化学发光与酶联免疫检测血清甲胎蛋白的比较
颜多清
442400湖南桂阳县人民医院检验科
摘要目的：化学发光与酶联免疫检测血清甲胎蛋白的比较。方法：化学发光法、酶联免疫法，按仪器操作手册各用配套试剂测定质控品。结果：线性实验：化学发光检测更宽；精密度试验：化学发光的重复性较酶联免役法更好。结论：化学发光法与酶联免役法之间差异无显著性，但化学发光法优点更多。
关键词甲胎蛋白线性范围精密度化学发光酶联免疫
材料和方法
标本来源：随机抽取150份临床送检血清标本，包括正常和异常标本，异常标
本中超过仪器检测范围的结果不予统计。
仪器与试剂：化学发光仪使用Bayer Centaur CP。使用原装配套试剂。酶表仪洗板机使用URANUS AE全自动酶免仪和配套洗板机，严格根据使用说明操作。
方法：按仪器操作规程操作，用配套试剂测定，数值在标定值允许的变异范围
内，接着做线性、相关性、回收率、精密度测试。
结果
线性试验：将AFP测定值在1000～1200ng/ml范围内的5份血清标本混合，反复测定5次，取其均值作为原倍血清测定值即为理论值。将此混合血清做5点倍比稀释，随机排列测定顺序，各反复测定5次，以原倍血清测定值为标准按稀释倍数算得其理论值，求两者相关性并进行回归分析。化学发光回归方程
为：Y=10235X+65594，R=09999。
酶联免疫法回归方程为：Y=06578X+38885，R=09558。化学发光法在2～900ng/ml范围内线性良好，酶联免疫法在5～400ng/ml范围内线性良好，
可见化学发光免疫法的检测范围更宽，更能充分满足临床要求。
相关性试验：用上述二种方法分别对受检血清标本进行AFP定量分析，结果表
明，二种方法差异无显著性（P>005），直线回归方程为：Y=1
0667X-05433，R=09858，提示二种方法相关性良好。
回收试验：取三种浓度的血清(1071ng/ml，1808ng/ml，46
83ng/ml)，分别用不同浓度定值血清混合，配制成浓度分别为211ng/ml，
300ng/ml，773ng/ml，278ng/ml，367ng/ml，84
0ng/ml， 538ng/ml，626ng/ml，1100ng/ml的样本，用化
学发光法与酶联免疫法测得的回收率分别为961～979和953～97 1，平均回收率为977和964。
精密度试验：采取批内和批间差异来确定。用上述二种方法分别对低、中、高值质控品进行精密度试验，每份标本连续测定20次，计算 X，S，求批内CV 值。每日测定1次，连续测定20天，计算X ，S，求批间CV值。结果表明，化学发光免疫法的重复性比酶联免疫法的更好，特别是高值化学发光明显优于酶联免疫法。见表1。
表1两种方法的批内和批间变异
讨论
本文测定AFP检测结果表明，化学发光免疫法与酶联免疫没之间无显著性差异(P>005)，相关性良好(R=09858)，但两种方法相比较，化学发
光免疫法有如下优点。
化学发光免疫法检测结果的稳定性，灵敏度，精密度均优于酶联免疫法。
化学发光免疫法检测的线性范围更宽。
试剂稳定性好，有效期长。由于标记物在自然环境下很稳定，因此用它标记的试剂也非常稳定，而酶联免疫法采用酶作为标记物，通过显色强度反映待测物质的浓度，而影响酶和底物活性的因素有很多，因而试剂的稳定性和灵敏度略显不足。
化学发光免疫法能快速进行免疫反应，20分钟内出结果，较酶联免疫法缩短了不少时间，提高了工作效率。一次性加样头的使用及流动冲洗程序，彻底避免
了交叉污染。
甲胎蛋白被认为是辅助诊断肝癌最好的临床检测方法，化学发光免疫法是公认快速、精确、重复性好且安全无毒的方法。ELISA以快速、简便实效的优势在基层广应用。本文检测AFP结果提示化学发光法和ELISA法之间差异无统计学意义(P>005)，相关性好(r=0998)。本文显示化学发光法线性范围宽精密度等方面明显优于ELISA法，但是在人体正常值参考范围内AFP的检测，ELISA法具有快速、简便、成本低廉的优点，在健康体检、人群普查、良性肝病患者定期检查中起到很好筛查作用。化学发光免疫法的应用实现了免疫检测的自动化，具有灵敏度高，线性范围宽，检测快速，结果稳定，试剂稳定
性好，应用范围广等优点，显示出很好的应用前景。
参考文献
1陶义训.免疫测定进展.上海医学检验杂志,1999,19:65-68.
2吴健民.免疫检验自动化.当代医学,2000,6:28-32.
3齐军,车轶群.使用多肿瘤标志物蛋白质芯片诊断系统检测卵巢肿瘤.中华检验医学杂志,2003,26(6):35.
