甘草酸的粗提工艺研究[1]

甘草中甘草酸的提取工艺研究王海峰;邱芳萍【摘要】采用氨性醇提取法,经粉碎、抽提、过滤等工艺过程从甘草中提取甘草酸,并利用响应面试验设计考察提取温度、提取时间、氨水浓度、乙醇浓度4因素对甘草酸提取率的影响.结果表明,甘草酸的最佳提取条件是:提取温度为40.28 ℃,提取时间为5.84 h,氨水浓度为0.41%,乙醇浓度为16.78%.最优条件下粗甘草酸的提取率达到66.40%.【期刊名称】《长春工业大学学报（自然科学版）》【年(卷),期】2010(031)001【总页数】4页(P66-69)【关键词】甘草;甘草酸;提取【作者】王海峰;邱芳萍【作者单位】长春工业大学,化学与生命科学学院,吉林,长春,130012;长春工业大学,化学与生命科学学院,吉林,长春,130012【正文语种】中文【中图分类】R284.20 引言甘草是临床最常应用的药品。

生甘草能清热解毒,润肺止咳,调和诸药性;炙甘草能补脾益气,临床用量特大,出口量大。

除药用之外,食品上也大量用甘草做糕点添加剂,它的甜度是蔗糖的百倍。

甘草的主要有效成分为甘草酸(glycyrrhizic acid)或甘草甜素(glycyrrhizin)及甘草次酸(glycyrrhetinic acid)等三萜类化合物、甘草黄酮类化合物以及甘草多糖等[1-2]。

文献[3]研究表明,甘草酸及甘草次酸具有解毒、消炎、镇痛、抗肿瘤的作用,还用于防治病毒性肝炎、癌症以及艾滋病等。

近年来,甘草药材由于遭到过度采挖,资源急剧减少,保护甘草资源已迫在眉睫。

国内多采用水回流法,该法存在用水量大、耗时长、甘草酸收率低、杂质多等弊端,也不同程度地造成资源的浪费。

为此,文中对甘草酸的氨性醇提法进行了优化,以期对实验研究和生产实践有所帮助[4]。

1 实验材料1.1 材料与试剂甘草,河北安国中药材市场。

无水乙醇、氨水等,均为分析纯。

1.2 仪器与设备DK-98-I电子恒温水浴锅,天津泰斯特仪器有限公司;T687鼓风干燥箱,天津泰斯特仪器有限公司;万能粉碎机,常州品正干燥设备有限公司。

甘草中甘草酸的提取工艺优化研究甘草（GlycyrrhizauralensisFisch）是中草药中重要的一种植物，其中含有大量的甘草酸，这是它的一种特殊的有效成分，具有多种生物活性，而其中的甘草酸也被广泛应用于药物、食品、化妆品等领域。

由于甘草酸的抗氧化、抗炎、抗菌等作用，但其从甘草中提取的高效工艺迄今未见报道。

甘草酸的提取是植物中以连续提取法、提取工艺的优化为主，以及由此引起的生物活性化学研究。

第一步是选择合适的溶剂，一般使用环氧乙烷、丙酮、乙醇等作为溶剂，然后通过溶剂提取法从甘草中提取出甘草酸，利用溶剂蒸发法进行纯化，以提高提取率和产品纯度。

其次，可以通过多种反应条件优化工艺，如溶剂浓度、温度、PH 值、提取时间、提取次数等条件来优化提取工艺，使其提取效率更高，提高成品的质量。

最后，可以利用高效液相色谱（HPLC）技术对提取的甘草酸进行分析测定，以提高分析的准确性和灵敏度。

此外，对提取出的甘草酸进行化学研究也是十分必要的。

首先，可以通过气相色谱法（GC）和核磁共振（NMR）研究甘草酸的结构。

其次，可以通过抗氧化实验、抗炎实验和抗菌实验来研究甘草酸的活性物质，最终确定其具有特异的抗氧化、抗炎和抗菌作用。

最后，可以通过众多研究的结果综合分析，形成一种有效高效的甘草酸提取工艺，探讨甘草酸的生物活性，为临床应用提供更有效的可能。

综上所述，甘草酸是一种重要的活性成分，具有多种生物活性，可以利用提取工艺的优化、多种反应条件优化以及化学研究等方法，从甘草中提取高纯度和高效率的甘草酸，为临床应用提供有效的可能。

另外，在提取过程中需要进行抗氧化、抗炎、抗菌等实验，以确定提取的甘草酸的生物活性。

因此，甘草中甘草酸的提取工艺优化研究具有重要的意义，可以用于临床应用，为植物药物的开发及其他领域的应用提供基础性的研究。

实验七甘草中甘草酸的提取分离
【实验目的】
1、学会运用煎煮法、渗漉法、回流法等方法从甘草中提取、分离干甘草酸
【实验原理】
甘草酸以钾盐的形式存在于植物体内，易溶于热水，因此可用水提取甘草酸钾盐，水提液加硫酸酸化后生成游离甘草酸，因其在冷水中的溶解度较小而沉淀析出。

