生化综述心肌肌钙蛋白cTnI检测方法及其影响因素和临床应用进展

心肌肌钙蛋白I 临床应用进展张再勤心肌肌钙蛋白I(Cardiac Troponin I,cTnI作为心肌损伤标志物,在临床上已应用了多年。

由于其高度的心肌特异性,对于心肌损伤的高度敏感性及较长的窗口期,cTnI已被临床医生及检验人员广泛接受,已取代CK-MB,不仅成为判断心肌损伤,特别是诊断急性心梗的“金标准”[1]。

而且已成为判断冠脉综合征病人处于心肌损伤风险的最合适的标志物。

肌钙蛋白的升高还作为有力的证据可支持临床医生及早做出抗血栓、抗血小板凝集及介入性治疗的决定。

本文将叙述cTnI的临床应用的最新进展。

一.cTnI作为疾病的检测指标1.急性心肌梗死(Acute Myocardial Infarction, AMI的首选指标。

心肌梗死是冠状动脉闭塞,血流中断,部分心肌因严重的持续性缺血而发生局部坏死。

临床上典型的症状是剧烈而持久的胸骨后疼痛,伴有发热,心肌损伤性蛋白升高及进行性心电图变化。

可发生心律失常、休克及心律衰竭而导致死亡。

心梗常见的原因是由于供应心肌的冠状动脉内长有粥样化硬块,硬块的破裂、脱落导致血管狭窄,以致闭塞,使之供血的那部分心肌组织细胞缺血而坏死。

但在血管的完全闭塞到心肌组织的不可逆坏死有一段时间间隔,如可争取时间,重新开通闭塞的血管,就可使心肌不坏死,或将梗死的心肌面积限制在最小范围内。

从而有效地降低死亡率。

由于cTnI的心脏特异性,及其在心脏受损后的快速及长时期升高,可作为一种诊断心肌损伤性疾病,特别是诊断心肌梗死的首选标志物[2]。

2. 不稳定性心绞痛最佳血液指标不稳定性心绞痛(Unstable angina, UA是一组介于稳定性心绞痛和急性心肌梗死之间的急性冠状动脉缺血综合征。

粥样化硬块破裂诱发非闭塞性血栓形成是其主要的发病机制,而病变血管的痉挛性收缩也起着重要的作用。

这些病理机制若引起病变血管的一过性堵塞,或血栓性物质造成冠状动脉小分支的栓塞,就可能引起心肌细胞的缺血性损伤,并可能与不稳定性心绞痛患者的不良预后有关。

肌钙蛋白I的检测方法进展心肌肌钙蛋白(cardiactropnin，Tn)是1987年Cummins等诊断急性心肌梗塞(acute myocardial infarction，AMI)时首次报道的，肌钙蛋白(Troponin，Tn)是心肌的主要结构收缩蛋白，由三个亚单位组成：肌钙蛋白C(TnC)、肌钙蛋白T(TnT)和肌钙蛋白I(TnI), 其中TnI又分为3种亚型：快骨骼肌亚型(fTnI)、慢骨骼肌亚型(sTnI)和心肌亚型(cTnI)，个体出生9个月后，心肌中仅存cTnI,无任何亚型，其分子量24kDa，由209个氨基酸组成，有超过40%的氨基酸序列与其他亚型有异源性,且氨基端多延伸出一段32个氨基酸组成的序列,所以cTnI 具有高度的心肌特异性，已被临床广泛接受，不仅成为诊断急性心肌梗死的“金标准”，而且已成为心肌疾病病情监测、疗效观察及预后评估的最合适标志物。

本文就cTnI的实验室检测方法综述如下：1酶联免疫吸附试验法酶联免疫吸附试验（enzyme linked immunosorbent assay,ELISA）法已成为一种经典的、被广泛应用于临床的免疫测定技术。

此种方法用于cTnI的检测最初是在80年代中期由Cummins等报道的，采用了多克隆抗体竞争抑制法，交叉反应无法消除，存在较大的局限性。

1992年Bodor等在此基础上对ELISA法进行了改良，筛选出一对与cTnI亲和力强的单抗，采用单克隆的双抗体夹心法，使灵敏度提高到0.5μg/L。

1993年Larue等在Bodor等的研究基础上，从28种纯化的单克隆抗体中筛选出一种特异性很强的抗体用于免疫分析，以辣根过氧化物酶（Horseradish Peroxidase,HRP）取代碱性磷酸酶（alkaline phosphatase，ALP)，检测限精确至0.1～0.2μg/L，检测时间30min。

目前，ELISA法已成为检测cTnI较为成熟的方法。

人心肌肌钙蛋白的测定及临床应用进展王秀华　陆希明摘要　肌钙蛋白是由cT nT和cT n I、cT nC组成的复合物,在肌肉的收缩和舒张过程中起重要的调节作用,因其发病后出现时间早,且持续时间长,对心肌损伤具有高度的特异性和灵敏性,成为诊断心肌梗塞的新金标准。

