DH5a大肠杆菌克隆菌株使用说明

Cat#：BSD02S1试剂盒组成（５T）DH5α感受态细胞0.1ml×5支SOC培养基1ml×5支阳性质控品 50ul说明书１份产品描述DH5α是世界上最常用的生物工程菌株之一，特别是在克隆应用方面。

本产品为克隆转化专用的感受态大肠杆菌，该菌株经过特殊方法处理而获得的高活性感受态细胞。

使用pUC18(2.7kb)检验可获得高达＞107cfu/ug。

本产品在液氮中保存可在二个月内保持＞107cfu/ug的转化效率，-70℃保存可在一个月内保持＞106cfu/ug的转化效率。

DH5α的基因型为: F-φ80lacZΔM15 Δ(lacZYA-argF) U169 deoR recA1 endA1 hsdR17 (r k-, m k+) phoA supE44 λ- thi-1 gyrA96 relA1。

操作方法（以下操作均按无菌条件的标准进行）1. 取感受态细胞室温下使其解冻,解冻后立即置冰上；2. 向感受态细胞中加入目的DNA(含量不超过50ng,体积不超过10μl)，轻轻旋转离心管以混匀，冰上放置30分钟；3. 将离心管置于42℃的水浴中放置60秒（时间必须准确控制）。

然后快速将离心管转移到冰上，放置5分钟；4. 向管中加入1ml培养基(不含Amp)，混匀后37℃水浴或振荡培养1小时，使细菌恢复正常生长状态，并表达质粒编码的抗生素抗性基因(Amp)；5. 将上述菌液涂布于含Amp的筛选平板上（也可经过离心收集后再涂板），正面向上放置半小时，待菌液完全被培养基吸收后倒置培养皿，37℃培养16-24小时。

重要提示1 用于转化的连接产物或质粒的体积不能超过感受态细胞体积的15%；2 质粒超过7.5kb后，随尺寸的增加转化效率会下降，质粒的尺寸超过10kb时，在大肠杆菌增殖过程中也可能会出现质粒缺失现象；3 用于转化的质粒量在0.1pg~50ng间的效果最好，超过50ng则转化效率会下降；4 42℃热击时间与离心管的厚度、菌液的体积、转入片段的大小直接相关，一般建议热击60秒，热击时间不宜超过90秒，否则转化效率会下降很快；5 本产品不能进行反复冻融和长期保存。

DH5a是一种常用于质粒克隆的菌株。

E.coli DH5a在使用pUC系列质粒载体转化时，可与载体编码的β－半乳糖苷酶氨基端实现α－互补。

可用于蓝白斑筛选鉴别重组菌株。

基因型：F-，φ80dlacZΔM15，Δ(lacZYA-argF)U169，deoR，recA1，endA1，hsdR17(rk-，mk+)，phoA，supE44，λ-，thi-1，gyrA96，relA1
BL21(DE3) 菌株
该菌株用于高效表达克隆于含有噬菌体T7启动子的表达载体（如pET 系列）的基因。

T7噬菌体RNA聚合酶位于λ噬菌体DE3区，该区整合于BL21的染色体上。

该菌适合表达非毒性蛋白。

基因型：F-，ompT， hsdS（rBB-mB－），gal， dcm（DE3）
BL21(DE3) pLysS菌株
该菌株含有质粒pLysS，因此具有氯霉素抗性。

PLysS含有表达T7溶菌酶的基因，能够降低目的基因的背景表达水平，但不干扰目的蛋白的表达。

该菌适合表达毒性蛋白和非毒性蛋白。

基因型：F-，ompT hsdS（rBB-mB－），gal， dcm（DE3，pLysS ，Camr 最直接的区分就是克隆菌株和表达菌株的区别
大肠杆菌DH5α做克隆或保存质粒用，BL21用来做原核表达用。

当然也有人用DH5α做表达也能表达出来。

也有人用BL21保存质粒的，但时间久了，质粒容易丢失。

你要是做原核表达的话，应该会现用前者克隆得到重组质粒，转化入后者进行表达
（学习的目的是增长知识，提高能力，相信一分耕耘一分收获，努力
就一定可以获得应有的回报）。

1：DH5a菌株DH5a是一种常用于质粒克隆的菌株。

E.coliDH5a在使用pUC系列质粒载体转化时，可与载体编码的β－半乳糖苷酶氨基端实现α－互补。

可用于蓝白斑筛选鉴别重组菌株。

基因型：F-，φ80dlacZΔM15，Δ(lacZYA-argF)U169，deoR，recA1，endA1，hsdR17(rk-，mk+)，phoA，supE44，λ-，thi-1，gyrA96，relA12：BL21(DE3) 菌株BL21菌株用于高效表达克隆于含有噬菌体T7启动子的表达载体（如pET系列）的基因。

