IGF-Ⅰ明胶微球对骨髓基质干细胞增殖作用的实验性研究

S D F 1α对大鼠骨髓源性内皮祖细胞克隆形成能力及增殖的影响夏艺萍　危当恒　童中艺　吕运成　姚峰　周晓峰　田永凤　姜志胜　王佐【摘要】　目的　观察基质细胞衍生因子-1α(S D F -1α)对体外培养的大鼠骨髓源性内皮祖细胞(E P C s )动员和增殖的影响。

方法　微孔法获取大鼠骨髓E P C s 并采用荧光显微镜和流式细胞术鉴定E P C s 特异性标记物。

不同浓度S D F -1α处理E P C s 后,采用细胞培养、M T T 检测E P C s 的克隆形成、细胞增殖。

结果　通过M T T 法检测,对照组与(1、10、100μg /L )S D F -1α处理组的O D 值分别为0.311±0.054、0.587±0.072、0.813±0.056、1.029±0.078,通过统计学方法分析,对照组与S D F -1α处理组比较差异均有统计学意义(n =5,P<0.05);100μg /LS D F -1α处理组次级内皮祖细胞集落单位数目是对照组近3倍(4.67±1.577比14.33±3.055,n =5,P<0.01)。

结论　S D F -1α剂量依赖性地促进E P C s 增殖,并显著增强E P C s 克隆形成能力。

【关键词】　基质细胞衍生因子-1α;内皮祖细胞;增殖E f f e c t s o f s t r o m a l c e l l -d e r i v e df a c t o r -1αo np r o l i f e r a t i o na n dc l o n e f o r m a t i o no f r a t b o n em a r r o wd e -r i v e de n d o t h e l i a l r r o g e n i t o r C e l l s X I AY i -p i n g ,W E I D a n g -h e n g ,T O N GZ h o n g -y i ,e t a l .I n s i t i t u e o f C a r d i o -v a s c u l a r D i s e a s e ,K e y L a b f o r A r t e r i o s c l e r o l o g y o f H u n a n P r o v i n c e ,U n i v e r s i t y o f N a n h u a ,H e n g y a n g 421001,C h i n a【A b s t r a c t 】　O b j e c t i v e T o i n v e s t i g a t e t h er o l e o f s t r o m a l c e l l -d e r i v e d f a c t o r -1α(S D F -1α)t op r o l i f e r a -t i o n a n d c l o n e f o r m a t i o n o n e n d o t h e l i a l p r o g e n i t o r c e l l s (E P C ).Me t h o d s B o n e m a r r o wd e r i v e d E P Cw e r e i n d -f i n e db y i m m u n o f l u o r e s c e n c e s t a i n i n ga n df l o wc y t o m e t r y .T r e a t e dw i t hd i f f e r e n t c o n c e n t r a t i o n s o f S D F -1α,t h e p r o p e r t y o f p r o l i f e r a t i o n w a s d e t e c t e d b y M M Ta n d c l o n e f o r m a t i o n w a s d e t e c t e dw i t h o p t i c a l m i c r o s c o p y .R e s u l t s S D F -1αp r o m o t e d E P Cp r o l i f e r a t i o na n dc l o n e f o r m a t i o nw i t hc o n c e n t r a t i o n -d e p e n d e n t m a n n e r .C o n c l u s i o n S D F -1αc a n i m p r o v e p r o l i f e r a t i o n o f E P C .【K e yw o r d s 】　S t r o m a l C e l l -D e r i v e d F a c t o r -1α;E n d o t h e l i a l P r o g e n i t o r C e l l s ;P r o l i f e r a t i o n 基金项目:中国博士后基金(项目编号:2005038472);湖南省自然科学基金(项目编号:07j j 3034);湖南省教育厅课题(项目编号:07C 617);湖南省自然科学基金(项目编号:06j j 5051)作者单位:421001湖南省衡阳市南华大学心血管病研究所/动脉硬化学湖南省重点实验室/南华大学护理学院 基质细胞衍生因子-1(S t r o m a l c e l l d e r i v e d f a c t o r 1,S D F -1)属于内分泌型C X C 趋化蛋白超家族,包括两种同分异构体,S D F -1α和S D F -1β,两者的区别在于前者比后者少4个3′氨基酸[1-3]。

《骨髓间充质干细胞源性外泌体通过上调Wnt3a促进软骨细胞再生、修复》篇一骨髓间充质干细胞源性外泌体通过上调Wnt3a促进软骨细胞再生与修复的机制研究一、引言随着再生医学的飞速发展，干细胞源性外泌体在组织修复和再生领域的应用日益受到关注。

