面接触碟/表面接触皿植物胨酵母琼脂YPD琼脂YPD肉汤沙氏葡萄糖琼脂(含抗生素)麦芽浸粉琼脂培养基基础沙氏琼脂培养基（灌装生产用）燕麦琼脂BSM无机盐培养基基础PTM1（微量元素）咖啡酸琼脂（CAA）Leeming-Notman培养基基础橄榄油培养基基础硫乙醇酸盐流体培养基(FT)无菌硫乙醇酸盐流体培养基(FT)哥伦比亚琼脂培养基基础强化梭菌培养基梭菌增菌培养基硫乙醇酸盐流体培养基(不含琼脂)CW琼脂基础（不含卡那霉素）CW琼脂基础（含卡那霉素）卵黄琼脂培养基基础胰月示-亚硫酸盐-环丝氨酸（TSC）琼脂基? SC琼脂基础厌氧卵黄琼脂基础表面接触碟/表面接触皿CCFA琼脂基础梭杆菌选择性琼脂基础亚硫酸盐-多粘菌素-磺胺嘧啶(SPS)琼脂基?含铁牛奶培养基产芽孢肉汤多价蛋白胨-酵母膏（PY）培养基缓冲动力-硝酸盐培养基基础乳糖-明胶培养基亚硫酸铁琼脂胰蛋白胨葡萄糖酵母浸膏肉汤（TPGYT基础? 明胶磷酸盐缓冲液TSN琼脂TBB培养基强化梭菌鉴别琼脂（DRCA）梭菌鉴别琼脂（DCA）强化梭菌培养基（RCM）强化梭菌琼脂梭状芽孢杆菌计数琼脂庖肉培养基基础庖肉培养基基础改良FM琼脂TYA培养基基础硫乙醇酸盐培养基（Brewer）碎肉肉汤基础碎肉葡萄糖肉汤基础碎肉碳水化合物肉汤基础厌氧基础肉汤厌氧基础琼脂葡萄糖血琼脂基础（新霉素葡萄糖血琼脂基CDC厌氧菌琼脂基础AN厌氧琼脂基础AN厌氧肉汤基础拟杆菌胆汁七叶苷琼脂基础（BBE）拟杆菌琼脂BDS培养基GAM肉汤表面接触碟/表面接触皿GAM半固体培养基GAM半固体培养基（不含葡萄糖）GAM琼脂改良GAM肉汤基础改良GAM琼脂基础Wilkins-Chalgren厌氧菌琼脂Wilkins-Chalgren厌氧菌肉汤厌氧菌肉汤MIC苛养厌氧菌肉汤苛养厌氧菌琼脂普通啤酒琼脂（UBA培养基）改良NBB琼脂基础需氧-厌氧菌琼脂培养基厌氧菌琼脂Brewer厌氧菌琼脂厌氧肉肝汤培养基Schaedler琼脂Schaedler肉汤CHO培养基基础抗生素检定培养基Ⅰ号(低pH)(pH6.5-6.6) 抗生素检定培养基Ⅰ号(高pH)(pH7.8-8.0) 抗生素检定培养基Ⅱ号(低pH)(pH6.5-6.6) 抗生素检定培养基Ⅱ号(高pH)(pH7.8-8.0) 抗生素检定培养基Ⅲ号抗生素检定培养基Ⅳ号抗生素检定培养基Ⅴ号抗生素检定培养基Ⅵ号抗生素检定培养基Ⅶ号抗生素检定培养基Ⅷ号抗生素检定培养基Ⅸ号Mueller-Hinton 琼脂MH肉汤MH肉汤Ⅱ（阳离子调节）四环素族检定培养基AK琼脂2号HTM培养基基础溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨培养基Iso-Sensitest 琼脂Iso-Sensitest 