目前,其检测方法有双抗体竞争放免法、竞争性EL ISA法、固相免疫层析法等,但由于不同校正品的使用,使不同检测系统之间存在一定差异。

国内外学者对其检测的标准化问题进行了大量研究。

迫切需要国际上给出一个统一的校准品。

肌钙蛋白的测定在临床有广阔的应用前景,主要用于对心肌损伤的诊断,不稳定心绞痛患者预后的评价,监护溶栓治疗效果,主要用于对心肌损伤的诊断,不稳定心绞痛患者预后的评价,监护溶栓治疗效果,病毒性心肌炎的诊断等方面。

肌钙蛋白的检测和临床诊断的标准化一旦完成,不但可以降低临床死亡率,提高诊断准确率,降低医疗费用,而且会对社会生活产生积极深远的影响。

关键词　肌钙蛋白　心肌损伤　检测方法[中图分类号]　R446.62 [文献标识码]　A 肌钙蛋白cT n是由肌钙蛋白I(cT n I)和cT nC,cT nT组成的复合物,在肌肉收缩和舒张过程中起重要调节作用。

在二十一世纪开始时,两个著名学术团体声称,出现了灵敏和特异的血清生物标志物,特别是心脏肌钙蛋白的测定,促进了心肌梗塞(M I)的重新定义,并在诊断M I时采用了以肌钙蛋白为基础的金标准〔1〕。

特别是当CK-M B在正常限内或临界值时,测定肌钙蛋白来分辨有无心肌坏死具有重要意义,且肌钙蛋白有较长的时间窗,血中浓度升高可延长至发病后6天至2周,其诊断效率达98%〔2〕。

中华医学会检验学会关于心肌损伤标志物应用准则中要求“对那些发病6～9小时后的就诊患者,可以不需要检测早期标志物如肌红蛋白,此时只需测定确定标志物肌钙蛋白,采血频率也应减少”〔3〕。

目前,肌钙蛋白作为心肌损伤的金标准已引起人们的广泛关注。

心肌肌钙蛋白I的医学用途及检测进展心肌肌钙蛋白I(cTnI)是心肌肌钙蛋白的一种亚型,正常人血液中含量很低,当心肌细胞损伤时,cTnI在血液中的含量迅速升高。

近年来随着cTnI检测方法的不断改进,cTnI已成为最具有价值的心肌损伤标志物之一,被广泛应用于心脏疾病的临床诊断和病情评估。

标签：心肌肌钙蛋白I;医学用途;酶联免疫分析;化学发光免疫分析心肌肌钙蛋白(cTnI)是一种新型的的心肌生化标志物,广泛用于诊断急性心肌缺血,能高特异性、高灵敏度地反映心肌损伤,其特点是在血液中出现时间早、持续时间长。

cTnI正逐渐取代传统的检测酶活性的心肌酶学,成为目前评价心肌损伤的标志物及指导治疗和预后判断的指标。

1 医学用途1.1 急性冠状动脉综合征(acute coronary syndrome, ACS)的临床诊断、危险性估计和预后判断ACS是以冠状动脉粥样硬化斑块破裂或糜烂,继发完全或不完全闭塞性血栓形成为病理基础的一组临床综合征,它是包括不稳定型心绞痛,非Q波心肌梗死和Q波心肌梗死的一系列临床病征。

目前,公认的早期心肌损伤的生化标志物主要限于肌红蛋白(myoglobin,Mb)和肌酸激酶同工酶(CK-MB)[1]。

肌钙蛋白(Troponin,Tn)是横纹肌收缩的重要调节蛋白,由3个亚基组成:肌钙蛋白C(TnC),肌钙蛋白T(TnT)和肌钙蛋白I(TnI)。

cTnI仅被发现存在于心肌细胞中,含量比CK-MB高13倍。

心肌受损发生时,cTnI被释放入血液中,而在慢性肾病、骨骼肌疾病和创伤性疾病发生时很少升高。

因此,cTnI的测定对心肌损伤具有高度特异性。

有文献报道[2]cTnI在急性心肌梗死(AMI)患者胸痛发作2～6 h即可升高,8～16 h达高峰,明显早于CK-MB,其诊断AMI的敏感度为98.6%,特异度为94.4%,且在血中可持续5～7 d。