也可以用乙醇渗漉后再酸化得到甘草总皂苷沉淀，将沉淀溶解于盐酸的甲醇溶液中，用三氯甲烷除去黄酮类化合物，即可得甘草皂苷。

【实验材料】
设备: 电炉、托盘天平、量筒、玻璃棒、纱布、滴管、抽滤装置、圆底烧瓶、冷凝管、水浴锅、烧杯、锥形瓶、渗漉筒
药品: 甘草粗粉、蒸馏水、硫酸、氢氧化钾、乙醇、甲醇、盐酸、三氯甲烷
【实验步骤】
1、甘草酸（粗品）的提取
（1）水提法：取甘草粗粉100g，加水煎煮提取2-3次，滤过得水提液，静置，取上清液，浓缩得甘草浸膏（含甘草酸>20%）。

浸膏加3倍量水溶解，加硫酸酸化，放置，滤过得甘草酸粗品。

（2）醇提法：取甘草粗粉100g，加10%乙醇渗漉，收集渗漉液酸化，放置过夜，滤过得沉淀（甘草总皂苷）。

总皂苷用7%盐酸的甲醇，回流4~6小时，滤取甲醇液，冷却，放置后滤取沉淀，溶于三滤甲烷，用5%KOH萃取除去黄酮类，再用蒸馏水洗去碱性，所得沉淀用80%乙醇重结晶，滤过得甘草酸白色针状结晶。

【注意事项】
1、提取甘草酸粗品时，水提液酸化后析出的沉淀，杂质较多难以过滤，故可倾出上清液再抽滤。

【实验装置图】【实验结论】【实验注意】。

甘草酸的纯化工艺研究分析甘草酸是一种在中药、食品、化妆品、医学和农业等领域广泛应用的天然产物，具有许多生物学和药理学活性。

它是从甘草根中提取的一种黄色染料，由于它的广泛应用价值，纯化甘草酸的工艺研究显得非常重要。

本文主要探讨甘草酸的纯化工艺研究分析。

1. 甘草酸的来源和结构特征甘草酸分别从甘草根、芦荟和华南食品中提取。

它的化学结构是一种呈淡黄色结晶的环烯酮酸，通式为C30H46O4。

甘草酸是一种多环有机酸，含有一种整体结构相对稳定的二环结构，较长的侧链具有极性，结构中含有苯骨架，对传递主要的生物学活性至关重要。

2. 甘草酸的纯化技术甘草酸的纯化主要包括前处理、萃取、分离和结晶四个部分。

2.1 前处理前处理步骤包括样品制备和样品预处理。

检测前，需要将药材制成适合提取的样品，通常的处理方式是将药材粉末用80目筛过滤并干燥至恒定重。

预处理对于获得准确和可重复的结果非常重要。

2.2 萃取甘草酸的萃取主要有水萃取、醇萃取和有机溶剂萃取。

其中水萃取为常用方法，它可以去除不需要的杂质和有机物，充分发挥甘草酸的萃取率，而且操作简单，易于控制。

2.3 分离萃取后的混合物需要进行分离，以分离甘草酸和其他杂质。

常用的分离技术有重力滤、离心、吸附剂、分子筛等方法，其中离心和重力过滤是最基本的技术。

2.4 结晶纯化的最后一步是甘草酸结晶，通过加入适当的沉淀剂进行结晶，然后通过提取结晶物进行干燥、筛分和质量控制。

结晶是一个极其重要的步骤，它决定了产物的纯度和产量，保证了提取物中细胞色素的活性和稳定性。

3. 纯化甘草酸的影响因素3.1 药材质量甘草酸的来源主要是甘草根，不同产地、不同自治区、不同产季的药材所获得的甘草酸含量会有所不同，这也导致了不同部位中药提取物的质量差异。

