中草药对家蚕病原细菌的体外抑菌试验

10味中草药对金黄色葡萄球菌的体外抑菌试验韩梅红【摘要】为了解金荞麦、黄连、连翘等10味中草药对鸡源性金黄色葡萄球菌(Sta ph yloccocus aureus)的体外抑菌效果,采用打孔法测定了10味中草药煎剂对临床分离的1株鸡源性金黄色葡萄球菌的抑菌圈的直径,并用试管法和平板法分别测定了其最小抑菌浓度和最低杀菌浓度.结果表明,供试菌株对这10种中草药存在不同程度的敏感性,其中抑菌效果最好的是黄连、大青叶和连翘,其最小抑菌浓度均为12.5mg/ml,最低杀菌浓度分别为12.5、50.0mg/ml和100mg/ml.该结果可为防治鸡金黄色葡萄球菌病中草药制剂的开发提供科学依据.【期刊名称】《长江大学学报（自然版）理工卷》【年(卷),期】2011(008)010【总页数】4页(P240-242,248)【关键词】中草药;金黄色葡萄球菌(Sta ph yloccocus aureus);最小抑菌浓度;最低杀菌浓度【作者】韩梅红【作者单位】长江大学动物科学学院,湖北荆州434025【正文语种】中文【中图分类】Q935金黄色葡萄球菌(Staphyloccocus aureus)可引起多种畜禽疫病，临床最常见的有败血症、关节炎、乳房炎、皮肤、组织器官化脓性感染及蜂窝织炎等。

鸡金黄色葡萄球菌性关节炎是鸡葡萄球菌病中常见的一种。

鸡、鸭常因趾、蹼或腿部被铁丝、碎玻璃等杂物划伤而感染金黄色葡萄球菌[1]，从而导致关节肿大、跛行，行走困难，采食和饮水受到极大影响，病鸡逐渐消瘦、脱水，最终死亡。

该病是一种条件性、环境性疾病，对肉鸡育成期的影响极大，常可由此带来巨大的经济损失。

目前，临床上主要还是使用抗菌药物来控制鸡金黄色葡萄球菌病，但由于广泛、大量、长期不规范地使用抗生素而导致该菌的耐药性大幅度提高，防治效果越来越差，并导致药物残留和一些药源性疾病，严重威胁着食肉安全[2]。

近年来，国内外研究者在科学实验和生产实践中，运用中兽医学理论，开发利用中药资源，取得了一定的成绩。

题目：中草药提取有效成分及抑菌试验的实验方案顾建凯，李威，宗凯，唐勇，吴杰（生物技术0901）一、问题的提出西药抗生素的抗菌作用不容置疑，但其毒副作用、所引起的过敏反应、二重感染及细菌的耐药性等使其应用受到一定限制;单味中药抗菌谱一般较窄，其效用难以适应复杂而多变的病情;中药复方制剂因含多种有效成分，具有多方位的综合效用，抗菌谱广，且高效、低毒、不易产生耐药性等特点与优势，日渐受到学者们的重视。

我小组想通过单味中药与中药复方制剂抑菌效果的对比，来验证中药复方的效果。

二、实验假设与理论依据中医复方的抗菌作用所以优于单味药，主要在于通过配伍发挥了药物间的相辅相成作用，从而明显增强复方的抗菌效能。

三、实验目标1.了解中药的抑菌作用2.学习中药有效成分的提取方法3.验证中药复方制剂的抑菌效果优于单味中药;四、实验对象、方法及手段1.实验对象实验室中老师所准备的各种微生物2.实验方法目前中药包括复方制剂杭菌作用的测定方法大部分是沿用抗菌素的研究方法，主要分为体外抗菌作用和体内抗菌作用两个方面。

体外抗菌作用的测定方法又分为三类:一是连续稀释法，包括肉汤连续稀释法即试管两倍稀释法，肉汤琼脂斜面连续稀释法，肉汤琼脂平板连续稀释法;二是扩散法，包括纸片法，小杯法、打孔法等;三是熏蒸法，因其只限于挥发性物质抗菌作用研究，所以在复方制剂抗菌研究中很少使用。