因此,测定cTnI含量可提高诊断AMI的敏感性,延长诊断窗口时间。

人心肌肌钙蛋白I的几种检测方法及其应用研究人心肌肌钙蛋白I（cTnI）是一种特异性心肌标志物，通常在心肌细胞受损时释放到血液中。

其升高水平可用于心肌梗死的早期诊断、评估患者的疾病严重程度，并用于预测心脏疾病的预后。

目前，有几种常用的检测方法可用于测量cTnI水平，包括免疫学方法、生物传感器和质谱法。

一种常见的免疫学方法是酶联免疫吸附试验（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）。

该方法通过使用特异性抗体结合剂和说明剂，可定量测量cTnI水平。

ELISA具有高灵敏度和高特异性，是一种常用的检测心肌标志物的方法。

然而，ELISA在样本准备方面比较繁琐，需要较长的检测时间。

另一种检测方法是电化学生物传感器。

生物传感器通过将生物分子与传感器结合，实现对心肌肌钙蛋白I的检测。

这种方法具有快速、灵敏和特异性高的特点，并且允许在点-of-care情况下进行检测。

电化学生物传感器的原理是将特定抗体修饰在电极表面，并通过电化学方法观察抗原-抗体的反应。

该方法需要较少的样本体积，并且可以在近实时的基础上提供结果，因此被广泛用于临床诊断。

质谱法是一种高分辨率的测量方法，可用于测量心肌肌钙蛋白I的水平。

它是一种定性和定量的技术，可以同时测量多个蛋白质。

质谱法通常使用质谱仪分析样品中的蛋白质，其中包括cTnI。

该方法具有高灵敏度和高分辨率的优点，可以检测到较低水平的蛋白质。

然而，质谱法在实施和数据分析方面要求相对较高的专业知识和专业设备。

这些检测方法在临床实践中具有重要的应用研究。

首先，这些方法可以帮助早期诊断心肌梗死，因为cTnI的升高表明心肌细胞受损。

其次，可以通过测量cTnI的水平来评估心脏疾病的严重程度，并指导治疗方案的选择。

此外，cTnI水平的测量还可以用于预测心脏疾病的预后，并为患者提供个体化的治疗和康复计划。

总之，人心肌肌钙蛋白I的检测方法多样，包括免疫学方法、生物传感器和质谱法。

心肌肌钙蛋白I的检测与临床意义海军青岛疗养院军以上干部疗养科何勤郭呈香20世纪80年代前，世界卫生组织(WHO ) 一直将心肌酶谱活性作为急性心肌梗死(AMI)的诊断标准之一。

20世纪80年代末，科研人员发现，肌钙蛋白 (troponin,Tn )的敏感性和特异性高于磷酸肌酸激酶(CK)、磷酸肌酸激酶同工酶(CK-MB )、乳酸脱氢酶和天冬氨酸氨基转移酶等标志。

心肌肌钙蛋白I(cTnI) 可检出微小心肌损害，成为心肌细胞损伤敏感性和特异性最强的标志物之一，是公认的快速诊断AMI和急性冠脉综合征(acute coronary syndromes, ACS )，以及协助ACS危险分层和反映其预后的主要生化标志。

CTnI的物生学特性Tn是由TnI、TnT和TnC三个亚单位组成，其中TnI是抑制性亚单位，可抑制肌球蛋白与肌动蛋白组合，阻止肌肉收缩，TnT是与原肌球蛋白结合的亚单位；TnC是与钙离子结合的受体。

1.CTnI的心肌特异性和抗原性TnI有三种亚型：分子量分别为24kD的cTnI,20kD的快骨骼肌和慢骨骼肌肌钙蛋白I ( sTnI)。

CTcI与sTnI的氨基酸序列有40%的异源性，cTnI氨基端有31 个氨基酸是sTnI所不具有的；两者在人体中的含量相差也较大，cTnI为5.7±0. 6mg/g, sTnI 为8. 4±2. 7|ig /g，比值为680±7 5 ；cTnI 与sTnI 的交叉反应最早认为是2%，后来由于检测技术的发展，交叉反应已降至0.007%。

在出生9个月后，新生儿心肌中仅存cTnI，且无任何亚型。

在个体发生的全过程中，无论骨骼肌受到任何病理刺激，均不表达cTnI,,所以cTnI具有高度的心肌特异性。

人cTnI有五个螺旋区域，呈伸展式构型。

抗体识别相应抗原表位不依赖于蛋白质的三级结构，使nTnI氨基酸序列易被免疫系统识别，故cTnI具有较强的抗原性。

人心肌肌钙蛋白I的几种检测方法及其应用研究心肌肌钙蛋白I（cTnI）是组成心肌肌钙蛋白复合物的亚单位之一，具有高度的心肌特异性，被认为是诊断心肌损伤的“金标准”。

快速、灵敏、准确测定人血中的cTnI对于诊断急性心肌梗死、急性冠状动脉综合征的危险分层、监测各种因素所导致的心肌损伤、以及心脏事件的判断预后等有着重要的意义。

目前，测定cTnI的方法主要有放射性同位素免疫分析法（RIA）、酶联免疫吸附试验法（ELISA）、化学发光免疫分析法（CLIA）、荧光免疫分析法（FIA）、以及金标免疫分析法等。

其中，RIA法因有放射性污染的危险已基本不使用；CLIA 法和FIA法灵敏度较高，但仪器价格偏高，国内在这方面的研究相对较少；金标免疫分析法主要应用于制作定性分析用的免疫层析试纸条，现在国内各医院多使用国外公司的产品，价格昂贵，国内学者虽在这方面有不少研究，但其灵敏度不高，难以推向市场；目前国内研究和应用最多的方法是ELISA，该方法灵敏度适中，使用相对简便，仪器价格也不很高，但存在测定周期偏长、灵敏度相对较低、检测范围较窄等不足。

