DAPI染色封片剂

DAPI-抗荧光淬灭封片剂
产品编号：F-0045 规格：10ml
产品简介
DAPI即4',6-二脒基-2-苯基吲哚(4',6-diamidino-2-phenylindole)，它能与DNA结合，在紫外光下可观察到蓝色荧光，最大吸收波长为358nm，最大发射波长为461nm。

使用范围
本产品为即用型工作液，无须稀释，直接用于FISH、IF、TUNEL等细胞核的荧光染色。

储存条件
-20℃，避光
本产品需要严格避光，可放于铝饭盒中或用锡纸包裹。

本产品为淡黄色粘稠液体，由于其中的抗荧光淬灭成分会吸收光，使用时间长后，液体会慢慢变深，最终为变为深褐色时，请勿使用。

使用方法
FISH
杂交结束，标本经过洗液洗涤、再经梯度酒精脱水、干燥，直接在标本上滴加10～20μl DAPI，加上盖玻片，室温下，大约20分钟后可观察荧光。

IF
孵育二抗结束，PBS洗涤后，直接在标本上滴加10～20μl DAPI，加上盖玻片，避光，室温下，大约20分钟后可观察荧光。

注意：
本产品含有甘油、抗荧光淬灭剂，也具备封片作用，在细胞核染色后，无须清洗，可减缓荧光淬灭，在严格避光情况下，4℃保存一周，荧光仍不会淬灭。

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广州市外显子生物技术有限公司
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DAPI染色1．原理DAPI为4’，6二脒基-2-苯吲哚(4’，6—diamidino-2—phenylindole)能与双链DNA小槽，特别是AT碱基结合，也可插入少于3个连续AT碱基对的DNA序列中。

当它与双链DNA结合时，荧光强度增强20倍，而与单链DNA结合则无荧光增强现象，因此是一种简易、快速和敏感地检测DNA的方法。

DAPI的荧光强度虽较Hoechst低，但荧光稳定性优于Hoechst；其特异性较溴化乙啶(ethidlium bromide，EB)和碘化丙啶(propidium iodide，P1)高。

2．溶液配制(1)0．01mol／L PBS(pH7．0)：取0．1mol／L NaH2PO4·H2O 34ml、0．1mol／LNa2HPO4 66ml、NaCl 0．9g，溶于900m1双蒸水；(2)DAPI储存液：将0．5mgDAPI溶于5．0ml PBS中，分装，低温长期保存；(3)DAPI工作液：用PBS稀释DAPI储存液，终浓度为0．1ug／ml。

3．染色程序(1)培养的单层细胞(未固定)或新鲜组织的冰冻切片等，PBS漂洗5分钟；(2)DAPI工作液室温染色5～20分钟(可根据实验材料的染色结果而定)；(3)PBS漂洗；(4)水溶性封片剂封片，游离细胞也可直接用含DAPI的PBS封片；(5)荧光显微镜观察。

结果：正常的细胞核呈强荧光，细胞质无荧光；固定的组织细胞同样处理，亦可得到相似的染色结果。

在有支原体污染的细胞质和细胞表面可见孤立的点状荧光，在感染痘苗病毒的细胞质中存在独特的“星状”荧光簇(star-like fluorescent clusters)，腺病毒感染早期胞质中也可出现荧光。

DAPI分子式C16H17Cl2N5 分子量350.25 性质 1. 外观黄色粉末2. 纯度≥95%HPLC3. 产品描述DAPI是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料。

和双链DNA结合后可以产生比DAPI自身强20多倍的荧光。

DAPI (4',6-diamidino-2-phenylindole)的配
制
贮存液：70%酒精溶解，浓度100 μg/ml，配好后用锡纸包起来，避光，可在4摄氏度下长期保存。

使用浓度：贮存液用1xPBS稀释1000倍，最终浓度100 ng/ml。

10x PBS的配制
80 g NaCl
2 g KCl
6.1 g 无水Na2HPO4
2 g 无水KH2PO4
加水到1000ml
贮存液可根据需要用蒸馏水稀释
荧光封片液
0.5 mol/L碳酸盐缓冲液与甘油等体积混合，pH9.5
染色与观察：
制好的玻片上滴加几滴DAPI染液，染色10分钟，流水冲去染液，滤纸吸除多余水分，加一滴荧光封片液，置于荧光显微镜下观察，激发波长360-400nm.
注意事项：
DAPI可能具有致癌性，全部操作过程中必须带塑料或乳胶手套。