3.2 溶剂种类和比例甘草酸的提取和分离主要是依靠特定的溶剂。

溶剂的选择和调配比例对甘草酸的提取效果有着直接的影响。

正确选择合适的溶剂和比例可以提高甘草酸的提取率，保证提取物中甘草酸的纯度和产量。

甘草中甘草酸的提取工艺研究作者：张灵文孙鑫磊来源：《科学与财富》2016年第03期摘要：本实验以甘草酸为指标对甘草提取工艺进行研究。

甘草酸最佳提取工艺为加入10倍量40%乙醇，超声提取25分钟，连续提取4次。

本工艺稳定、可行、收率高。

关键词：甘草；提取；工艺甘草别名为国老、甜草、乌拉尔甘草、甜根子。

甘草具有清热解毒、祛痰止咳、脘腹等功效。

甘草含有多种化学成分，主要成分有甘草酸、甘草甙、甘草甜素、甘草次酸、甘草甙、新异甘草甙、甘草素、异甘草素、异甘草甙、新甘草甙、甘草醇、异甘草醇[1-2]。

大量的研究表明，甘草酸是甘草中最重要的生理活性物质之一。

甘草具有抗溃疡、抗氧化、抗病毒、抗癌、抗炎、解痉、保肝、祛痰和增强记忆力等多种药理活性[3-5]。

本实验以甘草酸为指标对甘草提取工艺进行研究。

1 仪器与试药上海和泰仪器有限公司Ultra-pure water 超纯水器water-20n（中科仪（北京）仪器有限公司）；山东鲁创LC-3000液相色谱仪（梯度）（山东鲁创分析仪器有限公司）；XP204分析天平（北京联博永通科技有限公司）；KQ250DE超声波清洗器超声波检测仪器（烟台鑫康商贸有限公司）；PHS-550智能型台式酸度计（杭州陆恒生物科技有限公司）；WP-UP-Ⅲ-20精密型实验室专用超纯水机（四川沃特尔水处理设备有限公司）；美析V-1200可见分光光度计（美析（中国）仪器有限公司）。

甘草酸对照品（中国药品生物制品检定所提供）。

乙腈（山东丰仓化工有限公司）；磷酸（济南圣丰工贸有限公司）；甲醇（山东丰仓化工有限公司）；乙醇（济南圣丰工贸有限公司）。

2 方法与结果2.1 单因素考察2.2.1 提取次数。

按处方称取药材，粉碎为20目，至于圆底烧瓶内，分别提取四次，第一次加10倍40%乙醇，超声提取25分钟，过滤，合并滤液，减压浓缩；第二次加10倍40%乙醇，超声提取25分钟，连续提取两次，过滤，合并滤液，减压浓缩；第三次加10倍40%乙醇，超声提取25分钟，连续提取三次，过滤，合并滤液，减压浓缩。

大孔吸附树脂纯化甘草提取物中甘草酸的研究目的研究光果甘草中甘草酸的最佳大孔树脂纯化工艺。

方法以大孔吸附树脂纯化物中甘草酸的含量为考察指标，从24种大孔吸附树脂中筛选出纯化甘草粗提物中甘草酸的最佳大孔吸附树脂，并确定纯化甘草酸的最佳工艺条件。

结果AB-8大孔吸附树脂纯化甘草酸效果最佳，最佳工艺条件：上柱液浓度为0.11mg/mL，径高比为1：8，上样体积为所用树脂2BV，上样速度与洗脱速度均为2BV/h，用30%、50%的乙醇除杂，用80%乙醇富集甘草酸。

纯化后产品纯度为60.74%，收率为3.29%，转移率为76.33%。

结论采用AB-8大孔吸附树脂可较好地纯化甘草酸。

标签：甘草；甘草酸；AB-8大孔吸附树脂药用甘草为豆科植物甘草（Glycyrrhiza uralensis Fish.），胀果甘草（Glycyrrhiza inflata Batalin）或光果甘草（Glycyrrhiza glabra L.）的干燥根及根茎[1]。

甘草为药食两用植物，甘草酸又称甘草皂苷，是甘草的主要活性成分之一，具有促肾上腺皮质激素作用，能减少尿量及钠排出，增加钾排出，血钠上升，血钙降低。

可用于解毒，抗炎[2]，镇咳，抗肿瘤，抗溃疡，抗菌等[3]。

近年来的药理研究发现，甘草酸类药物对防治病毒性肝炎、高血脂症和癌症等疾病有一定的疗效[3-4]，对艾滋病毒也有一定的抑制增殖作用[5]。

长期以来，我国是甘草主要出口国，但产品多为原草或浸膏等初加工产品，缺乏深加工。

研究有工业应用价值的甘草酸分离与精制技术具有重要意义。

本实验将考察24种大孔树脂，选择出最优树脂进行甘草酸的纯化实验，并确定纯化的最佳条件。

制定出稳定可靠，成本低廉的纯化工艺，以期对工业化生产有所帮助。

1 材料LC-2010A高效液相色谱仪（日本岛津公司），FA10004N型万分之一分析天平（上海精密科学仪器有限公司），树脂（河北沧州宝恩吸附材料有限公司），甲醇色谱纯（天津市康科德科技有限公司），冰醋酸分析纯（天津市康科德科技有限公司），醋酸铵分析纯（天津市北方天医化学试剂场），光果甘草（购于河北安国药市长安中药材有限公司，经李天翔教授（天津中医药大学）鉴定），剪段约为3cm，砸至酥松，50℃干燥备用。