考虑到检测人血液中cTnI对于判断心肌损伤的重要性，以及目前国内测定cTnI的方法所存在的这样或那样的缺陷，本论文从快速、灵敏、准确测定和降低检测成本等方面入手，综合应用纳米金标记技术、纳米孔材料上的生物分子固定化技术、以及高灵敏的电化学检测技术和化学发光检测技术，建立了几种测定人cTnI的方法，弥补了现有方法的某些不足。

具体内容如下： 1．金标银染法快速检测人血清中cTnI的研究纳米金具有特殊的光学和电学性质，生物相容性好，是继放射性同位素、酶、发光（荧光）物质之后的又一种卓越的免疫标记物质，银染技术的引进使其可见性得以显著提高，从而使免疫检测的灵敏度随之大幅度提高。

本文以硝酸纤维膜作为基底，结合一步法双单克隆抗体夹心技术、低密度蛋白芯片技术、纳米金探针技术、以及纳米金颗粒上的银染放大技术建立了一种检测人心肌肌钙蛋白I的快速测定法。

人心肌肌钙蛋白I的几种检测方法及其应用研究心肌肌钙蛋白I（cTnI）是组成心肌肌钙蛋白复合物的亚单位之一，具有高度的心肌特异性，被认为是诊断心肌损伤的“金标准”。

快速、灵敏、准确测定人血中的cTnI对于诊断急性心肌梗死、急性冠状动脉综合征的危险分层、监测各种因素所导致的心肌损伤、以及心脏事件的判断预后等有着重要的意义。

目前，测定cTnI的方法主要有放射性同位素免疫分析法（RIA）、酶联免疫吸附试验法（ELISA）、化学发光免疫分析法（CLIA）、荧光免疫分析法（FIA）、以及金标免疫分析法等。

其中，RIA法因有放射性污染的危险已基本不使用；CLIA 法和FIA法灵敏度较高，但仪器价格偏高，国内在这方面的研究相对较少；金标免疫分析法主要应用于制作定性分析用的免疫层析试纸条，现在国内各医院多使用国外公司的产品，价格昂贵，国内学者虽在这方面有不少研究，但其灵敏度不高，难以推向市场；目前国内研究和应用最多的方法是ELISA，该方法灵敏度适中，使用相对简便，仪器价格也不很高，但存在测定周期偏长、灵敏度相对较低、检测范围较窄等不足。

考虑到检测人血液中cTnI对于判断心肌损伤的重要性，以及目前国内测定cTnI的方法所存在的这样或那样的缺陷，本论文从快速、灵敏、准确测定和降低检测成本等方面入手，综合应用纳米金标记技术、纳米孔材料上的生物分子固定化技术、以及高灵敏的电化学检测技术和化学发光检测技术，建立了几种测定人cTnI的方法，弥补了现有方法的某些不足。

具体内容如下： 1．金标银染法快速检测人血清中cTnI的研究纳米金具有特殊的光学和电学性质，生物相容性好，是继放射性同位素、酶、发光（荧光）物质之后的又一种卓越的免疫标记物质，银染技术的引进使其可见性得以显著提高，从而使免疫检测的灵敏度随之大幅度提高。

本文以硝酸纤维膜作为基底，结合一步法双单克隆抗体夹心技术、低密度蛋白芯片技术、纳米金探针技术、以及纳米金颗粒上的银染放大技术建立了一种检测人心肌肌钙蛋白I的快速测定法。