上：正常绍鸭成纤维细胞核，下：凋亡核。

dapi染色方法
DAPI染色方法是一种常用的细胞核染色方法，它可以用于检测DNA含量、核型分析、染色体计数和核型鉴定等方面。

DAPI染色方法的原理是利用DAPI（4',6-diamidino-2-phenylindole）这种荧光染料，它可以与DNA结合，使DNA发出蓝色荧光，从而实现对细胞核的染色。

DAPI染色方法的步骤如下：
1.将细胞固定在载玻片上，可以使用甲醛、乙醛、乙醇等固定剂进行固定。

2.用PBS（磷酸盐缓冲液）或者其他缓冲液进行洗涤，去除细胞表面的蛋白质和其他杂质。

3.将DAPI染料加入到载玻片上，使其与细胞核中的DNA结合。

4.在黑暗中孵育10-15分钟，使DAPI染料充分结合到DNA上。

5.用PBS或其他缓冲液进行洗涤，去除未结合的DAPI染料。

6.在显微镜下观察细胞核的荧光信号，可以使用荧光显微镜或者激光共聚焦显微镜进行观察。

DAPI染色方法的优点是可以快速、简单地染色，同时可以同时检测多个样本。

此外，DAPI染色方法还可以与其他荧光染料结合使用，
如FITC、TRITC等，从而实现多重染色，提高检测的准确性和灵敏度。

但是，DAPI染色方法也存在一些缺点，如DAPI染料对细胞有毒性，需要控制染色时间和浓度，避免对细胞造成伤害。

此外，DAPI染色方法只能检测DNA含量和核型分析等方面，不能检测其他细胞器和分子的信息。

DAPI染色方法是一种常用的细胞核染色方法，具有快速、简单、灵敏等优点，可以用于多种细胞学研究和临床检测中。

DAPI染DNA的原理及使用方法DAPI 即4',6-二脒基-2-苯基吲哚(4',6-diamidino-2-phenylindole)，分子式为C16H15N5·2C3H6O3，分子量457.48。

DAPI是一种能够与DNA强力结合的荧光染料。

它结合到双链DNA小沟的AT碱基对处，一个DAPI分子可以占据三个碱基对的位置。

结合到双链DNA上DAPI 分子的荧光强度提高大约20倍，常用与荧光显微镜观测，根据荧光的强度可以确定DNA的量。

另外，因为DAPI可以透过完整的细胞膜，它可以用于活细胞和固定细胞的染色。

在荧光显微镜观察下，DAPI染剂是利用紫外光波长的光线激发。

单独DAPI的最大吸收波长为340nm，最大发射波长为488nm；当DAPI与双链DNA结合时，最大吸收波长为364nm，最大发射波长为454nm（10 mM Tris pH7.0，100 mM N aCl，10 mM EDTA），其发散光的波长范围含盖了蓝色至青绿色。

DAPI也可以和RNA结合，但产生的荧光强度只有与DNA结合的荧光强度的1/5，其发散光的波长范围约在500nm左右。

DAPI的配制及贮存固体粉末：避光，2-8 ℃保存，3年没有问题。

贮存液：用无菌水配制成浓度1 mg/ml的贮存液，配好后用锡纸包起来，避光，可在-20 ℃下长期保存。

（DAPI易溶于水，在PBS中溶解度不高）使用浓度：贮存液用1xPBS稀释到终浓度100 ng/ml。

荧光封片液：0.5 mol/L碳酸盐缓冲液与甘油等体积混合，pH9.5染色与观察：制好的玻片上滴加几滴DAPI染液，染色10分钟，流水冲去染液，滤纸吸除多余水分，加一滴荧光封片液，置于荧光显微镜下观察，激发波长360-400nm。

注意事项：DAPI可能具有致癌性，全部操作过程中必须带塑料或乳胶手套。

推荐厂商：Invitrogen，Sigma资料下载：点击下载结构式：DAPI结构式DAPI与DNA的复合物晶体结构以下英文介绍摘自Wikipedia。

DAPI即4',6-二脒基-2-苯基吲哚(4',6-diamidino-2-phenylindole)，是一种能够与DNA强力结合的荧光染料，常用与荧光显微镜观测1。

