肝糖原的提取鉴定
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肝糖原的提取鉴定
肝糖原是一种由多个葡萄糖分子组成的多聚物,主要储存在肝脏
细胞中,是机体维持血糖平衡的重要物质之一。
以下是肝糖原的提取
和鉴定方法:
提取肝糖原方法:
1. 取新鲜肝脏切成细小的碎片,放入0.5 mol/L HClO4(冰醋酸也可)中。
2. 在4°C下振荡24小时,然后离心提取上清液。
3. 上清液的pH值调节至中性,加入4倍体积的85%乙醇,混合
均匀并放置于-20°C冷藏过夜。
4. 离心沉淀,用冷酒精洗涤沉淀,干燥后即为纯净的肝糖原。
鉴定肝糖原方法:
1. 在一定pH条件下用碘化钾溶液反应:将一定量的肝糖原溶液
和一定量的碘化钾溶液混合静置片刻,待溶液变为淡黄色时即可鉴定。
如果混合产生的沉淀呈现棕色,则肝糖原的存在得到证明。
2. 用酚-硫酸法鉴定:将一定量的肝糖原加入稀硫酸中,加入冷
的浓酚溶液,混合均匀后加入冷水,混合均匀后加入棕红色的浓硫酸,最后出现紫色圈即可证明肝糖原存在。