3支原体属和脲原体属
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第17章支原体支原体(mycoplasma)是目前已知一类没有细胞壁能在无生命培养基上生长繁殖的最小的原核细胞型微生物。
因能形成有分枝的长丝,故称支原体。
特点:因缺乏细胞壁,呈高度的多形性,细胞膜含固醇,能通过0.45um滤菌器;以二分裂繁殖为主,含DNA与RNA两种核酸。
支原体过去曾称为类胸膜肺炎微生物(pleuropneumonia-like organism,PPLO),1967年正式定为支原体。
支原体的种类较多,在自然界的分布广泛,并各有特定的宿主,包括人、家畜、家禽及实验动物。
实验室用于组织培养的材料,常易被支原体污染给工作带来地定困难。
第一节概述支原体因其没有细胞壁故归属于柔膜体纲(Mollicute)的支原体目(Mycoplasmatales)3个科:①支原体科(Mycoplasmataceae),在支原体科中又分支原体(Mycoplasma)和脲原体(Ureaplama)2个属。
支原体属现知有64个种,而脲原体属仅2个种。
其中对人致病的主要为肺炎支原体(M.pneumoniae)、人型支原体(M.hominis)、生殖器支原体(M.genitalium)、穿透支原体(M.penetraus)和溶脲脲原体(U.urealyticum)。
②无胆甾原体科(Acholeplasma-taceae),生长时不需要外源性胆固醇。
③螺原体科(Spiroplasmataceae),生长至一定阶段呈螺形。
一、生物学性状体(一)形态与结构1.形态与大小:支原体的大小为0.2~0.3um,可通过滤菌器,常给细胞培养工作带来污染的麻烦。
无细胞壁,不能维持固定的形态而呈现多形性,呈球形、球杆形、长丝状及分支状等。
图17-12.革兰氏染色阴性,但不易着色,故常用Giemsa染色法将其染成淡紫色。
3.结构:支原体的细胞膜由三层结构组成,其中内、外层的主要成分是蛋白质,而中层为脂质。
脂质中胆固醇含量较多,约占36%,对保持细胞膜的完整性具有一定作用。
细胞培养中支原体污染的问题原体是一种大小介于细菌和病毒之间(最小直径0.2um)并独立生活的微生物.约有1%可通过滤菌器。
支原体无细胞壁形态呈高度多形性.可为圆形、丝状或梨形。
支原体形态多变,在光境下不易看清内部结构。
电镜下观察支原体膜为三层结构.其中央有电干密度大的密集颗粒群或丝状的中心束。
支原体多吸附或散在于细胞表面和细胞之间。
横断面与细胞微绒毛相似,但微绒毛电子密度比支原体小,且中央无颗粒群或中央束。
支原体代谢需固醇类物质、部分种类需要精氨酸、O 2或葡萄糖,每一种支原体都有自身持点。
多数支原体适合于偏碱条件下生存(PH7.6—8.0),对酸耐受性差。
对热比较敏感,对一般抗生素不敏感。
支原体污染细胞后.培养液可不发生混浊.多数情况下细胞病理变化轻微或不显著,细微变化也可由于传代、换液而缓解.因此易被忽视。
但个别严重者,可致细胞增殖缓慢.甚至从培养器皿脱落。
为确定有无支原体污染可做如下检酗:①相差显微境检测:将细胞按种于事先放置于培养瓶内的盖玻片上,24h后取出,用相差油镜观察.支原体呈暗色微小颗粒位于细胞表面和细胞之间。
②荧光染色法:荧光染色用能与DNA特异性结合的荧光染料Hoechst 33258,可使支原体内含有的DNA着色,染色后用荧光显微镜观察。
具体方法如下:首先将细胞接种盖玻片上,在细胞未长满前取出玻片,用不合酚红的Hanks液漂洗一下,用l:3醋酸甲酵固定10Min,然后用生理盐水漂洗.置于用生理盐水配浓度为50pg/ml的Hoechst 33258中染色10min。
