天然药物化学
实验指导
循环使用
请勿带走
目录
实验一槐花M中芦丁的提取
实验二芦丁水解液的纸色谱鉴定
实验三大黄中大黄素的提取
实验四大黄中大黄素的柱色谱提纯
实验五苦参生物碱的薄层鉴定
实验六茶叶中咖啡因的提取
实验一槐花M中芦丁的提取
芦丁 槐花M为豆科植物槐花的未开放花蕾。味苦性凉，具清热、凉血、止血之功。槐花的主要化学成分为芦丁，又名芸香甙，含量可达12-16%。p1EanqFDPw 芦丁是由槲皮素 的苷。为浅黄色粉末或极细的针状结晶，含有三分子的结晶水，熔 点为174~178℃，无水物188~190℃。溶解度：冷水中为1:10000； 热水中1:200；冷乙醇1:650；热乙醇1:60；冷吡啶1:12。微溶于 丙酮、乙酸乙酯，不溶于苯、乙醚、氯仿、石油醚，溶于碱而呈黄色。DXDiTa9E3d 芦丁具有维生素P的作用。可降低毛细管前壁的脆性和调节渗 透性，有助于保持及恢复毛细血管的正常弹性，临床上用作毛细管 脆性引起的出血症，并常用作防治高血压病的辅助治疗剂。现在国 处也常用芦丁作食品及饮料的染色剂。RTCrpUDGiT 一、实验目的 1．通过芦丁的提取与精制掌握碱-酸法提取黄酮类化合物的原 理及操作。 2．掌握黄酮类化合物的主要性质。 二、实验原理 芦丁属黄酮类化合物，分子中有较多酚羟基，具弱酸性，易溶 于热碱中，酸化后又析出，因此可以用碱溶酸沉的方法提取芦丁， 又利用芦丁在冷水和热水中溶解度相差较大的特性进行重结晶精制。5PCzVD7HxA 三、实验材料 槐M、石灰乳、0.4％硼砂水溶液、浓盐酸、广泛pH试纸、棉 花等。 四、实验内容 称取槐M30g，在乳钵中研碎后，投入300ml0.4％硼砂溶液的沸 水溶液中煮沸2-3分钟，在搅拌下加入石灰乳调pH9，煮沸40分钟 <注意添加水，保持原有体积，保持pH8~9），趁热倾出上清液，用 棉花过滤。残渣加100ml水，加石灰乳调pH9，煮沸30分钟，趁热 用棉花过滤，二次滤液合并。滤液保持在60℃，加浓HCl，调pH2-3，放置过夜，则析出芦丁沉淀。jLBHrnAILg 五、实验说明及注意事项 1、加入饱和石灰水溶液既可达到碱溶液提取芦丁的目的，又可 除去槐花M中大量多糖粘液质，更容易过滤。也可直接加入150mL 水和1g氢氧化钙粉末，而不必配成饱和溶液。xHAQX74J0X 2、pH值过低会使芦丁形成烊盐而增加了水溶性，降低收率。 六、思考题 1．本实验提取过程中应注意哪些问题？ 2、根据这个实验，请总结出用酸碱调节法提取中药活性成分的 适用条件及一般原理。 实验二芦丁水解液的纸色谱鉴定 一、实验目的 1．掌握纸色谱方法。 2．掌握黄酮类化合物的色谱特点。 二、实验原理 芦丁可被稀酸水解，生成槲皮素及葡萄糖、李糖，并能通过纸 层析鉴定。 三、实验材料 槐M、石灰乳、0.4％硼砂水溶液、2％的硫酸溶液、浓盐酸、 正丁醇、醋酸、氨水、1％的氢氧化钠溶液、1％的三氯化铝乙醇溶液、1％的葡萄糖溶液、1％的鼠李糖溶液、1％芸香苷乙醇溶液、1％槲皮素乙醇溶液、95％乙醇、碳酸钡、广泛pH试纸、中速层析滤纸等。LDAYtRyKfE 四、实验内容 <一）芦丁的水解 取芦丁1g，研碎，加2％硫酸水溶液80ml，小火加热，微沸回 流30-60min，并及时补充蒸发掉的水分。在加热过程中，开始时溶 液呈浑浊状态，约10min后，溶液由浑浊转为澄清，逐渐析出黄色 小针状结晶，即水解产物槲皮素，继续加热至结晶物不再增加时为止。抽滤，保留滤液20ml，以检查滤液中的单糖。Zzz6ZB2Ltk <二）糖的纸色谱检识 取上述水解母液10ml小心用Ba(OH>2<大约1－1.5g , 并预先 用10ml水调至成乳液）中和至中性，过滤出生成的BaSO4沉淀，滤 液用热水浴小心浓缩至小体积1ml备用。取1张圆形滤纸, 用铅笔 画出通过圆心的三条直线将滤纸等分为6份，对角点样法两次将样品、葡萄糖、鼠李糖标准品点于距圆心一定<>0.5mm）处, 并将用其 它滤纸卷成的滤纸芯通过圆滤纸的圆心，借助滤纸芯的毛细作用用 正丁醇-乙酸-水<4：1：5）上层溶液作径向展开。dvzfvkwMI1支持剂：新华层析滤纸<中速、20cmХ7cm） 样品：水解浓缩液 对照品：a. 葡萄糖标准品水溶液b. 鼠李糖标准品水溶液 展开剂：正丁醇：冰醋酸：水<4：1：5上层） 显色：a. 喷苯胺-邻苯二甲酸试剂，于105℃加热10min，显棕 色或棕红色斑点 b.喷氨性硝酸银试剂，于100℃左右加热，呈棕褐色斑点。 五、思考题 1、芦丁酸水解时有何现象，如何解释？ 2、槲皮素和芦丁纸色谱鉴定时，用BAW<4：1：5）上层和下层展开后，解释两者的相对比移值大小关系？ 3、葡萄糖和鼠李糖的纸层析鉴定时，用BAW<4：1：5）上层展开后，何者相对比移值较大，为什么？ 实验三大黄中大黄素的提取 一、实验目的 <1）熟悉蒽醌类成分的提取分离方法<2）掌握PH梯度提取法的原理 和操作技术 二、实验原理 大黄为蓼科植物,味苦,性寒,具有泻热通肠、凉血解毒、逐瘀通 经等功效。其主要有效成分为大黄素、芦荟大黄素、大黄素甲醚等 蒽醌类化合物 ,其中大部分为结合的蒽醌,少量为游离的蒽醌。结合 的蒽醌类化合物由于其苷元具有酚羟基,故呈弱酸性,能溶于水、乙 醇、碳酸氢钠溶液,但在有机溶剂中的溶解度很小。游离的蒽醌易溶 于氯仿、乙醚等有机溶剂而不溶于水。其中，大黄酸具有羧基，酸 性最强；大黄素具有β-酚羟基，酸性第二；芦荟大黄素连有羟甲 基，酸性第三；大黄素甲醚和和大黄酚的酸性最弱。根据以上化合 物的酸度差异，可用碱性强弱不同的溶液进行梯度萃取分离。 rqyn14ZNXI 本实验主要用薄层层析法分离纯化大黄素，其Rf值由大到小分 别为大黄酚和大黄素甲醚、大黄素、芦荟大黄素、大黄酸。 EmxvxOtOco