体内抗菌作用的测定多用动物实验性感染治疗模型，该模型均系注射大量细菌引起暴发型感染如小鼠致死性感染，家兔腹膜炎等。

五、实验内容（实验步骤）1.中草药提取液的制备。

将各中草药烘干、粉碎，用35%的酒精于50℃萃取48h，将提取液离心后，减压浓缩．用35%酒精定容，使最终质量浓度为1g/ml。

置于0-4℃冰箱中，备用；2.培养基制备。

○1按改良液体马丁培养基常规制备方法配制，用于测定中药M IC值的培养基加入微量酚红(0001%)。

○2牛肉膏蛋白胨琼脂培养基，马铃薯葡萄糖琼脂培养基（配制方法见微生物学书后）3.菌悬液的配置。

单一中草药以及复方中草药体外抑菌效果研究【摘要】本文研究单一中草药以及复方中草药的体外抑菌效果，主要研究对沙门氏菌、猪肠道大肠杆菌等的体外抑菌效果，并做好复方中草药和单一中草组方工作，试验期间需要提取白头翁、黄连、何首乌等中草药的提取液，采用的吸食方式为微量二倍和双层琼脂扩散法，测定单一中草药和复方中草药对有害肠道菌的抑菌效果，通过研究可知采用单一大黄、黄芪、黄连药物的中草药能够达到最好的抑菌效果，大黄、黄芪、黄连组成的复合中草药能够达到更好的体外抑菌效果。

【关键词】单一中草药；复方中草药；体外抑菌中草药本身有着低残留、绿色、安全的优点，是绿色饲料的重要添加剂，能够有效提升体外抑菌效果，常见的中草药制作方式为水煎煮方式。

本文采用20多种中草药进行抑菌分析，采用二倍稀释方式，最好巴氏杆菌、猪链球菌等的分析工作，采用二倍稀释方式降低药物浓度，分析复方中草药和单一中草药在体外抑菌中的应用效果，研究结果显示黄连、大黄对原病菌的抑菌效果最佳，艾草、五味子等具有较高的抑菌敏感度。

1材料与方法.1.1试验材料黄芪等八种中草药购买于药材市场。

多种中草药的复配组合以及黄芪.黄连、大黄的复配比例根据本实验室前期研究确定。

供试细菌为猪大肠杆菌、猪沙门氏菌株金黄色葡萄球菌，由江西农业大学动物科学技术学院预防兽医学实验室提供。

普通肉汤培养基:牛肉浸膏3g.蛋白胨10g、NaCl5g，加纯化水至1000ml，pH值为7.2-7.4。

普通营养琼脂培养基:蛋白胨10g，牛肉膏3g，NaCl5g，琼脂20g，加纯化水1000ml，pH值为7.2-7.4。

1.2药物制备分别称取中草药l0g，按1:10比例加入100ml蒸馏水，浸提24h。

浸提后转移到超声波振荡器中，超声20min，使药物中的有效成分充分溶解。

再用文火加热煮沸10min，过滤后对药渣进行二次提取，合并两次提取的药液放人60C的水浴锅中浓缩。

过滤、离心沉淀，最后浓缩至含生药1g/ml。

家蚕细菌病防治药剂“蚕宁”的防效试验与推广应用叶建美【摘要】家蚕细菌病防治药剂——烟酸诺氟沙星粉（蚕用）是由湖北省农科院经济作物研究所2000年研制成功的一种新药，当时取名为“蚕病灵”，2007年经农业部批准同意地方标准上升为国家标准，2008年1月8日农业部兽药产品批准文号批件批复，兽药通用名为：烟酸诺氟沙星粉（蚕用），商品名改为：蚕宁。

批准文号为：兽药字（2008）170359835，含量规格为每小包5g：0．25g，5小包为1大袋。

由湖北农科生物化学有限公司生产与销售。

【期刊名称】《蚕桑茶叶通讯》【年(卷),期】2011(000)005【总页数】3页(P1-3)【关键词】防治药剂;细菌病;家蚕;防效试验;湖北省农科院;烟酸诺氟沙星;产品批准文号;应用【作者】叶建美【作者单位】湖北省农科院经济作物研究所,武汉430070【正文语种】中文【中图分类】S482.3家蚕细菌病防治药剂烟酸诺氟沙星粉(蚕用)是由湖北省农科院经济作物研究所2000年研制成功的一种新药，当时取名为“蚕病灵”，2007年经农业部批准同意地方标准上升为国家标准，2008年1月8日农业部兽药产品批准文号批件批复，兽药通用名为:烟酸诺氟沙星粉(蚕用)，商品名改为:蚕宁。

