马铃薯叶片原生质体的游离纯化

红薯叶中绿原酸的提取纯化工艺研究
针对红薯叶中绿原酸的提取纯化工艺研究，采用超临界流体技术（SFE）一般分为几个主要步骤：
一、组分分离
1.离子交换法：该方法是此研究的最常用技术，其原理是利用离子交换柱中的离子交换树脂来与分离物结合，以增加分离物的分离度。

2.原液离子交换法：该方法通过加入离子交换剂来实现对绿原酸的离子交换，通过改变溶液pH选择不同的离子交换型可以调整绿原酸的累积
情况，以增加提取的纯度。

二、精细提取
1.溶剂萃取技术：将溶剂混入灌流液中，控制溶剂的分离方式，从而提取绿原酸的高纯度。

2.超临界流体技术（SFE）：该技术可以大大改善分离物的分离度，并
可以有效选择各分子之间的竞争性萃取，这可以使膜的结构进一步精
细化。

三、纯化
1.液相色谱仪（HPLC）：通过液相色谱仪可以快速准确测定绿原酸的含量，从而可以控制和改善绿原酸的纯度。

2.凝胶纤维素电泳（GFC）：该方法可以有效地将绿原酸从杂质之中分离出来，通过调节电场和电压，可以有效地降低杂质的污染，从而达到浓缩绿原酸的目的。

四、稳定性
1.储存试验：储存条件是影响绿原酸的稳定性的重要因素，这需要在合理的温度、湿度和放置时间等条件下进行存储，保证储存品质稳定。

2.密封性检测：密封性检测是验证绿原酸的有效性的重要步骤，它可以防止绿原酸在储存过程中受到细菌、臭氧等污染，从而保证其长期有效。

以上就是红薯叶中绿原酸提取纯化工艺研究的概况，经过这些方法，可以获得纯净、高效的绿原酸，以达到研究的最终目的。

马铃薯组织培养前言：马铃薯组织培养的意义 .马铃薯（Solanum tuberosum）属茄科茄属植物! 常见的育种途径有: 常规二倍体杂交法,四倍体水平的品种间杂交法,远缘种间杂交法 ,2n配子利用法。

这些途径都是通过有性生殖产生马铃薯变异体，通过系谱，回交，轮回选择的方法，需经过6-8代选出附合目标性状的新个体。

进入 20世纪90年代后，随着生物技术的深入发展，人类对植物细胞遗传行为，基因表达传递行为达到分子水平深入了解，作物育种工作者开始引入了除单纯户外有性杂交育种之外，又一育种方法室内体细胞无性系变异育种法，其中组织培养（tissue culture）诱导再生植株的突变就是最常用的一种。

当马铃薯外植体（茎尖脱毒分生组织）培养时，由于组培环境引发了细胞异染色质 DNA延迟复制, 产生了较田间自然突变率高出500倍的大量变异。

这一现象已越来越被马铃薯育种工作者所认可，并成为一条马铃薯育种的有效途径。

现从组织培养及组织培养在马铃薯育种上的发展历史，研究意义，研究方式以及未来展望等方面逐一论述。

马铃薯的市场效益（为什么选马铃薯作试验材料）马铃薯是世界上仅次于小麦、水稻和玉米的第四种主要农作物就单位面积出产的干物质而言，它高于小麦、大麦和玉米，就单位面积出产的蛋白质而言，分别为小麦、水稻和玉米的2.02，1.33和1.20倍。

目前我国马铃薯常年种植面积为467万公顷左右，鲜薯年总产量5 500万吨，居世界第一位。

种植区域主要分布在黑龙江、吉林、内蒙古、山西、甘肃、青海、云南、贵州、四川等广大地区。

但是我国的马铃薯加工业发展十分缓慢，基本上以鲜食为主，少部分用于传统食品加工和制取粗淀粉，深加工产品很少，而且加工生产规模小，工艺落后。

20世纪90年代国内以马铃薯为原料的食品工业进入了一个蓬勃发展的时期然而产品与外同类产品相比，无论是在色泽、口味、品质，还是在包装上均存在一定差距。

马铃薯块茎水分多、脂肪少、单位体积的热量相当低，所含的维生素C是苹果的10倍，B族维生素是苹果的4倍，各种矿物质是苹果的几倍至几十倍不等，土豆是降血压食物膳食中某种营养多了或缺了可致病。