人心肌肌钙蛋白I的几种检测方法及其应用研究人心肌肌钙蛋白I（cTnI）是一种心肌损伤标志物，其释放量在心肌缺血和损伤后会明显增高。

因此，cTnI的检测可以用于心肌损伤的早期诊断、鉴别诊断、治疗效果监测以及预后评估。

目前常用的cTnI检测方法包括免疫层析法、免疫比浊法、免疫荧光法、酶联免疫分析法和质谱法等。

以下将对这些方法及其应用研究进行详细介绍：1.免疫层析法：该方法常用的是双抗体夹心法。

首先，将样品和抗体结合，随后将这些混合物加入含有特异性抗体的固相基质中，抗原与抗体结合，形成带有荧光标记的复合物。

通过检测这些复合物的浓度，即可确定cTnI的含量。

该方法具有操作简便、快速、敏感性高和特异性好等优点。

2.免疫比浊法：该方法利用抗原和抗体之间的反应引起的溶液浑浊度发生变化，通过测量溶液的透光率来确定cTnI的含量。

免疫比浊法具有操作简便、成本低、结果可视化等特点，但灵敏度较低。

3.免疫荧光法：该方法利用荧光效应测定抗原与抗体结合的程度，进而确定cTnI的含量。

免疫荧光法具有高灵敏度、高特异性、多重标记等优势，但需要专门的仪器设备和操作技术。

4.酶联免疫分析法：该方法利用酶标记抗体与抗原结合后的酶底物反应产生显色或荧光等信号，通过测量信号强度来确定cTnI的含量。

酶联免疫分析法具有高灵敏度、高特异性和广泛应用范围等优势，是目前最常用的cTnI检测方法之一5.质谱法：该方法利用质谱仪对样品中的cTnI进行分析和测定。

质谱法具有高灵敏度、高分辨率和高通量等特点，可用于准确测定cTnI的含量，但需要专门的设备和专业的操作技术。

目前，cTnI的检测已广泛应用于临床实践中。

在急性冠状动脉综合征诊断中，cTnI的测定是判断病情严重程度和预测病情发展的重要指标。

在心肌梗死早期诊断中，cTnI的测定可以提高患者中的阳性检出率，帮助及时采取相应的治疗措施。

此外，cTnI的检测还可用于预测心脏手术后的术后并发症风险、心血管疾病的预后评估和心肌损伤的治疗效果监测等。

心肌肌钙蛋白I(cTnI)在心肌组织中表达，在胎儿、健康人或疾病状态的成人骨骼肌中不表达〔1〕，因而对心肌具有高度特异性。

1987年Cummins等〔2〕首先报道，通过测定血中cTnI浓度可诊断急性心肌梗死(AMI)。

由于肌钙蛋白具有组织特异性强、诊断窗口期长、测定方法快速、在血中出现早等优点，使其在AMI诊断中的作用越来越受到人们的重视，并于1994～1995年被美国国家食品与药品管理局(FDA)批准应用于临床AMI的诊断〔3〕。

本文就cTnI 及其临床应用研究进行综述。

1 cTnI的分子结构与组织细胞分布肌钙蛋白属于调节蛋白，分子呈球形，包括三个亚单位：TnT、TnI和TnC。

TnT是一种非对称性蛋白质，伴有一球形C端功能区，它有一个与原肌球蛋白结合的位点。

原肌球蛋白与肌钙蛋白结合成Tm-Tn复合物，附着在肌动蛋白双股螺旋的纵沟内。

TnI是一种碱性蛋白， 209个氨基酸组成。

在无Ca2+和TnC的情况下，TnI是阻止肌肉收缩的亚单位，通过抑制肌动肌球蛋白ATP酶的活性，阻止肌球蛋白运动，而阻止肌肉收缩。

TnI是一个延伸分子，采取反向平行与TnC形成二元复合物，在TnT和TnI之间形成卷曲螺旋，结成一刚性不对称的结构IT臂，约有80埃，它桥连原肌球蛋白锚定位点〔4〕。

TnC呈亚铃形，两个球形功能区被一个长的中央螺旋体相连，TnC是钙离子受体，参予调节细丝的活化过程。

Takeda等〔5〕研究了在Ca2+饱和形式下的心肌肌钙蛋白核心结构域的晶体结构，核心结构域能进一步分为结构明显区分的子域，它们由可变的接头连接，使整个分子具有高度的可变性。

人cTnI有5个螺旋区域，呈伸展式构型。

抗体识别相应抗原表位不依赖于蛋白质的三级结构，使cTnI氨基酸序列易被免疫系统识别，故cTnI具有较强的抗原性。

在cTnI蛋白质的功能域中，抑制区是其最重要的功能区，它能在无钙离子存在的情况下，与组成细纤丝的肌动蛋白相互作用，抑制肌球蛋白的ATP酶活性。

肌钙蛋白I的生化特点及其影响测定的因素上海医科大学中山医院潘柏申关键词肌钙蛋白（cTn）心肌损伤测定标准化随着研究和应用的发展，心肌肌钙蛋白（cTn）[包括心肌肌钙蛋白I（cTnI）和心肌肌钙蛋白T（cTnT）]已成为临床诊断心肌损伤的确定标志物[1,2]。

由于仅一家生产厂商拥有cTnT 生产专利，因此人们对cTnI的生产应用兴趣大增。

目前FDA至少已批准8家生产厂商的共16种cTnI检测试剂[3]。

在临床应用中发现，这些cTnI检测试剂的测定值之间存在着差异，不同的cTnI 分析方法对同一份标本的检测值最大可相差30余倍[4]，这使得各种方法的参考范围、分析干扰、分析变异、诊断窗口期以及诊断和预后的临界值等出现不同程度的差别，给临床应用和评价带来一定困扰。

了解cTn特别是cTnI的系列化特别和各种分析测定试剂的特性，将有助于临床上正确使用这些方法检测和评价心肌缺血损伤。

1 心肌肌钙蛋白细胞内结构和分布心肌肌钙蛋白结构结构 cTn由三种亚基组成，参与调节肌肉收缩活动。

其中的肌钙蛋白C（TnC）是Ca2+结合亚基，分子量18kDa，等电点；cTnI为抑制亚基，分子量23kDa，等电点；cTnT为原肌球蛋白结合亚基，分子量34kDa，等电点[5]。