因为DAPI可以透过完整的细胞膜，它可以用于活细胞和固定细胞的染色。

DAPI - 染色机理DAPI 为一种荧光染料，可以穿透细胞膜与细胞核中的双链DNA结合而发挥标记的作用，可以产生比DAPI自身强20多倍的荧光，和EB相比，对双链DNA的染色灵敏度要高很多倍。

显微镜下可以看到显蓝色荧光的细胞，荧光显微镜观察细胞标记的效率高(几乎为100 %) ，且对活细胞无毒副作用。

DAPI染色常用于细胞凋亡检测，染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。

DAPI也常用于普通的细胞核染色以及某些特定情况下的双链DNA染色。

细胞经热激处理后用DAPI染色3分钟，在荧光显微镜下可以看到到细胞核的形态变化。

a、正常的烟草细胞核：核形完整，染色质均匀。

b、染色质固缩，向外周聚集，形成周边化。

c、染色质进一步固缩，形成很多颗粒物质。

d、细胞核破裂形成碎片，核解体。

DAPI的发散光为蓝色，且DAPI和绿色荧光蛋白(Green fluorescent protein, GFP)或Texas Red染剂(红色荧光染剂)的发散波长，仅有少部分重叠，研究员可以善用这项特性在单一的样品上进行多重荧光染色。

DAPI能快速进入活细胞中与DNA结合，因此DAPI对生物体而言，也被视为一种毒性物质与致癌物。

使用过程中应注意操作与抛弃的处理程序。

在细胞移植前，将DAPI 以一定的浓度加入培养基中，与细胞共同孵育过夜，用PBS 缓冲液漂洗至少6 次以洗掉未结合的DAPI，在用酶消化后离心收集细胞，加入DMEM培养基制成细胞悬液以备用。

储存条件-20℃避光保存1、DAPI强烈致癌，操作时要戴上手套。

2、贮存液用70%酒精配制，浓度100 µg/ml，可用黑纸包住，长期冻存。

抗荧光淬灭封片剂配方一、简介抗荧光淬灭封片剂是一种用于荧光显微镜下观察细胞的试剂。

在荧光显微镜下，由于荧光分子的不可逆性猝灭作用，会导致样品中的荧光信号逐渐减弱或消失，影响观察效果。

抗荧光淬灭封片剂可以有效地减轻这种猝灭作用，提高样品中荧光信号的稳定性和持久性。

二、配方1. PVA（聚乙烯醇）：PVA是本试剂的主要成分之一，在封片剂中起到增稠、降低表面张力、防止气泡生成等作用。

常见的PVA型号有17-88和10-98两种，前者的粘度较低，后者较高。

2. Glycerol（甘油）：甘油是一种具有保湿性质的化合物，在本试剂中起到保持细胞膜完整性、减少蒸发和挥发等作用。

3. DABCO（1,4-二氨基环己烷）：DABCO是一种具有活性氮原子的化合物，在本试剂中起到抗荧光淬灭的作用。

它可以与氧气、水和其他有机分子形成复合物，从而减少荧光分子的不可逆性猝灭作用。

4. PBS（磷酸盐缓冲液）：PBS是一种缓冲液，可以调节试剂的pH 值，使其适合于细胞生长和显微镜观察。

5. DAPI（4',6-二氨基-2-苯基吡啶）：DAPI是一种DNA染料，在本试剂中起到标记细胞核的作用。

它可以与DNA结合，发出蓝色荧光。

6. Mounting medium（封片剂）：封片剂是一种用于固定细胞和显微镜观察的介质。

常见的封片剂有DABCO、Vectashield等。

三、制备方法1. 加入PVA：将适量的PVA加入PBS中，并在50℃下搅拌至完全溶解。

2. 加入甘油：将适量的甘油加入PVA溶液中，并搅拌至均匀混合。

3. 加入DABCO：将适量的DABCO加入甘油-PVA溶液中，并搅拌至均匀混合。

4. 加入DAPI：将适量的DAPI加入甘油-PVA-DABCO溶液中，并搅拌至均匀混合。

5. 制备封片：将制备好的样品滴在载玻片上，加入适量的封片剂，然后用盖玻片覆盖。

最后用胶水固定盖玻片。

四、注意事项1. 避免过度搅拌：过度搅拌会使PVA分子链断裂，导致溶液黏度降低。

DAPI染DNA的原理及使用方法DAPI 即4',6-二脒基-2-苯基吲哚(4',6-diamidino-2-phenylindole)，分子式为C16H15N5·2C3H6O3，分子量457.48。

