(胶体金法)生产工艺规程模板

样品稀释液
2ml
4瓶
2ml
1瓶
2ml
2瓶
说明书
1份
1份
1份
1份
1份
1份
按包装盒标准折叠方法折好包装盒，根据成品组分名称、规格及数量，分别装入
检测卡铝箔袋或试纸筒、样品稀释液、说明书。包装组组长每盒清点查看，合格后用
封口签（合格证）封口。
（4）储存：2～30℃，有效期 24 个月。
抽检量为 3%，最小抽检量为 500 人份。经质量管理部 QC 检测合格，QA 做生产记录审核后 开具《成品放行审核单》方可入库。
3.7 质量标准
3.7.1.主要原辅料质量标准及依据：
（1）重组乙肝抗原
质量
性状
肉眼观察不含异物、浑浊或摇不散的沉淀或颗粒
标准
蛋白浓度
用福林-酚法，以Sigma公司生产的牛血清白蛋白作对照， 蛋白含量以毫克/毫升表示，浓度为0.5-10.0mg/ml；
纯度和分子量
用SDS-PAGE蛋白电泳法测定，每个泳道加样量10μg，电 泳带显示无杂蛋白。分子量：
效价 功能性试验
ELISA 检测，效价应大于 1∶10000
以本品制备三批小试样品，与其他合格组分组装后 检测：阴性参考品符合率：20份阴性参考品符合率（-/-） 应为20/20；最低检出量：抗-HBs的最低检出量应不高于 10mIU/ml；批内精密度用1份乙型肝炎病毒表面抗体精密 性参考品平行检测同批内的10个测试卡，结果应全部呈 阳性，且显色度均一。批间精密度：连续三批的小试样 本，分别重复检测精密度参考品5次，结果应全部为阳性， 且呈色度均一。稳定性试验：置37℃放置10天，进行阴 性参考品符合率、阳性参考品符合率、最低检出量和精 密度的检测，应符合上述要求。
3.6.6 小样试验：在铺金和划膜之前，应首先将待铺的基因重组抗原-胶体金复合物溶液， 先铺一条玻纤（6mm×310mm）上，用配好的质控线液、检测线液划膜一张，与其他组分组 合在一起，进行检测，要求：
阴性参考品符合率：20份阴性参考品符合率（-/-）应为20/20。
灵敏度：灵敏度参考血清，呈阳性反应。
按照不同规格的要求，需要进行检测卡装配的试纸条先把切好的试条装配到完好的 PVC 卡中，再用压卡机进行压卡，装条时应注意检查条有无划痕污渍，宽度是否符合要求；PVC
卡外观应清洁，平整，无变形，底面配套性好，压卡应注意调节松紧度，避免将卡压破或
变形。
（1）装卡：单个卡和无水硅胶干燥剂一起放入铝箔袋中，卡印字方向应朝向铝箔袋开口
清洁、维护、保养标准操作规程》进行操作打印标签、包装盒上的“三期”。
（2）贴签：在上述装好检测卡的铝箔袋及装好试纸条的筒上贴上标签。
（3）成品组装：
纸盒内组份：
组件
100T/盒
装量
数量
25 袋/盒（1 支/袋）
装量
数量
50 袋/盒（1 支/袋）
装量
数量
试纸条
25 条/筒 4 筒
无
无
无Biblioteka Baidu
无
试纸卡
无
无
1 支/袋 25 袋 1 支/袋 50 袋
贮藏条件
-20℃冻存
依据 《抗体质量标准及检验操作规程》
（6） 硝酸纤维素膜：Millipore Hiflow Plus 18002 硝酸纤维素膜
质量 标准
外观 毛细迁移速率 功能性试验
不干胶纸：13mm× 310mm
将上述切割好的材料进行贴膜制成乙型肝炎表面抗体胶体金试纸条，各膜层叠关系如下：
1） 2)
3） 3)
6)
T线 C线
5) （4）
1） 不干胶纸
2） 样品垫
3）金结合物垫
4）包被有检测线（T 线）和质控线（C 线）的硝酸纤维素膜
5）吸水垫
6）塑料衬片
金标垫 2 片，第一片搭上 NC 膜 2mm， 第二片搭第一片 3mm ；样品垫 15mm，搭上
方向，确保无漏装。
（2）密封。密封时应检查密封的效果及铝箔袋上的效期印字是否正确，使用封口机进行
封口。
装筒，将无卡试纸以 25 支/筒的规格装入筒中，放入干燥剂，然后封筒。
（1）不干胶标签批号、生产日期、有效期打印：以试纸条组装日期为“生产日期”，并
由此推算出“有效期至”，批号按照《批号管理规程》的规定设置。按照《批号打印机使用、