在Ca2+存在的情况下，TnC与Ca2+结合后构型发生变化，与cTnI的结合增强（Ka约为×10-8 M-1）[5]；TnT与TnC – cTnI结合，但较TnC – cTnI之间的结合弱。

反之，Ca2+浓度低或TnC未与Ca2+结合时，TnC和cTnI之间的结合比较松散。

cTnI-cTnT的结合相对较弱( Ka约为×10-5 M-1)[5]。

心肌肌钙蛋白的组织含量在心肌内cTnI的含量大约为5mg/g湿重组织，cTnT的含量大致为g湿重组织（相比之下，CK-MB仅g湿重组织[6]；cTn主要结合于心肌肌纤维中，少量（cTnI的% ～ %；cTnT的6% ～ 8%）在细胞浆中以游离形式存在[7]。

三种敏感的心机肌钙蛋白检测方法分析性能评价及临床应用敏感的心肌钙蛋白（sensitive cardiac troponin，s-cTn）是临床上常用的心肌损伤指标，可以用于判断急性心肌梗死（acute myocardial infarction，AMI）等心脏疾病。

目前，有三种常用的s-cTn检测方法：第一代高灵敏度（high-sensitivity，hs）s-cTnT检测方法、第二代hs-s-cTnT检测方法和第四代hs-s-cTnI检测方法。

本文将对这三种方法的性能评价及临床应用进行分析。

第一代hs-s-cTnT检测方法是最早被开发的一种方法，通过检测心肌细胞损伤后释放的cTnT来判断心肌损伤程度。

该方法具有高度敏感性和特异性，可以在很早的时间内检测到心肌损伤的迹象，但其灵敏度较低，可能导致错误阳性结果。

此外，由于该方法的门槛较高，因此使得其在临床应用中的可操作性受到一定的局限。

第二代hs-s-cTnT检测方法相较于第一代方法，具有更高的灵敏度和特异性。

该方法可以在更短的时间内检测到心肌损伤的迹象，提高了对AMI的早期诊断。

然而，该方法仍然存在一定的错误阳性率，并且其检测的门槛仍然相对较高，使其在部分患者中的应用受到限制。

第四代hs-s-cTnI检测方法是目前最新开发的一种方法，具有更高的灵敏度和特异性。

该方法通过检测心肌细胞损伤后释放的cTnI来判断心肌损伤程度。

相较于前两种方法，第四代hs-s-cTnI方法的门槛更低，可以更准确地诊断AMI，并且其可操作性更强。

此外，该方法还能够提供更多的信息，如心肌损伤的程度和预后风险。

然而，该方法仍然存在一定的错误阳性率，可能导致不必要的治疗或诊断。

综上所述，不同的s-cTn检测方法在性能和临床应用方面存在一定的差异。

第四代hs-s-cTnI检测方法具有更高的灵敏度和特异性，能够更准确地诊断AMI，并提供更多的信息。

然而，无论使用哪种方法，都需要结合临床表现和其他诊断手段进行综合分析，以提高诊断的准确性。

肌钙蛋白I的生化特点及其影响测定的因素2.2蛋白激酶A磷酸化cTnI的第22位和第23位的丝氨酸易受蛋白激酶A作用发生磷酸化反应[14]，使cTnI形成四种形式：一种未磷酸化、两种单磷酸化和一种双磷酸化结构。