骨髓间充质干细胞（MSCs）作为一种具有多向分化潜能和免疫调节功能的细胞，其源性外泌体在促进软骨细胞再生与修复方面具有显著作用。

本文旨在探讨骨髓间充质干细胞源性外泌体如何通过上调Wnt3a，促进软骨细胞的再生与修复。

二、骨髓间充质干细胞源性外泌体的制备与特性骨髓间充质干细胞是一种能够自我更新并分化为多种细胞类型的多能性细胞。

通过特定的分离培养技术，可获取MSCs，并从中提取其外泌体。

这种外泌体含有多种生物活性分子，如蛋白质、RNA和酶等，具有促进细胞增殖、迁移和分化等作用。

三、Wnt3a在软骨细胞再生与修复中的作用Wnt信号通路在软骨细胞的发育和功能维持中起着重要作用。

Wnt3a作为Wnt信号通路的关键因子，能够促进软骨细胞的增殖和分化。

在软骨损伤修复过程中，Wnt3a的表达水平上升，有助于软骨细胞的再生与修复。

四、骨髓间充质干细胞源性外泌体对Wnt3a的调控作用研究表明，骨髓间充质干细胞源性外泌体能够通过上调Wnt3a的表达，促进软骨细胞的再生与修复。

外泌体中的某些生物活性分子能够与Wnt3a相互作用，激活Wnt信号通路，从而促进软骨细胞的增殖、迁移和分化。

此外，外泌体还能够降低炎症反应，为软骨细胞的再生与修复创造良好的微环境。

五、骨髓间充质干细胞源性外泌体促进软骨细胞再生与修复的机制1. 上调Wnt3a：骨髓间充质干细胞源性外泌体中的生物活性分子与Wnt3a相互作用，激活Wnt信号通路，从而促进软骨细胞的增殖和分化。

2. 抗炎作用：外泌体具有降低炎症反应的作用，减轻软骨组织的炎症损伤，为软骨细胞的再生与修复创造良好的微环境。

3. 促进细胞迁移：外泌体能够促进软骨细胞的迁移，使损伤部位的软骨细胞能够迅速迁移至损伤区域进行修复。

《骨髓间充质干细胞源性外泌体通过上调Wnt3a促进软骨细胞再生、修复》篇一骨髓间充质干细胞源性外泌体通过上调Wnt3a促进软骨细胞再生与修复的研究一、引言随着再生医学的不断发展，骨髓间充质干细胞（BMSCs）的广泛应用引起了广泛关注。

