生物制品复习题
3、佐剂的作用机理？
1.对抗原的作用
（1）增加抗原分子的表面积
（2）增强T细胞和B细胞的协同作用
（3）延长抗原在组织内的储存时间，是抗原缓慢降解和缓释
2.对抗体的作用
（1）引起细胞浸润
（2）加速淋巴细胞的转化
（3）引起膜和胞浆的变化
（4）引起细胞功能的改变
4、病毒性动物组织灭活苗的制备程序？
1）、氢氧化铝胶佐剂的制备
先将无水三氯化铝用去离子水配成25%溶液，加热溶化，使用时稀释至8%，将NaOH配成4%溶液，加热至56-60℃，60℃水浴三氯化铝溶液，边加边搅拌加入NaOH溶液，当pH达到5.6-6.0时即为终点，继续搅拌10min，后121℃，灭菌，30min；
2）、抗原的制备
(1)、取病料，去除结缔组织和脂肪组织，剪碎；
(2)、按1:3加水，匀浆；
(3)、反复冻融2-3次；
(4)、4000rpm离心30min，取上清，过滤，，按8‰加入甲醛，混匀；
(5)、37℃，摇床灭活24h；
(6)、灭活后，划线培养检测是否灭活彻底；
3）、配苗
弃去铝胶上清液，按抗原;铝胶=4:1加入灭活抗原液，混匀，即成。
5、说出五种常用的免疫佐剂？
（1）氢氧化铝胶佐剂 （2）明矾佐剂 （3）弗氏佐剂
（4）油乳佐剂 （5）蜂胶佐剂
6、弱毒株选育的方法有哪些？
1)、自然突变弱毒株
2）、人工诱变 ○1化学途径：重金属盐、洗衣粉等化学诱变剂；○2物理途径，如高温、紫外线；○3生物途径，如适应非易感动物或细胞、杂交减毒。
7、病毒性灭活苗与活疫苗的优缺点？
8、弱毒苗与灭活苗的优缺点？
弱毒苗
优点：①可以在免疫动物体内繁殖；
②能刺激机体产生系统免疫反应和局部免疫反应
③免疫力持久，有利于清除局部野毒；
④产量高、生产成本低。
缺点：①疫苗残毒有毒力增强和返祖危险；
②有不同抗原的干扰现象；
③要求在低温、冷暗条件下运输和储存。
灭活苗
优点： ①微生物在动物体内不繁殖，安全性好；
② 不存在毒力返祖现象；
③ 有利于制备多价或多联等混合疫苗；
④ 制品稳定，有利于保存运输。
缺点：① 不同血清型之间缺乏交叉保护，甚至同一血清型内不同基因型之间交叉保护也不理想；
②免疫剂量大，成本高，有时需多次免疫
③产生的抗体与野毒感染产生抗体不易区别；
④疫苗生产条件需要极高的生物安全系统；
有的疫苗存在过敏反应
三、论述题
1、免疫失败的原因有哪些？
1）疫苗的种类和质量 ○1疫苗的种类，○2疫苗本身质量问题，○3疫苗运输、保管不当
2）免疫机体情况 ①畜禽感染某些疾病，②遗传素质
的影响，③继发性免疫缺陷，④早期感染的影响
3）病原影响 ①病原毒力、毒型的影响，②过量野毒攻击
4）接种技术影响 ①接种剂量不足或过量，②无菌观念不强，③免疫接种途径错误，④疫苗选择贪多求洋，○5免疫程序不合理，○6多种疫苗联合使用
5）饲养管理影响 ①营养缺乏，②环境卫生差
6）其他因素 ①气候、季节等引起畜禽应激， ②技术员责任心差
2、鸡新城疫油乳剂灭活苗的制备程序？
1）白油的准备(100mL)
(1).量取7#/10#白油94mL，加入2g硬脂酸铝，搅拌混匀；
(2).加热至60℃左右，开始缓慢加入6mL司本-80，边加边搅拌；
(3).加热至120℃，维持一段时间使硬脂酸铝和司本-80完全溶解；
(4).冷却，分装，116℃灭菌30min。备用。
2）鸡新城疫灭活病毒的制备
(1).选择10-11日龄的鸡胚，照蛋，挑除死胚；
(2).接毒，无菌操作，1000羽配200mL，加入青链霉素各2/5，注射0.1mL进入尿囊腔；
(3).38℃培养，24h后照蛋，拣出死胚，以后每4h照蛋一次，将死胚放入4℃,96h时，把鸡胚全部放入4℃，次日取毒；
(4).取毒，无菌操作，收集尿囊液，加入2‰甲醛灭活。
3）配苗
(1).取灭活的37℃预热的病毒液加入4%的吐温-80，混匀；
(2).按2.8-3.5:1（油:水）加入白油佐剂，匀浆器中乳化5min左右，
4）分装，低温保存。
4、高免血清的制备及免疫方法？
(1)、抗原的制备，基础免疫一般选择弱毒苗或灭活苗加强免疫时选择毒力强的菌毒株， ○1细菌性抗原，分离出菌株后扩大培养，在配制成一定浓度的抗原液；○2病毒性抗原，先破碎细胞释放病毒，收集并制成乳剂。
(2)、实验动物的选择，选择健康的适宜畜禽；
(3)、免疫动物，○1基础免疫，一般1-3周免疫一次，1-3次即可；○2加强免疫，一般在基础免疫后2-4周进行，每隔5-7天免疫一次，次数因血清抗体效价而定。
(4)、采血与血清的分离，待效价符合要求时，大型动物可一次采足，小型动物应多次少采，将收集血液不加抗凝剂放入无菌容器内，放置4℃过夜，使析出血清；
(5)、收集血清，加入0.02%硫柳汞，分装入灭菌瓶中，-15℃保存。
另：
1、常用防腐剂：石炭酸(苯酚)、硫柳汞、甲醛、结晶紫
2、治疗用生物制品：卵黄抗体、免疫血清、牛奶抗体
3、影响冻干保护剂功效的因素：保护剂种类、组分浓度、配制方法、pH
4、常用实验动物：家兔、小鼠、大鼠、豚鼠
5、菌种保存放法：传代培养保存（斜面传代保存、半固体保存）、液氮保存、冷冻干燥保存法、低温冰箱冷冻保存法
6、诊断用生物制品：诊断抗原、诊断抗体、标记抗体
7、甲醛灭活浓度，病毒性1-2‰，细菌性3-4‰
8、细菌种
子接种量1-2%
9、免疫途径：注射、点眼滴鼻、气雾、经口免疫、穿刺接种
10、新型疫苗的种类：重组亚单位疫苗、重组活载体疫苗、基因缺失疫苗、基因疫苗、多肽疫苗
11、鸡胚接种途径：绒囊尿囊膜、尿囊腔、卵黄囊、羊膜腔、脑内静脉接种法
12、细菌性灭活苗的程序：培养基制备→种子制备→培养菌液制备→半成品检测→灭活→配苗→分装→冻干
13、弱毒株的选育程序：
14、细胞病变的特征：
15、好氧培养方法：划线接种、倾注培养
16、厌氧培养法：CO2培养法，
17、基因工程活疫苗；参照新型疫苗
18、弱毒冻干苗保存温度-15℃，氢氧化铝胶佐剂保存在常温
19、多联苗；利用不同类微生物增殖培养物，按免疫学原理和方法组合而成的疫苗。