实验五_RT-PCR(逆转录)

二 实验药品
模板RNA 模板RNA dNTP 随机引物 反转录酶AMV或 反转录酶AMV或M-MLV AMV 5×buffer Rnase Inhibitor
三 实验步聚
反转录体系 第一步： 第一步：
模板RNA 模板RNA dNTP 随机引物 DEPC水 DEPC水 70℃ 第二步： 第二步： 反转录酶AMV或 反转录酶AMV或M-MLV AMV 5×buffer Rnase Inhibitor DEPC水 DEPC水 37℃ 60min 0.5uL 5uL 0.2uL 9.3uL 95 ℃ 5min 4 ℃ 10min 2uL 2uL 2uL 4uL 5min 4 ℃ 10min
实验五 RT-PCR ---逆转录 ---逆转录
一 实验目的
掌握逆转录的基本原理和方法。 掌握逆Fra Baidu bibliotek录的基本原理和方法。
逆转录也称反转录，是某些生物（如鸡的肉瘤病毒、HIV等 逆转录也称反转录，是某些生物（如鸡的肉瘤病毒、HIV等）的特殊复制 方式。它们的遗传信息载体是RNA 而不是DNA 因此，在感染细胞时， DNA。 方式。它们的遗传信息载体是RNA 而不是DNA。因此，在感染细胞时，首先经 过逆转录作用成为双链DNA，才能整合到宿主基因组中去。 过逆转录作用成为双链DNA，才能整合到宿主基因组中去。 DNA 这个过程由逆转录酶催化，它具有以RNA为模板合成DNA。 这个过程由逆转录酶催化，它具有以RNA为模板合成DNA。 RNA为模板合成DNA 逆转录现象和逆转录酶是分子生物学研究中的重大发现，是对经典中心法则重 逆转录现象和逆转录酶是分子生物学研究中的重大发现， 要补充。 要补充。
混样制备
X（体积）×N(样本数）×1.1 体积） N(样本数） 样本数
混样制备
X（体积）×N(样本数）×1.1 体积） N(样本数） 样本数
四 实验结果
五 注意事项
防止污染 加样准确