近年来，越来越多的研究表明，骨髓间充质干细胞源性外泌体（Exosomes）在软骨细胞再生与修复方面发挥着重要作用。

其中，Wnt3a信号通路的激活是外泌体发挥生物学效应的关键机制之一。

本文旨在探讨骨髓间充质干细胞源性外泌体通过上调Wnt3a促进软骨细胞再生和修复的作用机制，以期为临床应用提供理论依据。

二、方法1. 材料与设备本研究使用骨髓间充质干细胞及软骨细胞等细胞材料，并利用实验仪器检测Wnt3a信号通路等关键分子的表达情况。

2. 实验方法（1）BMSCs源性外泌体的提取与鉴定：通过培养BMSCs并收集其分泌的外泌体，进行形态学和分子学鉴定。

（2）软骨细胞损伤模型的建立：采用特定方法诱导软骨细胞损伤，为后续实验提供损伤模型。

（3）BMSCs源性外泌体对软骨细胞的作用：将BMSCs源性外泌体加入软骨细胞中，观察其对软骨细胞的保护作用和再生效果。

（4）Wnt3a信号通路的检测：利用实验方法检测BMSCs源性外泌体处理后软骨细胞中Wnt3a等关键分子的表达情况。

三、结果1. BMSCs源性外泌体的提取与鉴定结果通过培养BMSCs并收集其分泌的外泌体，成功提取出形态学和分子学特征明显的外泌体。

2. 软骨细胞损伤模型的建立结果成功建立软骨细胞损伤模型，为后续实验提供了可靠的实验基础。

3. BMSCs源性外泌体对软骨细胞的作用结果BMSCs源性外泌体能够显著促进软骨细胞的再生和修复，提高软骨细胞的存活率和功能恢复。

4. Wnt3a信号通路的检测结果BMSCs源性外泌体处理后，软骨细胞中Wnt3a等关键分子的表达水平显著上升，表明Wnt3a信号通路被激活，是BMSCs源性外泌体促进软骨细胞再生和修复的关键机制之一。

微流控芯片上胰岛素样生长因子1和碱性成纤维细胞生长因子对兔关节软骨细胞增殖的影响李元城;张卫国;秦建华;林炳承【摘要】Objective To investigate the effects of insulin-like growth factor-1 (IGF-1) and basic fibroblast growth factor (bFGF) on the proliferation of chondrocytes in a 3-dimensional (3D) culture environment of microfluidic chip.Method Rabbit articular chondrocytes embedded in microfluidic chip and 96-well plate were cultured with solitary and component concentrations of IGF-1 and bFGF for 2 weeks,and then the proliferation rates of chondrocytes were calculated and compared.Results The maximal proliferation effect of IGF-1 was found when the concentration reached 57.14ng/ml (up to 2.38-fold),and of bFGF at the concentration of5.72ng/ml (up to 3.85-fold),while the maximal proliferation effect of combination of IGF-I+bFGF was found at the concentration of 85.71ng/ml IGF-1 plus 1.43ng/ml bFGF (up to 4.76-fold).There was no significant difference between the proliferation rate of chondrocytes cultured in microfluidic chip and 96-well plate.Conclusions A combination of IGF-1 plus bFGF in certain concentration may synergistically increase the proliferation of chondrocytes.Microfluidic chip could be used for efficient cartilage tissue engineering.%目的在微流控芯片平台上探索三维培养环境下胰岛素样生长因子1(IGF-1)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对软骨细胞体外增殖的影响.方法微流控芯片上,分别在IGF-1、bFGF以及二者组合浓度梯度下三维培养兔关节软骨细胞,2周后计算软骨细胞增殖率并与传统的96孔板培养结果进行比较.结果 IGF-1在57.14ng/ml产生最大增殖效应,平均倍增2.38倍；bFGF在5.72ng/ml产生最大增殖效应,平均倍增3.85倍；85.71ng/ml IGF-1+1.43ng/ml bFGF的组合可使软骨细胞产生最大的增殖效应,平均倍增4.76倍.微流控芯片与96孔板传统培养的软骨细胞增殖率差异无统计学意义.结论一定浓度组合的IGF-1和bFGF可协同产生最大的增殖效应；微流控芯片技术可用于软骨组织工程领域,具有广阔的应用前景.【期刊名称】《解放军医学杂志》【年(卷),期】2013(038)006【总页数】5页(P476-480)【关键词】软骨细胞;组织工程;微流控芯片;胰岛素样生长因子1;成纤维细胞生长因子2【作者】李元城;张卫国;秦建华;林炳承【作者单位】116001辽宁大连大连医科大学附属第一医院骨科;116001辽宁大连大连医科大学附属第一医院骨科;116001 辽宁大连中国科学院大连化学物理研究所;116001 辽宁大连中国科学院大连化学物理研究所【正文语种】中文【中图分类】R394.26关节软骨是一种无血管组织，其结构特点决定了软骨一旦受损便很难自我修复。

胰岛素样生长因子-1对血管平滑肌细胞增殖的影响李飞虹;尚茹茹;吕淑萍;张锦;来春林;刘晓红【期刊名称】《中国药物与临床》【年(卷),期】2017(017)003【摘要】目的探讨胰岛素样生长因子-1(IGF-1)对血管平滑肌细胞(VSMC)增殖的影响.方法用脂多糖(LPS)诱导巨噬细胞RAW264.7极化为M1型巨噬细胞,制备炎症模型即条件培养基(CM),未加LPS诱导组为对照组即非条件培养基(nCM).体外培养VSMC分为5组,分别予nCM、CM、CM+IGF-160 ng/ml、CM+IGF-190ng/ml、CM+IGF-1120 ng/ml干预,用噻唑蓝(MTT)法检测各组吸光度(A)值,以A 值反应各组VSMC的数量.结果巨噬细胞RAW264.7在LPS 0 ng/ml、10 ng/ml、100 ng/ml、1μg/ml、10μg/ml浓度刺激下各组上清液中IL-6的浓度分别是(6.75±0.12)pg/ml、(7.82±1.53)pg/ml、(44.09±1.58)pg/ml、(155.71±23.93)pg/ml、(436.59±3.15)pg/ml,差异有统计学意义(P<0.01);VSMC 在5组不同干预下各组A值分别是(0.53±0.07)、(0.26±0.06)、(0.30±0.10)、(0.62±0.09)、(0.55±0.05),差异有统计学意义(P<0.01).结论 M1型巨噬细胞可抑制VSMC增殖,但IGF-1可拮抗M1型巨噬细胞对VSMC增殖的抑制作用,本实验中IGF-1促进VSMC增殖的最适浓度为90 ng/ml.%Objective To investigate the effect of insulin-like growth factor-1 (IGF-1) on the proliferation of vascular smooth muscle cells (VSMCs). Methods Macrophages RAW264.7 was induced by lipopolysaccharide (LPS) and polarized into M1 macrophages. The inflammation model, the conditioned medium (CM) was prepared. The non-LPS induced group, the unconventional culture medium(nCM) was included as the control group. The in vitro cul-tured VSMC was divided into five groups, which were given intervention with nCM, CM,CM+IGF-160 ng/ml, CM+IGF-190 ng/ml, CM+IGF-1120 ng/ml, respectively. The A value in each group was determined by MTT method, and the number of VSMC in each group was reflected by A value. Results The macrophages RAW264.7 were stimulated by LPS of the concentrations of 0 ng/ml, 10 ng/ml, 100 ng/ml, 1 μg/ml and 10μg/ml, and the concentration of IL-6 in the supernatant of each group was (6.75 ±0.12) pg/ml, (7.82±1.53) pg/ml, (44.09 ±1.58) pg/ml, (155.71 ±23.93) pg/ml and(436.59±3.15) pg/ml, and the difference was statistically significant(P<0.01). The A value of VSMC wa s (0.53± 0.07), (0.26±0.06), (0.30±0.10), (0.62±0.09) and (0.55±0.05) in the five groups under different interventions, respec-tively, and the difference was statistically significant (P<0.01). Conclusion M1 macrophages can inhibit the prolifer-ation of VSMC, but IGF-1 can antagonize the inhibitory effect of M1 macrophages on the proliferation of VSMC. In this study, the optimal concentration of IGF-1 in promoting VSMC proliferation is 90 ng/ml.【总页数】4页(P334-337)【作者】李飞虹;尚茹茹;吕淑萍;张锦;来春林;刘晓红【作者单位】030012 太原,山西医科大学附属省人民医院;030012 太原,山西医科大学附属省人民医院;030012 太原,山西医科大学附属省人民医院;030012 太原,山西医科大学附属省人民医院;030012 太原,山西医科大学附属省人民医院;030012 太原,山西医科大学附属省人民医院【正文语种】中文【相关文献】1.胰岛素样生长因子-1对大鼠血管平滑肌细胞增殖及凋亡的影响 [J], 尚茹茹;刘晓红;张锦;李飞虹;吕淑萍;王兴兴;文仙仙;张娜2.胰岛素样生长因子结合蛋白5对大鼠血管平滑肌细胞增殖的影响 [J], 王利娟;支运来3.miR-17通过靶向胰岛素样生长因子1调节冠状动脉疾病中血管平滑肌细胞增殖[J], 金爱萍;李书琳;张倩榕;李冰4.胰岛素样生长因子1受体抗体对大鼠血管平滑肌细胞增殖的影响 [J], 苏海霞;盛净;刘德莉;夏万尧;成静;陈朝婷5.胰岛素样生长因子-1受体中的寡核苷酸反义链对血管平滑肌细胞增殖的影响 [J], 孟晓萍;王智慧;崔健华;PatrickDelafotain因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