甘草酸提取方法总结1、甘草酸一般以钾盐或钙盐形式存在于甘草中，其盐易溶于水。

同时，甘草酸为有机弱酸，酸性条件下游离。

这是我们采用水酸提取法从甘草中提取甘草酸的理论依据。

操作方法：将甘草进行适当粉碎，取lOOg甘草粗粉置于1000mL 烧杯中，加500mL水，加热煮沸10min，然后置于振荡器上，于60℃下恒温振荡2h。

过滤，将滤渣重复上述操作，至滤液于252nm无明显吸收为止。

合并滤液，蒸发浓缩至200mL左右，然后边搅拌边滴加浓H2SO4。

至不再析出沉淀；陈化2h，离心分离，将沉淀物置于100℃下干燥lh，得到棕色块状物8．9g，即为甘草酸粗品，粉碎备用。

2、甘草经室温干燥后磨成粗末以适量水浸泡20h，过滤,，滤渣再用适量水浸泡20h，过滤。

合并滤液, 在搅拌下缓缓滴加3.5-4mol/L硫酸至溶液的pH为1.9，放置冰箱6h以上，倾去上清液。

沉淀以适量甲醇回流提取两次，合并提取液，滴加氨水至ph7.5-8.0，减压蒸干，得糖浆状物。

趁热加入冰醋酸使溶解，室温静置，投入甘草酸单铵盐晶种。

翌日吸滤，以少量冷冰醋酸洗涤，减压干燥，称重。

3、以下实验提取溶剂组成经优化均为60%乙醇+1%氨水+水①、热回流提取法：称取相应粒度的甘草10克，第1次加入溶剂100ml于约80℃温度下进行回流提取1.5小时，过滤；提取后的残渣加入溶剂80ml进行第二次回流提取1.5小时，过滤；再次将残渣加入溶剂80ml进行第三次回流提取1.5小时，过滤。

