真菌形态
子囊子囊壳子囊腔
附着胞侵入钉假根各式吸器
无隔担子有隔担子有隔担子
真菌的分离培养及形态观察 真菌分离培养应考虑所分离真菌的特性，配制合适的培养基，选择所需的气体环境。同时, 由于真菌分离材料常污染有大量细菌，所以可在培养基中加入抗菌素并在分离培养过程中严格执行无菌操作。 目的要求 1．掌握真菌分离培养方法。 2．认识真菌菌落的特征，比较与细菌菌落有何不同。 3．了解真菌载片培养法。 4．掌握观察真菌的基本方法，并观察其形态特征。 操作步骤 —、真菌的分离培养方法 （－）平板划线分离法 1．取适合真菌的琼脂培养基融化，冷至45℃，注入无菌平皿中，每皿15～20ml，制成平板待用。 2．取要分离的材料（如田土、混杂的或污染的真菌培养物、真菌）少许，投入盛无菌水的试管内，振摇，使分离菌悬浮于水中。 3．将接种环经火焰灭菌并冷却后，蘸取上述菌悬浮液，进行平板划线(同细菌的划线法)。 4．划线完毕，置温箱中培养2～5d，待长出菌落后，钓取可疑单个菌落先作制片检查，若只有一种所需要的真菌生长，即可进行钓菌纯培养。如有杂菌可从单个菌落中钓少许菌制成悬液，再作划线分离培养，有时需反复多次，才得纯种。另外，也可在放大镜的观察下，用无菌镊子夹取一段待分离的真菌菌丝，直接放在平板上作分离培养，可获得该种真菌的纯培养。 （二）稀释分离法 1．取盛有无菌水的试管5支（每管9ml），分别标记1、2、3、4、5号。取样品（如田土等）1g，投入1号管内，振摇，使悬浮均匀。 2．用1ml灭菌吸管，按无菌操作法，从1号管中吸取1ml悬浮液注入2号管中，并摇匀；同样由2号管取1ml至3号管，依此类推，直至5号管。注意每稀释一管应更换一支灭菌吸管。 3．用2支无菌吸管分别由4号、5号试管中各取1ml悬液，并分别注入2个灭菌培养皿中，再加入融化后冷至45℃的琼脂培养基约15ml，轻轻在桌面上摇转，静置，使冷凝成平板。然后倒置温箱中培养，2～5d后，从中挑选单个菌落，并移植于斜面上。 二．真菌培养性状观察 （一）真菌在固体培养基上的生长表现 1 .酵母菌菌落：酵母菌在固体培养基上多呈油脂状或蜡脂状，表面光滑、湿润、黏稠，有的表面呈粉粒状、粗糙或皱褶。菌落边缘有整齐、缺损或带丝状。菌落颜色有乳白色、黄色或红色等。 2. 霉菌菌落：将不同霉菌在固体培养基上培养2～5d，可见霉菌菌落呈绒毛状、絮状、蜘蛛网状等。菌落大小依种而异，有的能扩展到整个固体培养基，有的有一定的局限性（直径1～2mm或更小）。很多霉菌的孢子能产生色素，致使菌落表面、背面甚至培养基呈现不同的颜色，如黄色、绿色、青色、黑色、橙色等。 （二）真菌在液体培养基中的生长表现 1. 酵母菌注意观察其混浊度、沉淀物及表面生长性状等。
真菌学实验报告 一.实验目的： 1.1了解真菌形态的基本特征。 1.2掌握丝状真菌制片方法。 1.3掌握内生真菌的分离方法 1.4掌握真菌的鉴定方法。 二.前言： 真菌广泛分布于地球表面,从高山、湖泊到田野、森林，从海洋、高空到赤道、两极，到处都有真菌。真菌虽然不在空气中生长繁殖，但它的孢子却成群的漂浮在天空，只要稍微注意你会发现人类原来生活在真菌的汪洋大海中。 当今世界，生物技术已迈入世界经济的支柱产业，真菌学在生物技术的大潮中得到了长足的发展。真菌是原始的真核生物，具有广泛的多样性，真菌生长我繁殖迅速，在很短的时间内就可以得到比动物和植物多得多的后代，能够直接、快速地进行遗传性状分离的
分析。因此，真菌可以作为研究基础生物学过程中的一个重要工具，真菌基因的多样性以及真菌分子生物学的发展，为生物技术产业提供了一个广阔的天地。 植物的生长环境直接影响内生真菌的生物多样性，植物物种的年代越久远，其生物内生真菌的多样性越丰富：抗病原性能越强的植物，其所含的内生真菌具有抗菌活性的可能行就越大；其所含的内生真菌有可能产生与植物相同或相似的抗菌无知或产生抗菌活性物质可能参与了药用植物的抗菌过程，本实验通过植物病原真菌和G+、G-细菌的抑制实验发现茎，根，花，种子或果实内生真菌的代谢产物具有不同程度的抑菌能力，并且对G+、G-有普片遍的抑菌作用。研究和开发内生真菌的寻找新的抗菌活性物质具有广泛的应用前景。 三.材料与方法： 3.1.1材料： 在校园内采集银杏、喜树、桂花树样品包括叶、茎、根、花、种子或果实。 3.1.2.药品与试剂： 葡萄糖、蛋白胨、KH2P04·3H2O、MgSO4·7H2O，马铃薯、琼脂。孟加拉红，青霉素，链霉素，甲基蓝，蛋白胨，酵母膏，蔗糖，磷酸盐，葡萄糖，琼脂条，无菌水等。消毒剂：75%的乙醇，0.1%升汞（HgCl2），次氯酸钠溶液（含活性氯10%），30%双氧水。双