骨形态发生蛋白缓释微球结合富血小板凝胶对骨髓基质干细胞增殖分化的影响卢晓郎;郑亦静;程涛;叶超;洪建军【期刊名称】《中国组织工程研究》【年(卷),期】2016(020)047【摘要】BACKGROUND:Various growth factors together participate in the different stages of bone healing, but the current tissue-engineered materials limited on single type and concentration cannot obtain satisfactory outcomes. There is stil a lack of study on the novel tissue-engineered material releasing two or more growth factors in order. OBJECTIVE:To observe the effect of platelet-rich gel (PRG) combined with poly(lactide-glycolide acid) (PLGA) microspheres encapsulating bone morphogenetic protein-2 (BMP-2) on the proliferation and osteoblastic differentiation of bone marrow stromal stem cel s. METHODS:PLGA microspheres loading BMP-2 were prepared by multiple emulsion method, and the encapsulation rate, morphology and volume of microspheres as wel as in vitro releasing rate of BMP-2 were measured. The eligible microspheres combined with the activated PRG were co-cultured with human bone marrow stromal stem cel s on the PLGA three-dimensional scaffold. Additional y, bone marrow stromal stem cel s were divided into six groups including platelet poor gel, PRG, BMP-2/platelet poor gel, BMP-2/PRG, BMP-2 microspheres/platelet poor gel and BMP-2microspheres/PRG groups, and the preprocessed PLGA scaffold was added into each group. The DNA content, alkaline phosphatase activity and mRNA expression levels of osteopontin and osteocalcin were observed. RESULTS AND CONCLUSION:The DNA content of bone marrow stromal stem cel s was higher in al PRG scaffolds compared with the platelet poor gel scaffolds. The alkaline phosphatase activity and mRNA expression levels of osteopontin and osteocalcin in the BMP-2 microspheres/platelet poor gel and BMP-2 microspheres/PRG groups were markedly higher than those in the other four groups. These results suggest that the BMP-2 sustained-release microspheres combined with PRG are able to enhance the proliferation and differentiation of bone marrow stromal stem cel s.%背景：在骨组织愈合过程的不同阶段需要不同种类的生长因子协同参与，目前组织工程中对生长因子的递送大多局限于单一种类和单一浓度，其结果往往差强人意。

