柞蚕(幼虫)中β-蜕皮激素提取工艺的优化

响应面法优化柞蚕蛹虫草活性肽提取工艺研究
刘博佳;李正钰;柳叶飞;王泽;徐方旭
【期刊名称】《中国饲料》
【年(卷),期】2024()5
【摘要】为优化柞蚕蛹虫草多肽提取工艺,本试验分别研究了pH、酶解时间、反应温度和加酶量对多肽得率的影响,并采用响应面法对提取条件进行了优化。

结果表明:四种因素对柞蚕蛹虫草多肽得率的影响顺序为pH>酶解时间>反应温度>加酶量,最佳酶解条件为:酶解时间2.8 h、加酶量2%、pH 9.7、反应温度56℃。

在此酶解条件下进行验证试验,测得柞蚕蛹虫草多肽得率平均值为86.1%,与预测值87.52%接近,表明该模型能较好地预测辅助提取柞蚕蛹虫草活性肽,可为柞蚕蛹虫草的产业性开发应用提供依据。

【总页数】6页(P45-50)
【作者】刘博佳;李正钰;柳叶飞;王泽;徐方旭
【作者单位】沈阳师范大学生命科学学院;沈阳师范大学粮食学院;沈阳师范大学实验教学中心;辽宁省功能性蛹虫草重点实验室;沈阳市功能性蛹虫草产业技术研究院;辽宁省蛹虫草种质资源库
【正文语种】中文
【中图分类】S816.7
【相关文献】
1.响应面法优化超声波辅助提取蚕蛹油的工艺研究
2.响应面法优化蚕蛹抗菌肽提取工艺研究
3.响应面法优化日本黄姑鱼鱼肉免疫活性肽的提取工艺
4.基于响应面分析法优化蚕蛹总黄酮的提取工艺研究
5.响应面法优化柞蚕蛹多糖的提取工艺及其抑菌活性研究
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蝉蜕蛋白的提取工艺优化及体外抗氧化活性研究目的：优化蝉蜕蛋白的提取工艺，并考察其体外抗氧化活性，为蝉蜕蛋白的深入研究提供参考。

方法：以蛋白提取量为响应值，在单因素试验基础上，采用Box-Behnken响应面法对超声波辅助提取蝉蜕蛋白的液料比、超声时间、提取次数等条件进行优化，并进行验证试验。

以维生素C（VC）为阳性对照，以对1，1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）和2，2′ -连氮基-双-（3-乙基苯并二氢噻唑啉-6-磺酸）（ABTS）自由基的清除率为指标，评价蝉蜕蛋白的体外抗氧化活性。

结果：蝉蜕蛋白的最佳提取条件为液料比28 ∶1（mL/g），超声时间65 min，提取2次。

验证试验中，蝉蜕蛋白的平均提取量为65.45 mg/g（RSD=1.68%，n=3），与预测值的相对误差为5.48%。

蝉蜕蛋白对ABTS和DPPH自由基均有一定的清除效果，当蝉蜕蛋白质量浓度为0.2 mg/mL时对ABTS自由基的清除率即达97.0%，其作用与VC相当；蝉蜕蛋白对DPPH自由基的清除能力稍弱，半数清除浓度为0.96 mg/mL，其作用不及VC。