2.1 植物细胞工程的基本技术一、植物组织培养技术1.如图是植物组织培养的过程,相关说法错误的是()外植体愈伤组织长出丛芽生根移栽成活A.外植体若是月季的花粉,则经培养后获得的植株为单倍体B.过程①一般不需要光照,后续培养中每日需给予适当时间和强度的光照C.外植体若是菊花的根尖组织,因细胞中没有叶绿体,故培养成的新植株叶片为无色D.过程①和①接种的培养基中植物激素的比例不同2. 某生物兴趣小组成员以西瓜5天龄幼苗子叶为外植体进行相关实验研究,得到如图所示的实验结果。

下列相关叙述正确的是()A.实验开始前应对培养基和西瓜幼苗子叶进行灭菌处理B.西瓜幼苗子叶细胞脱分化形成愈伤组织的过程中细胞已经发生分化C.暗处理时间的长短对细胞脱分化率和再分化率的影响均不大D.图示结果表明,西瓜幼苗子叶经诱导形成胚状体的最适暗处理时间是1~2周3．下列关于细胞全能性的叙述，不正确的是()A．乳腺癌细胞易于进行离体培养，说明其全能性比较高B．细胞具有全能性是因为细胞内含有发育所需的全套遗传物质C．离体的植物体活细胞，需要借助某些因子的作用使其表达出全能性D．植物细胞具有全能性，而其他生物体细胞一般不具有全能性4. (2023·江苏南通高三期末) SOD是一种广泛分布于各种细胞中的抗氧化酶，它能催化超氧阴离子自由基形成H2O2，增强植物的抗逆性。

下图为培育能够产生SOD农作物新品种的一种方式，有关叙述正确的是()A．①过程中最常用的方法是采用Ca2＋处理法将SOD基因导入植物细胞B．②需要进行照光培养，以诱导叶绿素的形成C．③表示再分化过程，无需严格的无菌操作D．该育种方式利用了细胞工程和基因工程，能体现细胞的全能性二、植物体细胞杂交技术5.植物体细胞杂交过程中细胞融合的方式有对称融合和非对称融合。

对称融合是将两个物种的两个完整的原生质体融合在一起,由于两个物种的全套基因组合在一起,有用基因和不利基因共处于一个杂种植株中,往往需要多次回交才能去除杂种植株中的不利基因。

原生质体融合技术在马铃薯育种中的应用马铃薯作为一种重要的粮食作物，在我国种植面积和产量都有着很大的增长，但是由于其短周期内产生大量的病虫害和环境适应性差等问题，对其进行育种是非常必要的。