DAPI是一种能够与DNA强力结合的荧光染料。

它结合到双链DNA小沟的AT碱基对处，一个DAPI分子可以占据三个碱基对的位置。

结合到双链DNA上DAPI分子的荧光强度提高大约20倍，常用与荧光显微镜观测，根据荧光的强度可以确定DNA的量。

另外，因为DAPI可以透过完整的细胞膜，它可以用于活细胞和固定细胞的染色。

在荧光显微镜观察下，DAPI染剂是利用紫外光波长的光线激发。

单独DAPI的最大吸收波长为340nm，最大发射波长为488nm；当DAPI与双链DNA结合时，最大吸收波长为364nm，最大发射波长为454nm（10 mM Tris pH7.0，100 mM NaCl，10 mM EDTA），其发散光的波长范围含盖了蓝色至青绿色。

DAPI也可以和RNA 结合，但产生的荧光强度只有与DNA结合的荧光强度的1/5，其发散光的波长范围约在500nm左右。

DAPI的配制及贮存固体粉末：避光，2-8 ℃保存，3年没有问题。

贮存液：用无菌水配制成浓度1 mg/ml的贮存液，配好后用锡纸包起来，避光，可在-20 ℃下长期保存。

（DAPI易溶于水，在PBS中溶解度不高）使用浓度：贮存液用1xPBS稀释到终浓度100 ng/ml。

荧光封片液：0.5 mol/L碳酸盐缓冲液与甘油等体积混合，pH9.5染色与观察：制好的玻片上滴加几滴DAPI染液，染色10分钟，流水冲去染液，滤纸吸除多余水分，加一滴荧光封片液，置于荧光显微镜下观察，激发波长360 -400nm。

注意事项：DAPI可能具有致癌性，全部操作过程中必须带塑料或乳胶手套。

推荐厂商：Invitrogen，Sigma资料下载：点击下载结构式：DAPI结构式DAPI与DNA的复合物晶体结构以下英文介绍摘自Wikipedia。

抗荧光衰减封片剂（含DAPI）使用说明货号：S2110规格：5ml/25ml保存：-20℃保存，一年有效。

产品简介：抗荧光衰减封片剂是一种用于减缓荧光衰减的封片试剂。

以甘油为基础，加入抗荧光衰减剂，有强烈的抗荧光衰减作用，用于对荧光组织和细胞样品的封片。

封片后，样品4℃或者-20℃避光可保存2-3周。

本试剂操作简单，在封片时用移液枪滴一滴抗荧光衰减封片液，盖上盖玻片就可以了。

抗荧光衰减封片剂内含DAPI即4',6-二脒基-2-苯基吲哚(4',6-diamidino-2-phenylindole)，是一种能够与DNA强力结合的荧光染料，常用与荧光显微镜观测。

因为DAPI可以透过完整的细胞膜，它可以用于活细胞和固定细胞的染色，显微镜下可以看到显蓝色荧光的细胞。

DAPI和双链DNA结合后，最大激发波长为360nm，最大发射波长为460nm。

使用说明：使用前平衡至室温。

1.贴壁细胞样品：A.染色完毕后，吸尽液体。

B.滴一滴(20-50ul)抗荧光衰减封片液于载玻片上，盖上贴有细胞的盖玻片，让细胞接触封片液，尽量避免气泡。

C.随后即可通过荧光显微镜观察样品。

2.组织切片：A.染色完毕后，吸尽液体。

B.滴一滴(20-50ul)抗荧光衰减封片液于组织切片上，盖上盖玻片，让切片接触封片液，尽量避免气泡。

C.随后即可通过荧光显微镜观察样品。

3.其它样品：其它样品参考细胞样品或组织切片进行操作。

注意事项：1.荧光物质均易发生衰减，染色后的样品宜避光保存。

2.在使用抗衰减封片液的情况下可以减缓衰减，但仍宜尽量避光和尽早拍照。

3.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

相关试剂：P11128%多聚甲醛P11104%多聚甲醛P210010×多聚赖氨酸A1840荧光抗体稀释液SF8羊抗兔IgG-FITC。

甲醛固定细胞的dapi染色流程下载提示：该文档是本店铺精心编制而成的，希望大家下载后，能够帮助大家解决实际问题。

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人体口腔上皮细胞临时装片制作
第一步：收集样本
首先，要准备所需的工具和材料，包括棉签、生理盐水、载玻片、滴管、显微镜等。