题目：真菌的培养及形态观察 动物科学1204班聂孝明 20121546 指导教师：邹玲 摘要：了解酵母菌和霉菌的菌落特征及在培养基中的生长表现，还有真菌的分离培养方法和载片培养，学习真菌水浸片的制备及形态观察。本实验通过真菌的固体培养，酵母菌水浸片旳制备观察及划线分离培养的方法进行形态观察。在固体培养基上，观察到A菌落成绿色比较光滑、有分生孢子、菌丝有横隔为青霉。D菌落有大量直立菌丝并且顶部发黑、有孢子囊、菌丝无横隔为根霉。B菌落大而光滑、显微镜下菌体较大、有假菌丝并且出芽生殖的为酵母菌。 关键词：酵母菌霉菌形态观察分离培养 引言：真菌在自然界中分布广、数量大、种类多。酵母菌是单细胞微生物，细胞核和细胞质有明显的分化，个体直径比细菌大10倍左右，多为圆形或卵圆形，无性繁殖为出芽生殖，可以形成假菌丝，有性繁殖是通过结合产生子囊孢子。用美蓝染色液制成水浸片可以观察期外形和区分细菌的死活。霉菌的营养体是分支的丝状体，较大，分为基内菌丝和气生菌丝，不同的霉菌的繁殖菌丝可以形成不同的孢子，细胞易收缩变形，孢子容易分散。利用培养在玻璃纸上的霉菌作为观察材料，可以得到清晰，完整，保持自然状态的霉菌形态。 1材料与方法 1.1材料 1.1.1菌种：酵母菌，青霉，根霉的斜面培养菌种 1.1.2试剂：沙堡培养基、美蓝染色液、70%酒精、无菌水等 1.1.3其他：解剖针、玻片、盖玻片、接种环、显微镜等 1.2方法 1.2..1真菌的划线分离培养 培养基：将沙堡琼脂培养基融化后，冷却至45摄氏度，注入无菌平皿中，每皿15~20ml，做成平板备用。 接种：取待分离的材料少许，投入无菌水试管中，振荡，使分离菌悬浮于水中，将接种环火焰灭菌后冷却，取上述悬液，进行平板划线分离。 培养与观察：划线完毕后，置于28摄氏度温箱培养2~5天，待形成子实器官后，取单个菌落部分，制片镜检。若只有一种菌，既得纯培养物。如有杂菌可取培养物少许制成悬液，用作划线分离，有时反复多次可获得纯种。也可在放大镜下观察，用无菌镊子夹取一段分离的真菌菌丝，在平板上分离培养，即可得到真菌的纯培养物。 1.2.2真菌在固体培养基上的生长表现： 酵母菌在固体培养基上菌落呈油脂状或蜡质状，表面光滑、湿润、粘稠，有的表面呈现粉粒状，粗糙或褶皱，菌落边缘整齐、缺损或带丝状。菌落颜色有乳白色、黄色、红色等。将不同的霉菌在固体培养基上培养2~5d，可见霉菌有绒毛状、絮状、绳索状等。大小依霉菌种类而异，很多霉菌的孢子和菌丝能产生色素，致使菌落表面、背面甚至培养基呈现不同的颜色，如黄色、绿色、黑色、橙色等。 1.2.3真菌的形态观察 1.2.3.1酵母菌水浸片的制备：将美蓝染色液或蒸馏水滴于干净的载玻片中央，用接种环以无菌及操作取培养48h的酵母菌少许，均匀涂于液滴中，染色2~3min后加盖玻片。注意切勿产生气泡，然后低倍镜和高倍镜观察其细胞形态、芽殖方式，注意酵母菌的形态、大小和芽体，同时可以根据是否染上颜色来区别死活细胞。 1.2.3.2挑取真菌孢子接入盛有灭菌水的试管中，震荡试管制成孢子悬液，用灭菌滴管吸取
真菌形态的几种观察方法.txt39人生旅程并不是一帆风顺的，逆境失意会经常伴随着我们，但人性的光辉往往在不如意中才显示出来，希望是激励我们前进的巨大的无形的动力。40奉献是爱心，勇于付出，你一定会收到意外之外的馈赠。真菌形态的几种观察方法 真菌作为一种实验材料，在微生物实验室中的应用是相当普遍的，正确的培养观察方法，能够如实地反映其本质特征。下面介绍实验室中真菌形态的几种观察方法。 1．载片培养法 载片培养方法是实验室观察真菌形态的基本方法。此法的基本步骤是：在无菌条件下，用无菌吸管吸取融化的培养真菌的固体培养基，快速地滴一滴于无菌的载玻片上，待其冷却以后，用接种环沾取少许孢子或者挑取一点菌丝段于凝固的培养基上，上面放上无菌的盖玻片。然后，将此片子放入干净的培养皿中，培养皿底部放入潮湿的吸水滤纸，或者将培养皿底放入一些水，中间用玻璃棒隆起，将做好的培养片子搭放在上面，合适温度下培养。将培养好的片子取出，用小镊子轻轻地取下上面的盖玻片，把盖玻片转放于另一干净的载玻片上，待自然干燥后，两边用透明胶固定，用棉蓝染色液染色。 载片培养法还可以这样进行：将厚度约0.5mm的平板培养基用小刀切成大小0.5cm2的小块，挑取一小块培养基放于干净的载玻片上，同样的方法接种、培养观察。还可以用刀片将培养好的载玻片上的多余培养基割去，自然干燥后，用大一点的盖玻片盖上菌丝，用同样方法两边固定，染色观察，这种方法特别适用于产生无性孢子的真菌的形态观察。该方法要注意以下几点：滴的培养基不能太多，接种物不能太多，防止污染。 2．插片培养法 插片培养法是实验室观察真菌形态的另一种基本方法。这种方法的基本步骤是：将菌丝块接种于固体平板的中间。假如是以孢子接种，则将孢子稀释液涂布于固体平板上，然后，用小镊子夹起一块无菌的盖玻片，以45度角的角度斜插入培养基中，不要插入培养基太深，让菌丝爬上盖玻片；培养好了以后，再用小镊子将盖玻片取出，自然干燥以后，将盖玻片转移到一干净的载玻片上，用同样的方法两边固定，染色观察。该方法要注意：插片的角度要掌握好，不能太直或太平；当两面都有菌丝时，擦去背对中心的那面的菌丝，以避免干扰。 3．粘片法 粘片法是用透明胶粘贴菌丝或者孢子进行观察的方法。用剪刀剪取一小段透明胶，用小镊子夹住一个角，轻轻地粘一些菌丝或者孢子，然后将其放入一干净的载玻片上，在载玻片上滴一滴染色液，可以染色观察。此法要注意：粘贴时，不要用力粘的太多；粘上菌丝或者孢子的透明胶放入载玻片上，不要移动，要一次放好。 4．平板观察法 平板观察法是在平板上直接观察真菌的方法。对菌丝生长得比较稀疏的真菌和观察基内菌丝。此法比较直接真实地反映菌丝的形态特征，观察时将平板的上盖拿开，倒置于显微镜的载物台上。这种方法可以消除由于培养体变干或者放在菌丝表面的盖玻片等可能出现的影响。此