金标垫 2mm；吸水垫 20mm，搭上 NC 膜 2mm，不干胶 13mm，搭上露出的 NC 膜 2mm。
（1）组装环境条件的控制在相对湿度 30%以下，并所有组件拆封后暴露于空气中时间 不超过 2 小时。
（2）按照《切条工序作业指导书》使用切条机，将组装好的乙肝病毒表面抗体检测试 剂切割成宽度为 2.5mm±0.1mm 试条，切条过程中应于前、后及过程中每 30 分钟对切条的 宽度检查一次。 检测卡的装配
贮藏条件
-20℃冻存
依据 《抗原质量标准及检验操作规程》
（2）兔 IgG 抗体
蛋白浓度
经OD280方法检测浓度≥5mg/mL。
纯度
用SDS-PAGE蛋白电泳法测定，每个泳道加样量10μg，电 泳带显示无杂蛋白
功能性试验
以本品制备三批小试样品，与其他合格组分组装后 检测：阴性参考品符合率：20份阴性参考品符合率（-/-） 应为20/20；最低检出量：抗-HBs的最低检出量应不高于 10mIU/ml。；批内精密度用1份乙型肝炎病毒表面抗体精 密性参考品平行检测同批内的10个测试卡，结果应全部 呈阳性，且显色度均一。批间精密度：连续三批的小试 样本，分别重复检测精密度参考品5次，结果应全部为阳 性，且呈色度均一。稳定性试验：置37℃放置10天，进 行阴性参考品符合率、阳性参考品符合率、最低检出量 和精密度的检测，应符合要求。且背景干净，质控线2分 钟内显出，在10-30ug/ml包被时具有活性标记时具有活 性。
（1）
（2） （3）
按照 装作 书》，
原料名称 原料名称 原料名称
用量 用量 用量 配制环境：
规 格 配制环境：
求进
配制环境：
分装
格 + 附加量。如下表所示（单位：ml/瓶）：
《液体分 业指导 根据相应 的装量要 行分装， 量＝规
标示量 15ml 3.6.3 胶体金制备
附加量 0ml
装量 15ml
原料名称 烧金溶液 A 烧金溶液 B
超纯水
用量
制备环境：金标车间配料间（十万级洁净区）
（1） 量取 ml 超纯水到适当大小的烧瓶中； （2） 量取 ml 烧金溶液 A 并加入烧瓶中； （3） 水沸腾后，加入已经平衡的烧金溶液 B ml； （4） 水继续沸腾 5 分钟关闭加热搅拌器，并将烧瓶移至桌面，用铝箔纸盖住瓶口，让
胶体金自然冷却。 （5） 胶体金的储存：2～8℃；有效期 6 个月。 2CO3 液，混匀后，快速搅拌中加入相应量的乙肝抗原或兔 IgG(乙肝抗原和兔 IgG 分开标记)， 混合均匀后，反应 30 分钟。 ℃，有效期 6 个月。 3.6.5 铺金液配制 用工作液将 1/10 体积的乙肝病毒表面抗原金标记物沉淀放大 10 倍；兔 IgG 金标记物沉淀 按 1/3 乙肝病毒表面抗原沉淀的量，加至上述乙肝金标工作液中（即兔 IgG 金标记物沉淀 为乙肝的 1/3） 按 0.2mg/ml 的量加入抗 RBC 到铺金液中；
精密性：连续重复测定精密性参考品10次，反应结果应均为阳性，且显色度均一。
3.6.7 铺金 按每张玻纤可以铺金 36ml 计算金标液的体积 ℃干燥 18～24 小时，如不立即使用，加干燥剂铝箔袋封存。 保存过程中严格防潮，以后打开和使用一定要在 30%湿度以下。
按照《划膜机标准操作规程》，以“252”泵速（对应速度 2.7ul/cm），将质控线液和检 测线液均匀地划在膜上，质控线划在距膜顶端 12.1±0.1cm 处，检测线划在距膜顶端 12.5cm ±0.1cm 处，质控线与检测线相距 5mm±1mm。 ℃干燥 18～24 小时，如不立即使用，加干燥剂铝箔袋封存。
贮藏条件
-20℃冻存
依据 《抗体质量标准及检验操作规程》
（4） 兔抗 RBC
纯度
用SDS-PAGE蛋白电泳法测定，每个泳道加样量10μg，电 泳带显示无杂蛋白
活性 功能性试验
琼脂免疫双扩试验，测定效价应不低于1：8。
以本品制备三批小试样品，与其他合格组分组装后 检测：阴性参考品符合率：20份阴性参考品符合率（-/-） 应为20/20；最低检出量：抗-HBs的最低检出量应不高于 10mIU/ml；批内精密度用1份乙型肝炎病毒表面抗体精密 性参考品平行检测同批内的10个测试卡，结果应全部呈 阳性，且显色度均一。批间精密度：连续三批的小试样 本，分别重复检测精密度参考品5次，结果应全部为阳性， 且呈色度均一。稳定性试验：置37℃放置10天，进行阴 性参考品符合率、阳性参考品符合率、最低检出量和精 密度的检测，应符合要求。血球被结合，背景干净