补肾益精中药调控体外培养成骨细胞IGF-I分泌与表达的研究赵咏芳;詹红生;徐宇;石印玉【期刊名称】《上海中医药杂志》【年(卷),期】2006(40)12【摘要】目的观察补肾益精中药对体外培养成骨细胞类胰岛素样生长因子I(IGF-I)分泌和表达的影响,探讨补肾益精中药调节骨重建的作用机理。

方法采用连续酶消化法培养大鼠颅盖骨成骨细胞,观察补肾益精药物血清对成骨细胞增殖率、碱性磷酸酶(ALP)、矿化结节数目以及成骨细胞不同分化时期IGF-I分泌和mRNA表达的影响。

结果与对照组比较,补肾益精中药能明显增加成骨细胞增殖率,提高成骨细胞ALP分泌量,增加矿化结节数;中药组IGF-I的分泌在第7d、第21d时与对照组比较无差异,但在第14d时IGF-I的分泌量明显高于对照组,同时其成骨细胞IGF-I mRNA表达下调。

结论补肾益精中药可能通过调控细胞因子IGF-I的表达与分泌发挥促进骨形成的作用。

【总页数】3页(P4-6)【关键词】补肾益精中药;药理学;成骨细胞;骨重建;骨形成;IGF—I【作者】赵咏芳;詹红生;徐宇;石印玉【作者单位】上海中医药大学附属曙光医院;上海市中医药研究院骨伤科研究所【正文语种】中文【中图分类】R285.5【相关文献】1.三种补肾中药有效成份促进体外培养成骨细胞增殖的研究 [J], 沈骅睿;李婷;胡晓梅;杨松涛;扶世杰;汪国友;赵家松;郝奇;关钛元;曾胜强2.益骨汤对体外培养成骨细胞增殖及分泌胰岛样生长因子I的影响 [J], 陈芳;张宜;刘琴;王丽平3.益骨胶囊含药血清对体外培养成骨细胞分泌胰岛素样生长因子Ⅰ的影响 [J], 朱晓峰;张荣华4.补肾中药血清对体外培养成骨细胞合成碱性磷酸酶及骨钙素的调控 [J], 余克强5.鲑鱼降钙素对体外培养鼠成骨细胞增殖及IGF-I表达的影响 [J], 赵中涛;刘强;吴斗因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

人胰岛素样生长因子Ⅰ基因的半合成及其克隆表达
凌明圣;许祥裕
【期刊名称】《中国生化药物杂志》
【年(卷),期】1999(020)004
【摘要】目的将人胰岛素样样生长因子Ⅰ（ＩＧＦ－Ⅰ）基因克隆到ｐＥＴ１１Ｃ中，构建成ｐＥＴＩＧＦ－Ⅰ表达载体，完成人ＩＧＦ－Ⅰ基因大在大肠杆菌中的表达。

方法利用固相亚磷酸三酯法化学合成人ＩＧＦ－Ⅰ基因的２条寡核苷酸片段，通过互补配对和Ｋｌｅｎｏｗ酶促补平成完整的ＩＧＦ－Ⅰ双链ＤＮＡ片段，然后经酶切克隆于ｐＴＶ１１８Ｎ载体中，构建ｐＴＶＩＧＦ－Ⅰ克隆载体并测定ＤＮＡ序列后，构建ｐＥＴＩＧＦ－Ⅰ表达载体。