在传统的马铃薯育种中，主要采用的是人工杂交和改良选育等方法，但是这些方法存在着繁琐、耗时、成本高等问题。

近年来，原生质体融合技术的应用在马铃薯育种中引起了广泛关注。

原生质体融合技术是指将两个或多个细胞的原生质体融合在一起，使得它们的细胞核融合，形成新的细胞体系。

该技术具有克服杂交障碍、扩大基因来源、提高遗传多样性等优点。

在马铃薯育种中，原生质体融合技术主要应用于以下几个方面。

一、提高抗病性马铃薯是一种容易感染病毒的作物，其中最为严重的是马铃薯Y 病毒。

在传统育种中，提高马铃薯的抗病性是非常困难的。

但是通过原生质体融合技术，可以将具有抗病性的品种与感病性品种进行融合，从而产生具有抗病性的新品种。

例如，将具有良好的抗病性的野生马铃薯与普通马铃薯进行原生质体融合，可以获得具有更强的抗病性的新品种。

二、提高产量和品质通过原生质体融合技术，可以将不同品种的马铃薯进行融合，从而产生具有更高产量和更好品质的新品种。

例如，将产量高、品质好的马铃薯品种与耐病、耐旱的野生马铃薯进行原生质体融合，可以获得具有高产量和优质品质的新品种。

三、提高逆境适应性马铃薯在生长过程中面临着许多逆境，例如干旱、高温、低温等。

通过原生质体融合技术，可以将具有逆境适应性的野生马铃薯与普通马铃薯进行融合，从而产生具有更好逆境适应性的新品种。

例如，在干旱地区，将野生马铃薯的原生质体与普通马铃薯进行融合，可以获得具有更强抗旱能力的新品种。

总之，原生质体融合技术在马铃薯育种中具有广泛的应用前景。

通过该技术，可以克服传统育种的限制，提高马铃薯的产量和品质，提高其逆境适应性和抗病性，从而为马铃薯产业的发展提供更好的支持。

马铃薯花粉原生质体分离与培养马铃薯花粉原生质体分离与培养引言：马铃薯（Solanum tuberosum L.）是一种重要的食用作物，在全球范围内广泛种植。

它不仅具有高营养价值，还是许多经济作物的重要杂交亲本。

而马铃薯花粉原生质体是进行马铃薯杂交育种的重要材料，通过分离和培养马铃薯花粉原生质体，可以加快繁殖速度、提高经济效益和育种进程。

本文将介绍马铃薯花粉原生质体分离与培养的方法和应用。

一、马铃薯花粉原生质体分离与培养的原理马铃薯花粉原生质体是指从马铃薯花蕾中分离出的无性生殖细胞，经培养可形成植株新体。

花粉原生质体培养可以实现马铃薯杂交与育种过程中的快速繁殖。

其原理主要包括以下几个步骤：1. 花蕾采集：选择生长健壮、未开放的马铃薯花蕾，以确保获取高质量的花粉原生质体。

2. 花蕾表皮去除：将花蕾放入含有0.1%双氧水的去离子水中，在显微镜下使用无菌镊子轻轻去除外层表皮。

3. 花蕾细胞解离：将去除表皮后的花蕾放入含有酶解液的离心管中，用振荡器在适当温度下进行振荡，使花蕾细胞充分解离。

4. 细胞过滤：将解离的细胞通过滤网筛选，去除大颗粒杂质。

5. 原生质体提取：采用离心法将过滤后的细胞沉淀下来，去除上层液体，得到花粉原生质体。

6. 培养基配置：根据不同实验目的，配制适宜的培养基，包括无菌的培养基、添加适当激素的培养基等。

7. 培养条件：将提取到的花粉原生质体悬浮在培养基中，并置于恒温恒湿的培养箱中，为其提供合适的温度、光照和营养条件。

8. 原生质体分化：在培养基中，花粉原生质体将经历细胞壁合成、分裂增殖等过程，形成新的细胞团块或植株体。

二、马铃薯花粉原生质体培养的应用马铃薯花粉原生质体分离和培养技术在马铃薯育种中有广泛的应用价值。

1. 育种材料快速繁殖：通过花粉原生质体培养技术，可以大量繁殖育种中的良种，提高繁殖效率和育种速度。

2. 高效杂交：马铃薯育种中的杂交往往需要解决不同种类之间的亲和性问题，花粉原生质体培养技术可提供有效的方法，改善杂交效果。

原生质体融合技术在马铃薯育种中的应用原生质体融合技术是一种基因工程技术，可以将不同品种甚至不同属的植物原生质体融合，从而获得具有多种优良性状的杂种。

在马铃薯育种中，原生质体融合技术被广泛应用于基因转化、特定性状改良以及多倍体育种等方面。

1.基因转化。

利用原生质体融合技术，可以将具有抗病、抗旱、抗虫等优良性状的基因导入马铃薯，从而提高其抗逆性能。

这种技术不仅可以快速获取高抗性马铃薯，还可以避免传统育种中的基因杂交和后代筛选过程。

2.特定性状改良。

原生质体融合还可以通过将不同类型的马铃薯原生质体融合，获得具有多种特定性状的杂种。

例如，将高产量和耐旱性等性状融合在一起，可以获得既高产又抗旱的马铃薯品种。

3.多倍体育种。

原生质体融合技术还可以实现多倍体育种。

在马铃薯育种中，多倍体常常具有更大的叶片和块茎，更高的产量和抗逆性能。

因此，通过原生质体融合育种，可以获得更具发展前景的多倍体马铃薯品种。

总之，原生质体融合技术在马铃薯育种中的应用，可以提高马铃薯的抗病抗逆性能，改良特定性状，甚至获得更具发展前景的多倍体品种。

这种技术的应用将有助于加速马铃薯栽培的进程，提高马铃薯产量和品质，满足不断增长的全球食品需求。

第26卷第6期作　物　学　报V o l .26,N o .62000年11月A CTA A GRONOM I CA S I N I CAN ov .,2000提高马铃薯原生质体细胞分裂频率的研究X 李　韬X X 戴朝曦X X X(甘肃农业大学农业生物工程研究所,甘肃兰州,730070)提　要　为了提高马铃薯原生质体培养时的细胞分裂频率,对原生质体游离、纯化,培养过程中的几个重要环节进行了研究。