真菌的生物学形态特征 与细菌相比，真菌的大小、形态、结构和化学组成均有很大的差异。真菌比细菌大几倍至几十倍，可以用普通光学显微镜观察。真菌的细胞是典型的真核细胞，真菌细胞具有细胞壁、细胞膜、细胞核、细胞器及细胞质。真菌细胞壁主要化学成分为几丁质(chitin)和1，3-葡聚糖，而细菌细胞壁主要化学成分为肽聚糖。真菌按形态可分为单细胞和多细胞两类。单细胞真菌主要为酵母菌(yeast)和酵母样菌(veast-1ike)，菌体呈圆形或卵圆形，其形成的菌落为酵母型或类酵母型，临床常见的有念珠菌属和新生隐球菌。多细胞真菌由菌丝和孢子组成，菌丝伸长分支，交织成团形成菌丝体(mycelium)，并长有各种孢子，这类真菌称为丝状菌(filamentous fungus)，俗称霉菌(mold)。其形成的菌落为丝状型。对人致病的有皮肤癣菌等。有些真菌可因营养、温度、氧气等环境条件的改变，而两种形态发生互变，称为二相性(dimorphic)。真菌的菌落形态、颜色变化及真菌不同生长时期的镜下特征是正确鉴定真菌的重要依据。 (一)真嚣的镜下形态 多细胞真菌的菌丝和孢子随真菌种类不同而形态不同，是鉴别真菌的重要依据。 1.菌丝菌丝是由孢子出芽形成的。孢子在环境适宜的条件下长出芽管，逐渐延长呈丝状即菌丝(hyphae)。当菌丝不断生长、分支并交织成团时，被称为菌丝体(mycelium)。孽警粤结构不同可分为有隔菌丝和无隔菌丝。有隔菌丝(septate hyphae)是由横隔将管状尊构的菌丝分隔成一连串多细胞样的丝状体，如曲霉、青霉和毛癣菌等大多数丝状真菌的菌丝属于此类：无隔菌丝(nonseptate hyphae)无隔膜，整条菌丝为单个细胞，细胞质内有多个细胞核，根霉和毛霉的菌丝属于此类。菌丝在人工培养基中生长，按其着生情况可分为营乔丽丝(vegetative hyphae)和气生菌丝(aerial hyphae)。菌丝向下生长，深入培养基内获取营养的菌丝称为营养菌丝：而从培养基表面长出向空中伸展的菌丝称为气生菌丝。部分气生菌丝发育到一定阶段可衍化为具有繁殖能力的繁殖菌丝(reproductive hyphae)。菌缝可有多种形态，如螺旋状、球拍状、结节状、鹿角状、梳状和关节状等，它们有助于真菌的鉴别。 2.孢子孢子是真菌的繁殖结构，分为有性孢子和无性孢子两类。有性孢子是由同一里体璧不同菌体上的两个细胞融台经减数分裂形成。无性孢子由菌丝上的细菌直接分化或出芽形成，是病原性真菌传播和延续后代的主要方式。真菌孢子抵抗力不强，加热60～70℃短时间即死亡。真菌孢子与细菌芽胞不同，其区别见表22-1。
实验三放线菌形态及菌落特征的观察 一、目的要求 掌握观察放线菌形态的基本方法，并观察放线菌的形态特征。 二、基本原理 和细菌的单染色一样，放线菌也可用石炭酸复红或碱性美蓝等染料着色后，在显微镜下观察其形态。放线菌的孢子丝形状和孢子排列情况是放线菌分类的重要依据，为了不打乱孢子的排列情况，常用印片染色法和胶带纸粘菌染色法进行制片观察。 放线菌是由不同长短的纤细的菌丝所形成的单细胞菌丝体。菌丝体分为两部分，即潜入培养基中的营养菌丝（或称基内菌丝）和生长在培养基表面的气生菌丝。有些气生菌丝分化成各种孢子丝，呈螺旋形、波浪形或分枝状等。孢子常呈圆形、椭圆形或杆形。气生菌丝及孢子的形状和颜色常作为分类的重要依据。三、器材 1.活材料：放线菌培养物，酵母菌斜面培养物； 2.染色液：复红染色液（或结晶紫，美兰）； 3.器材：载玻片，胶带纸，小刀，接种环，吸水纸，擦镜纸，酒精灯，香柏油，乙醚-乙醇混合液，显微镜。 四、操作步骤 1．印片法：放线菌自然生长状态的观察 印片：取干净载玻片一块，用小刀切取放线菌培养体一块，放在载玻片上，用另一块载玻片对准菌块的气生菌丝轻轻按压，然后将载玻片垂直拿起。注意不要使培养体在玻片上滑动，否则会打乱孢子丝的自然形态； 微热固定：将印有放线菌的涂面朝上，通过酒精灯火焰2-3次加热固定；染色:石炭酸复红染色1min； 水洗：水洗后晾干； 镜检：先用低倍镜后用高倍镜，最后用油镜观察孢子丝、孢子的形态及孢子排列情况。 2．胶带纸法 粘菌：用胶带纸在放线菌培养体上粘取菌体，注意，压取时从菌落边顺着菌体生长方向，避免从菌落上面压取，以免取得的全是孢子。 染色：将粘有菌体的胶带纸压在事先准备好的滴油染液的载玻片上。将多余染色液用滤纸吸掉。 镜检：同上。 五、实验报告 绘图说明你所观察到的放线菌的形态特征。
丝状真菌地鉴定主要根据形态特征。形态特征包括群体形态和个体形态。 1、群体形态 群体形态即菌落的形态。观察菌落形态时多采用固定的培养基，将固体培养基制成平板，以点植法接种，即用接种针尖沾取少量孢子点植在平板上适当的位置，例如中心，或三角形的三点。然后于25－28℃培养一定时间（如2、4、7、10天）进行观察，观察时可用肉眼或借助放大镜、低倍镜、解剖镜等。 观察的要点一般包括下列几项： 1）大小：它反映生长或发育速度，通常测量菌落的直径。 2）颜色：包括菌落表面子实体、气生菌丝、菌核的颜色和基内的颜色，还应注意培养基颜色的变化。 3）菌落表面的纹饰：如皱纹、辐射沟纹、同心环、整个菌落致密或疏松等。 4）菌落的质地：即菌落外观呈毡状、绒毛状、棉絮状、粉粒状、革质状，有无成束状或绳状的气菌丝。 5）菌落的高度：菌落扁平或凸起，中心部分凸起或凹陷。气生菌丝的高度。 6）菌落的边缘：全缘、锯齿状、树枝状等。 7）渗出物：指菌落表面有无液滴、液滴的颜色和数量。 2、个体形态 个体形态指菌丝的特征，子实体的形态(如孢子囊。子囊壳、子囊、担子果等的形态)，孢子的形态（如孢囊孢子、分生孢子、芽孢子、节孢子、厚垣孢子、卵孢子、接合孢子、担孢子等）。由于丝状真菌的个体大都较小，必须制成载片标本在显微镜下观察。 丝状真菌的制片比较简单，通常将乳酸苯酚（Lactophenol）液一滴，滴于