然后，用棉签轻轻擦拭口腔内壁、舌头以及其他口腔黏膜部位，将这些样本擦拭到载玻片上。

第二步：制作装片
将收集到的样本涂布均匀，不要过于密集或稀疏，以免影响观察。

然后，将装片放置在通风处晾干，直至样本完全干燥。

第三步：染色
完成装片的制作后，可以进行染色处理，以增强细胞的对比度，便于观察和分析。

常用的染色方法有吉姆萨染色法和细胞膜染色法。

吉姆萨染色法将样本浸泡在甲醇中，然后使用伊红染色液染色，最后用甲醇漂洗。

细胞膜染色法则使用DAPI染色，将样本浸泡在DAPI染色液中，然后用PBS漂洗。

第四步：封片
染色完成后，需要将装片封闭，以保护样本并防止样本变干。

使用封片胶或封片剂将装片周围封闭。

第五步：观察和分析
将封片放置于显微镜下，使用合适的镜头和调焦，观察样本的细胞形态和结构。

可以根据需要进行拍照或录像，以便后续分析和记录。

通过观察和分析口腔上皮细胞临时装片，可以研究口腔黏膜的健康状况、病变情况以及细胞的形态和结构等，为口腔疾病的诊断和治疗提供重要的参考。

总结起来，人体口腔上皮细胞临时装片制作主要包括收集样本、制作装片、染色、封片、观察和分析。

这是一项简单而重要的实验技术，可以在研究和诊断口腔疾病方面发挥重要作用。

dapi染色原理DAPI染色原理。

DAPI（4',6-diamidino-2-phenylindole）是一种广泛应用于细胞生物学和生物医学研究中的荧光染色剂，主要用于DNA的染色。

DAPI染色原理基于其与DNA结合的特性，使得DNA在荧光显微镜下呈现出蓝色荧光。

下面将详细介绍DAPI染色的原理及其在实验中的应用。

DAPI是一种紫外光激发的荧光染色剂，其最大激发波长为358纳米，最大发射波长为461纳米。

在细胞实验中，DAPI通常与细胞固定剂一起使用，如乙醇或甲醛，以固定并渗透细胞膜，使得DAPI能够进入细胞内部并结合DNA。

DAPI与DNA结合后，由于其特异性和高亲和力，能够发出强烈的蓝色荧光，从而使得细胞核在荧光显微镜下清晰可见。

DAPI染色的原理主要基于其与DNA的结合。

DAPI是一种双腺嘌呤类似物，其分子结构中含有两个氨基苯基吲哚环，这些结构使得DAPI能够通过π-π堆积和氢键相互作用与DNA中的腺嘌呤和胞嘧啶结合。

在细胞实验中，DAPI能够与DNA的碱基对结合，形成稳定的DAPI-DNA复合物，从而实现对DNA的高度选择性染色。

由于DAPI与DNA的特异性结合，因此在细胞实验中被广泛应用于DNA染色和细胞核标记。

在免疫荧光染色实验中，DAPI通常与抗体共染色，用于观察细胞核的位置和形态。

此外，DAPI还可用于细胞凋亡的检测，因为在凋亡过程中，细胞核会出现形态上的改变，DAPI染色能够清晰地显示这些变化。

在细胞遗传学研究中，DAPI也被用于观察染色体的数量和形态。

总之，DAPI染色原理是基于其与DNA的特异性结合，使得DNA在荧光显微镜下呈现出蓝色荧光。

由于其高度选择性和特异性，DAPI在细胞生物学和生物医学研究中得到了广泛的应用，成为了观察DNA和细胞核的重要工具。

希望本文对DAPI染色原理有所帮助，谢谢阅读！。

DAPI染DNA的原理及使用方法DAPI 即4',6-二脒基-2-苯基吲哚(4',6-diamidino-2-phenylindole)，分子式为C16H15N5·2C3H6O3，分子量457.48。