结论：采用Box-Behnken响应面法优化蝉蜕蛋白的提取条件准确、可靠；蝉蜕蛋白具有一定的体外抗氧化活性。

ABSTRACT OBJECTIVE：To optimize extraction technology of protein from Cryptotympana pustulata and investigate its in vitro antioxidant activity，so as to provide reference for further research of protein from C. pustulata. METHODS：Using extraction amount of protein as response value，based on single factor test，Box-Behnken response surface methodology was used to optimize the ratio of liquid to material，ultraonic time and extraction times. Validation test was conducted. Using Vitamin C （VC）as positive control，in vitro antioxidant activity of protein from C. pustulata was evaluated by using scavenging rate of 1，1-diphenyl-2-picrylhydrazyl （DPPH）and 2，2′ -azino-bis（3-ethyl benzothiazoline-6-sulfonic acid）（ABTS）free radical as index. RESULTS：The optimal extraction condition of protein from C. pustulata was as follows as the ratio of liquid to material 28 ∶ 1 （mL/g），ultrasonic time of 65 min，extracting for twice. In validation test，average extraction amount of protein from C. pustulata was 65.45 mg/g（RSD=1.68%，n=3），relative error of which to predicted value was 5.48%. The protein from C. pustulata showed strong scavenging effect on ABTS and DPPH free radicals. When the concentration of protein from C. slough was 0.2 mg/mL，and the scavenging rate of it to ABTS free radicals was 97%，the effect of which was similar to VC. The protein from C. pustulata showed weak scavenging ability to DPPH free radical，IC50 was 0.96 mg/mL，the effect of which was not as good as VC. CONCLUSIONS：The extraction technology of protein from C. pustulata optimized by Box-Behnken response surface methodology shows high accuracy and good reliability. The protein from C. pustulata shows certain antioxidant activity in vitro.KEYWORDS Protein from Cryptotympana pustulata；Ultrasonic assisted extraction；Technology optimization；Box-Behnken response surface methodology；Antioxidant activity in vitro蝉蜕为蝉科昆虫黑蚱（Cryptotympana pustulata Fabricius）的若虫羽化时脱落的皮壳，味甘，性寒，入肺、肝经，具有疏散风热、明目退翳、利咽、解痉等功效[1]。

蜕皮激素在桑蚕生产中的应用效果试验作者：李佳颖钟远信来源：《新农业》2022年第13期摘要：據史载，种桑养蚕在我国有5000多年的历史，从众多的丝绸博物馆陈列的丝绸文物中我们可以窥见一斑，而丝绸之路是最早最重要的古代东西方文明交流通道。

而近年所倡导的“一带一路”就是由此而来，它的意义重大，会有力促进全球经济发展更加均衡。

所以，种桑养蚕虽然说是一个传统小农业，劳动密集，产能低，经济效益与工业相比不具备优势，但是它所起的作用也不容小觑。

关键词：蜕皮激素；桑蚕；试验；效果蜕皮激素又称为脱皮激素，它是从鸭跖草科植物珍珠露水草根部提取的一种活性物质。

据了解，蜕皮激素广泛应用于虾、蟹等甲壳类水生生物人工饲养及种桑养蚕生产中，只要科学合理地使用，对生产能起到一定的积极效果。

蜕皮激素在蚕体内的主要作用是促进蚕儿变态和蜕皮，因此，在种桑养蚕科技上只要在蚕幼虫末期添食适当剂量该物质，就能使桑蚕令期缩短，达到上蔟整齐，并能够促进蚕儿提早吐丝结茧。

当5龄蚕进入中食期后，添食一定剂量的蜕皮激素，蚕儿就能提早老熟，缩短龄期，且老熟齐一。

笔者在蚕区工作多年，留意到农村蚕农在养蚕生产中，经常会遇到影响养蚕产量的不利因素，比如台风袭击、洪水冲刷、天气持久干旱等原因，造成桑园生产不正常、桑叶减产，或者因为蚕农做的蚕作计划欠缺周全，估计桑叶产量不准或者茧价市场突然看好、蚕农超饲养量等原因，造成5龄后期桑叶不够，尤其秋期更为多见，因干旱缺叶少喂而强迫蚕儿饥饿上簇，甚至不得已采取淘汰、倒蚕的现象并不少见，给蚕农生产带来一定程度的经济损失。