批准文号为:兽药字(2008)170359835，含量规格为每小包5g:0．25g，5小包为1大袋。

由湖北农科生物化学有限公司生产与销售。

1 对家蚕细菌性败血病的防治效果1．1 试验方法1．1．1试验动物蚕品种为春蕾×镇珠，由湖北省农科院经济作物研究所蚕桑研究室提供。

在常规条件下饲养至5龄起蚕时进行试验，接种后试验蚕在24～25℃的温度下饲养。

1．1．2菌悬液的制备与接种试验菌种为黑胸败血病菌(Bacillus sp．)和黏质沙雷氏菌(Serratia marcescens Bizio)，均为湖北省农科院经济作物研究所提供。

试验前将以上菌种接种于营养琼脂培养基上培养72h，试验时，将10 ml无菌水加入新鲜斜面培养试管中，用毛细吸管将细菌培养物轻轻吹吸下来后，经充分振动，使菌体完全分散，用细菌浓度比浊测定法粗测含菌浓度，然后用无菌水调成含菌约108～109个/ml的菌悬液。

几种中药提取物对不同病原菌的抑制作用随着时代的发展，人们健康意识的逐渐提高，环境与农产品的安全性受到了广泛重视，而且对农药残留的限制也要求的很严格。

近年来，化学农药被大量使用于农业生产中，由于多数在自然环境中不易降解，蓄积能力强，导致污染了环境，使病虫害产生了抗药性，破坏了生态平衡，农作物及畜产品中农药残留量超标，危害了人体健康。

而最值得注意的是生产这些化学农药过程中三废的排放问题，按我国1998年生产化学农药约18万t计，年排放的三废超过40万t[1]。

因此，化学农药的使用量势必会不断下降，而植物源农药将替代化学农药广泛应用于农业生产中。

植物源农药的活性成分是自然存在的物质，在自然界中的降解不污染环境，不会对人体产生危害，且低毒、低残留、病虫害不易产生抗药性，农产品的高品质能够得到充分保留。

植物源农药活性成分复杂，通常能作用于靶标生物的多个位点，有利于延缓靶标生物的抗药性；有些植物源农药还能刺激植物生长，起到生长调节作用[2]。

因此植物源农药在农业生产中具有广阔的应用前景。

纪淑娟等对丁香抑菌成分超声波提取工艺进行研究，得到以95%乙醇为溶剂的提取物对灰葡萄孢菌的抑菌率为62.47%[3]；杨帮等对美洲商陆抑菌活性进行研究，得出以极性强的甲醇为溶剂对柑橘绿霉病和小麦纹枯病2种病原菌的抑菌率均达100%[4]；崔永明等在甘草总黄酮的提取技术及其抑菌活性研究中指出甘草总黄酮对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的抑制作用均较为明显[5]；杨国平等通过天南星提取物对小鼠S180肉瘤的抑制作用的研究，得出天南星醇提物对小鼠S180肉瘤表现出明显的抑制生长作用，并未造成明显毒害作用[6]。

根据上述文献可知，丁香、商陆、甘草、天南星对不同致病菌有很强的抑制生长作用，而为研究不同中药提取物对不同致病菌的抑制作用，本试验选用8种中药材的提取物对4种主要致病菌进行抑菌活性研究，以筛选出對主要致病菌有抑制作用的中药提取物，对于开发和利用我国丰富的中药植物资源，有着十分重要的意义。

0引言抗菌肽(antibacterial peptides)是生物体免疫防卫系统产生的一类对抗外源性病原体致病作用的防御性多肽活性物质，是生物体先天免疫的重要组成成分，在机体的先天非特异性免疫中起重要作用[1]。

根据氨基酸组成和结构特征，抗菌肽可分为天蚕素（cecropins ）、防御素（defensins ）、蛙皮素（magainins ）和蜂毒素（melittins ）[2]。

抗菌肽是一种无毒副作用、无残留、无细菌耐药性的环保型制剂，具有热稳定、水溶性好、广谱杀菌甚至能杀真菌、原虫等优点，且对畜禽具有促生长、保健和治疗疾病的功能[3]。

在畜禽的生产中，抗生素添加剂的长期使用严重破坏了畜禽肠道的微生物平衡，并易在畜禽体内残留，严重影响了畜禽产品的品质和人类健康。

探讨抗菌肽的药用价值，努力使之成为新型抗菌药物来替代抗生素，解决细菌对抗生素日益增强的耐药性和体内残留这一棘手问题，逐渐成为科研人员关注的焦点。

因此，有关抗菌肽及其应用逐渐成为人们的研究热点[4]。

但由于在生物体内天然抗菌基金项目：合肥市应用技术研究与开发项目“家蚕抗菌肽在畜禽业中的应用研究”（合科合同（农）字2008（1005）号）；安徽省农科院院长青年创新基金项目（09A0502）；安徽省国际科技合作计划项目“家蚕降血糖产品的研制与开发”（0908*******）。