肉汤药敏试验琼脂药敏试验肉汤抗生素检测用培养基Ⅱ抗生素培养基1号抗生素培养基2号抗生素培养基3号抗生素培养基4号抗生素培养基5号抗生素培养基8号抗生素培养基9号抗生素培养基10号抗生素培养基11号抗生素培养基12号抗生素培养基13号抗生素培养基19号抗生素培养基32号抗生素培养基34号抗生素培养基35号抗生素培养基36号抗生素培养基39号抗生素培养基40号抗生素培养基41号MS培养基MS培养基MS培养基（1/2蔗糖、不含琼脂）MS大量元素B5培养基H培养基MT培养基KC培养基GD基本培养基霍格兰氏营养液DCR培养基支原体肉汤培养基精氨酸支原体肉汤培养基支原体半流体培养基支原体琼脂培养基PPLO肉汤基础PPLO琼脂基础支原体肉汤基础（Frey）肺炎支原体肉汤基础解脲支原体肉汤基础解脲支原体琼脂基础TSATSAPTSAP（400万单位/L) TSAWLP TSAWLPPNANAPPCAR2ATSATSAPTSAWLP TSAWLPPTSAPTSASTTSALPTSAGTSAP80TSACNANAPR2ATSANAPCAR2ATSACTSALTHThNACNACTSAPTSASDASDAPSDASDAPSDASTSDALPSDAGSDAP80SDA玫瑰红钠琼脂玫瑰红钠琼脂Kovacs氏靛基质试剂脱纤维绵羊血革兰氏染色液芽孢染色液V-P试剂甲基红试剂硝酸盐还原试剂吲哚试剂瑞氏染色液姬姆萨染色液庆大霉素琼脂基础添加剂多粘菌素B（2.5万单位）25%纤维二糖溶液多粘菌素E多粘菌素B溶液氨苄青霉素溶液20%脱脂奶粉溶液CIN-1培养基基础添加剂ITC肉汤基础添加剂40%尿素溶液甘油10%醋酸铅溶液萘啶酮酸溶液吖啶黄溶液吖啶黄溶液萘啶酮酸溶液吖啶黄溶液多粘菌素B溶液头孢他啶溶液吖啶黄溶液萘啶酮酸溶液柠檬酸铁铵溶液吖啶黄溶液萘啶酮酸溶液多粘菌素E放线菌酮溶液吖啶黄溶液萘啶酮酸溶液拉氧头孢溶液β-苯乙醇吖啶黄溶液放线菌酮溶液吖啶黄溶液放线菌酮溶液1:800三氮化钠溶液0.05%TTC溶液羧苄青霉素溶液0.5%TTC溶液头孢磺啶溶液新生霉素储备液新生霉素储备液亚碲酸钾溶液头孢克肟溶液万古霉素溶液1%TTC溶液Bolton肉汤基础添加剂无菌裂解脱纤维绵羊血Bolton增菌培养基基础添加剂弯曲菌分离琼脂添加剂(头孢哌酮、两性霉? FBP溶液改良Skirrow琼脂基础添加剂改良CCDA培养基基础添加剂Campy-Cefex 琼脂培养基基础添加剂改良Campy-Cefex 琼脂培养基基础添加剂改良Camp-BAP琼脂基础添加剂A改良Camp-BAP琼脂基础添加剂B0.1%溶菌酶溶液胰酪胨大豆多粘菌素肉汤添加剂莫匹罗星锂盐储备液β-苯乙醇放线菌酮溶液吐温80L-半胱氨酸盐酸溶液10%乳糖溶液Middlebrook OADC增菌液Middlebrook ADC增菌液Dubos肉汤基础添加剂Dubos油酸琼脂基础添加剂多粘菌素B溶液双抗巧克力琼脂添加剂淋病奈瑟菌增菌培养基添加剂IsoVitaleX 添加剂V-C-N 抑菌剂三甲氧苄胺嘧啶乳酸盐布鲁氏菌选择性添加剂改良布鲁氏菌选择性添加剂碘溶液0.1%煌绿溶液新生霉素溶液。