25 条/筒 无
2ml 1份
4筒 无
4瓶 1份
无 1 支/袋 2ml 1份
无 25 袋 1瓶
1份
无 1 支/袋
2ml 1份
无 50 袋 2瓶 1份
3.4.2 储存条件：2-30℃保存。 3.4.3.有效期：24 个月。 3.5.生产工艺流程图文件末（23 页）。 3.6.生产工艺过程及工艺条件
根据以下各配方，按各相关试剂配制作业指导书进行配制。
(1) 商品名：乙型肝炎病毒表面抗体检测试剂（胶体金法） （2）英文名：Diagnostic Kit for Antibody to Hepatitis B Surface Antigen(Colloidal
Gold Immunochromatagraphic Assay)
（3）汉语拼音名：Yixing Ganyan Bingdu Biaomian Kangti Jiance Shiji（jiaotijin Fa） 3.2.2.类型：三类 6840 体外诊断试剂。 3.2.3.规格：100T/盒(25T/筒*4 筒)（无卡）；25 袋/盒（1 支/袋）、50 袋/盒（1 支/袋） 3.3.产品概述
1. 适用范围 适用于乙型肝炎病毒表面抗体检测试剂盒（胶体金法）的生产和质量控制。
2. 职责 研发部：制定本规程。 生产管理部：执行本规程 质量管理部：按本规程执行，监督本规程的执行情况。
3. 内容 3.1.依据
《乙型肝炎病毒表面抗体检测试剂（胶体金法）》产品标准 3.2.产品名称、剂型、规格 3.2.1 名称：
贮藏条件
-20℃冻存
依据 《抗体质量标准及检验操作规程》
（3）羊抗兔 IgG
蛋白浓度
经OD280方法检测浓度≥5mg/mL。
纯度
用SDS-PAGE蛋白电泳法测定，每个泳道加样量10μg，电 泳带显示无杂蛋白
功能性试验
以本品制备三批小试样品，与其他合格组分组装后 检测：阴性参考品符合率：20份阴性参考品符合率（-/-） 应为20/20；最低检出量：抗-HBs的最低检出量应不高于 10mIU/ml；批内精密度用1份乙型肝炎病毒表面抗体精密 性参考品平行检测同批内的10个测试卡，结果应全部呈 阳性，且显色度均一。批间精密度：连续三批的小试样 本，分别重复检测精密度参考品5次，结果应全部为阳性， 且呈色度均一。稳定性试验：置37℃放置10天，进行阴 性参考品符合率、阳性参考品符合率、最低检出量和精 密度的检测，应符合要求。且背景干净，质控线2分钟内 显出，在0.5-2.0mg/ml包被时具有活性标记时具有活性。
保存过程中严格防潮，以后打开和使用一定要在 30%湿度以下。
3.6.8 样品垫的准备
按每张玻纤可以铺液 36ml 计算全血样品垫处理液的体积
℃干燥 18～24 小时，如不立即使用，加干燥剂铝箔袋封存。
保存过程中严格防潮，以后打开和使用一定要在 30%湿度以下。
金标垫：6mm × 310mm 样品垫：15mm ×310mm 吸水垫：20mm×310mm
乙型肝炎病毒表面抗体检测试剂（胶体金法）采用胶体金免疫层析分析原理、双抗原 夹心法，在玻璃纤维纸上预包埋金标记重组乙型肝炎病毒表面抗原，在硝酸纤维素膜上检
测线（T）和质控线（C）分别包被重组的乙型肝炎病毒表面抗原和羊抗兔IgG。当检测样本
为阳性时，样本中的乙肝病毒表面抗体与胶体金标记的重组乙肝病毒表面抗原结合形成复 合物，由于层析作用复合物沿纸条向前移动，经过检测线（T）时与预包被的重组乙肝表面
抗原反应，形成免疫复合物而显现红色条带，游离金标记的兔IgG则在质控线（C）与羊抗
兔IgG结合显现红色条带。阴性样本则仅在质控线（C）显色。
3.4.试剂盒组成、储存、有效期
3.4.1.试剂盒组成：
组件
100T/盒
装量
数量
25 袋/盒（1 支/袋）
装量
数量
50 袋/盒（1 支/袋）
装量
数量
试纸条 试纸卡 样品稀释液 说明书