载片上，再用解剖针挑取欲观察的培养物置此液滴内，并且用针尖将其分散开勿使成团，盖好盖片即得载片标本。这种载片可保存数月，如盖片四周涂封漆则可保存数年。 1两种分生孢子, 大型分生孢子呈镰刀形，小型分生孢子呈椭圆形 2孢子长方形，接连成链 菌丝断裂为成串的节孢子 3灰绿色，绒毛状，表面有绿色的孢子孢子圆球形，呈绿色 孢子大小(μm)：3.03～4.26 分生孢子梗顶端膨大，表面的产孢瓶体上成链的分生孢子
本课程，本课程是大学本科生物技术、生物科学专业的选修课程。介绍真菌分类现状、分类方法（包括传统与现代分类方法的比较）、分类依据及其原则。本课程的教学不限于介绍研究的成果，重在介绍分析和解决问题的方法，以培养学生分析问题和创新的能力。所以在理论学习的同时开设综合性实验，培养学生观察、分析和动手能力。基本掌握真菌分离、鉴定的方法，并应用于真菌其它领域的研究。 本指导书适用于生物技术和生物科学专业。
1、实验：内生真菌的分离及鉴定 ???????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????3 2、实验报告基本内容要求 ???????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????7 3、实验报告格式????????????????????????????????????????????????????????????????8
实验内生真菌的分离及鉴定 实验学时：18 实验类型：综合 实验要求：选修 一、实验目的 1.了解真菌形态的基本特征。 2.掌握丝状真菌制片方法和真菌鉴定方法。 二、实验内容 采集植物样品包括叶、茎、根、花、种子或果实，然后对分离样品的内生真菌，并进行形态和分子生物学方法的鉴定。 三、实验原理、方法和手段 （一）实验原理 根据真菌的形态特征和ITS序列等分子证据对分离到真菌进行归类和鉴定。 （二）实验手段和方法 1、内生真菌分离纯化方法 1.1样品的表面消毒及预处理 分别取根、茎、叶、果实，用洗涤剂在自来水下洗净。 老树皮用75%酒精进行表面消毒后，用镊子取出，于酒精灯上烧灼15秒至表面焦糊，切成1×1cm2大小置于PDA固体培养基上。 对于根、茎、叶、果实按下列程序进行表面消毒： 75%的酒精漂（浸）洗2-3min→无菌水冲洗4-6次→0.1%升汞不同的消毒时间（共设置7个梯度）→无菌水冲洗4-6次→用灭菌滤纸吸干多余水分→无菌刀片将材料切成小块 将根、茎的表皮、韧皮部、木质部大致分开，并切成0.5×0.5cm2大小。将果实的外种皮去掉，消毒之后将内种皮去掉。 灭菌时，沥干的植物材料转放到烧杯中，记好时间，倒入消毒溶液，不时用玻璃棒轻轻搅动，以促进材料各部分与消毒溶液充分接触，驱除气泡，使消毒彻
实验四酵母菌形态及菌落特征的观察 一、目的要求 1．观察酵母菌的细胞形态及出芽生殖方式。 2．观察酵母菌的菌落特征。 3. 学习掌握区分酵母菌死、活细胞的染色方法。 二、基本原理 酵母菌是多形的、不运动的单细胞微生物，细胞核与细胞质已有明显的分化，菌体比细菌大。繁殖方式也较复杂，无性繁殖主要是出芽生殖，仅裂殖酵母属是以分裂方式繁殖；有性繁殖是通过接合产生子囊孢子。本实验通过用美蓝染色制成水浸片，和水-碘水浸片来观察生活的酵母形态和出芽生殖方式。美蓝是一种无毒性染料，它的氧化型是蓝色的，而还原型是无色的，用它来对酵母的活细胞进行染色，由于细胞中新陈代谢的作用，使细胞内具有较强的还原能力，能使美蓝从蓝色的氧化型变为无色的还原型，所以酵母的活细胞无色，而对于死细胞或代谢缓慢的老细胞，则因它们无此还原能力或还原能力极弱，而被美蓝染成蓝色或淡蓝色。因此，用美蓝水浸片不仅可观察酵母的形态，还可以区分死、活细胞。但美蓝的浓度、作用时间等均有影响，应加注意。 三、器材 1.活材料：酿酒酵母（Saccharomyces calsbergensis）2-3d培养物； 2.染液：吕氏碱性美蓝染液 3.器材：显微镜，载玻片，盖玻片等。 四、操作步骤 1．酵母菌落形态观察并记录。 2.美蓝浸片观察 (1)在载玻片中央加一滴碱性美蓝染液，液滴不可过多或过少，以免盖上盖玻片时，溢出或留有气泡。然后按无菌操作法取斜面上培养2-3d的酿酒酵母少许，放在碱性美蓝染液中，使菌体与染液均匀混合。 (2)取盖玻片一块，小心地盖在液滴上。盖片时应注意，不能将盖玻片平放下去，应先将盖玻片的一边与液滴接触，然后将整个盖玻片慢慢放下，这样可以避免产生气泡。 (3)将制好的水浸片放置3分钟后镜检。先用低倍镜观察，然后换用高倍镜观察酿酒酵母的形态和出芽情况，同时可以根据是否染上颜色来区别死、活细胞。 2．水浸片观察 在载玻片中央滴一滴蒸馏水，取酿酒酵母少许，放在水-碘液滴中，使菌体与水混匀，盖上盖玻片后镜检。可以适当将光圈缩小观察。 五、实验报告 绘图说明你所观察到的酵母菌的形态特征。