②、索氏提取法：称取相应粒度的甘草10克，加入溶剂200ml在约80℃下提取5小时或10小时，过滤。

③、室温提取法：称取相应粒度的甘草3克，加入溶剂30ml，间断2小时手摇，室温(约15℃)下提取相应时间，过滤。

④、微波辅助提取法：称取相应粒度的甘草10克，加入溶剂100ml，在经技术改造后的微波辅助提取设备内约80℃温度下提取相应时间，过滤。

连续3次提取时，第1 次提取4min，过滤，残渣再重复提取2次。

甘草中甘草酸和甘草苷的提取工艺研究魏宁;郎伟君【摘要】为优选甘草的最佳提取工艺条件，以甘草酸和甘草苷的提取率为指标，采用正交设计法对影响提取的因素进行优化．结果表明，最佳提取溶剂为乙醇，影响浸出的主要因素为乙醇体积分数、溶媒用量、提取时间和提取次数，最佳提取工艺为6倍量55％乙醇，加热回流提取3次，每次1．5 h．该工艺合理，稳定可行，适合生产．%The orthogonal design method was used to optimize the best extraction technology conditions of glycyrrhiza uralensis with extraction rate of glycyrrhizic acid and liquorice glyco-sides as index.Results indicated that the best extraction solvent was ethanol, and the main factors influencing the leaching were ethanol concentration, solvent dosage, extraction time and extraction times.In addition, the best extraction process was 6 times of the volume of 55%ethanol, heating reflux extraction for 3 times and each time for 1.5 h.This process was reasonable, stable, feasible and suitable for production.【期刊名称】《哈尔滨商业大学学报（自然科学版）》【年(卷),期】2015(000)002【总页数】3页(P143-145)【关键词】甘草酸;甘草苷;正交试验;提取工艺【作者】魏宁;郎伟君【作者单位】哈尔滨商业大学药学院，哈尔滨150076;哈尔滨商业大学药学院，哈尔滨150076; 哈尔滨乐泰药业有限公司，哈尔滨150025【正文语种】中文【中图分类】R284甘草为豆科植物甘草、胀果甘草、光果甘草的根及根茎，具有补脾益气、清热解毒、祛痰止咳、缓急止痛、调和诸药的功能[1].甘草的主要化学成分为三萜皂苷类和黄酮类，其中甘草酸、甘草苷分别是其重要的单体活性成分，具有很强的药理活性[2].本文以甘草酸和甘草苷的提取率为指标，对提取溶剂的选择和最佳方法进行考察，旨在为甘草用于化妆品并实现工业化生产提供参考.高效液相色谱仪(日本岛津公司)：SPD-M20A型二极管阵列检测器、LC-10ATvP型泵、DGU-20A3型脱气器、CBM-20A型系统控制器、SIL-20A型自动进样器、LC solution色谱工作站、Diamonsil-C18色谱柱(5 μm,150 mm×4.6 mm)(迪马公司).甘草药材(哈药集团世一堂制药厂，经哈尔滨商业大学药学院张德连副教授鉴定为真品)；甘草酸单铵盐对照品(批号：111089-201301)、甘草苷对照品(批号：111610-201301)均购自中国药品生物制品鉴定所；甲醇、乙腈、冰乙酸为色谱纯，水为双蒸水，无水乙醇为分析纯.2.1 甘草酸和甘草苷的质量浓度测定2.1.1 色谱条件1)甘草酸色谱柱：Diamonsil-C18柱(5 μm,150 mm×4.6 mm)；流动相：甲醇-0.2 mol/L 醋酸铵溶液-冰醋酸(67∶33∶1)；检测波长：250 nm；流速：1 mL/min，进样量：10 μL.2)甘草苷色谱柱：Diamonsil-C18柱(5 μm,150 mm×4.6 mm)；流动相：乙腈-0.5%冰醋酸(1∶4)；检测波长：276 nm；流速：1.0 mL/min；进样量：20 μL.2.1.2 对照品溶液的制备1)甘草酸精密称取甘草酸单铵盐对照品5 mg，置于5mL量瓶中，用流动相溶解并稀释至刻度，摇匀即得.2)甘草苷精密称取甘草苷对照品1.25 mg，置于5 mL量瓶中，加甲醇制成每1 mL含250 μg的溶液.2.1.3 供试品溶液的制备1)甘草酸精密量取各提取液1 mL，置50 mL量瓶中，加流动相约20 mL，超声处理30 min，加流动相稀释至刻度，精密量取续滤液10 mL，置25 mL量瓶中，加流动相稀释至刻度，取续滤液，测定并计算；2)甘草苷精密量取各提取液1 mL，置具塞锥形瓶中，精密加入70%乙醇溶液10 mL，超声处理30 min，补足减失的重量，精密量取续滤液1 mL，置50 mL量瓶中，用20%乙腈稀释至刻度，取续滤液，测定并计算.2.1.4 线性关系考察1)甘草酸精密吸取对照品溶液0.25、0.50、0.75、1.00、1.50 mL，分别置于5 mL容量瓶中，流动相稀释，摇匀.分别精密吸取10 μL注入液相色谱仪进行分析.以甘草酸单铵盐对照品的进样质量浓度(C)对其峰面积积分值(A)进行线性回归，得回归方程：A=3811.1C+683.15(r=0.999 8)，结果表明，甘草酸单铵盐对照品的进样质量浓度在50～300 μg/mL的范围内与其峰面积积分值呈良好线性关系.2)甘草苷精密吸取对照品溶液0.25、0.50、0.75、1.00、1.50 mL，分别置于5 mL容量瓶中，甲醇稀释，摇匀.分别精密吸取20 μL注入液相色谱仪进行分析.以甘草苷对照品的进样质量浓度(C)对其峰面积积分值(A)进行线性回归，得回归方程：A=19 003C+10 174(r=0.999 7)，结果表明，甘草苷对照品的进样质量浓度在6.25～37.5 μg/mL的范围内与其峰面积积分值呈良好线性关系.2.2 提取工艺研究2.2.1 不同提取溶剂的选择根据文献报道[3]和2010年版《中国药典》(一部)，结合实际生产的需要，对不同提取溶剂进行筛选.选取水和65%的乙醇作为提取溶剂，以甘草酸和甘草苷的提取率为评价指标进行比较，提取方法： 1)水煎煮法：甘草粗粉50 g，用20倍量水煎煮3次，每次1.5 h，合并煎液，离心，倾取上清液，浓缩至50 mL，测定； 2)乙醇回流提取法：甘草粗粉50 g，用6倍量65%的乙醇回流提取3次，每次1.5 h，合并提取液，回收乙醇至无醇味，浓缩至50 mL，测定.不同提取溶剂下甘草酸和甘草苷的提取率见表1.注由表1可知，水煎煮法的总提取物得率比65%乙醇回流提取法的总提取物得率高一些，但65%乙醇回流提取法的甘草苷和甘草酸的提取率都比水煎煮法的高很多，综合结果优选65%的乙醇作为提取溶剂.2.2.2 优化乙醇回流提取工艺选用正交试验，优化乙醇回流提取条件.根据预实验选取乙醇体积分数(A)、溶媒用量(B)、提取时间(C)、提取次数(D)4个因素，每个因素选3个水平，采用L9(34)正交设计，以甘草酸和甘草苷的提取率综合值为指标进行考察，综合值=(甘草酸提取率+甘草苷提取率)/2.因素水平见表2；正交实验结果见表3；方差分析结果见表4.由表3直观分析可知，各因素对提取效果的影响依次为D>C>B>A，优化水平是A2B3C3D3；由表4方差分析可知，提取次数(D)对甘草酸、甘草苷提取效果的影响有显著意义(P<0.05).以总提取物得率为考察指标时，直观分析表明各因素对提取效果的影响依次为D>C>B>A，优化水平是A2B3C3D3；方差分析表明，B、C、D三种因素对总提取物得率的影响均有显著意义(P<0.05)；乙醇体积分数(A)对甘草酸、甘草苷的提取率，总提取物得率的影响均无显著意义.为降低大批量生产成本，决定选用55%乙醇(A1)，则最佳工艺为A1B3C3D3，即6倍量55%乙醇，回流提取3次，每次1.5 h.该结果与正交试验中综合值最高者的搭配A1B3C3D3一致.2.2.3 验证试验称取甘草50 g，按最佳工艺A1B3C3D3进行验证试验，测得甘草酸、甘草苷提取率分别为73.41%、74.18%，接近正交试验方案中的最高值，优化条件可行.有文献报道[4]，甘草酸用氨水提取效果好.甘草苷易溶于有机溶剂，多用乙醇提取.通过查阅文献和预实验，并从甘草用于化妆品工业化生产和安全角度考虑，本试验综合优选乙醇作为提取溶剂，确定乙醇体积分数、溶媒用量、提取时间和提取次数为考察因素，通过验证放大实验表明，正交实验优选确定的最佳工艺水平是科学、可行的，有利于实际生产降低能源、节约时间，故确定甘草乙醇回流提取的最佳工艺为A1B3C3D3，即6倍量55%乙醇，回流提取3次，每次1.5 h.【相关文献】[1] 国家药典委员会.中国药典(一部)[M].北京: 中国医药科技出版社, 2010. 80-81.[2] 张明发, 沈雅琴, 张艳霞.甘草及其有效成分的皮肤药理和临床应用[J].药物评价研究, 2013, 36(2): 146-156.[3] 刘育辰,王文全,郭洪祝.甘草有效成分的提取纯化方法研究进展[J].中成药, 2010, 32(11): 1953-1957.[4] 杜文彬,张洪.甘草中甘草酸的提取工艺研究[J].安徽农业科技, 2008, 36(25): 10935-10946.。