第一作者简介：范涛，男，1962年出生，安徽合肥人，研究员，研究生同等学历，学士，从事桑蚕资源综合利用技术研究，E-mail ：fantao1116@ 。

通讯作者：代君君，女，1975年出生，安徽凤阳人，助理研究员，硕士研究生，从事家蚕生理研究，通信地址：230061安徽省合肥市霍山路15号，安徽省蚕桑研究所。

E-mail ：serilife@ 。

收稿日期：2009-06-25，修回日期：2009-07-21。

家蚕抗菌肽的诱导及其抑菌作用研究范涛1，代君君1，周业奉2，魏国清3，范后文2，肖林珍1，吴传华1，王储炎1，田善富1（1安徽省农业科学院蚕桑研究所，合肥230061；2合肥永丰畜禽有限公司，合肥231200；3安徽农业大学生命科学学院，合肥230036）摘要：家蚕抗菌肽是存在于家蚕及蚕蛹的血淋巴内具有抗菌活性的多肽物质，在家蚕的天然免疫中起到至关重要的作用。

25种黔产中药材提取物体外抑菌活性的筛选作者：周艺李洪菲郭建军任欢汪群豪陈晓青来源：《中国民族民间医药·上半月》2020年第05期【摘要】目的：选取25种黔地中药材，研究其70%乙醇提取物对临床常见致病菌的体外抑菌活性。

方法：中药粗粉用70%乙醇回流提取，通过纸锭琼脂扩散法测定提取物的抑菌圈，微量倍比稀释法测定最低抑菌浓度（MIC）和最低杀菌浓度（MBC）。

结果：25种黔产中药材醇提物中，有15种中药材对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌均表现出不同程度的抑菌效果。

其中，黄连、夏枯草、大黄、鱼腥草、金钱草等5种中药材对两种病原菌的抗菌活性较为突出，抑菌圈d≥20 mm;对两种病原菌的最低抑菌浓度范围在7.82～31.25 mg/mL之间;对两种病原菌的最低杀菌浓度范围在15.625 ～62.50 mg/mL之间。

结论：首次筛选出的5种抗菌活性较强的黔产中药材，可为抗耐药性的中药抑菌剂和抑菌日化产品的开发提供一定的科学依据。

【关键词】黔产中药材;金黄色葡萄球菌;大肠杆菌;最低抑菌浓度;最低杀菌浓度【中图分类号】R285.5 【文献标志码】 A 【文章编号】1007-8517（2020）9-0032-07Screening of antibacterial activity in vitro of 25 kinds of Chinese medicinal materials from guizhouZHOU Yi1 LI Hongfei3 GUO Jianjun2，3* REN Huan3 WANG Qunhao3 CHEN Xiaoqing41.High School， Anshun University，Anshun 561000，China;2. College of Biotechnology，Jiangsu University of Science and Technology，Zhenjiang 212000，China;3.College of Agriculture，Anshun University，Anshun 561000，China;4.Chongqing Youliang Health Management Co.， Ltd，Chongqing 400000，ChinaAbstract：Object Selecte 25 kinds of traditional Chinese medicinal materials from guizhou， to study the antibacterial activity of 70% ethanolextract on common clinical pathogenic bacteria in vitro.Methods The traditional Chinese medicine powder was extracted by refluxing with 70% ethanol， and the bacteriostatic circle of the extract was measured by paper ingot AGAR diffusion method， and the minimum bacteriostaticconcentration （MIC） and the minimum bactericidal concentration （MBC） were determined bythe microfold dilution method. ResultsAmong the 25 kinds of alcohol extracts of guizhou traditional Chinese medicinal materials， 15 showed different degrees of bacteriostatic effects on n S. aureus and E. coli. Among them， Coptis chinensis Franch，Prunella vulgaris L， Rheum officinale Baill， Houttuynia cordata Thunb， Lysimachia christinae Hance have prominent antibacterial activities against the two pathogenic bacteria， with a bacteriostatic circle d ≥ 20 mm; The MIC of the two pathogens ranged from 7.82 mg/mL to 31.25 mg/mL. The MBC of the two pathogens ranged from 15.625 mg/mL to 62.50 mg/mL. Conclusion Five kinds of guizhou Chinese medicinal materialswith strong antibacterial activity were screenedout， which provided certain scientific basis for the development of traditional Chinese medicine bacteriostatic agent and bacteriostatic daily chemical products.Keywords：Chinese medicinal materials in guizhou;S.aureus; E. coli;MIC; MBC大腸杆菌（Escherichia coli， EC）和金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus， SA）现已成为世界上医院内常见的致病菌，被列为世界范围内最难解决的感染病菌之一[1-2]。