研究发现，病人体内磷酸化形式的cTnI占相当数量。

磷酸化可改变cTnI的分子结构形式和抗原性，从而影响某些抗体的识别[15]。

2.3氧化还原形式cTnI的第79位和第96位是半胱氨酸，容易发生氧化或还原反应。

这种氧化或还原反应了可影响cTnI的分子结构形式和抗原性，从而影响某些抗体的识别能力。

3 测定校准品各生产厂商的cTnI校准品内含的cTnI结构形式或含量各不相同，使得测定结果大相径庭。

甚至使用同一份标定cTnI值的人血清进行校准也未能完全消除不同测定系统之间测定值的差异[16]。

因此，有人提议最好采用从人心组织提取的cTnI﹣cTnT﹣CTnC复合物作为校准品[12]。

4 抗凝剂为缩短检测周转时间（TAT），许多检测方法要求采用血浆或全血，以避免分离血清所需的时间。

这需要合理选择适当的抗凝物。

4.1 EDTA EDTA是Ca2 螯合剂，可促使cTnI﹣TnC复合物的解离，使游离型cTnI增加，从而影响测定值的真实性。

因此，有些专家认为最好避免使用[2]。

4.2 肝素 cTnI带有较多正电荷（pI 9.87）[5],易于和带有负电荷的基团形成复合物。

肝素带有负电荷，与cTnI结合形成的复合物可影响抗原一抗体反应，进而引起cTnI检测值降低。

但在不同的cTnI检测试剂中，肝素的干扰程度不等[17]。

为使cTnI的测定更加准确，以便为临床提供更加科学、可靠的信息，许多临床化学家进行了大量的深入研究探讨，并呼吁开展cTnI测定标准化工作。

为了使cTnI测定标准化顺利进行，IFCC和AACC还分别建立了专门机构从事这方面工作。

必须认识到，cTnI的测定标准化工作将是十分艰巨的。

[18]。

心肌钙蛋白Ⅰ（cTnⅠ）检测在心肌损伤诊断的应用价值分析【摘要】目的：分析心肌钙蛋白Ⅰ（cTnⅠ）检测在心肌损伤诊断的应用价值。

方法：回顾性的选择2013年4月-2016年4月本院收治32例心肌损伤患者临床资料，将其设为观察组，选取同期30例健康体检者设为对照组，采用酶法与化学发光法检测两组心脏标志物，对比两组诊断结果。

结果：观察组同工酶、C-反应蛋白、肌酸激酶、心肌钙蛋白Ⅰ阳性比例分别为21.87%、68.75%、18.75%、78.12%，与对照组比较差异均有统计学意义（P＜0.05）；观察组患者发病24h时cTnⅠ阳性检测率达至100%，明显高于发病5h及发病48时（P＜0.05）。

结论：心肌钙蛋白Ⅰ（cTnⅠ）具有高度特导性与敏感性，可用于心肌损伤的诊断，具实用价值。

【关键词】心肌钙蛋白Ⅰ；检测；心肌损伤；诊断应用心肌是由心肌细胞构成的肌肉组织，临床上常以患者的血清心肌酶谱用于诊断心肌梗塞、心肌炎及心绞痛等心肌损伤疾病，尤其将CK-BB的浓度高低作为心肌梗死诊断的金标准[1，2]。

随着社会的进步与医疗事业的发展，化学发光技术得到不断发展与进步，心肌钙蛋白Ⅰ（cTnⅠ）逐渐被广泛用于临床诊断中，为明确其在心肌损伤诊断的应用价值，本研究针对本院2013年4月-2016年4月已选定的32例心肌损伤患者给予同工酶、C-反应蛋白、肌酸激酶以及血清心脏标志物cTnⅠ检测，报告如下：1.资料和方法1.1一般资料回顾性的选择2013年4月-2016年4月本院收治32例心肌损伤患者临床资料，均经过心肌酶谱检测，符合WHO所指定急性心肌损伤诊断指标，将其设为观察组，选取同期30例健康体检者设为对照组。

对照组男女比例17：13，年龄40-61岁，平均（50.48±3.21）岁；观察组男女比例18：16，年龄36-57岁，平均（41.25±2.36）岁；两组基线资料比较无明显差异（P＞0.05）。

综述题目：cTnI检测方法及其影响因素和临床应用进展姓名：学号：系别：年级：专业：二○一二年三月心肌肌钙蛋白I检测方法及其影响因素和临床应用进展摘要心肌肌钙蛋白I(cTnI)是心肌损伤最特异、最敏感的血清标志物之一，目前已被广泛地应用于临床诊断。

但cTnI检测方法尚未标准化，血液循环中cTnI浓度的检测也受血浆肝素浓度、类风湿因子水平、溶血、慢性肾脏衰竭、年龄等多种因素干扰。

cTnI广泛在诊断急性心肌梗塞(AMI)，监测心脏手术，诊断不稳定型心绞痛，骨骼损伤或慢性肾衰伴有心肌损伤的鉴别方面有广泛应用。

前言传统的心肌酶谱包括天门冬氨酸转氨酶（AST），乳酸脱氢酶（LDH）及其同工酶和肌酸激酶（CK及其同工酶。

传统的心肌酶谱由于特异性较差，敏感性和精确性不高和不能及时反映疾病等弊端，现在在心脏疾病的标志物中已少用。

心肌损伤标志物是近十年来临床生物化学钟发展最快的部分，出现了一批项目及许多研究应用报告。

心肌肌钙蛋白由于其敏感性和特异性都高的特点，为心肌损伤的诊断带来了新气象，提高了对微小损伤的诊断成功率，为临床广泛应用，诊断指标从酶类为主转向了以蛋白类为主。

肌钙蛋白（Tn)是组成横纹肌细丝的结构蛋白，其亚单位I、T、C组成复合物，在肌肉收缩和舒张过程中起重要作用。

其中，心肌肌钙蛋白I(CTnI)经大量的研究，已被证实为心肌损伤最特异性、最敏感的血清标志物之一，正逐渐取代肌酸激酶MB同工酶(CK—MB)成为判断心肌损伤，特别是急性心肌梗塞(AMI)的“金标准”。

本文介绍CTnI检测方法及影响因素和临床应用进展。

关键词心肌肌钙蛋白I 检测方法影响因素临床应用1.结构性质肌钙蛋白(troponin，Tn)是组成横纹肌细丝的结构蛋白，可调节钙介导的肌动蛋白和肌球蛋白之间的相互反应，本身为多肽。

