生物碱类成分分析ppt课件

➢绝大多数具有显著的生理活性 ➢中药材中生物碱多和植物酸性成分结合成盐的状态存在
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结构特征及理化性质
❖ 结构特征 CHON
大多数生物碱 在酸性水溶液中可 以与某些试剂生成 不溶于水的复盐或 分子复合物，这类
试剂
❖ 理化性质
物理性状：结晶性固体；液体、小分子固体（挥发性、升华性），多无色 溶解性：多样性 沉淀反应：生物碱沉淀试剂，定性（蛋白质、多肽、鞣质，避免假阳性）
的问题？ ❖ 含生物碱类成分中药制剂定性鉴别，以硅胶为载
体时，展开系统需注意的问题？ ❖ HPLC法分析制剂中单体生物碱的含量时，改进流
动相的常用方法？
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概述
❖定义 生物碱是生物界除生物体必须的含氮化合物
（如氨基酸、蛋白质和B族微生素等）之外的所有 含氮有机化合物，因其结构中氮原子上的未共享电 子对而大多具有碱性。
1.提取净化条件的考察 2.测定方法与条件的选择 3. 定量分析方法验证 3.1 专属性 3.2 线性关系考察 3.3 精密度试验 3.4 准确度试验 3.5 稳定性试验 3.6 测灵敏度及检测限的测定
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含量测定
❖总生物碱含量测定 化学分析法
范围：处方药味少，内含成分简单的中药制剂 酸碱滴定法：生物碱碱性强弱，水/非溶液酸碱滴
定法 重量法：提取生物碱成沉淀 or 加生物碱沉淀试剂
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酸碱滴定法
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溶液后标示的“（1－10）”等符号， 系指固体溶质1.0g或液体溶质1.0ml 加溶剂使成10ml的溶液；未指明用 何种溶剂时，均系指水溶液；
4.固定相即色谱柱的选择：采用ODS柱 5.流动相的选择：部分含水溶剂，水用超纯水，有机溶剂采
用色谱纯溶剂，并用0.45um过滤膜过滤 6.洗脱方式的选择
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7.检测器的选择：UVD 8.定量分析 8.1方法学考察：专属性，线性关系和范围，精密
度试验，重现性试验，稳定性试ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ 8.2含量测定：
重 量 法
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含量测定
❖分光光度法
样品分离、净化（化学法、柱色谱法、TLC法等） 直接测定法：不经过化学反应用生物碱物质自身
的吸收波长 范围：药物少，内含成分简单的中药制剂 离子对萃取比色法
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分 光 光 度 法： 直 接 测 定 法
2010版药典：HPLC 定量黄连、炒白芍
硅胶弱酸性，形成盐至Rf值小、拖尾、复斑，碱性展开系统or碱性条件下
显色剂：改良碘化铋钾（橘红色） 供试品的制备：处方、剂型、存在状态、溶解性、共存成分的性质
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固 体 剂 型 回 流 提 取
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液 体 剂 型 液 液 萃 取
层板上进行 2.5检视：供试品色谱中，在与对照药材色谱及对
照品色谱相应的位置上，显相同的斑点
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1.如何建立一清颗粒定含量测定分析方法？ 叙述实验步骤及注意事项。
1.药味及活性成分的选择 黄连君药 小檗碱主要活性成分
2.供试品溶液的制备：提取、纯化（液－液萃取法）制备供 试品溶液
3.对照品溶液的制备：精密称取干燥至恒重的小檗碱对照品 溶液，溶于甲醇即得对照品溶液
马钱子主含生物碱。以番木鳖 碱(士的宁) 与马钱子碱(布鲁 生) 为主, 主效成分及毒性成 分。生物碱以盐的形式存在， 加浓氨水使生物碱盐转变成游 离碱，易溶于氯仿有机溶剂。 地龙含较多多肽、蛋白质等， 不溶于有机溶剂。
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定性鉴别
❖色谱鉴别
1.TLC法： 常用载体：硅胶 常用展开剂：氯仿、苯及相应极性调节剂
显色反应：纯品，少用于制剂中生物碱分析
碱性：多呈碱性，碱性强成盐弱游离，供试品制备及分析方法建立及条件 选择的依据
紫外光谱特征：共轭体系，紫外吸收
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定性鉴别
❖一般理化鉴别
沉淀反应多用：酸性条件，净化处理（除蛋白质、 多肽、鞣质），制剂中两种以上含生物碱药材（难 说明问题）
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问题 1.如何建立一清颗粒的定性鉴别方法？ 叙述实验步骤及注意事项。
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1.薄层板的制备 2.黄连药材的鉴别： 2.1对照品溶液的制备：小檗碱作为对照品，制备
小檗碱甲醇对照品溶液； 2.2黄连对照药材溶液的制备：甲醇回流提取 2.3供试品溶液的制备：甲醇浸渍提取 2.4点样及展开：按照薄层色谱法试验，在同一薄
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第五章 中药制剂中各类化学成分分析
第一节 生物碱类成分分析
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大纲要求
❖ 熟悉生物碱类成分结构特征及理化性质 ❖ 掌握生物碱类制剂定性鉴别常用方法 ❖ 掌握生物碱类制剂定量分析常用方法
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问题
❖ 生物碱类成分的理化性质？ ❖ 含生物碱类成分的中药制剂制备供试品时需考虑
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分 光 光 度 法： 直 接 测 定 法
2010版药典：HPLC 定量黄连
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分光光度法
离子对萃取比色法
范围：中药制剂中微量生物碱的含量测定 原理：一定PH介质中，有机碱与一些酸性染料或磺酸类、
酸类的阴离子，定量结合为有色离子对，离子对定量溶于 某些有机溶剂，一定波长下测定有机溶剂的或碱化后释放 出的染料的吸收度，按分光光度法计算有机碱的含量。 常用方法：酸性染料比色法和苦味酸盐比色法
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固 体 剂 型 大 蜜 丸
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定性鉴别
❖色谱鉴别
2.纸色谱法： 显色：含硫酸的试剂不可 3.HPLC法： 快速、灵敏、微量
Rt值法，峰面积 or 峰高加大法（用内标）
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含量测定
反映中药制剂中含生物碱的真实情况 提取、净化、分析测定均要准确 方法学考察内容
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分光光度法
❖酸性染料比色法
适当PH介质中，生物碱可与氢离子结合成生物 碱盐的阳离子，而酸性染料在此条件下解离为阴离子， 生物碱盐的阳离子与染料阴离子定量地结合成有色的 配合物（即离子对），此离子对可定量地溶于某些有 机溶剂，测定有机溶剂的吸收度 or 经碱化后释放出 的染料的吸收度，即可计算生物碱的含量。