结果表明:以蔗糖作为渗透压调节剂游离原生质体时,原生质体的损伤小、活力好、分裂频率高、原生质体自发融合频率低;采用看护培养时,在同一属内,马铃薯物种的异同,饲养层愈伤组织与培养细胞的亲缘关系的远近,对饲养效果并无显著影响;进行单个原生质体培养时加入1.2%的马铃薯块茎浸提液可明显提高细胞分裂频率;酶的纯度也是影响原生质体游离效果的重要因素之一。

关键词　马铃薯;原生质体;细胞分裂频率Stud ies on I m prov i ng the Cell D iv ision Frequency of Pota to Protopla stsL I T ao DA I Chao 2X i(A g robiotechnology Institu te ,Gansu A g ricu ltu ral U niversity ,L anz hou ,730070)Abstract T he low cell divisi on frequency of the p ro top lasts is one of the m ain p rob lem s in po tato p ro top last m an i p u lati on .T he p resen t studies ai m ed at so lving the p rob lem .T he resu lts show ed that the p ro top lasts had good vigo r ,h igh cell divisi on frequency and low cell selffu si on frequency as w ell as less cell dam age frequency w hen sucro se w as u sed as o som o ticregu lato r du ring the iso lati on of p ro top lasts.U sing nu rse cu itu re system ,the cell divisi on frequency of p ro top lasts cou ld be increased bu t no sign ifican t effects cou ld be found from differen t po tato sp ecies and differen t b lood relati on sh i p to the cu ltu re resu lts .U sing single p ro top last cu ltu re system ,good resu lts w ere also ob tained w hen the 1.2%po tato tuber ex tracti on so lu ti on w as supp lied in to the m edium .T he p u rity of the enzym es u sed to iso late p ro top lasts w as also one of the i m po rtan t facto rs w h ich affect the yield and the vigo r ofp ro top lasts.Key words Po tato ;P ro top last ;Cell divisi on frequency马铃薯(S olanum tuberosum L .)是粮菜兼用型作物,原生质体的培养在遗传操作及育种研究中有着重要的意义,它既是体细胞融合与杂交的基础,同时也是获得体细胞变异的一个重要手段。

马铃薯叶肉细胞原生质体培养
赵颖君;祁新
【期刊名称】《吉林农业科学》
【年(卷),期】2000(025)003
【摘要】马铃薯叶肉细胞原生质体培养后，再生细胞形成细胞团和愈伤组织，愈
伤组织经ＭＳ＋２，４－Ｄ１．０ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ１．０ｍｇ／Ｌ＋ＺＴ０．５ｍｇ／Ｌ＋蔗糖２％继代后，移至分化培养基ＭＳ＋６－ＢＡ１．０ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ０．１ｍｇ／Ｌ＋ＺＴ１．０ｍｇ／Ｌ＋ＡＣ２ｇ／Ｌ＋蔗糖２％＋甘露醇１％分化效果较好，小植株在培养基ＭＳ＋ＮＡＡ１．０ｍｇ／Ｌ形成完整植株。

【总页数】1页(P18)
【作者】赵颖君;祁新
【作者单位】吉林农业大学农学院,吉林长春;吉林省农科院,吉林公主岭
【正文语种】中文
【中图分类】S532.035.3
【相关文献】
1.燕麦叶肉原生质体培养—再生细胞持续分裂形成小愈伤组织
2.马铃薯野生种叶肉原生质体培养及其植株再生(简报)
3.叶肉细胞原生质体培养再生植株变异的研究
4.二倍体马铃薯叶肉细胞原生质体培养的研究
5.烟草NC_(89)叶肉细胞原生质体培
养再生植株及影响因素的研究
因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。