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（分机）产品说明书Product Manual
【产品名称】
通用名称：四硫磺酸钠煌绿增菌液（或MKTTn 肉汤）配套试剂
英文名称：Additives for Tetrathionate Broth or MKTTn Broth 【产品编号与包装规格】
产品编号
产品类型包装规格SR0040液体2×5支/盒
【产品用途】
含碘液和煌绿，各1支同时添加于100mL （023030、023033、HCM013）中配成TTB 或MKTTn 肉汤。

【配方成分】
【使用方法】
1、西林瓶的打开方法:本西林瓶在铝盖上有箭头的标志，开启西林瓶前，用75%酒精棉消毒西林瓶表面，在无菌条件下，按铝盖上的箭头方向打开铝盖，撕开铝盖，打开西林瓶胶塞。

2、试剂的使用方法：碘液和煌绿各1支添加于100mL（023030、02303
3、HCM013）中配成TTB 或MKTTn 肉汤；在开盖后，未使用完请放回包装盒子内避光保存。

【储存条件与保质期】
2-8℃保存，有效期三年。

【废物处理】
检测之后带菌物品置于121℃下高压灭菌30分钟后处理。

【执行标准】
Q/HK 0709微生物检测配套试剂
【说明版本】
2019年5月14日。

山东省职业技能等级认定试卷农产品食品检验员技能等级认定三级技能考核试卷02备料单一、糖果中苯甲酸含量的检测（60分）（一）说明1.参照GB 5009.28-2016高效液相色谱法。

2.除非另有说明，所用试剂均为分析纯，水为GB/T 6682规定的一级水，所用仪器需校正。

（二）仪器、试剂准备1.亚铁氰化钾溶液（92g/L）：称取106g 亚铁氰化钾，加入适量水溶解，用水定容至1000mL2.乙酸锌溶液（183g/L）：称取220g 乙酸锌溶于少量水中，加入30mL 冰乙酸，用水定容至1000mL3.苯甲酸标准储备溶液(1000mg/L)：准确称取苯甲酸钠0.118g (精确到0.0001g)，用水溶解并分别定容至100mL。

于4℃贮存，保存期为6个月。

当使用苯甲酸标准品时，需要用甲醇溶解并定容4.塑料离心管：50mL5.分析天平：感量为0.001g 和0.0001g6.离心机：转速＞8000r/min7.恒温水浴锅8.恒温超声波发生器9.容量瓶：100mL、50mL、10mL10.吸量管：10mL、2mL11.移液管：25mL12.量筒：100mL13.洗瓶：500mL14.胶头滴管15.饮料样品16.高效液相色谱仪：配紫外检测器17.甲醇（CH 3OH）：色谱纯（备用试剂，根据考评要求使用）18.乙酸铵（CH 3COONH 4）：色谱纯（备用试剂，根据考评要求使用）19.甲酸（HCOOH）：色谱纯（备用试剂，根据考评要求使用）20.水相微孔滤膜：0.45μm（备用工具，根据考评要求使用）（三）考场准备1.考场整洁、卫生、明亮、符合考核要求；2.考位安排合理，考核方便；3.仪器、试剂存放合理并能满足考核用量；4.有符合安全要求的电源插座；5.上下水畅通。

二、鲮鱼罐头中沙门氏菌的检验（40分）（一）说明本试题检验方法，参考GB4789.4-2016沙门氏菌的检验。

（二）仪器、试剂准备1.待检样品：鲮鱼罐头2.已灭菌的内装缓冲蛋白胨（BPW）水（225ml）的锥形瓶3.四硫磺酸钠煌绿（TTB）增菌液4.亚硒酸盐胱氨酸（SC）增菌液5.亚硫酸铋（BS）琼脂6.木糖赖氨酸脱氧胆盐（XLD）琼脂7.三糖铁琼脂（TSI）试管斜面8.赖氨酸脱羧酶试验培养基9.75%酒精10.超净工作台11.培养箱12.冰箱13.恒温水浴锅14.酒精灯15.打火机16.镊子17.酒精棉球18.试管架19.洗耳球20.接种环21.接种针22.标签纸23.记号笔24.已灭菌的吸管（1mL、10mL）25.已灭菌的培养皿26.废液杯、废物杯27.按GB4789.4-2016方法准备的在BS琼脂、XLD琼脂平板上已接种培养好的沙门氏菌和其他用以鉴别的菌28.按GB4789.4-2016方法准备的已接种培养好的沙门氏菌和非沙门氏菌的三糖铁琼脂、赖氨酸脱羧酶试验培养基（三）考场准备1.考场整洁、卫生、明亮、符合考核要求。