大蒜等12种中草药的体外抑菌实验【摘要】目的研究大蒜、辣椒粉、黄柏等12种常见中草药的体外抑菌性能及培养基对中草药抑菌效果的影响。

方法采用药敏纸片扩散法确定各中草药对各病原菌抑菌性能及最小抑菌浓度(MIC)。

结果辣椒粉对副伤寒沙门氏菌、金黄色葡萄球菌有抑制作用，MIC分别为12.5%，12. 5%;大蒜对副伤寒沙门氏菌、金黄色葡萄球菌有抑菌作用，MIC分别为6. 25%，12. 5%;黄桕等常见中草药对各病原菌也都有一定的抑菌效果。

结论大蒜、辣椒提取物对特定病原菌有抑制作用，黄柏等常见中草药对各种病原菌均有较强抑菌效果。

培养基显著影响中草药抑菌效果。

【关键词】辣椒；大蒜；黄柏；药敏纸片扩散法；体外抑菌Abstract： ObjectiveTo study the inhibitory effect of capsicum, garlic and several herbs on pathogens. MethodsThe minimum inhibiting concentration (MIC) of these herbs on chosen pathogens was determined by K-B programm. ResultsCapsicum could inhibit S. typhimurium and S. aureus in vitro with MIC 12. 5% and 12.5% respectively; Garlic showed inhibitory effect on S. typhimurium and S. aureus with MIC 6. 25% and 12. 5% respectively; Other herbs had great inhibitory effect on chosen pathogens. ConclusionCapsicura and garlic can inhibit some pathogens in vitro. Traditional Chinese herbs such as Bark of Chinese Corktree can inhibit pathogens greatly. Medium affects inhibiting effect greatly.Key words： Capsicum; Garlic; Bark of Chinese Corktree; K-B programe; Inhibitory effect in vitro大蒜是人们日常饮食中的重要调味品，具有健胃开食、增进消化的功能，其辛辣成分大蒜素对多种病原菌及深部感染真菌有抑制作用[1，2]，在禽类及水产养殖方面对养殖动物能起到防病保健和促进生长的作用[3，4];此外，大蒜还有良好的抗氧化作用，可加入食用油延长其保质期[5];在疾病预防方面，经常进食大蒜可以提高血浆及红细胞抗氧化性能[6],并能有效降低血压，预防动脉粥样硬化和心脑血管疾病[7，8];大蒜还可以抑制结肠癌细胞的生长[9]，也可通过抑制硝酸盐还原细菌繁殖和亚硝酸盐合成预防胃癌的发生[10];除大蒜素外，大蒜还含有大蒜多糖等多种保健成分，可以和银杏叶制成天然保健饮料[11，12]。

156生物技术世界 BIOTECHWORLD1 材料与方法1.1 材料实验中要用到的主要试剂有营养肉汤、营养琼脂、小牛血清。

要用到的中药材有黄柏、栀子、佛手、何首乌、姜黄、细毡毛忍冬和杜仲。

要用到的菌株有标准沙门氏菌、标准大肠杆菌、临床巴氏杆菌和临床大肠杆菌。

1.2 实验方法1.2.1 七种中药有效成分的提取提取液的成分主要是乙醚和浓度不同的乙醇。

提取过程的相关数据见表1:根据上表对中药材进行有效成分提取后,将滤液合并,真空浓缩,待其干燥后所得物就是中药提取物浸膏,计算浸膏得率。

1.2.2 中药提取物溶液的制备采用少量二甲亚砜对浸膏进行溶解,以蒸馏水辅助定容,配置成生药浓度为1g.mL -1的原液,用流通蒸汽进行灭菌后放置到4℃的冰箱中保存备用。

