高中生物选修三基因工程主要知识点（1.1、1.2）
一、基因工程：按照人们的意愿，进行严格的设计，并通过体外DNA重组和转
基因等技术，赋予生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。
一、基因工程的三大工具：限制性核酸内切酶—“分子手术刀”；DNA连接酶
—“分子缝合针”；基因进入受体细胞的载体—“分子运输车”。
二、限制性核酸内切酶的特点：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，
并且是每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键。
三、限制酶识别序列的特点：反向对称，重复排列。
四、限制酶在原核生物中的作用：切割外源DNA，保护细菌细胞。
五、为什么限制酶不剪切原核生物自身的DNA分子？原核生物本身不含相应特异性序列；对DNA分子进行甲基化修饰。
六、两种常见的DNA连接酶：E·coli DNA连接酶：源自大肠杆菌，只连接黏性
末端；T4DNA连接酶：提取自T4噬菌体，两种末端均可连接，连接平末端效率
低。
七、DNA连接酶和DNA聚合酶的相同点：都是蛋白质；都能生成3'磷酸二酯
键。不同：前者在两个片段之间形成3'磷酸二酯键，后者只能将单个核苷酸连接
到已有片段上；前者不需要模版，后者需要。
八、载体需要满足的条件：有一到多个限制酶切点；对受体细胞无害；导入基因
能在受体细胞内复制和表达；有某些标记基因；分子大小合适。
九、质粒：一种裸露的、结构简单、独立于细菌拟核DNA之外，并具有自我复制能力的很小的双链环状DNA分子。
十、标记基因的作用：鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因
的细胞筛选出来。
十一、三类载体：质粒；λ噬菌体的衍生物；动植物病毒。
十二、获取目的基因的方法：说法一：从自然界已有的物种中分体（鸟枪法、反
转录法）、用人工的方法合成；说法二：从基因文库中获取（鸟枪法、反转录法）、利用PCR技术合成、用化学方法人工合成。
十三、基因库：一个物种中全部个体的全部基因的总和；基因文库：将含有某种
生物不同基因的许多DNA片段，导入受体菌的群体中储存，个个受体菌分别含有这种生物的不同的基因；基因组文库：含有某种生物全部基因的基因文库；部分基因文库：只含有一种生物部分基因的基因文库；cDNA文库：用某种生物发育的某个时期的mRNA反转录产生的多种互补DNA片段，与载体连接后储存在一个受体菌群中。
十六、目的基因：主要是指编码蛋白质的基因，也可以使一些具有调控作用的因子。
十七、启动子的特性：物种特异性、组织特异性、强弱差异。
十八、基因工程的步骤：目的基因获取、构建基因表达载体、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。
十九、PCR的全称：多聚酶链式反应。
二十、PCR扩增目的基因的条件：dNTP、引物、Taq酶、DNA模版
二十一、PCR技术扩增目的基因的过程：90-95℃，模版解旋；55-60℃，退火，引物与模版结合；70-75℃，Taq酶合成互补链。
二十二、基因工程的核心：构建基因表达载体。
二十三、构建基因表达载体的作用：使目的基因在受体细胞内能稳定存在，并遗传给下一代；使目的基因能表达和发挥作用。
二十四、载体构成：插入基因、启动子、终止子、标记基因、（复制原点）。
二十五、T-DNA：农杆菌Ti质粒中的一段DNA序列,可以从农杆菌中转移并稳定整合到植物核基因组中,常用于农杆菌转化法导入目的基因。
少。
段的单链DNA分子。
三十、个体水平的鉴定：观察受体生物是否表现出目的基因所控制的性状；基因工程的生物产品与天然产品的功能活性比较。
三十一、启动子：一段具有特殊结构的DNA片段，位于基因的首段，它是RNA 聚合酶识别和结合的部位。
三十二、终止子：位于基因的尾端，也一段具有特殊结构的DNA片段，是转录种植的信号。
三十三、农杆菌转化法、显微注射法、钙离子处理法的步骤：略。
三十四、DNA分子杂交、分子杂交、抗原-抗体杂交的过程：略。
三十五、鸟枪法、反转录法的步骤：略。