在这种情况下，笔者设想能否通过添食一定剂量蜕皮激素的办法，达到喂食等量桑叶的效果，获得尽可能多的优质蚕茧，把缺叶造成的损失降到最低。

为此，笔者以2020下半年饲养的第二批蚕作为试验对象，进行5龄中后期添食蜕皮激素对比试验，仅供桑蚕生产上遇到缺叶时采取应急措施作参考。

1.1 供试品种及材料桑蚕两广二号正交种、桑叶、蚕用蜕皮激素、酒精、天宇325号旋转方格簇等。

高效液相色谱-串联质谱法测定家蚕血液中β-蜕皮激素唐博志;李龙;武国华【摘要】建立了高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)测定家蚕血液中β-蜕皮激素的方法.实验以高油菜素内酯为内标,用乙腈去除家蚕血液样品中的蛋白质;C18反相柱作为分析色谱柱,以乙腈和含0.5％乙酸的水溶液作为流动相,使用梯度洗脱的方法进行液相色谱分离.在优化的仪器条件下,血液中蜕皮激素的加标回收率在83.56％～97.11％之间,相对标准偏差小于5.4％,在3.13～50 μg/L浓度范围内,线性相关系数R2为0.996 3,方法的检出限为0.2μg/L.该方法能较好地满足测定家蚕血液中β-蜕皮激素含量的要求,同时也可被推广测定其他昆虫血液中的β-蜕皮激素.【期刊名称】《质谱学报》【年(卷),期】2015(036)001【总页数】7页(P52-58)【关键词】β-蜕皮激素;家蚕;血液;高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)【作者】唐博志;李龙;武国华【作者单位】江苏科技大学生物与化学工程学院,江苏镇江212018;中国农业科学院蚕业研究所,农业部蚕桑产品及食用昆虫质量安全风险评估实验室,江苏镇江212018;江苏科技大学生物与化学工程学院,江苏镇江212018;中国农业科学院蚕业研究所,农业部蚕桑产品及食用昆虫质量安全风险评估实验室,江苏镇江212018【正文语种】中文【中图分类】O657.63β－蜕皮激素又叫20－羟基蜕皮酮，简称20E，是一种能促进甲壳动物蜕皮的激素，分子式为C27H44O7，结构式示于图1。

它具有调控甲壳动物生长发育的作用，广泛存在于昆虫、蟹等动物体内［1－2］。

此外，蜕皮激素还存在于植物中，某些植物的蜕皮激素含量远高于动物，是提取蜕皮激素的主要来源［3］。

目前，蜕皮激素主要应用于家蚕、虾蟹等甲壳动物养殖业中，用于调节甲壳动物的新陈代谢，使甲壳动物快速而顺利地完成蜕皮，促进其生长［4］。

近年来，对蜕皮激素的药理和临床研究发现，蜕皮激素具有促进人体肝脏蛋白质的合成和脂肪代谢，以及促进血管内皮细胞分裂增殖等作用［5］。

彝药露水草中β-蜕皮激素的提取工艺研究
郭菊玲;杨勇帮;赵玉梅
【期刊名称】《云南中医中药杂志》
【年(卷),期】2017(038)007
【摘要】目的采用纤维素酶法及澄清工艺提取彝药露水草中β-蜕皮激素.方法纤维素酶法:加入纤维素酶,从其影响因素pH值,酶加入量,酶解温度及酶解时间入手,采用L9(34)的正交试验设计,分析实验结果得出最优提取工艺流程;澄清工艺:加入不同类型及不同比例的澄清剂.结果 pH值4.5,酶加入量9 mg,酶解温度40℃,酶解时间30 min;壳聚糖澄清剂及ZTC1 +1-Ⅱ型澄清剂A:B(2:8)澄清效果最佳.结论该工艺提取过程简单、高效、节约成本,为改进生产企业从露水草中提取β-蜕皮激素的提取工艺提供参考依据.
【总页数】4页(P70-73)
【作者】郭菊玲;杨勇帮;赵玉梅
【作者单位】云南省玉溪市食品药品检验所,云南玉溪653100;云南省玉溪市食品药品检验所,云南玉溪653100;云南中医学院,云南昆明650500
【正文语种】中文
【中图分类】R284.2
【相关文献】
1.从露水草中提取纯化β-蜕皮激素工艺研究
2.露水草提取物β－蜕皮激素含量分析
3.溶剂辅助高压脉冲电场提取柞蚕中β-蜕皮激素的工艺研究
4.HPLC法测定民
族药露水草中β-蜕皮激素的含量5.RP-HPLC法测定珍珠露水草提取物中蜕皮激素的含量
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蝉蜕中甲壳素的提取工艺优化及其抗氧化活性和止血效果评价雷雨洁;程菁菁;汤成;孟燕【期刊名称】《天然产物研究与开发》【年(卷),期】2024(36)2【摘要】该研究以蝉蜕为原料,通过单因素结合正交实验,对超声辅助酸碱提取蝉蜕中甲壳素的工艺条件进行优化;以ABTS、DPPH及O-2自由基清除率为指标,评价提取物的抗氧化活性;通过提取物对兔血凝固时间的影响以及对不同出血模型出血时间、出血量的影响来评价提取物的止血效果。