结
【总页数】4页(P166-169)
【作者】凌明圣;许祥裕
【作者单位】南京军区军事医学研究所;南京军区军事医学研究所
【正文语种】中文
【中图分类】R378.21
【相关文献】
1.广州管圆线虫半乳凝素基因的克隆表达、蛋白纯化及免疫反应性研究 [J], 郝丽;吴焜;陈晓光;王琼
2.人胰岛素样生长因子Ⅰ基因修饰成肌细胞移植心肌梗死大鼠心肌细胞胰岛素样生长因子Ⅰ及端粒酶反转录酶mRNA的表达 [J], 高焱章;卢永昕;米少华;荣书玲;刘
晓明;粱振涛
3.人心钠素的蛋白质工程研究Ⅰ.一种人心钠素衍生物RH-1的基因合成及克隆表达 [J], 任皓;王启松
4.凡纳滨对虾半胱次磺酸脱羧酶基因的克隆表达 [J], 欧英杰;庄俊钰;许银叶
5.人胰岛素样生长因子Ⅰ基因修饰成肌细胞移植对心肌梗死大鼠心肌细胞胰岛素样生长因子Ⅰ及p16^INK4a和细胞核增殖抗原表达的干预 [J], 高焱章;卢永昕;刘晓明;米少华;苏冠华;荣书玲
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体外构建携带PDGF-BB和IGF-1缓释微粒的脱细胞人工真皮刘诚;付劲松;刘善;周增丁;宋志勇【期刊名称】《组织工程与重建外科杂志》【年(卷),期】2009(005)003【摘要】目的探讨体外构建携带并持续释放血小板源生长因子(PDGF-BB)和胰岛素样生长因子(IGF-1)的脱细胞人工真皮的可行性.方法体外合成含PDGF-BB和IGF-1生长因子的可降解微球,并与脱细胞人工真皮联结,Elisa方法检测人工真皮中生长因子释放情况;通过携带生长因子的人工真皮与真皮成纤维细胞的共培养,采用细胞计数及WST-8比色法,观察成纤维细胞的增殖速率与细胞活力.结果携带生长因子的人工真皮与真皮成纤维细胞共培养组与对照组细胞倍增时间分别为(2.01±0.38)d和(7.27±1.16)d,共培养组细胞倍增时间明显缩短(P<0.05,n=5);体外培养7d、14d、21 d时,共培养组及对照组细胞活力无统计学差异(P>0.05,n=5).结论本实验成功制备了能持续释放PDGF-BB和IGF-1生长因子并加速体外培养的成纤维细胞增殖的人工真皮,为加速创面修复的研究提供实验依据.【总页数】3页(P128-130)【作者】刘诚;付劲松;刘善;周增丁;宋志勇【作者单位】330006,江西省南昌市,江西省人民医院;330006,江西省南昌市,江西省人民医院;330006,江西省南昌市,江西省人民医院;330006,江西省南昌市,江西省人民医院;330006,江西省南昌市,江西省人民医院【正文语种】中文【中图分类】Q813.1+2【相关文献】1.微粒皮复合人工真皮构建的组织工程皮肤用于大鼠巨大创面修复的研究 [J], 汤永喆;何奇;亓发芝2.负载PDGF-BB纳米微球的脱细胞人工真皮修复裸鼠皮肤缺损 [J], 刘诚;付劲松;熊清华;刘淑琴;熊龙3.聚乳酸/聚乙醇酸与脱细胞软骨粒支架及聚乳酸/聚乙醇酸-脱细胞软骨粒支架体外构建组织工程软骨的比较 [J], 张军武;张永红4.载药交联脱细胞角膜基质透镜的制备及体外药物缓释效果评价 [J], 饶静;陈建苏;顾佳宁;陈晓;王译妮;刘永欢;普蔼君;周奇志5.载药交联脱细胞角膜基质透镜的制备及体外药物缓释效果评价 [J], 饶静;陈建苏;顾佳宁;陈晓;王译妮;刘永欢;普蔼君;周奇志因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

明胶纤维支架促进人牙髓干细胞的成纤维分化姜力铭;夏商;宋戈;陈旭【期刊名称】《中国组织工程研究》【年(卷),期】2018(022)013【摘要】BACKGROUND: A tooth can be led to lose viability, split easily and miss immune defensive response by pulpitis and pulp necrosis. Determining how to achieve dental pulp regeneration has become a research focus in dentistry. The physicochemical properties and biocompatibility of scaffold materials are crucial for proliferation and differentiation of stem cells. OBJECTIVE: To study whether a gelatin scaffold can induce dental pulp stem cells to differentiate into fibroblasts.METHODS: Gelatin scaffolds at different concentrations were prepared by electrospinning method. The surface morphology and physical properties of gelatin scaffolds were tested by using scanning electron microscope and tensile tests. The human dental pulp stem cells (hDPSCs) were seeded on the scaffolds and the cell proliferation and fibrogenic differentiation were tested using MTT and RT-PCR. RESULTS AND CONCLUSION: The fiber diameter of the 7.5% gelatin scaffold was (2.02±0.36) μm, and it was increased to (3.15±0.52) μm after cross-linking. In the 15% gelatin scaffold, fiber bonding was detected and strengthened until the emergence of flat structures after cross-linking. Both 7.5% and 15% gelatin scaffolds could promote the adhesion and growth of hDPSCs. Onday 7, the cell number on the 7.5% gelatin scaffold was significantly higher than that on the 15% gelatin scaffold (P < 0.05). The levels of Collagen I, α-SMA, Periostin and Fibronectin were also higher in the 7.5% gelatin scaffold than in the 15% gelatin scaffold (P < 0.05). In conclusion, 7.5% gelatin scaffold is more beneficial to the proliferation and fibrogenic differentiation of hDPSCs.%背景:牙髓炎、牙髓坏死使得牙齿丧失活力,牙质变脆易折裂,并且失去牙髓免疫防御反应,如何实现牙髓组织再生成为口腔领域研究热点.支架材料的理化性质、生物相容性等对于干细胞的增殖和分化起关键作用.目的:探讨明胶纤维支架是否能够促进牙髓干细胞向成纤维细胞分化.方法:通过静电纺丝法合成不同浓度的明胶纤维支架,利用扫描电镜观察支架的表面形貌,拉伸实验检测明胶纤维支架的物理学性质.将人牙髓干细胞接种于支架材料表面,利用 MTT 和 RT-PCR 方法检测明胶纤维支架对人牙髓干细胞增殖和成纤维分化能力的影响.结果与结论:①7.5%的明胶纤维支架纤维直径为(2.02±0.36) μm,交联后纤维直径增大,为(3.15±0.52) μm;15%的明胶支架纤维出现粘结,交联后粘结情况更加显著,纤维结构丧失,呈现平面结构;②两种明胶纤维支架均能促进人牙髓干细胞的黏附和生长,第7天时,7.5%明胶纤维支架上的细胞数量明显高于15%明胶纤维支架(P <0.05);③7.5%明胶纤维支架组Collagen Ⅰ、α-SMA、Periostin和Fibronectin 的表达水平高于15%明胶纤维支架组(P < 0.05);④结果表明,7.5%明胶支架的多孔纤维结构更利于细胞的增殖和向成纤维细胞分化.【总页数】6页(P1981-1986)【作者】姜力铭;夏商;宋戈;陈旭【作者单位】中国医科大学口腔医学院,辽宁省沈阳市 110002;辽宁省口腔疾病重点实验室,辽宁省沈阳市 110002;中国医科大学口腔医学院,辽宁省沈阳市 110002;中国医科大学口腔医学院,辽宁省沈阳市 110002;中国医科大学口腔医学院,辽宁省沈阳市 110002;辽宁省口腔疾病重点实验室,辽宁省沈阳市 110002【正文语种】中文【中图分类】R394.2【相关文献】1.表皮生长因子与碱性成纤维细胞生长因子对人牙髓干细胞分化的影响 [J], 吴桂堂;徐皑;刘兴容2.转化生长因子β1对人牙髓干细胞成纤维向分化的作用 [J], 姜力铭;宋戈;夏商;陈旭3.明胶纤维支架促进人牙髓干细胞的成纤维分化 [J], 姜力铭;夏商;宋戈;陈旭;;;;;;4.Scleraxis联合碱性成纤维细胞生长因子体外促进人羊膜间充质干细胞向人韧带成纤维细胞的定向分化 [J], 桑鹏; 刘毅5.Scleraxis联合碱性成纤维细胞生长因子体外促进人羊膜间充质干细胞向人韧带成纤维细胞的定向分化 [J], Sang Peng; Liu Yi因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