宁夏乌拉尔甘草中甘草酸的提取工艺的研究陈兵兵;解鹤;马有良;陈琼;康建【摘要】研究了宁夏盐池乌拉尔甘草中甘草酸的提取方法,通过醇提法对乙醇浓度、提取时间、固液比和温度等进行了单因素实验及正交实验的研究;发现甘草酸的最佳提取工艺条件为乙醇浓度50％,固液比1:50、提取时间4h、温度50℃,在此实验条件下甘草中甘草酸提取量为121.0073 mg/g,提取率为86.58％.通过对提取工艺稳定性考察发现,甘草中甘草酸的实际提取总量在117.8982～122.8362mg/g之间,工艺稳定.【期刊名称】《广州化工》【年(卷),期】2018(046)019【总页数】3页(P53-55)【关键词】乌拉尔甘草;甘草酸;提取【作者】陈兵兵;解鹤;马有良;陈琼;康建【作者单位】宁夏理工学院文理学院,宁夏石嘴山753000;宁夏理工学院文理学院,宁夏石嘴山753000;宁夏理工学院文理学院,宁夏石嘴山753000;宁夏理工学院文理学院,宁夏石嘴山753000;宁夏理工学院文理学院,宁夏石嘴山753000【正文语种】中文【中图分类】O69甘草(Glycyrrhiza)是双子叶豆科甘草属植物，生长在我国半荒漠地区，具有清热去毒、滋润肺部、止住痛咳等药性，而且在补脾益气，增强人体的免疫力方面具有很强的作用。

甘草中存在多种药理活性成分，甘草酸和甘草次酸是其重要组成之一[1]，他具有解毒、消炎、镇痛、抗肿瘤的作用[2-5]。

为此研究甘草中甘草酸的提取工艺具有重要的意义。

1 实验1.1 材料乌拉尔甘草采购于宁夏盐池，经晒烘干、粉碎备用。

1.2 仪器及药品722S紫外分光光度计，上海佑科仪器仪表有限公司；FA2004N电子天平，上海民桥精密科学仪器有限公司；101-3型电鼓风干燥箱，天津市通利信达科技有限公司；SDF-101Z集热式恒温加热磁力搅拌器，山东菏泽祥龙电子科技有限公司；HB-Ⅲ型循环水式真空泵，陕西太康生物科技有限公司；甘草酸标准品，国药集团化学试剂有限公司产品。

甘草有效成分（甘草酸，甘草次酸，甘草苷）的提取一、甘草酸的提取：试剂：甘草粗粉，浓H2SO4，95%乙醇，80%乙醇，浓氨水，冰醋酸。

取甘草粗粉40g,加水煮沸2次(15倍,1.25h;12倍，1h),脱脂棉过滤，合并滤液，浓缩，冷却，搅拌下加入浓硫酸至不再析出甘草酸粘性沉淀为止（约PH=1）。

放置，倾出上清液，棕色粘性沉淀用水洗涤数次，60℃以下干燥，粉碎，即得甘草酸粗品，称重。

将甘草酸粗品称重后加3.5—4倍量95%乙醇浸泡0.5—1h，抽滤，滤渣加3倍量80%乙醇回流1—2h，滤液冷却后加浓氨水（边加边搅拌）调至弱碱性（PH=8），减压回收乙醇至糖浆状，趁热加入等体积冰醋酸浸泡洗涤，放冷，析出结晶，过滤，即得甘草酸单铵盐粗品。

称重后，用70—80%乙醇重结晶，即得甘草酸单铵盐纯品，称重，得率。

二、甘草次酸的提取：试剂：5%H2SO4，氯仿，乙醇。

取甘草酸单铵盐，加5%H2SO4，加热10h,抽滤，水洗至中性，干燥，即得白色甘草次酸粗品，加热氯仿溶解，趁热过滤，所得滤液放冷，通过AL2O3柱，用氯仿洗脱，得甘草次酸粗品，加乙醇重结晶，得甘草次酸结晶。

三、甘草苷的提取：试剂：70％乙醇，甲醇。

取干燥药材粗粉约lOg，精密称定，加10倍量70％乙醇，回流提取2次，每次3h回流提取，纱布过滤，将提取液倒入已恒重的蒸发皿中，水浴浓缩至干，再减压干燥至恒重，得浸膏。

