柞蚕(幼虫)中β-蜕皮激素提取工艺的优化

响应面法优化柞蚕蛹虫草活性肽提取工艺研究
刘博佳;李正钰;柳叶飞;王泽;徐方旭
【期刊名称】《中国饲料》
【年(卷),期】2024()5
【摘要】为优化柞蚕蛹虫草多肽提取工艺,本试验分别研究了pH、酶解时间、反应温度和加酶量对多肽得率的影响,并采用响应面法对提取条件进行了优化。

结果表明:四种因素对柞蚕蛹虫草多肽得率的影响顺序为pH>酶解时间>反应温度>加酶量,最佳酶解条件为:酶解时间2.8 h、加酶量2%、pH 9.7、反应温度56℃。

在此酶解条件下进行验证试验,测得柞蚕蛹虫草多肽得率平均值为86.1%,与预测值87.52%接近,表明该模型能较好地预测辅助提取柞蚕蛹虫草活性肽,可为柞蚕蛹虫草的产业性开发应用提供依据。

【总页数】6页(P45-50)
【作者】刘博佳;李正钰;柳叶飞;王泽;徐方旭
【作者单位】沈阳师范大学生命科学学院;沈阳师范大学粮食学院;沈阳师范大学实验教学中心;辽宁省功能性蛹虫草重点实验室;沈阳市功能性蛹虫草产业技术研究院;辽宁省蛹虫草种质资源库
【正文语种】中文
【中图分类】S816.7
【相关文献】
1.响应面法优化超声波辅助提取蚕蛹油的工艺研究
2.响应面法优化蚕蛹抗菌肽提取工艺研究
3.响应面法优化日本黄姑鱼鱼肉免疫活性肽的提取工艺
4.基于响应面分析法优化蚕蛹总黄酮的提取工艺研究
5.响应面法优化柞蚕蛹多糖的提取工艺及其抑菌活性研究
因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

蝉蜕蛋白的提取工艺优化及体外抗氧化活性研究目的：优化蝉蜕蛋白的提取工艺，并考察其体外抗氧化活性，为蝉蜕蛋白的深入研究提供参考。

方法：以蛋白提取量为响应值，在单因素试验基础上，采用Box-Behnken响应面法对超声波辅助提取蝉蜕蛋白的液料比、超声时间、提取次数等条件进行优化，并进行验证试验。

以维生素C（VC）为阳性对照，以对1，1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）和2，2′ -连氮基-双-（3-乙基苯并二氢噻唑啉-6-磺酸）（ABTS）自由基的清除率为指标，评价蝉蜕蛋白的体外抗氧化活性。

结果：蝉蜕蛋白的最佳提取条件为液料比28 ∶1（mL/g），超声时间65 min，提取2次。

验证试验中，蝉蜕蛋白的平均提取量为65.45 mg/g（RSD=1.68%，n=3），与预测值的相对误差为5.48%。

蝉蜕蛋白对ABTS和DPPH自由基均有一定的清除效果，当蝉蜕蛋白质量浓度为0.2 mg/mL时对ABTS自由基的清除率即达97.0%，其作用与VC相当；蝉蜕蛋白对DPPH自由基的清除能力稍弱，半数清除浓度为0.96 mg/mL，其作用不及VC。

结论：采用Box-Behnken响应面法优化蝉蜕蛋白的提取条件准确、可靠；蝉蜕蛋白具有一定的体外抗氧化活性。

ABSTRACT OBJECTIVE：To optimize extraction technology of protein from Cryptotympana pustulata and investigate its in vitro antioxidant activity，so as to provide reference for further research of protein from C. pustulata. METHODS：Using extraction amount of protein as response value，based on single factor test，Box-Behnken response surface methodology was used to optimize the ratio of liquid to material，ultraonic time and extraction times. Validation test was conducted. Using Vitamin C （VC）as positive control，in vitro antioxidant activity of protein from C. pustulata was evaluated by using scavenging rate of 1，1-diphenyl-2-picrylhydrazyl （DPPH）and 2，2′ -azino-bis（3-ethyl benzothiazoline-6-sulfonic acid）（ABTS）free radical as index. RESULTS：The optimal extraction condition of protein from C. pustulata was as follows as the ratio of liquid to material 28 ∶ 1 （mL/g），ultrasonic time of 65 min，extracting for twice. In validation test，average extraction amount of protein from C. pustulata was 65.45 mg/g（RSD=1.68%，n=3），relative error of which to predicted value was 5.48%. The protein from C. pustulata showed strong scavenging effect on ABTS and DPPH free radicals. When the concentration of protein from C. slough was 0.2 mg/mL，and the scavenging rate of it to ABTS free radicals was 97%，the effect of which was similar to VC. The protein from C. pustulata showed weak scavenging ability to DPPH free radical，IC50 was 0.96 mg/mL，the effect of which was not as good as VC. CONCLUSIONS：The extraction technology of protein from C. pustulata optimized by Box-Behnken response surface methodology shows high accuracy and good reliability. The protein from C. pustulata shows certain antioxidant activity in vitro.KEYWORDS Protein from Cryptotympana pustulata；Ultrasonic assisted extraction；Technology optimization；Box-Behnken response surface methodology；Antioxidant activity in vitro蝉蜕为蝉科昆虫黑蚱（Cryptotympana pustulata Fabricius）的若虫羽化时脱落的皮壳，味甘，性寒，入肺、肝经，具有疏散风热、明目退翳、利咽、解痉等功效[1]。