DAPI是一种能够与DNA强力结合的荧光染料。

它结合到双链DNA小沟的AT碱基对处，一个DAPI分子可以占据三个碱基对的位置。

结合到双链DNA上DAPI 分子的荧光强度提高大约20倍，常用与荧光显微镜观测，根据荧光的强度可以确定DNA的量。

另外，因为DAPI可以透过完整的细胞膜，它可以用于活细胞和固定细胞的染色。

在荧光显微镜观察下，DAPI染剂是利用紫外光波长的光线激发。

单独DAPI的最大吸收波长为340nm，最大发射波长为488nm；当DAPI与双链DNA结合时，最大吸收波长为364nm，最大发射波长为454nm（10 mM Tris pH7.0，100 mM N aCl，10 mM EDTA），其发散光的波长范围含盖了蓝色至青绿色。

DAPI也可以和RNA结合，但产生的荧光强度只有与DNA结合的荧光强度的1/5，其发散光的波长范围约在500nm左右。

DAPI的配制及贮存固体粉末：避光，2-8 ℃保存，3年没有问题。

贮存液：用无菌水配制成浓度1 mg/ml的贮存液，配好后用锡纸包起来，避光，可在-20 ℃下长期保存。

（DAPI易溶于水，在PBS中溶解度不高）使用浓度：贮存液用1xPBS稀释到终浓度100 ng/ml。

荧光封片液：0.5 mol/L碳酸盐缓冲液与甘油等体积混合，pH9.5染色与观察：制好的玻片上滴加几滴DAPI染液，染色10分钟，流水冲去染液，滤纸吸除多余水分，加一滴荧光封片液，置于荧光显微镜下观察，激发波长360-400nm。

注意事项：DAPI可能具有致癌性，全部操作过程中必须带塑料或乳胶手套。

推荐厂商：Invitrogen，Sigma资料下载：点击下载结构式：DAPI结构式DAPI与DNA的复合物晶体结构以下英文介绍摘自Wikipedia。

DAPI 染色液(5ug/ml,含封片剂)简介：DAPI 染色液(DAPI Staining Solution)是适用于常见细胞和组织细胞核染色的染色液。

DAPI ，即2-(4-Amidinophenyl)-6-indolecarbamidine dihydrochloride ，也称DAPI dihydrochloride ，分子式为C 16H 15N 5·2HCl ，分子量为350.25，是可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料，和双链DNA 结合后可以产生比DAPI 自身强20多倍的荧光，灵敏度高于EB 。

DAPI 染色常用于细胞凋亡检测，染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。

DAPI 也常用于普通的细胞核染色以及某些特定情况下的双链DNA 染色。

DAPI 的最大激发波长为，最大发射波长为，DAPI 和双链DNA 结合后，最大激发波长为，最大发射波长为。

Leagene DAPI 染色液(5ug/ml,含封片剂)可以直接用于固定细胞或组织的细胞核染色，亦可以根据实验具体要求，稀释到相应浓度后进展染色，无需单独封片步骤。

一般推荐工作浓度。

组成：自备材料：1、 荧光显微镜2、 蒸馏水3、 微量移液器4、 PBS 或生理盐水操作步骤(仅供参考)：1、对于细胞或组织样品，固定后冲洗去除固定剂。

如果需要进展免疫荧光染色，那么先进展免疫荧光染色，染色完毕后再按后续步骤进展DAPI 染色，如果不需要进展其它染色，那么直接进展后续的DAPI 染色。

对于贴壁细胞或组织切片，参加少量DAPI 染色液(5ug/ml,含封片剂)，覆盖住样品即可。

对于悬浮细胞，参加DAPI 染色液，充分混匀。

2、室温放置。

3、轻轻吸除DAPI 染色液(5ug/ml,含封片剂)。

4、用无菌的PBS 或生理盐水清洗。

5、无需封片，直接在荧光显微镜下观察。

编号 名称 DA0006 Storage DAPI 染色液(5ug/ml,含封片剂) 10ml-20℃ 避光 使用说明书 1份染色结果：细胞发生凋亡时，会看到凋亡细胞的细胞核呈致密浓染，或呈碎块状致密浓染。