其亚单位I、T和C组成复合物。

其中Tnl是肌原纤维ATP 酶的抑制单位，可抑制肌球蛋白与肌动蛋白结合，阻止肌肉收缩。

人℃TnI氨基末端有32个氨基酸残基为sTnI所不具有，因此抗原性有较大差异，有利于获得特异性cTnI抗体【1】。

心肌肌钙蛋白的临床应用和检测进展【中图分类号】R542.2+2 【文献标识码】A 【文章编号】1672-5085（2014）04-0037-02急性心肌梗塞(AMI)是心内科常见病、多发病，具有死亡率高的特点。

为了早期诊断该病，降低患者的病死率，检验科医生和临床医生经过不懈的探索，逐渐发现若干灵敏性和特异性都较好的心肌损伤标志物，其中心肌肌钙蛋白(cTn)逐渐成为判断心肌损伤的确定标志物，也很快为广大医护人员所接收，随着人们几十年的临床实践，心肌肌钙蛋白在临床应用和检测中不断的得到深入进展。

一、心肌肌钙蛋白的结构肌钙蛋白(Tn)属于调节蛋白，对肌肉收缩的调节非常重要，有三个亚基组成，即肌钙蛋白C( TnC)，肌钙蛋白T( TnT) 和肌钙蛋白I( TnI)。

肌钙蛋白C的分子量为18000，每个分子结合两个钙离子，骨骼肌和心肌含有的肌钙蛋白C的量是一样的，是肌钙蛋白的钙离子结合亚基[1]。

肌钙蛋白I属于肌钙蛋白抑制亚基，它的分子量为24000，TnI含有源至三种不同基因的的三个亚型，即快骨骼肌亚型、慢骨骼肌亚型和心肌亚型( cTnI) ，心肌亚型与其他两种亚型相比约有40%的不同源性，尽管急性心肌梗死后cTnI的释放形式还不是很清楚，但是由于它与其他两种亚型的氨基酸末端多了31个残基，这种特异的排列顺序使之具有较高的心肌特异性。

肌钙蛋白T的分子量为37000，它与肌钙蛋白I相同，也具有三个不同的亚型，但们分布在心肌和骨骼肌中所受的表达有不同的基因调控。

肌钙蛋白C受钙离子的影响较大，在钙离子存在时或浓度高时，肌钙蛋白与之结合后结构发生变化，与肌钙蛋白I的结合增强；反之，未与钙离子结合时或者钙离子浓度很低时，肌钙蛋白C与肌钙蛋白I的结合相对就比较松散。

另外，肌钙蛋白在血液循环中的半衰期大约有几小时，最后从肾脏排出。

心肌梗塞时心肌细胞受损，游离形式的心肌肌钙蛋白T相对较早释放形成第一个高峰，紧接着，在肌纤维处结合的肌钙蛋白T释放形成第二个高峰。

心肌肌钙蛋白I的一些生化特点及其影响测定的因素潘柏申心肌肌钙蛋白i的一些生化特点及其影响测定的因素-潘柏申《中国临床医学》，2001年6月，第8卷，第3期，《中国临床医学杂志》，2001年第8卷，第3期309□综述□心肌肌钙蛋白I的某些生化特征及其影响因素潘柏申(复旦大学附属中山医院检验科,上海200032)影响心肌内降钙素测定和某些生化特性的因素panbaishen(zhongshanhospital,fudanuniversity,shanghai 200032)急性心肌缺血损伤的实验室检测项目很多。

随着临床研究和应用的发展，心肌肌钙蛋白（CTN），包括心肌肌钙蛋白I（cTnI）和心肌肌钙蛋白T（cTnT），已被公认为心肌损伤临床诊断的明确标志物[1,2]。

CTN的应用评价也引起了全世界临床医生和实验室专家的广泛关注。

目前，美国国家药品和食品管理局（FDA）已经批准了至少16种cTnI检测试剂[3]。

在临床应用中，发现这些cTnI检测试剂的测量值存在差异。

不同cTnI分析方法对同一样本的测量值的最大差值可达30倍以上[4]，这使得各种cTnI检测方法的参考范围、分析干扰、分析变异、诊断窗口期、诊断临界值和预后都有不同程度的不同，这给临床应用和评价带来了困难。

了解CTN，尤其是cTnI的生化特性，以及影响其分析和测定的因素，将有助于临床上正确使用cTnI检测和评价心肌缺血损伤。

1心肌肌钙蛋白的细胞内结构、分布和释放1.1 结构ctn由三种亚基组成,参与调节心肌收缩活动。

其中肌钙蛋白c(tnc)是ca2+结合亚基,分子量18kda,等电点4.1;ctni为抑制亚基,分子量23kda,等电点9.87;ct-nt为原肌球蛋白结合亚基,分子量34kda,等电点5.1[5]。

ctni相对两种肌钙蛋白骨骼肌亚型(stni)约有40%不同源性[6];人的ctni氨基末端比stni多31个氨基酸残基[7]。

这种独特的氨基酸顺序使之具有较高的心肌特异性。