蜕皮激素在桑蚕生产中的应用效果试验作者：李佳颖钟远信来源：《新农业》2022年第13期摘要：據史载，种桑养蚕在我国有5000多年的历史，从众多的丝绸博物馆陈列的丝绸文物中我们可以窥见一斑，而丝绸之路是最早最重要的古代东西方文明交流通道。

而近年所倡导的“一带一路”就是由此而来，它的意义重大，会有力促进全球经济发展更加均衡。

所以，种桑养蚕虽然说是一个传统小农业，劳动密集，产能低，经济效益与工业相比不具备优势，但是它所起的作用也不容小觑。

关键词：蜕皮激素；桑蚕；试验；效果蜕皮激素又称为脱皮激素，它是从鸭跖草科植物珍珠露水草根部提取的一种活性物质。

据了解，蜕皮激素广泛应用于虾、蟹等甲壳类水生生物人工饲养及种桑养蚕生产中，只要科学合理地使用，对生产能起到一定的积极效果。

蜕皮激素在蚕体内的主要作用是促进蚕儿变态和蜕皮，因此，在种桑养蚕科技上只要在蚕幼虫末期添食适当剂量该物质，就能使桑蚕令期缩短，达到上蔟整齐，并能够促进蚕儿提早吐丝结茧。

当5龄蚕进入中食期后，添食一定剂量的蜕皮激素，蚕儿就能提早老熟，缩短龄期，且老熟齐一。

笔者在蚕区工作多年，留意到农村蚕农在养蚕生产中，经常会遇到影响养蚕产量的不利因素，比如台风袭击、洪水冲刷、天气持久干旱等原因，造成桑园生产不正常、桑叶减产，或者因为蚕农做的蚕作计划欠缺周全，估计桑叶产量不准或者茧价市场突然看好、蚕农超饲养量等原因，造成5龄后期桑叶不够，尤其秋期更为多见，因干旱缺叶少喂而强迫蚕儿饥饿上簇，甚至不得已采取淘汰、倒蚕的现象并不少见，给蚕农生产带来一定程度的经济损失。

在这种情况下，笔者设想能否通过添食一定剂量蜕皮激素的办法，达到喂食等量桑叶的效果，获得尽可能多的优质蚕茧，把缺叶造成的损失降到最低。

为此，笔者以2020下半年饲养的第二批蚕作为试验对象，进行5龄中后期添食蜕皮激素对比试验，仅供桑蚕生产上遇到缺叶时采取应急措施作参考。

1.1 供试品种及材料桑蚕两广二号正交种、桑叶、蚕用蜕皮激素、酒精、天宇325号旋转方格簇等。

高效液相色谱-串联质谱法测定家蚕血液中β-蜕皮激素唐博志;李龙;武国华【摘要】建立了高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)测定家蚕血液中β-蜕皮激素的方法.实验以高油菜素内酯为内标,用乙腈去除家蚕血液样品中的蛋白质;C18反相柱作为分析色谱柱,以乙腈和含0.5％乙酸的水溶液作为流动相,使用梯度洗脱的方法进行液相色谱分离.在优化的仪器条件下,血液中蜕皮激素的加标回收率在83.56％～97.11％之间,相对标准偏差小于5.4％,在3.13～50 μg/L浓度范围内,线性相关系数R2为0.996 3,方法的检出限为0.2μg/L.该方法能较好地满足测定家蚕血液中β-蜕皮激素含量的要求,同时也可被推广测定其他昆虫血液中的β-蜕皮激素.【期刊名称】《质谱学报》【年(卷),期】2015(036)001【总页数】7页(P52-58)【关键词】β-蜕皮激素;家蚕;血液;高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)【作者】唐博志;李龙;武国华【作者单位】江苏科技大学生物与化学工程学院,江苏镇江212018;中国农业科学院蚕业研究所,农业部蚕桑产品及食用昆虫质量安全风险评估实验室,江苏镇江212018;江苏科技大学生物与化学工程学院,江苏镇江212018;中国农业科学院蚕业研究所,农业部蚕桑产品及食用昆虫质量安全风险评估实验室,江苏镇江212018【正文语种】中文【中图分类】O657.63β－蜕皮激素又叫20－羟基蜕皮酮，简称20E，是一种能促进甲壳动物蜕皮的激素，分子式为C27H44O7，结构式示于图1。

它具有调控甲壳动物生长发育的作用，广泛存在于昆虫、蟹等动物体内［1－2］。

此外，蜕皮激素还存在于植物中，某些植物的蜕皮激素含量远高于动物，是提取蜕皮激素的主要来源［3］。

目前，蜕皮激素主要应用于家蚕、虾蟹等甲壳动物养殖业中，用于调节甲壳动物的新陈代谢，使甲壳动物快速而顺利地完成蜕皮，促进其生长［4］。

近年来，对蜕皮激素的药理和临床研究发现，蜕皮激素具有促进人体肝脏蛋白质的合成和脂肪代谢，以及促进血管内皮细胞分裂增殖等作用［5］。