实验二、真菌形态观察（一） 1目的： 认识真菌营养体及变态，认识真菌无性和有性孢子类型。 掌握鞭毛菌亚门和接合菌亚门的主要形态特征。 掌握临时玻片的制作方法和绘图技术。 2原理： 真菌营养生长阶段的结构称为营养体，当营养生长进行到一定时期，就开始转入繁殖阶段，形成繁殖体，即子实体。营养体主要为菌丝体，主要变态有吸器、假根、菌核、子座以及根状索菌等。繁殖体主要包括无性孢子和有性孢子。 通常制作临时玻片来观察病原物在植物上着生的情况以及病原物的形态特征。 3材料用具 番茄晚疫病菌装片，辣椒疫霉病菌装片，黑根霉装片，酵母菌悬浮液等培养真菌，植物病害组织。挑针，刀片，木块，酒精灯，火柴，载玻片，盖玻片，纱布，乳酚油，二甲苯，显微镜，吸水纸，擦镜纸。投影仪，多媒体课件等。 4内容与方法（自己写，包括主要内容即可） 4.1 临时玻片 4．1 .1浮载剂制作临时玻片都要使用浮载剂，浮载剂的作用是防止材料干燥和集中光线，以利于显微镜下观察。浮载剂的种类很多，最常用的是水和乳酚油，其次是甘油、甘油明胶，希尔浮载剂等。 (1水：水浮载剂一般使用蒸馏水，应用最为方便。对细菌、真菌孢子等无不利影响。观察细菌、线虫活动，真菌孢子萌发都必须用水作浮载剂。测量真菌菌丝直径和真菌孢子大小时也以水作浮载剂为
好。但是用水作浮载剂制片时较易形成气泡，制成的玻片也易干燥而不能保存。 (2乳酚油：乳酚油长期以来一直是真菌学和植物病理学工作者习惯使用的浮载剂。乳酚油的组成如下：苯酚结晶(加热熔化20ml，乳酸 20ml，甘油40ml、水20ml。各成分混合后成为油状粘稠液体，具杀死和固定病原物的作用，可使干瘪的真菌孢子膨胀复原，还可使病组织变得略为透明。如在乳酚油中加入0．05--0．1％的染料制成棉蓝乳酚油，藏红乳酚油等，还能使菌丝或孢子略微着色，更便于观察。用乳粉油制作的玻片可长期保持湿润不会干燥，它的缺点中，很难精确测量病原物的大小。另外，乳酚油能与许多封固剂起作用，盖玻片也易滑动，不易封固。 4．1.2 临时玻片的制作临时玻片制作方法很多，如涂，撕、粘，挑和切片等，可根据病原物的类型选择使用。 (1涂抹法，细菌和酵母菌的培养物常用涂抹法制片。将细菌或酵母菌的悬浮液均匀地涂在洁净的载玻片上，在酒精灯火焰上烘干，固定，再加盖玻片封固。加盖玻片前还可进行染色处理，使菌体或鞭毛着色而易于观察。 (2撕取法，用小金属镊子仔细撕下病部表皮或表皮毛制成临时玻片。此法可以观察着生在寄主或基物表面的菌丝和孢子，寄主表皮细胞内的真菌菌丝、吸器和休眠孢子囊堆，以及病毒病的内含体等。 试以小麦白粉病叶，烟草花叶病病叶，蚕豆花叶病叶，受禾谷多粘茵为害的小麦病根等为材料，用撕取法制作临时玻片，观察病原物的形态。 (3粘贴法：将塑料胶带纸剪成边长5mm左右的小块，使胶面朝下贴在病部，轻按一下后揭下制成玻片。粘贴法用于菌丝或子实体着生于病组织或基物衷面的材料制片，特别适用于观察分生袍子在分生抱子梗上的着生情况。 (4挑取法，采用挑取法可以直接用挑针从病组织或基物(如培养基
实验二、真菌形态观察（一）1 目的：认识真菌营养体及变态，认识真菌无性和有性孢子类型。 掌握鞭毛菌亚门和接合菌亚门的主要形态特征。 掌握临时玻片的制作方法和绘图技术。 2原理：真菌营养生长阶段的结构称为营养体，当营养生长进行到一定时期， 就开始转入繁殖阶段，形成繁殖体，即子实体。营养体主要为菌丝体，主要变态有吸器、假根、菌核、子座以及根状索菌等。繁殖体主要包括无性孢子和有性孢子。 通常制作临时玻片来观察病原物在植物上着生的情况以及病原物的形态特征。 3 材料用具 番茄晚疫病菌装片，辣椒疫霉病菌装片，黑根霉装片，酵母菌悬浮液等培养真菌，植物病害组织。挑针，刀片，木块，酒精灯，火柴，载玻片，盖玻片，纱布，乳酚油，二甲苯，显微镜，吸水纸，擦镜纸。投影仪，多媒体课件等4内容与方法（自己写，包括主要内容即可）4.1 临时玻片 4．1 .1浮载剂制作临时玻片都要使用浮载剂，浮载剂的作用是防止材料干燥和集中光线，以利于显微镜下观察。浮载剂的种类很多，最常用的是水和乳酚油，其次是甘油、甘油明胶，希尔浮载剂等。 （1 水：水浮载剂一般使用蒸馏水，应用最为方便。对细菌、真菌孢子等无不利影响。观察细菌、线虫活动，真菌孢子萌发都必须用水作浮载剂。测量真菌菌丝直径和真菌孢子大小时也以水作浮载剂为 好。但是用水作浮载剂制片时较易形成气泡，制成的玻片也易干燥而不能保存。 (2乳酚油：乳酚油长期以来一直是真菌学和植物病理学工作者习惯使用的浮载剂。乳酚油的组成如下：苯酚结晶(加热熔化20ml，乳酸20ml，甘油 40ml、水20ml。各成分混合后成为油状粘稠液体，具杀死和固定病原物的作
用，可使干瘪的真菌孢子膨胀复原，还可使病组织变得略为透明。如在乳酚油中加入0．05--0．1％的染料制成棉蓝乳酚油，藏红乳酚油等，还能使菌丝或孢子略微着色，更便于观察。用乳粉油制作的玻片可长期保持湿润不会干燥，它的缺点中，很难精确测量病原物的大小。另外，乳酚油能与许多封固剂起作用，盖玻片也易滑动，不易封固 4．1.2 临时玻片的制作临时玻片制作方法很多，如涂，撕、粘，挑和切片等，可根据病原物的类型选择使用。 (1涂抹法，细菌和酵母菌的培养物常用涂抹法制片。将细菌或酵母菌的悬浮液均匀地涂在洁净的载玻片上，在酒精灯火焰上烘干，固定，再加盖玻片封固。加盖玻片前还可进行染色处理，使菌体或鞭毛着色而易于观察。 (2 撕取法，用小金属镊子仔细撕下病部表皮或表皮毛制成临时玻片。此法可以观察着生在寄主或基物表面的菌丝和孢子，寄主表皮细胞内的真菌菌丝、吸器和休眠孢子囊堆，以及病毒病的内含体等。 试以小麦白粉病叶，烟草花叶病病叶，蚕豆花叶病叶，受禾谷多粘茵为害的小麦病根等为材料，用撕取法制作临时玻片，观察病原物的形态。 (3粘贴法：将塑料胶带纸剪成边长5mm左右的小块，使胶面朝下贴在病部，轻按一下后揭下制成玻片。粘贴法用于菌丝或子实体着生于病组织或基物衷面的材料制片，特别适用于观察分生袍子在分生抱子梗上的着生情况。 (4 挑取法，采用挑取法可以直接用挑针从病组织或基物(如培养基