精密称取甘草浸膏量的l／20置于25mL量瓶中，加甲醇适量，超声处理30min，冷至室温，加甲醇稀释至刻度，摇匀，用045um的微孔滤膜过滤，即制得供试品溶液。

四、药典同时提取甘草酸和甘草苷：试剂：70％乙醇，取本品粉末（过三号筛）0.2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入70%乙醇100ml，密塞，称定重量，超声处理（功率250W，频率40kHz）30分钟，取出，放冷，再称定重量，用70%乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

甘草酸是甘草中最主要的活性成分。

甘草酸及其系列产品，对肉瘤、癌细胞生长有抑制作用，对艾滋病的抑制率更高达90％，有较强的增加人体免疫功能作用，而且也是很好的食品添加剂和香料基料。

近年来，在医药、化工、食品、日用化工等行业也得到了广泛的应用。

甘草酸传统提取工艺：甘草酸传统提取工艺，将甘草提取液过滤除杂，再减压浓缩到一定的体积，加浓盐酸调PH2～3，静置12h后离心，沉淀水洗3次，真空冷冻干燥得到甘草酸粗品。

甘草→浸提→过滤→浓缩→酸沉→离心、水洗→真空冷冻干燥→甘草酸粗品传统工艺的劣势：甘草除了具有药用价值有效成分外，主要还有大分子蛋白、植物纤维、植物胶体、多糖、蛋白质、酶、鞣质及无机盐等无效杂质，传统过滤工艺精度低，使成品杂质含量高，影响产品质量，并且降低了后续工艺的效率；提取液体积大，传统热浓缩耗能大、成本高。

3、工艺周期长，传统浓缩设备结构趋于复杂，给操作和管理带来较高要求；4、传统工艺，人工劳动强大，增加了大量的人工成本；“和诚过滤”公司充分运用膜分离技术的优势，成功的将膜分离技术结合传统提取、分离、浓缩工艺，对传统工艺进行技术改造和革新，以“清洁生产、革新过滤方法”为核心，致力于为企业降低综合生产成本，提高产品质量。

甘草酸膜过滤浓缩提取工艺：甘草→浸提→膜过滤→膜浓缩→酸沉→离心、水洗→真空冷冻干燥→甘草酸粗品甘草酸膜过滤浓缩提取工艺优势：1.膜过滤精度高，很好地截留有效成分，同时除去大分子杂质，从而提高了浸膏中有效成分的含量和药效，并且提高了后续工艺的效率；2.膜浓缩工艺连贯，减小热浓缩体积，减少了罐体等设备投入，缩短了热浓缩时间，节约了蒸汽消耗，提高了生产效率，提高了产品收率；3.常温操作，不需要添加有机试剂，尤其适合稳定性差的物质的分离纯化，产品质量稳定；4.采用错流过滤得方式，滤膜不易堵塞和污染，膜的保存和再生工序简单，膜的使用寿命长；5.生产工序少、周期短、效率高、成本低、能耗低、安全指数高；6.自动化程度高，采用PLC加变频器控制，操作简单、方便。

ＳｃｉｅｎｃｅａｎｄＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙｏｆＦｏｏｄＩｎｄｕｓｔｒｙ２００７年第０３期食品工业科技超高压法从甘草中提取甘草酸的工艺研究郭文晶，张守勤，王长征（吉林大学生物与农业工程学院，吉林长春１３００２５）摘要：研究了甘草酸的超高压提取工艺。

以水为提取溶剂，采用正交设计，考察了压力、保压时间和固液比三个因素对甘草酸粗品收率的影响，得出甘草酸超高压提取最优工艺条件为压力４００ＭＰａ、保压３ｍｉｎ、固液比１∶１０。