在使用之前,利用灭菌营养肉汤来稀释浓度,大约稀释到500mg.mL -1。

1.2.3 制备菌悬液在营养琼脂培养基中划线接种保种菌液,37℃恒温环境中培养24小时,之后在营养肉汤培养基中将取出的单个典型菌落接种,在37℃的恒温水浴中震荡培养24小时候留作备用。

取出八个装入4.5mL生理盐水的灭菌试管,第一个试管加入0.5mL活化菌液,之后的试管活化菌液浓度依次稀释10倍。

用微量移液器取出稀释浓度不同的稀释液放到琼脂平板上,均匀涂布,考虑实验需要,每个浓度涂布三个平板,在24小时之后计数细菌数目,,将数目在30到300个之间的平板个数记录下来,并求出其平均值。

最后将其稀释到106cFu.mL-1的细菌数。

之后测定各个最小杀菌浓度MBC和最小抑制菌浓度MIC。

2 结果与分析2.1 实验结果由表中数据可以得知,在这七种药材中,抑菌效果最好的是黄柏,其提取物对临床巴氏杆菌的抑菌效果更好(表2)。

2.2 结果分析与总结煎煮法是最为常用的传统中药提取方法,此外还有渗漉法、浸渍法和热回流法等等。

煎煮法的优点明显,弊端也不容忽视,例如有效成分流失现象严重,尤其是一些不溶于水的成分,在浓缩过程中难度较大,易失效变质。

20种水产养殖常用中草药体外抑菌试验研究作者：周冬仁罗毅志等来源：《现代农业科技》2013年第03期摘要采用试管倍比稀释法，选择大黄、黄芪、黄芩等20种中草药对淡水养殖常见2种主要致病菌进行体外抑菌试验，测定其最低抑菌浓度（MIC）。

试验结果表明，大黄、黄芩、穿心莲、连翘、贯众的抑菌效果最好，从而为研制水产用的中草药方剂提供理论依据。

关键词中草药；水产养殖；抑菌试验；最低抑菌浓度中图分类号 S948 文献标识码 A 文章编号 1007-5739（2013）03-0303-01我国水产养殖模式大部分属于高密度养殖，高密度养殖有较高的投资回报，但是容易大规模暴发病害，在实际生产中为了防治病害，大量使用化学药品及抗菌药物，进而给水产品质量带来隐患。

目前，利用我国传统中草药防治水产病害、减少抗生素使用量及提高免疫力成为兽医药理学研究热点之一[1-3]。

课题组根据2010年出版的兽药国家标准汇编中中药部分的内容结合实际应用，挑选出大黄、鱼腥草、黄芪等多种中草药进行抑菌效果测定，为增加抗菌中草药种类和制剂研发提供科学依据[4]。

1 材料与方法1.1 试验材料1.1.1 供试菌株。

试验菌株共有3株，分别为：标准株嗜水气单胞菌嗜水亚种菌株（购于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号：cgmcc1.0927）；嗜水气单胞菌（从湖州地区患病甲鱼中分离得到）；爱德华氏菌。

后2组菌株由浙江省淡水水产研究所实验室分离鉴定[5]。

1.1.2 供试药物。

供试大黄、黄芪、黄芩、甘草、穿心莲、金银花、虎杖、大青叶、鱼腥草、板蓝根、柴胡、川楝子、黄柏、地锦草、五倍子、茵陈、连翘、陈皮、贯众、苦参，购于湖州开心人大药房。

1.1.3 培养基。

营养肉汤培养基购于杭州天和生物制剂公司，121 ℃灭菌15 min备用。

1.2 试验方法1.2.1 药液提取。

水提法，取各种单味中药50 g，粉碎后加超纯水300 mL，温室浸泡过夜，煎30 min，纱布过滤药液，重复3次，最后将过滤液蒸馏浓缩至药液内含原药1 g/mL。

中草药对大肠杆菌体外抑菌试验＊路振香时维静杨用光（安徽技术师范学院，安徽凤阳，233100）选用27种不同的中草药制剂（煎剂、挥发油、蒸馏液，以平板稀释法和纸片法对一株肉鸡源的大肠杆菌进行体外抑菌试验。