碱性成纤维细胞生长因子缓释微球对软骨细胞作用的实验研究彭智;张一;李波【摘要】目的观察碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)缓释微球对软骨细胞增殖和细胞外基质合成的影响.方法酶消化法从兔肩、膝关节获取软骨细胞,将bFGF微球加入软骨细胞培养液中,流式细胞仪观察细胞增殖情况.同时检测各组DNA总量及糖胺多糖总量.结果流式细胞仪检测显示培养2d后,bFGF组的G2/M+S期百分数最高,4、8d后,bFGF微球组G2/M+S期百分数最高.DNA总量对照组、bFGF组和bFGF微球组分别为(2.82±0.24)、(4.80±0.32)、(6.85±0.35)μg；糖胺多糖总量对照组、bFGF和bFGF微球组分别为(14.21±0.92)、(26.44±1.22)、(34.25±1.84)μg.结论 bFGF促进了软骨细胞增殖,bFGF微球通过较长时间持续释放活性bFGF,明显促进了软骨细胞增殖与分化.【期刊名称】《贵州医药》【年(卷),期】2011(035)011【总页数】2页(P966-967)【关键词】碱性成纤维细胞生长因子;微球体;软骨细胞【作者】彭智;张一;李波【作者单位】贵州省人民医院骨科,贵阳550002;贵州省人民医院骨科,贵阳550002;贵州省人民医院骨科,贵阳550002【正文语种】中文【中图分类】R332碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）可调节软骨的形成，但bFGF在体内的半衰期仅为3～10min，全身或局部应用的效果难以满足临床需要。

因此，有学者开始研究bFGF微球缓释制剂。

本研究旨在观察bFGF微球对体外培养软骨细胞的作用。

1 材料与方法1.1 材料和试剂DMEM培养液（Gibico公司，美国）；Ⅱ型胶原酶（Sigma公司，美国）；0.25%胰蛋白酶（Gibio公司，美国）；bFGF－冻干粉剂（珠海亿胜生物制药有限公司）；自制bFGF－聚乳酸－羟基酸共聚物（PLGA）微球。

类胰岛素生长因子I(IGF-I)基因的克隆及融合蛋白的表达赵大鹏;王晓宇;刘畅;戚凤春;蒙冲;王影;王妍;盛君;杨煜;傅学奇【期刊名称】《中国生物制品学杂志》【年(卷),期】2001(14)3【摘要】目的扩增类胰岛素生长因子Ｉ（ＩＧＦ－Ｉ）２１０ｂｐ的ＤＮＡ片段，将其克隆到ＰＧＥＸ－１λＴ质粒，并转化到Ｅ．ｃｏｌｉＮＨ５２２中高效表达。