结果表明,蝉蜕中甲壳素的最佳提取工艺为:脱钙:质量分数:8%盐酸,温度:室温,料液比:1∶25,超声功率:160 W,超声时间:150 min;脱蛋白:质量分数:10%氢氧化钠,温度:60℃,料液比:1∶25,超声功率:无显著差异,超声时间:90 min;脱色:质量分数:5%高锰酸钾、8%亚硫酸氢钠,温度:90℃,时间:高锰酸钾反应60 min、亚硫酸氢钠反应90 min;蝉蜕甲壳素对ABTS、DPPH及O-2自由基均有一定的清除能力;相同剂量的蝉蜕甲壳素粉末与云南白药粉末相比,蝉蜕甲壳素体外促凝血能力更优,且蝉蜕甲壳素显著地缩短了鼠尾出血时间、出血量及肝创口的出血时间。

该研究可为昆虫类中药的高值化利用与综合开发提供借鉴。

【总页数】11页(P268-278)【作者】雷雨洁;程菁菁;汤成;孟燕【作者单位】湖北中医药大学药学院【正文语种】中文【中图分类】R932【相关文献】1.响应面优化黄皮叶中的活性因子超声提取工艺及其抗氧化活性研究2.蝉蜕蛋白的提取工艺优化及体外抗氧化活性研究3.粉葛中葛根素提取工艺的优化及其提取物抗氧化活性4.蒲公英总黄酮的提取工艺优化及抗氧化活性评价5.响应面法优化金丝皇菊多酚提取工艺及其抗氧化活性评价因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

蜕皮激素在桑蚕生产中的应用效果试验摘要：蜕皮激素又称为脱皮激素，它是从鸭跖草科植物珍珠露水草根部提取的一种活性物质。

据了解，蜕皮激素广泛应用于虾、蟹等甲壳类水生生物人工饲养及种桑养蚕生产中，只要科学合理地使用，对生产能起到一定的积极效果。

蜕皮激素在蚕体内的主要作用是促进蚕儿变态和蜕皮，因此，在种桑养蚕科技上只要在蚕幼虫末期添食适当剂量该物质，就能使桑蚕令期缩短，达到上蔟整齐，并能够促进蚕儿提早吐丝结茧。

关键词：蜕皮激素；桑蚕生产；应用；效果试验；引言2021年，广西地区桑园面积超过300万亩，占全国桑园面积的1/4左右，同时蚕茧产量超过40万t，占全国总产量的55%左右，占世界总产量的近40%。

如今广西桑蚕养殖业大力发展产业集群，完善蚕、桑、茧、丝、绸产业链，推动一二三产业融合发展，率先构建现代化蚕桑产业体系，促进了当地经济的发展。

广西桑蚕养殖业取得如此成绩，与当地桑蚕高产养殖技术密不可分，基于此，文章总结广西地区桑蚕养殖技术经验，为相关从业人员提供参考。

一、桑蚕生物学特性桑蚕属于无脊椎动物，是完全变态昆虫，同时也是吐丝结茧的经济昆虫之一，以桑叶为食，一生经历卵、幼虫、蛹、成虫4个发展阶段。

其中，卵是胚胎发生、发育形成幼虫的阶段，幼虫是摄取食物营养的生长阶段，蛹是从幼虫向成虫过渡的变态阶段，成虫是交配、产卵、繁殖后代的生殖阶段。

蚕在整个发育成长过程中，通常要经过5个龄期，眠4次，蜕皮4次。

成虫交尾产卵后数日死亡，产下的卵越年，翌春孵化的为滞育卵，不经越年孵化的为非滞育卵。

卵孵化经3d～4d第一次蜕皮前为1龄期，蜕皮后进入2龄期，经2d～3d第二次蜕皮后进入3龄期，经3d～4d第三次蜕皮进入4龄期，经第四次蜕皮后进入5龄期，并逐渐长大老熟结茧。

