mueller-hinton琼脂培养基制备方法
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mueller-hinton琼脂培养基制备方法以下是Mueller-Hinton琼脂培养基的制备方法:
1. 称量
根据培养基配方,称取适量所需成分,除另有规定外,一般可按以下比例称量:牛肉膏5g,氯化钠8g,可溶性淀粉1g,琼脂17g,蒸馏水1000mL。
2. 溶化
将除琼脂外的其他成分溶解于蒸馏水中。
3. 调pH值
用酸度计或精密试纸校正pH值至7.2~7.4。
4. 加琼脂
加热煮沸,将琼脂加入,边煮边搅拌,直至琼脂完全溶解。
5. 过滤
趁热用已灭菌的细纱布过滤。
6. 分装
将培养基分装于已灭菌的培养皿中,每皿约20mL。
7. 灭菌
将分装好的培养基进行高压蒸汽灭菌,灭菌时间为15min,一般在121℃条件下灭菌。
8. 倒平板
将灭菌后的培养基倒入已灭菌的培养皿中,待冷却凝固后即可使
用。
9. 保存
制备好的Mueller-Hinton琼脂培养基应保存在2~25℃的环境中,并避免阳光直射。
一般可保存3~6个月。
注意事项:
1. 在制备过程中要严格控制pH值,以保证培养基的性能。
2. 在加热溶解过程中要不断搅拌,以防琼脂糊底而导致培养基烧焦。
3. 在分装过程中要保证每皿的培养基量相等,以免影响后续实验结果的准确性。