水产动物疾病学实验ppt课件

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五、实验内容
• 1.病毒材料收集与保存 • （1）无菌操作收集，病毒不灭活，材料标本不能在太
阳下曝晒，要在阴暗低温处； • （2）用发病早期的鱼（典型出血病），不用已经死亡
的鱼，用水冲洗体表，再用70%的酒精消毒体表，然后 才取出肌肉、内脏，随即放入50%缓冲甘油内保存，写 好标签（地点、寄主、日期），野外收集最好用冰壶 带回，保存在-20℃或5℃冰箱内。
器官色素变化等。
• 三、显微检查：
• 病灶部位和可疑部位取样制片在显微镜、介剖镜下 检查。
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五：病原体检查
• 1病原体分离与培养： • 2pcR仪器检测病原体： • 3酶联体检测病原体：
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六 疾病诊断
• １：疾病诊断是一个复杂的．综合的分 析判断过程，它是根据环境条件，发病 对象，发病季节，发病症状与表现，病 原体确定等因素做出的综合分析判断结 果。
水产动物疾病学实验
• 实验目的与任务： • 本实验课程的教学旨在学生掌握水产动物疾病学的基
本原理和基本技术，主要包括水产物疾病学的典型症 状和诊断的一般方法。在教学基本理论和方法的基础 上动，加强与生产实际相联系，引进一些最新技术扩 大学生的知识视野。注重培养学生分析问题和解决问 题的能力以及严格的科学作风，使学生具备从事水产 动物疾病学研究和为水产业服务的过硬本领。 • 本实验的任务是培养学生掌握水产动物疾病学中病毒、 细菌、真菌、藻类、寄生虫和非寄生性疾病的典型症 状及区别，疾病诊断的方法与步骤，疾病防治的方法。
• １基本情况 • ２体表检查 • ３体内检查 • ４根据检查情况进行初步诊断 • ５病原体确定进行确诊。
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四、实验方法
• 一、基本情况调查：
• 水质情况、吃食情况、用药情况、发病情况等。 • 二、肉眼检查；
• （1）体表：大型寄生虫、发炎、充血、腐烂、体
色变化等； • （2）体内器官：大型寄生虫、发炎、充血、腐烂、
• 3、按实验指导书上所述方法，在完成相关的实验操作后，通过观察、分 析能认真仔细地独立撰写实验报告；并通过理论与实践知识的累积，不 断提高自子解决问题的能力和实际动手操作能力。
• 4.要求课前，弄懂进行预习实验目的和原理，熟悉内容和步骤，写出相 应的预习报告。
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实验项目
• 实验一 疾病常规检查方法与诊断 • 实验二 病毒疫苗土法制备安全及效率试验 • 实验三 虾蟹类病毒性疾病的观察 • 实验四 细菌性鱼病活体或病变标本的观察（一） • 实验五 细菌性鱼病活体或病变标本的观察（二） • 实验六 虾蟹类细菌性疾病的观察（一） • 实验七 虾蟹类细菌性疾病的观察（二） • 实验八 真菌性、藻类性疾病及病原体的观察 • 实验九 纤毛虫、鞭毛虫类的观察 • 实验十 孢子虫、吸虫类的观察 • 实验十一 绦虫、线虫类的观察 • 实验十二 甲壳动物病病原体的观察
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实验一 疾病常规检查方法与诊断
• 一、实验目的 • 通过对本实验课的学习，了解常规的肉
眼检查和显微镜检查疾病的方法，对检 查结果进行分析、比较，进行疾病诊断 • 二、实验材料、仪器 • 活的或刚死的病鱼，显微镜、介剖镜、 介剖盘、介剖剪、介剖刀、镊子、吸管、 载玻片、盖玻片等 •。
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三;疾病检查与诊断程序
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水产动物疾病学实验
• 实验教学基本要求：
• 1、运用所学的《水产动物疾病学》等理论课中的概念和理论知识来指 导实验，并通过实验获得相关的感性知识，从而更进一步地巩固所学的 理论课知识。
• 2、熟练地掌握水产动物疾病学实验的基本操作与基本技能，通过仔细观 察和相互比较来熟悉水产动物常见疾病的主要症状、危害程度及流行情 况；掌握水产动物疾病诊断的常规步骤与方法；了解主要疾病病原体的 生物学与生态学特征及生活史等；了解水产常见药物的药理与使用方法； 熟悉水产动物疾病大类的预防与治疗方法。
锅灭活72小时。
• 化学灭活：以福尔马林作为化学灭活剂。灭活前先确定福尔马林 对该病原菌的安全灭活浓度，确定方法为：取 7 支灭菌试管，分 别 5ml 加入预先制备病原菌菌液，其中 6 支装有菌液的试管分 别依次加入一定量的福尔马林，使福尔马林的终浓度分别为 0.1% 、 0.2% 、 0.4% 、0.6% 、0.8% 、1.0% ，另 1 支试管不 加入福尔马林作为对照；于 4 ℃ 下放置 24h 后，于每支试管中 分别取 0.2ml 菌液于 2216E 琼脂平板上涂布， 28～30 ℃ 下培 养 48h ，检测各试管内细菌的存活情况，只有没有细菌生长的对 应福尔马林浓度才是该病原菌的灭活安全浓度。向第 1 步中制备 的 1% 菌悬液内添加福尔马林，使福尔马林的最终浓度达到安全 灭活浓度以上，于 4 ℃ 下放置 24h ，制备灭活菌液。
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• 三、实验材料 • 1.患草鱼三大病（赤皮、肠炎、烂鳃病）的草
鱼，最好是三大病并发的濒死或刚死不久的草 鱼； • 2.患典型出血病的濒死或刚死不久的草鱼。 • 四、实验药品 • 1.甲醛、生理盐水、70%的酒精； • 2.青霉素、链霉素、生理盐水、70%的酒精、 50%缓冲甘油、PBS液、Earle培养液。
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2.活苗的制备
• 无菌操作取出病灶（肌肉、内脏组织）， 称重后剪碎，加10倍无菌生理盐水，匀 浆，3000～3500转/分低温离心30分钟， 取上清液，加青霉素1000IU/mL，链霉素 1000μ g/mL，混匀，再在4℃下过夜除菌 后即为病毒悬液。
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2.灭活
– 加入福尔马林，使成0.1%浓度，摇匀后，置于32℃恒温水浴
• 1.了解土法疫苗免疫的原理，掌握其制备方法和注射
方法（或了解细菌性灭活疫苗制备的基本过程）。 • 2.掌握草鱼出血性病毒疫苗制备（或组织浆灭活疫苗
制备）的基本过程。 • 二、仪器设备 • 1.解剖工具（剪刀、镊子）、台秤（天平）、组织打
浆机或匀浆机（或研钵）、水浴锅、温度计、注射器、 量筒、三角锥瓶、漏斗、水壶； • 2.剪刀、天平、蔡氏过滤器、塑料微型滤器、冰箱、 液氮罐、离心机。
• ２：疾病诊断是确定引起疾病发生的主 要原因，疾病过程与发病机理。
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疾病诊断
• ３：疾病诊断方法 • （１）根据症状诊断 • （２）根据病原体诊断 • （３）综合诊断
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作业一
• １疾病检查的一般程序？ • ２疾病诊断的方法？正确诊断的意义？
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实验二：病毒疫苗土法制备
一、实验目的