通过此工艺，甘草酸粗品收率可达１１．７１％，粗品中甘草酸含量达７３．０９％。

超高压法提取甘草酸具有提取率高，提取时间短，节约溶剂，提取物杂质少，能耗低，工艺简单等优点，是一种高效、节能的新方法。

关键词：甘草，甘草酸，超高压提取，正交设计Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ａｕｌｔｒａｈｉｇｈ－ｐｒｅｓｓｕｒｅｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ（ＵＨＰＥ）ｐｒｏｃｅｓｓｆｏｒｇｌｙｃｙｒｒｈｉｚｉｃａｃｉｄｗａｓｓｔｕｄｉｅｄ．Ｔｈｅｓｔｕｄｙｗａｓｃａｒｒｉｅｄｏｕｔｔｈｒｏｕｇｈｏｒｔｈｏｇｏｎａｌｄｅｓｉｇｎ，ｕｓｉｎｇｗａｔｅｒａｓｔｈｅｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｓｏｌｖｅｎｔ．Ｔｈｅｅｆｆｅｃｔｓｏｆｔｈｒｅｅｆａｃｔｏｒｓｓｕｃｈａｓｐｒｅｓｓｕｒｅ，ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｔｉｍｅａｎｄｓｏｌｉｄ／ｌｉｑｕｉｄｒａｔｉｏｏｎｔｈｅｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｙｉｅｌｄｏｆｃｒｕｄｅｇｌｙｃｙｒｒｈｉｚｉｃａｃｉｄｗｅｒｅｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｄ．Ｔｈｅｏｐｔｉｍｕｍｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓａｒｅ：ｐｒｅｓｓｕｒｅｉｓ４００ＭＰａ，ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｔｉｍｅｉｓ３ｍｉｎ，ａｎｄｓｏｌｉｄ／ｌｉｑｕｉｄｒａｔｉｏｉｓ１︰１０．Ｕｎｄｅｒｔｈｅｏｐｔｉｍａｌｃｏｎｄｉｔｉｏｎ，ｔｈｅｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｙｉｅｌｄｏｆｃｒｕｄｅｇｌｙｃｙｒｒｈｉｚｉｃａｃｉｄｉｓｕｐｔｏ１１．７１％，ｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｏｆｇｌｙｃｙｒｒｈｉｚｉｃａｃｉｄｉｓｕｐｔｏ７３．０９％．ＴｈｅＵＨＰＥｍｅｔｈｏｄｉｓａｎｅｆｆｅｃｔｉｖｅ，ｅｎｅｒｇｙｓａｖｉｎｇａｎｄｎｅｗｍｅｔｈｏｄｆｏｒｔｈｅｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｏｆｇｌｙｃｙｒｒｈｉｚｉｃａｃｉｄ，ｗｈｉｃｈｈａｓｔｈｅａｄｖａｎｔａｇｅｓｏｆｈｉｇｈｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｙｉｅｌｄ，ｐｕｒｅｒｐｒｏｄｕｃｔ，ｓｈｏｒｔｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｔｉｍｅ，ｌｅｓｓｕｓｅｏｆｓｏｌｖｅｎｔ，ｌｅｓｓｅｎｅｒｇｙｃｏｎｓｕｍｐｔｉｏｎａｎｄｓｉｍｐｌｅｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｐｒｏｃｅｓｓ．Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ｇｌｙｃｙｒｒｈｉｚａ；ｇｌｙｃｙｒｒｈｉｚｉｃａｃｉｄ；ｕｌｔｒａｈｉｇｈ－ｐｒｅｓｓｕｒｅｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ；ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌｄｅｓｉｇｎ中图分类号：ＴＳ２０１．１文献标识码：Ａ文章编号：１００２－０３０６（２００７）０３－０１９４－０３收稿日期：２００６－０８－２９作者简介：郭文晶（１９８０－），女，博士研究生，研究方向：天然产物有效成分提取分离。

甘草酸的纯化工艺研究甘草酸是一种天然的化合物，被广泛应用于医药、化妆品等领域。

然而，由于其天然来源不够稳定、含杂质量较高，导致甘草酸的纯化工艺一直是研究的重点。

本文将介绍甘草酸的纯化过程及相关技术，以期提高甘草酸的质量和产量。

一、甘草酸的提取和分离甘草酸是从甘草（Glycyrrhiza uralensis Fisch）根里提取得到的，通常采用水提法、浓缩法和分离纯化法等技术。

其中，水提法是最常用的方法，其基本操作如下：将干燥的甘草根粉末放入提取器中，加入适量纯水，常温下静置10小时，再用煮沸水回流提取7小时，接着用过滤器过滤、蒸发浓缩、醋酸经酸化后冷沉淀的方法分离纯化，最终得到甘草酸产品。

二、甘草酸的纯化工艺虽然采用水提法可得到甘草酸，但其纯度仅有70%左右，而且会存在红褐色和黄色杂质。

因此，为了提高甘草酸的纯度，通常需要进行以下步骤的纯化工艺。

1.甘草酸的结晶纯化甘草酸和甘草酸二钾盐都可以通过结晶纯化的方式提高其纯度。

其基本过程是：将甘草酸或甘草酸二钾盐溶解在水中，然后缓慢冷却结晶，此时甘草酸会比甘草酸二钾盐结晶净化得更好，最终通过过滤、干燥等步骤得到高纯度的甘草酸。

2.甘草酸的柱层析纯化柱层析方法是分离纯化天然产物和化学品的常用方法，同样也适用于甘草酸的纯化。

在柱层析前，需要将甘草酸加入到合适的溶剂中，并根据其物理化学性质选择合适的固相材料进行操作。

通过调节溶剂和流动相的比例，可以使不同组分被分离纯化。

柱层析法可以获得更高的纯度和产量，也更简单、安全和节省时间。

3.甘草酸的超声波萃取纯化超声波萃取技术是利用超声波的热力、机械和化学效应，在水溶液中加速物质扩散，使其分散均匀，从而实现高效的萃取过程。

以甘草酸的纯化为例，超声波萃取技术可大大提高其纯度、提高产率及减轻环保压力。

具体实现方法如下：将甘草酸粉末加入水中，再利用超声波设备，对样品进行10~20分钟的超声波加热和震荡，然后用静置沉淀的方法得到纯化甘草酸。