经蛹化与蛹期二次蜕皮再经14d左右羽化成成虫。

成虫交尾产卵需5d～7d，产卵后成虫自然死亡，完成一个世代。

从生活习性方面来讲，桑蚕除了吃桑叶，也吃鸦葱、柘叶、蒲公英、榆树叶等，以此维持体内所需要的水分、无机盐、碳水化合物和维生素等营养物质。

β—蜕皮素的实用方法
蜷木理
【期刊名称】《江苏蚕业》
【年(卷),期】1993(000)002
【摘要】β—蜕皮素早在25年前,已知能促进蚕的老熟,用于上蔟。

其后,从植物中提取牛膝固醇为主成分的上族促进剂在市上售,但当时由于纯度低,效果不稳定等原因未能固定下来,作养蚕上的药品。

1988年松本武,久保伊佐发现高浓度(1～5％)的20—羟基蜕皮素(与β—蜕皮素相同)存在于植物中,并确立了高效的提取方法。

于是开始研究新提取物用于上蔟,并在各县的试验研究机关作多次试验,证明了蜕皮素在养蚕上的有效性。

目前,蜕皮素使用方法的研究以及在农家作充分测试,已作为农药申请登录。

蜕皮素促进熟化的效果蜕皮素的作用是缩短5龄经过。

【总页数】2页(P63-64)
【作者】蜷木理
【作者单位】无
【正文语种】中文
【中图分类】S884.19
【相关文献】
1.蜕皮甾酮对胰岛素抵抗细胞模型胰岛素敏感性和糖代谢的影响 [J], 陈秋;夏永鹏;邱宗荫
2.蜕皮甾酮对胰岛素抵抗HepG2细胞胰岛素受体表达的影响 [J], 陈秋;邹德平;张
蓉;邱宗荫;夏永鹏
3.添食蜕皮素和20—羟蜕皮素对家蚕幼虫发育的不同影响 [J], 田中好秋;徐世清
4.β—蜕皮激素和水龙骨素B的混合物对促进对虾蜕皮生长的作用 [J], 罗日祥;王玉英
5.蚕用定向登簇剂与蚕用蜕皮素联合应用效果分析 [J], 冯增兰; 丁小丽; 戎世芳因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

采用正交试验优化柞蚕丝肽生产条件
曹慧颖;夏润玺;石生林;李群;王学英
【期刊名称】《蚕业科学》
【年(卷),期】2006(32)4
【摘要】利用废弃柞蚕丝生产的丝肽在食品、医药、化妆品、化工等领域有广泛的用途,为此研究了利用硫酸降解柞蚕丝生产丝肽的最佳条件。

将硫酸浓度、反应温度和反应时间作为试验因素,经二次回归正交旋转组合试验,建立回归方程,最终得到柞蚕丝降解物丝肽的最佳生产条件为：硫酸浓度4．00～4．31mol/L,温度88．57～89．53℃,时间5．62～5．84h。

在以上条件下生产所得产品的各项指标均符合食品、化妆品添加剂要求。

【总页数】3页(P596-598)
【关键词】柞蚕;丝肽;硫酸水解;降解条件;正交试验
【作者】曹慧颖;夏润玺;石生林;李群;王学英
【作者单位】沈阳农业大学生物科技学院
【正文语种】中文
【中图分类】S885.1
【相关文献】
1.用正交试验法探索化油器最佳生产条件 [J], 张明华
2.正交试验在腐植酸作柞蚕丝漂白稳定剂工艺参数筛选中的应用 [J], 白迎娟
3.正交试验优化花生肽螯合锌的制备工艺 [J], 李晨; 陈复生; 布冠好
4.采用正交试验优化分析极硬岩隧道滚刀刃形 [J], 宋天田; 翟乾智; 马偃辉; 刘宁
5.正交试验优化培养基因工程菌(E.coli pGEX)产降血压肽培养基的组成 [J], 吴亚丽;刘冬;张丽君;李世敏;梁世中
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