方法用改进的ＲＴ－ＰＣＲ法合成人肝脏ｃＤＮＡ，然后从该ｃＤＮＡ文库中扩增出ＩＧＦ－Ｉ基因。

将扩增的ＩＧＦ－ＩｃＤＮＡ用ＢａｍＨＩ和ＥｃｏＲＩ双酶切后，插入到同样双酶切处理的ｐＧＥＸ－１λＴ载体中，连接转化Ｅ．ｃｏｌｉＮＭ５２２，筛选克隆，酶切鉴定后，进行了核苷酸序列分析及表达。

结果将ＩＰＴＧ诱导表达的菌体离心收集，经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析，在相对分子质量３４０００处可见明显高表达带，表达量可占菌体蛋白总量的２０％以上。

免疫印迹表明重组蛋白具有ＩＧＦ－Ｉ的抗原性。

结论重组人ＩＧＦ－Ｉ的成功克隆与表达，将为进一步研究人ＩＣＦ－Ｉ的生物学特性打下基础。

【总页数】4页(P139-142)【关键词】人类胰岛素生长因子;PCR;表达;克隆;融合蛋白【作者】赵大鹏;王晓宇;刘畅;戚凤春;蒙冲;王影;王妍;盛君;杨煜;傅学奇【作者单位】长春生物制品研究所;吉林大学【正文语种】中文【中图分类】R392－33【相关文献】1.乙型肝炎病毒X基因-丙型肝炎病毒C基因融合表达蛋白对肝癌细胞胰岛素样生长因子1受体表达的影响 [J], 刘重阳;王军;杨丽2.在正常和多囊性卵巢综合征卵巢编码胰岛素样生长因子(IGF-I,II),IGF及胰岛素受体和IGF结合蛋白1-6的其基因表达及基因产物的定位 [J],3.大菱鲆2种类胰岛素样生长因子结合蛋白基因克隆及在成鱼和早期发育期中的表达 [J], 胡健;母伟杰;张远青;温海深;关健;官曙光;何峰;李吉方;史丹;马瑞芹;刘淼4.哲罗鲑胰岛素样生长因子－I（IGF－I）cDNA 分子克隆、序列分析及组织表达[J], 王晓玉;纪锋;徐黎明;赵景壮;刘淼;曹永生;尹家胜5.胰岛素样生长因子I(IGF-I)基因的克隆及分泌表达 [J], 赵大鹏;王晓宇;刘畅;郭桥;戚凤春;蒙冲;吴晓娟;王妍;盛君;杨煜;傅学奇因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

骨髓基质细胞与MPEG-PLLA-PLL聚合膜的黏附机制研究的开题报告一、研究背景：骨髓基质细胞是一种重要的细胞类型，在骨髓内具有重要的生物学功能。

近年来，人工聚合物被广泛应用于医学生物材料作为替代品来修复组织和器官，特别是在组织工程和再生医学方面。

其中，聚酯材料如MPEG-PLLA-PLL聚合膜在细胞培养和组织修复中被广泛使用。

因此，研究骨髓基质细胞与MPEG-PLLA-PLL聚合膜的黏附机制对于进一步开发可用于组织工程和再生医学的生物材料具有重要的意义。

二、研究目的：本研究旨在通过实验研究骨髓基质细胞与MPEG-PLLA-PLL聚合膜的黏附机制，探究其黏附的分子和信号通路，为进一步开发生物医用材料提供基础研究和理论支持。

三、研究内容与方法：1. 基于研究目的，本研究将采用以下方法：（1）骨髓基质细胞的纯化和培养（2）制备MPEG-PLLA-PLL聚合膜（3）利用细胞生物学技术（如细胞培养、细胞染色、ELISA、Western blot等）分析骨髓基质细胞与MPEG-PLLA-PLL聚合膜的相互作用2. 具体实验步骤包括：（1）骨髓基质细胞的分离和纯化：采用离心法和梯度离心分离纯化骨髓基质细胞，并进行细胞鉴定以保证实验的可靠性；（2）制备MPEG-PLLA-PLL聚合膜：采用溶液吸收-冷凝法制备MPEG-PLLA-PLL聚合膜，并进行形态学和化学成分的分析；（3）细胞黏附实验：将骨髓基质细胞接种于MPEG-PLLA-PLL聚合膜上，观察细胞的黏附、增殖和分化情况，同时采用细胞染色、ELISA、Western blot等技术进行细胞黏附分子和信号通路的分析。

四、研究意义：本研究将有助于深入了解骨髓基质细胞与MPEG-PLLA-PLL聚合膜的黏附机制和信号通路，为进一步开发和改进生物医用材料提供理论基础和技术支持，促进组织工程和再生医学的发展。