染色后用蒸溜水洗1—2min.向细胞面滴加pH5.5磷酸缓冲液数滴,然后置荧光显微镜下观察。
镜下支原体为散在于细胞同围或附于细胞膜表面的亮绿色小点。
③电镜检查;用扫描电镜方法简便快速.也可以利用透射电镜。
④DNA分子条文检查或支原体培养等方法:检出率高.但方法较为复杂支原体是一类缺乏细胞壁的原核细胞型微生物,大小一般在0.3-0.5um之间,呈高度多形性,有球形、杆形、丝状、分枝状等多种形态。
医学基础知识重要考点支原体微生物学支原体是一类缺乏细胞壁、呈高度多形性、能通过除菌滤器、在无生命培养基中能生长繁殖的最小原核细胞微生物。
1.主要致病性支原体:
1)肺炎支原体:肺炎支原体是人类支原体肺炎的病原体。
支原体肺炎的病理改变以间质性肺炎为主,有时并发支气管肺炎,称为原发性非典型性肺炎。
2)解脲脲原体:脲原体属包括六个种,其中解脲脲原体与人类泌尿生殖道感染有密切关系。
3)人型支原体:人型支原体,人型支原体是支原体的一种,它存在于泌尿系和生殖器中,可以引起泌尿系的感染和生殖器的炎症
4)生殖支原体:除引起尿道炎外,且伴有抗体形成,并与前列腺炎、盆腔炎性疾病有关。
5)穿透支原体:1990年Lo从AIDS患者尿中分离到新的支原体,命名为穿通支原体,也称穿透支原体。
2.支原体与细菌L型的相同点:
1)结构:无细胞壁;
2)大小形态:高度多形性,能通过滤菌器;
3)培养特性:在无生命的培养基上能生长繁殖,形成油煎蛋样菌落;
4)抵抗力:对影响细胞壁的抗生素如青霉素等不敏感;
5)致病性:都具有致病性。
3.支原体与细菌L型的主要区别:
来源:中公卫生人才网。
螺旋体、支原体、衣原体、立克次氏体知识点一、螺旋体1.概念1)⼀类细长、柔软、弯曲呈螺旋状、利用细胞壁和细胞膜间的轴丝运动活泼的原核细胞型微⼀物2)基本结构与细菌相似,有细胞壁、原始核质,以二分裂方式繁殖;对抗生素等药物敏感2.螺旋体的科和属3.钩端螺旋体1)钩端螺旋体属⼀属钩端螺旋体科,简称钩体。
2)常⼀的有问号钩端螺旋体、双曲钩端螺旋体、亚历⼀⼀钩端螺旋体及其他13个新种。
3)代表菌种为问号钩端螺旋体4)形态结构a)螺旋盘绕细致⼀规则,形似细⼀珍珠排列的细链。
⼀端或两端呈钩状。
b)电镜下钩端螺旋体为圆柱状结构,由外向内依次为鞘膜、胞壁和浆膜。
鞘膜由脂多糖和蛋⼀质组成。
胞壁与浆膜之间有⼀根由两条轴丝扭成的中轴,位于菌体⼀侧。
钩端螺旋体是以整个圆柱形菌体缠绕中轴而成c)运动活泼,常呈C、S或8字型d)Fontana镀银染色法背景为淡棕色,钩端螺旋体染成棕褐色e)其胞壁成分与革兰阴性杆菌相似,革兰染色为阴性5)培养&抵抗力a)营养要求复杂,常用Korthof培养基b)适宜生长温度28~30°Cc)人工培养基生长缓慢,液体培养基中呈半透明云雾状生长。
d)水或湿土中可存活数周至数月。
e)对干燥、热、日光直射的抵抗力较弱,56 °C10min或60°C1min死亡6)抗原a)与分型有关的抗原存在于螺旋体表⼀的表⼀抗原(P抗原),为蛋⼀质多糖的复合物,具有型特异性,是钩端螺旋体分型的依据。
b)存在于螺旋体内部的内部抗原(S抗原),是类脂多糖复合物,具有属特异性,为钩端螺旋体分群的依据7)致病性a)致病物质●类似细菌内毒素与外毒素、内毒素样物质(ELS)或脂多糖样物质(LLS)●溶血素细胞毒性因子(CTF)●细胞致病作用(CPE)物质b)疾病后可获得抗同型钩体的持久免疫力,细胞免疫为主c)人兽共患:传播途径经破损⼀肤或粘膜进⼀d)进⼀⼀液⼀量繁殖,引起钩体败⼀症,随后钩体侵⼀肝、脾、肾、肺、⼀、淋巴结和中枢神经系统等组织器官,引起相关脏器和组织的损害和体征e)临床上常⼀流感伤寒型、⼀疸出⼀型、肺出⼀型。