显色培养基：大肠杆菌显色培养基 E.Coli Chromogenic Medium大肠菌群显色培养基Coliform Chromogenic Medium大肠杆菌/大肠菌群显色培养基 E.Coli/Coliform Chromogenic Medium 细菌总数显色培养基Total Genes Chromogenic MediumO157显色培养基O157 Chromogenic Medium沙门氏菌显色培养基Salmonella Chromogenic Medium李氏菌显色培养基Listera Chromogenic Medium金黄色葡萄球显色培养基Staphylococcus Chromogenic Medium霉菌和酵母菌显色培养基Mould and Yeast Chromogenic Medium弧菌显色培养基Vibrio Chromogenic Medium坂崎杆菌显色培养基Enterobacter sakazakii Chromogenic Medium常用检测培养基：平板计数琼脂(PCA)Plate Count Agar月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤(LST) Lauryl Sulfate Tryptose Broth 煌绿乳糖胆盐肉汤(BGLB) Brilliant Green Lactose Bile Broth EC 肉汤 E.Coli Broth伊红美蓝琼脂(EMB) Eosin-Methylene Blue Agar营养肉汤(NB) Nutrient Broth营养琼脂(NA) Nutrient Agar乳糖胆盐发酵培养基Lactose Bile Broth乳糖发酵培养基Lactose Broth结晶紫中性红胆盐琼脂(VRBA) Violet Red Bile Agar去氧胆酸盐琼脂Desoxycholate Lactose Agar肠道菌计数琼脂(VRBDA) Violet Red Bile Dextrose Agar肠道菌增菌肉汤(EE) Enterobacteria Enrichment Broth7.5%氯化钠肉汤7.5% Sodium Chloride BrothBaird-Parker琼脂基础Baird-Parker Agar Base胰蛋白胨大豆肉汤（TSB) Trypticase (Tryptic) Soy Broth胰蛋白胨大豆琼脂（TSA) Tryptose Soya Agar胰月示-亚硫酸盐-环丝氨酸琼脂基础(TSC)Tryptose Sulfite Cycloserine Agar Base 甘露醇卵黄多粘菌素琼脂基础(MYP)Mannitol-Egg-Yolk-Polymyxin Agar Base亚碲酸盐卵黄增菌液Egg-Yolk Tellurite Emulsion缓冲蛋白胨水(BPW) Buffered Peptone Water亚硒酸盐胱氨酸增菌液(SC) Selenite Cystine Broth四硫磺酸盐煌绿增菌液基础(TTB) Tetrathionate Broth Base胆硫乳琼脂(DHL) Deoxycholate Hydrogen Sulfide Lactose AgarSS 琼脂Salmonella Shigella Agar亚硫酸铋琼脂(BS) Bismuth Sulfite Agar亚利桑那菌琼脂(SA) Salmonella Arizona AgarHE 琼脂(HE) Hekton Enteric Agar三糖铁琼脂(TSI) Triple Sugar Iron Agar马铃薯葡萄糖琼脂(PDA) Potato Dextrose Agar高盐察氏琼脂Salt Czapek Dox Agar沙氏琼脂培养基Sabouraud’s Agar孟加拉红培养基Rose Bengal MediumYPD琼脂Yeast Peptone Dextrose Agar胰酪胨大豆多粘菌素肉汤基础Trypticase-Soy-Polymyxin Broth Base 酪蛋白琼脂Casein Agar产芽孢肉汤Sporulation Broth溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培养基Glucase Peptone Water Medium 李氏菌增菌肉汤(LB1,LB2)基础Listeria Enrichment Broth Base 半固体动力培养基Motility Test培养基基础：胰蛋白胨Tryptone酪蛋白胨Peptone from Casein植物(大豆)蛋白胨Peptone from soy月示胨Proteose peptone多价蛋白胨Polypeptone特殊蛋白胨Peptone Special牛心浸粉Beef Heart Infusion肝浸粉Liver Infusion牛肉浸粉Beef Extract Powder酵母浸粉Yeast Extract Powder酸水解酪蛋白Casein acid Hydrolysate 细菌琼脂粉Bacterial Agar牛胆盐Bile Salt。