FTIC及DAPI的染色流程FTIC标记凝集素的组织化学染色程序1、组织切片经脱蜡处理，若是Bouin液固定的组织，用70％乙醇洗3次除去组织切片内的黄色后，再用蒸馏水漂洗；2、PBS漂洗(含1％牛血清白蛋白)2次，每次5分钟；3、加入FITC-凝集素(PBS适当稀释)，置湿盒内孵育，室温1小时；4、PBS漂洗3次，每次5分钟；5、水溶性封片剂封片，荧光显微镜观察。

6、结果FITC标记的凝集素能直接与组织细胞内的糖基结合，从而显示糖基的位置，可用于检测组织细胞中的糖成分，阳性部位呈黄绿色荧光。

7、注意事项(1)固定液：以Bouin固定液为佳，也可用70％乙醇固定；(2)与其他组织化学方法一样，染色过程中，应始终保持一定湿度，使切片保持湿润状态；(3)需经预实验确定FITC-凝集素的最佳工作浓度；(4)凝集素的活性部位需重金属离子维持，故可用TBS作为缓冲液，加微量的金属(CaCl2、MgCl2、MnCl2各1、0mmol/L)，可增强凝集素的结合能力。

DAPI染色1、原理DAPI为4’，6二脒基-2-苯吲哚(4’，6―diamidino-2―phenylindole)能与双链DNA小槽，特别是AT碱基结合，也可插入少于3个连续AT碱基对的DNA序列中。

当它与双链DNA结合时，荧光强度增强20倍，而与单链DNA结合则无荧光增强现象，因此是一种简易、快速和敏感地检测DNA的方法。

DAPI的荧光强度虽较Hoechst低，但荧光稳定性优于Hoechst；其特异性较溴化乙啶(ethidlium bromide，EB)和碘化丙啶(propidium iodide，P1)高。

2、溶液配制(1)0、01mol／L PBS(pH7、0)：取0、1mol／L NaH2PO4・H2O 34ml、0、1mol／LNa2HPO4 66ml、NaCl 0、9g，溶于900m1双蒸水；(2)DAPI储存液：将0、5mgDAPI溶于5、0ml PBS中，分装，低温长期保存；(3)DAPI工作液：用PBS稀释DAPI储存液，终浓度为0、1ug／ml。

DAPIDAPI即4',6-二脒基-2-苯基吲哚(4',6-diamidino-2-phenylindole)，是一种能够与DNA强力结合的荧光染料，常用于荧光显微镜观测。

因为DAPI可以透过完整的细胞膜，它可以用于活细胞和固定细胞的染色。

DAPI介绍在荧光显微镜观察下，DAPI染剂是利用紫外光波长的光线激发。

当DAPI与双股DNA 结合时，最大吸收波长为358nm，最大发射波长为461nm，其发散光的波长范围含盖了蓝色至青绿色。

DAPI也可以和RNA结合，但产生的荧光强度不及与DNA结合的结果，其发散光的波长范围约在500nm左右。

DAPI的发散光为蓝色，且DAPI和绿色荧光蛋白(Green fluorescent protein, GFP)或Texas Red染剂(红色荧光染剂)的发散波长，仅有少部分重叠，研究员可以善用这项特性在单一的样品上进行多重荧光染色。

DAPI能快速进入活细胞中与DNA结合，因此DAPI对生物体而言，也被视为一种毒性物质与致癌物。

使用过程中应注意操作与抛弃的处理程序。

中文名：4，6-联脒-2-苯基吲哚(?)英文名：4',6-diamidino-2-phenylindole，2-(4-amidinophenyl)-1H -indole-6-carboxamidine，DAPI dihydrochloride分子式：C16H15N5分子量：277.324CAS number：28718-90-3光谱性质：DAPI的最大激发波长为340nm，最大发射波长为488nm与双链DNA结合时最大吸收/最大发射为358 nm/461 nm；与RNA结合时，最大发射移动到400 nm左右。

DAPI染色原理：DAPI 为一种荧光染料，可以穿透细胞膜与细胞核中的双链DNA结合而发挥标记的作用，可以产生比DAPI自身强20多倍的荧光，和EB相比，对双链DNA的染色灵敏度要高很多倍。