真菌学报告
真菌学实验报告 学院：生命科学学院 专业：生物技术 班级：生计091 姓名：xxxxxx 学号：xxxxxxx 指导教师：xxxxx 实验组：第九组 实验时间：2011.10.15——2011.12.15
一.实验目的： 1.了解真菌形态的基本特征。 2.掌握丝状真菌制片方法。 3.掌握内生真菌的分离方法 4.掌握真菌的鉴定方法。 二.前言： 真菌广泛分布于地球表面,从高山、湖泊到田野、森林，从海洋、高空到赤道、两极，到处都有真菌。真菌虽然不在空气中生长繁殖，但它的孢子却成群的漂浮在天空，只要稍微注意你会发现人类原来生活在真菌的汪洋大海中。 当今世界，生物技术已迈入世界经济的支柱产业，真菌学在生物技术的大潮中得到了长足的发展。真菌是原始的真核生物，具有广泛的多样性，真菌生长我繁殖迅速，在很短的时间内就可以得到比动物和植物多得多的后代，能够直接、快速地进行遗传性状分离的分析。因此，真菌可以作为研究基础生物学过程中的一个重要工具，真菌基因的多样性以及真菌分子生物学的发展，为生物技术产业提供了一个广阔的天地。 植物的生长环境直接影响内生真菌的生物多样性，植物物种的年代越久远，其生物内生真菌的多样性越丰富：抗病原性能越强的植物，其所含的内生真菌具有抗菌活性的可能行就越大；其所含的内生真菌有可能产生与植物相同或相似的抗菌无知或产生抗菌活性物质可能参与了药用植物的抗菌过程，本实验通过植物病原真菌和
G+、G-细菌的抑制实验发现茎，根，花，种子或果实内生真菌的代谢产物具有不同程度的抑菌能力，并且对G+、G-有普片遍的抑菌作用。研究和开发内生真菌的寻找新的抗菌活性物质具有广泛的应用前景。 三.材料与方法： （一） 1.材料： 在校园内采集银杏、喜树、桂花树样品包括叶、茎、根、花、种子或果实。 2.药品与试剂： 葡萄糖、蛋白胨、KH2P04·3H2O、MgSO4·7H2O，马铃薯、琼脂。孟加拉红，青霉素，链霉素，甲基蓝，蛋白胨，酵母膏，蔗糖，磷酸盐，葡萄糖，琼脂条，无菌水等。消毒剂：75%的乙醇，0.1%升汞（HgCl2），次氯酸钠溶液（含活性氯10%），30%双氧水。双蒸水、琼脂糖，Tris饱和酚、巯基乙醇(β- Mercaptoethanol)，石英砂，Tris饱和酚，氯仿，异戊醇，无水乙醇，硼酸，冰醋酸，氯化钠，盐酸，氢氧化钠，EDTA，CTAB。 3.培养基： 1、马铃薯、葡萄糖琼脂培养基 马铃薯汁 1000ml，葡萄糖20g，琼脂20g
实验一：植物病害症状、真菌一般形态、玻片标本观察及临时玻片标本制作 一、目的及要求 1、通过植物病害症状的观察，掌握植物病害的症状类型、病害特点以及病害症状在植物病害诊断中的作用。 2、熟悉常规临时玻片的制作方法，并通过玻片制作观察病原真菌的营养体结构和各种孢子类型。 二、实验材料 1、植物病害新鲜标本 橡胶炭疽病、橡胶白粉病、鸡蛋花锈病、花生黑斑病、花生褐斑病、香蕉炭疽病、香蕉叶斑病、黄瓜霜霉病、柑橘青霉（绿霉）病、丛枝病、病毒病、根结线虫、煤烟病、生木瓜、桑寄生。 2、制作的实验室标本 香蕉灰纹病、木薯褐斑病、龟背竹锈病、番木瓜疮痂病、金钱树白绢病、菜豆锈病、玉米大斑病、菠萝蜜白化病、胡椒花叶病、香蕉黑星病、番木瓜环斑花叶病。 三、实验用具 小烧杯50ml、培养皿90cm、小刀、刀片、载玻片（每人5~10片）、盖玻片、剪刀、镊子、透明胶（1cm宽）、吸水纸、酒精、显微镜（以上材料为每人一份）、蒸馏水。 四、实验内容与方法 1、观察采集的新鲜植物标本和实验室陈列的制作标本，记录植物病害的病状和病征。 1.1 病状类型病状一般分为变色、坏死、腐烂、萎蔫和畸形5 大类型 ⑴变色：植物受到外来有害因素的影响后，常导致色泽的改变，如褪色、花叶、条点、白化、色泽变深或变浅等，统称为变色。主要表现有： ①褪绿或黄化：褪绿或黄化是由于植物叶绿素的减少而使叶片表现为浅绿色或黄色。如：小麦黄矮病、植物的缺氮症等。 ②花叶与斑驳：花叶是叶片颜色不均匀地变色，且不同变色部分的轮廓是
很清楚的，如：烟草花叶病。如果不同变色部分的轮廓不清楚则称为斑驳，如：黄瓜绿斑驳病等 ⑵坏死：坏死是由于病植物组织和细胞的死亡而引起的。主要表现有： ①斑点：根、茎、叶、花、果实的病部局部组织或少量细胞坏死，产生各种小型的、形状和颜色不同的斑点。如：玉米大小斑病、花生黑斑病等。 ②枯死：芽、叶、枝、花的局部或大部分组织发生变色、焦枯、死亡。如：马铃薯晚疫病、水稻白叶枯病等。 ③穿孔和落叶落果：在叶片病斑外围的组织形成离层，使病斑从叶片组织中脱落下来，形成穿孔，如：桃穿孔病；有些植物的花、叶、果等受害后，在叶柄或果梗附近产生离层而引起过早的落叶、落果等。 ④疮痂：果实、嫩茎、块茎等的病组织局部木栓化，表面粗糙，略突起，病部较浅。如：马铃薯疮痂病、柑橘疮痂病。 ⑤溃疡：多见于木本植物的枝干、叶片或果实上。病部面积大，中央凹陷，坏死深人到皮层，周围的寄主细胞有时增生和木栓化或开裂。如柑橘溃疡病、番茹溃疡病、橡胶树条溃疡病等。 ⑥猝倒和立枯：大多发生在各种植物的苗期。幼苗的茎基或根冠组织坏死，地上部萎蔫或坏死,引起突然倒伏的称为猝倒;茎基部坏死但不倒伏的称为立枯。如棉花立枯病、瓜苗猝倒病等。 ⑶萎蔫：萎蔫指植物根部或茎部的维管束组织受到侵染而发生的枯萎现象,萎蔫可以是局部的,也可以是全株性的。典型的萎蔫病害是外表枝叶萎垂,无病征，植物皮层组织完好，但内部维管束组织受到破坏。 引起植物萎蔫的原因有生理性和病理性两种。用小刀或刀片斜切病株的茎基部，注意观察维管束部分有无变褐色。病理性萎蔫病株的茎基部维管束多呈褐色，如：番茄青枯病、棉花枯萎病等。 ⑷腐烂：腐烂是较大面积植物组织的分解和破坏的表现,根据症状及失水快慢又可分为干腐和湿腐。 湿腐如大白菜软腐病、甘薯软腐病等，干腐如甘薯糠心病、玉米干腐病等。 流胶也是腐烂的一种，桃树等木本植物受病菌为害后，内部组织坏死并腐烂分解，常从病部向外流出黄色黏胶状物质。如桃树流胶病。 ⑸畸形：畸形是由于病组织或细胞的生长受阻或过度增生而造成的形态异常。植物病害的畸形症状很多，常见的有：
实验六丝状真菌形态特征观察 杨明轩生物111 1102040128 一、实验目的 1、观察并描述真菌菌落特征。 2、掌握制作水压片观察真菌的方法。 3、区分丝状真菌的军体特征及其形态特点。 二、实验原理 毛霉和根霉都属于真菌的结合菌门。菌落生长迅速，表面呈棉花样，初为白色，以后变灰至褐灰色。菌丝单细胞无横隔，有分支，多核。毛霉无假根；根霉有假根和匍匐死。无性生殖产生孢囊孢子。孢囊梗直接由菌丝体上长出，孢囊梗顶端膨大形成孢囊，孢囊成熟破裂后，露出囊轴，囊轴基部与孢囊梗连接处称为囊托。毛霉无囊托，根霉的假根上方产生孢囊梗。孢囊孢子呈球形、卵形或不规则形。有性生殖形成接合孢子，常为异宗配合。这些结构均可通过水压片进行观察。 很多青霉、曲霉及镰刀菌尚未发现它们的有性生殖阶段，称为半知菌。这三种菌的无性生殖阶段均有特征性的分生孢子梗及分生孢子形态和分生孢子着生方式。青霉菌落多为灰绿色，菌落质地绒状、絮状、绳状或束状，成熟后表面呈粉末状。青霉菌丝可直接分化为分生孢子梗，其顶端具有对称或不对称的扫帚状分枝，其上着生几轮小梗，小梗顶端着生成串的球状或卵状的绿色分生孢子。曲霉菌落呈绒毛状或絮状，表面有同心圆形的轮状带。分生孢子梗长在厚壁的足细胞上，不分枝，顶端膨大呈球形、椭圆形或棍棒状顶囊。其表面着生一层或两层小梗，下层为柱状初生小梗，上层为瓶装次生小梗，顶端着生成串的球状分生孢子。镰刀菌菌落呈绒毛状，多为白色、粉红色或紫红色。菌丝分隔有分枝。具有两种分生孢子。小型分生孢子梗分枝或不分枝，其顶端有链状或假头状着生的小型分生孢子。大型分生孢子梗不分枝，其顶端着生镰刀状大型分生孢子多隔，单生或丛生。 三、实验材料 1、菌种：毛霉（Mucor sp.）“＋”“－”型菌株、根霉（Rhizopus sp.）、青霉（Penicilliumsp.）、 曲霉（Aspergillus sp.）、镰刀菌（Fusarium sp.） 2、浮载剂：乳酸酚溶液 3、培养基：真菌培养基 4、其他：无菌培养皿、载玻片、盖玻片、无菌水、擦镜纸、吸水纸、接种钩 四、实验方法 1、形态观察 （1）直接观察：不打开培养皿盖，将培养皿置于载物台上，在低倍镜下直接观察。 （2）制水压片：取一洁净的载玻片，于中央滴一滴乳酸酚溶液，用接种钩挑取少量菌丝及孢囊与染液中，用两根接种针将其拉松散，再轻轻盖上盖玻片，置于高倍镜下观察。（桔青霉和黑曲霉要观察足细胞，在挑菌时应当挑取少量培养基）。 2、毛霉接合孢子观察 （1）培养：分别在已经倒好的马铃薯葡萄糖培养基的平皿背面中央画一条线，于线左右分别标“＋”“－”，然后取相应的毛霉菌株接种，并在26℃恒温箱中倒置培养7天。 （2）镜检：制作水压片，观察。
真菌形态的几种观察方法 1．载片培养法 载片培养方法是实验室观察真菌形态的基本方法。此法的基本步骤是：在无菌条件下，用无菌吸管吸取融化的培养真菌的固体培养基，快速地滴一滴于无菌的载玻片上，待其冷却以后，用接种环沾取少许孢子或者挑取一点菌丝段于凝固的培养基上，上面放上无菌的盖玻片。然后，将此片子放入干净的培养皿中，培养皿底部放入潮湿的吸水滤纸，或者将培养皿底放入一些水，中间用玻璃棒隆起，将做好的培养片子搭放在上面，合适温度下培养。将培养好的片子取出，用小镊子轻轻地取下上面的盖玻片，把盖玻片转放于另一干净的载玻片上，待自然干燥后，两边用透明胶固定，用棉蓝染色液染色。载片培养法还可以这样进行：将厚度约0.5mm的平板培养基用小刀切成大小0.5cm2的小块，挑取一小块培养基放于干净的载玻片上，同样的方法接种、培养观察。还可以用刀片将培养好的载玻片上的多余培养基割去，自然干燥后，用大一点的盖玻片盖上菌丝，用同样方法两边固定，染色观察，这种方法特别适用于产生无性孢子的真菌的形态观察。该方法要注意以下几点：滴的培养基不能太多，接种物不能太多，防止污染。 2．插片培养法 插片培养法是实验室观察真菌形态的另一种基本方法。这种方法的基本步骤是：将菌丝块接种于固体平板的中间。假如是以孢子接种，则将孢子稀释液涂布于固体平板上，然后，用小镊子夹起一块无菌的盖玻片，以45度角的角度斜插入培养基中，不要插入培养基太深，让菌丝爬上盖玻片；培养好了以后，再用小镊子将盖玻片取出，自然干燥以后，将盖玻片转移到一干净的载玻片上，用同样的方法两边固定，染色观察。该方法要注意：插片的角度要掌握好，不能太直或太平；当两面都有菌丝时，擦去背对中心的那面的菌丝，以避免干扰。3．粘片法 粘片法是用透明胶粘贴菌丝或者孢子进行观察的方法。用剪刀剪取一小段透明胶，用小镊子夹住一个角，轻轻地粘一些菌丝或者孢子，然后将其放入一干净的载玻片上，在载玻片上滴一滴染色液，可以染色观察。