结果表明，有14种中药对此株大肠杆菌有不同程度的抑制作用。

试验还表明中药制剂的配方工艺不同，其抑菌的效果亦有不同。

关键词：中药；大肠杆菌; 抑菌作用中兽医学有着悠久的历史和丰富的应用经验，在抗生素使用以前，对保障家畜健康起着重要作用。

随着科学技术的不断发展，西药以其方便快捷的优势逐渐在临床应用中占据主导地位，但由于西药抗生素类的广泛使用，使得病原菌的抗药性日趋增强[1]，中草药作为替代抗生素解决抗药性和药残的重要方案，越来越受到重视[2-3]，尤其是近年来肉食品中的抗生素残留问题已经被提到了一定的高度，而大肠杆菌又属于多血清型和变异型强的细菌，极易产生抗药性，笔者用不同种类和浓度的中药制剂分别用平板稀释法和纸片法对大肠杆菌进行体外抑菌试验，以期筛选出具有临床应用价值的中药制剂，为畜牧业生产服务。

1材料方法1.1材料1.1.1试验菌株肉鸡源大肠杆菌（安徽技术师范学院动科系预防兽医教研室提供）。

1.1.2 培养基普通营养琼脂、麦康凯琼脂。

按常规方法配制。

1.1.3 单味中药银花、防风、板兰根、白芷、连翘、杏仁、射干、辛夷、贯众、羌活、荆芥、藿香，每ml相当于1g生药量。

中草药的煎制与蒸馏由安徽技术师范学院中药实验室完成。

1.1.4 复方中药银射煎液、麻杏射防煎液、羌藿连防煎液、辛芷荆煎液、辛芷荆蒸馏液、银射蒸馏液、羌藿连防蒸馏液、麻杏射防蒸馏液，每ml相当于1g生药量。

1.2 方法1.2.1大肠杆菌对中药（单味、复方）敏感性的体外试验——平板稀释法[4]。

1.2.1.1取1ml原药液为第一支试管；在第二只试管中分别加入0.5ml原药液和0.5ml生理盐水以倍比稀释法稀释至第四支试管；第五支试管为无药对照，每支试管中均含有1ml不同浓度的药液。

蟾皮有效成分提取工艺优化及其体外抑菌试验目录一、内容概述 (2)1. 研究背景 (2)2. 研究目的与意义 (4)3. 文献综述 (4)二、材料与方法 (5)三、实验设计与实施 (7)1. 提取工艺优化实验设计 (8)原料选择与处理 (9)步骤与参数设置 (9)中间检测与调整 (10)最佳条件筛选 (12)2. 体外抑菌试验设计 (13)细菌菌种与来源 (14)试验介质与浓度 (14)数据收集与分析 (15)四、结果与讨论 (16)1. 提取工艺优化结果 (17)数据呈现与分析 (17)最优条件确认 (18)2. 体外抑菌试验结果 (19)不同浓度下的抑菌效果 (20)抑菌谱测定 (21)3. 结果讨论 (22)提取工艺的可行性与合理性评估 (23)体外抑菌作用的机制探讨 (24)与其他研究的比较与分析 (25)五、结论与展望 (27)一、内容概述本文深入研究了蟾皮有效成分的提取工艺，并对其体外抑菌性能进行了评估。