此法要注意：粘贴时，不要用力粘的太多；粘上菌丝或者孢子的透明胶放入载玻片上，不要移动，要一次放好。 4．平板观察法 平板观察法是在平板上直接观察真菌的方法。对菌丝生长得比较稀疏的真菌和观察基内菌丝。此法比较直接真实地反映菌丝的形态特征，观察时将平板的上盖拿开，倒置于显微镜的载物台上。这种方法可以消除由于培养体变干或者放在菌丝表面的盖玻片等可能出现的影响。此方法要注意不要倒太多的培养基，直径10cm的平皿倒10ml的培养基就可以了。5．玻璃纸观察法 玻璃纸观察法是一种观察真菌生长特性的一种特殊方法。这种方法一般用于下列情况：研究菌丝生长的促进和阻碍作用，将无菌的玻璃纸放入刚倒好的平板中，用L型玻璃棒将玻璃纸表面铺平，然后用小刀将玻璃纸和培养基一起切成从中心向外辐射的2～4个区域。将菌丝块接入平板中心，此时用小针头的注射器滴一滴抑制或促进生长的营养液（例如不同浓度的CuSO4或者2，4-二硝基苯）于玻璃纸下面的各个区域中，培养一定时间待菌丝生长到滴加液部位时，切下玻璃纸和培养基小块于载玻片上，观察菌丝的生长情况。此法要注意以下几点：玻璃纸一定要铺平，不能使其中间打折；用小刀切块时，要使各个区域间分开，避免不同浓度的抑制剂或营养剂的相互干扰；平板不能倒得太厚，观察时要找一带分支的菌丝尖端，定时（5min）观察。 6．真菌的染色液 真菌的菌丝一般是无色的，因此，在观察其形态时，要用染色液进行染色观察，一般的染色液如结晶紫染色液不适合用来进行真菌染色观察。在这些染色液中，真菌菌丝容易集结
微生物形态结构和培养特性观察 １、微生物的形态结构观察主要是通过染色，在显微镜下对其形状、大小、排列方式、细胞结构（包括细胞壁、细胞膜、细胞核、鞭毛、芽孢等）及染色特性进行观察，直观地了解细菌在形态结构上特性，根据不同微生物在形态结构上的不同达到区别、鉴定微生物的目的。 ２、细菌细胞在固体培养基表面形成的细胞群体叫菌落（colony）。不同微生物在某种培养基中生长繁殖，所形成的菌落特征有很大差异，而同一种的细菌在一定条件下，培养特征却有一定稳定性。以此可以对不同微生物加以区别鉴定。因此，微生物培养特性的观察也是微生物检验鉴别中的一项重要内容。 １）细菌的培养特征包括以下内容：在固体培养基上，观察菌落 大小、形态、颜色（色素是水溶性还是脂溶性）、光泽度、透明度、 质地、隆起形状、边缘特征及迁移性等。在液体培养中的表面生长情况（菌膜、环）混浊度及沉淀等。半固体培养基穿刺接种观察运动、扩散情况。（下图）
细菌的培养特征图隆起8. 扁平7. 纺锤状6. 假根状5. 不规则形4. 丝状3. 圆形2. 点状1.
9.凸起10.垫状11.脐状12.边缘整齐13.波状14.裂片状15.啮蚀状16.丝状17.卷发状18.丝线状19.刺毛状20.串珠状21.疏展状22.树根状23.假根状24.丝状25.串珠状26.乳头状27.绒毛状28.树根状29.量杯状30.萝卜状31.漏斗状32.囊状33.层状34.絮状35.环状36.蹼状37.膜状 ２）霉菌酵母菌的培养特征：大多数酵母菌没有丝状体，在固体培养基上形成的菌落和细菌的很相似，只是比细菌菌落大且厚。液体培养也和细菌相似，有均匀生长、沉淀或在液面形成菌膜。霉菌有分支的丝状体，菌丝粗长，在条件适宜的培养基里，菌丝无限伸长沿培养基表面蔓延。霉菌的基内菌丝、气生菌丝和孢子丝都常带有不同颜色，因而菌落边缘和中心，正面和背面颜色常常不同，如青霉菌：孢子青绿色，气生菌丝无色，基内菌丝褐色。霉菌在固体培养表面形成絮状、绒毛状和蜘蛛网状菌落。
植物病害分为细菌病害、真菌病害和病毒病害三大类，其中真菌病害占到植物病害的95%左右。病源微生物侵染植物后，导致寄主植物细胞和组织的正常生理功能受到严重的影响，并引起病变症状。即植物在外形上、生理上和生长上的不正常变化，这种变化可以导致植物局部的损伤或全株死亡，造成植物产品品质和产量的损失。 真菌分布广泛，种类繁多，已报导的将近45000多种，是植物病原生物中最主要的一大类群，它所引起的病害占植物病害的80%以上，尽管真菌形态差异很大，但基本结构相似，大多数真菌有营养体和繁殖体之分，营养体是指吸收养分的器官，繁殖体是指从营养体上产生的各种类型的孢子。 真菌产生孢子的机构，无论是有形性的还是无性的，统称为子实体。真菌的孢子分为无性孢子和有性孢子两类。无性孢子有游动孢子、孢囊孢子、分生孢子和厚垣孢子；有性孢子有休眠孢子囊、卵孢子、接合孢子、子囊孢子和担子孢子。真菌孢子的形态特征是鉴定和分类学上的重要依据，其营养体及其变态和菌组织体则是真菌分类的重要参考依据，有的还是重要的鉴别特征和分类依据。 一、实验目的 通过本次实验熟悉真菌的营养体和繁殖体的基本形态，为以后真菌病害的病原物鉴定和真菌分类奠定初步基础。 二、实验原理 霉菌的营养体是分枝的丝状体。其个体比细菌和放线菌大得多，分为基内菌丝和气生菌丝。气生菌丝中又可分化出繁殖丝。不同霉菌的繁殖菌丝可以形成不同的孢子。霉菌菌丝较粗大，细胞易收缩变形，且孢子容易飞散，所以制标本时常用乳酸石炭酸棉蓝染色液。此染色液制成的霉菌标本片的特点是：细胞不变形，具有杀菌防腐作用，且不易干燥，能保持较长时间，溶液本身呈蓝色，有一定染色效果。利用培养在玻璃纸上的霉菌作为观察材料，可以得到清晰、完整、保持自然状态的霉菌形态；也可以直接挑取生长在平板中的霉菌菌体制水浸片观察。