通过一系列实验，旨在优化提取条件，提高蟾皮中有效成分的纯度和生物活性，同时验证其在抗菌治疗中的潜在应用价值。

在提取工艺方面，本文首先对蟾皮中的有效成分进行了鉴定和分类，明确了其主要活性成分为蟾皮素等。

文章比较了不同提取方法的优劣，最终确定采用超声波辅助提取法，结合醇沉技术，能够最大程度地提取出蟾皮中的有效成分。

在体外抑菌试验中，本文选用了多种常见细菌进行测试。

经过优化的提取工艺制备的蟾皮提取物对多种细菌具有显著的抑制作用，其抑菌效果与浓度呈正相关。

文章还对提取物的抑菌机制进行了初步探讨，发现其可能通过破坏细菌细胞壁或干扰细菌代谢途径来发挥抑菌作用。

本文的研究为蟾皮有效成分的进一步开发和应用提供了有力支持。

通过优化提取工艺和评估体外抑菌性能，不仅提高了蟾皮资源的利用率，还为抗感染药物的研发提供了新的思路。

1. 研究背景又称蟾蜍皮，是一种传统中药材，广泛分布于中国的华东、华南、西南等地。

在中医药理论中，蟾皮具有清热解毒、消肿止痛、抗癌等多种药理作用，被广泛应用于治疗痈疽肿毒、咽喉肿痛、跌打损伤等病症。

3种中草药对4种细菌的体外抑菌试验刘先敏【期刊名称】《河南畜牧兽医（综合版）》【年(卷),期】2015(036)009【摘要】探讨五味子、贯众、金银花3种中草药对鸡源性大肠杆菌、鸡源性沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌的体外抑菌作用.采用牛津杯法,选用五味子、贯众、金银花水煎液及五味子贯众混合水煎液、五味子金银花混合水煎液、五味子贯众金银花混合水煎液对鸡源性大肠杆菌、鸡源性沙门氏菌、金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌进行体外抑菌试验,测定抑菌圈的直径.结果表明:五味子水煎液对4种细菌均有较强的抑菌作用,贯众和金银花水煎液对4种细菌均没有抑菌作用;五味子贯众混合水煎液、五味子金银花混合水煎液、五味子贯众金银花混合水煎液对4种细菌均有抑菌作用,但抑菌作用均明显弱于单味药五味子水煎液;且五味子贯众金银花混合水煎液对鸡源性大肠杆菌、鸡源性沙门氏菌、枯草芽孢杆菌的抑菌作用弱于五味子贯众混合水煎液、五味子金银花混合水煎液.【总页数】3页(P6-8)【作者】刘先敏【作者单位】河南省动物疫病预防控制中心,河南郑州450008【正文语种】中文【中图分类】S852.61【相关文献】1.中草药对家蚕病原细菌的体外抑菌试验 [J], 高绘菊;胡增娟;窦学娥;牟志美;郭良让2.中草药肠宁Ⅱ对9种细菌的体外抑菌试验 [J], 孙福亮;鞠玉琳;赵达卓;金美花3.11种中草药对8种常见细菌的体外抑菌试验 [J], 高尚进;毛艳;周汉东;唐小凤;高思敏;葛东梅;杨宗琪4.23种中草药及复方对鲫肠道3种细菌的体外抑菌试验 [J], 李茜;张懿瑾;华汝泉;胡晓玲;刘文斌5.用改进的方法测中草药对细菌的体外抑菌试验 [J], 司红彬;陈鹏举;赵瑞丽;匡秀华;胡功政因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

黄芩等六种中草药的体外抑菌试验王德成;张翠婷【摘要】应用平板打孔法和试管两倍稀释法检测了本地常见清热型中草药黄芩、青葙子、五色梅、一点红、鸡蛋花、少花龙葵等对沙门氏菌和大肠杆菌的抑制作用.结果表明:沙门氏菌对黄芩、一点红和鸡蛋花呈高度敏感,最小抑菌浓度在1/40～1/10之间;对少花龙葵呈中度敏感,最小抑菌浓度为大于1/10;而对青葙子和五色梅不敏感.大肠杆菌K88对黄芩、一点红、鸡蛋花和少花龙葵都呈高度敏感,黄芩和鸡蛋花的最小抑菌浓度在1/20～1/10;一点红和少花龙葵大于1/10;对青葙子和五色梅不敏感.大肠杆菌26和大肠杆菌40除对黄芩呈高度敏感外,对其他5种中草药均不敏感.【期刊名称】《广东畜牧兽医科技》【年(卷),期】2010(035)006【总页数】3页(P26-27,44)【关键词】中草药;体外抑菌试验;抑菌作用【作者】王德成;张翠婷【作者单位】东莞市黄江兽医站,广东东莞523770;东莞市黄江兽医站,广东东莞523770【正文语种】中文【中图分类】S853.75随着集约化养殖业的发展，动物的发病率呈上升的趋势，用化学药物防治疾病，不但可使动物抗病力减弱，而且可在动物体中残留蓄积，产生毒副作用，危及动物和人体的健康。

细菌引起的家畜疾病经常发生，其耐药性问题已经成为全球关注的热点。

积极开展抗菌中草药的筛选和应用研究对于动物细菌性疾病的防治具有重要意义。

广东中草药资源十分丰富，对本地广泛分布的中草药的研究和利用，具有长远的发展意义和经济意义。

本试验旨在探讨应用本地新鲜中草药对常见家畜致病菌的体外抑制作用，希望能找到新的抗菌资源，为天然药物及抗菌饲料添加剂的开发和利用奠定基础。

1 材料与方法1.1 材料1.1.1 药敏实验待检药物黄芩：黄芩的根，有较广的抗菌谱，体外试管试验黄芩对沙门氏菌，金黄色葡萄球菌敏感，对大肠杆菌较差[1]。

青葙子：秋季果实成熟时采割植物或摘取果穗，晒干，收集种子。