T7噬菌体RNA聚合酶位于λ噬菌体DE3区，该区整合于BL21的染色体上。

该菌适合表达非毒性蛋白。

基因型：F-，ompT， hsdS（rBB-mB－），gal，dcm（DE3）3：BL21(DE3) pLysS菌株BL21(DE3) pLysS菌株含有质粒pLysS，因此具有氯霉素抗性。

PLysS含有表达T7溶菌酶的基因，能够降低目的基因的背景表达水平，但不干扰目的蛋白的表达。

该菌适合表达毒性蛋白和非毒性蛋白。

基因型：F-，ompT hsdS（rBB-mB－），gal，dcm（DE3，pLysS ，Camr4：JM109菌株JM109菌株在使用pUC系列质粒载体进行DNA转化或用M13phage载体进行转染时，由于载体DNA产生的LacZa多肽和JM09编码的LacZΔM15进行α－互补，从而显示β－半乳糖苷酶活性，由此很容易鉴别重组体菌株基因型：recA1，endA1，gyrA96，thi－1，hsdR17，supE44，relA1，Δ（lac－proAB）/F’[traD36，proAB+，lacIq，lacZΔM15]5：TOP10菌株TOP10菌株适用于高效的DNA克隆和质粒扩增，能保证高拷贝质粒的稳定遗传。

基因型：F- ，mcrAΔ(mrr-hsd RMS-mcrBC)，φ80，lacZΔM15，△lacⅩ74，recA1 ，araΔ139Δ(ara-leu)7697， galU，galK ，rps， (Strr) endA1， nupG6：HB101菌株HB101菌株遗传性能稳定，使用方便，适用于各种基因重组实验基因型：supE44，hsdS20（rB-mB－），recA13，ara－14，proA2，lacY1，galK2，rpsL20，xyl-5，mtl-1，leuB6，thi-1。

【引用】常用大肠杆菌感受态JM109，DH5a，BL21等的区别生命科学2011-03-31 14:48:42 阅读80 评论0 字号：大中小订阅本文引用自xxrrzq《常用大肠杆菌感受态JM109，DH5a，BL21等的区别》1：DH5a菌株DH5a是一种常用于质粒克隆的菌株。

E.coli DH5a在使用pUC系列质粒载体转化时，可与载体编码的β－半乳糖苷酶氨基端实现α－互补。

可用于蓝白斑筛选鉴别重组菌株。

基因型：F-，φ80dlacZΔM15，Δ(lacZYA-argF)U169，deoR，recA1，endA1，hsdR17(rk-，mk+)，phoA，supE44，λ-，thi-1，gyrA96，relA12：BL21(DE3) 菌株该菌株用于高效表达克隆于含有噬菌体T7启动子的表达载体（如pET系列）的基因。

T7噬菌体RNA聚合酶位于λ噬菌体DE3区，该区整合于BL21的染色体上。

该菌适合表达非毒性蛋白。

基因型：F-，ompT，hsdS（rBB-mB－），gal，dcm（DE3）3：BL21(DE3) pLysS菌株该菌株含有质粒pLysS，因此具有氯霉素抗性。

PLysS含有表达T7溶菌酶的基因，能够降低目的基因的背景表达水平，但不干扰目的蛋白的表达。

该菌适合表达毒性蛋白和非毒性蛋白。

基因型：F-，ompT hsdS（rBB-mB－），gal，dcm（DE3，pLysS ，Camr4：JM109菌株该菌株在使用pUC系列质粒载体进行DNA转化或用M13 phage载体进行转染时，由于载体DNA产生的LacZa多肽和JM09编码的LacZΔM15进行α－互补，从而显示β－半乳糖苷酶活性，由此很容易鉴别重组体菌株基因型：recA1，endA1，gyrA96，thi－1，hsdR17，supE44，relA1，Δ（lac－proAB）/F’[traD36，proAB+，lacIq，lacZΔM15]5：TOP10菌株该菌株适用于高效的DNA克隆和质粒扩增，能保证高拷贝质粒的稳定遗传。

DH5a大肠杆菌克隆菌株编号 名称北京华越洋生物NRR01300 DH5a大肠杆菌克隆菌株基本信息：名称 DH5a大肠杆菌克隆菌株规格 300ul甘油菌类别 大肠杆菌克隆菌株抗性 无培养基 LB培养方式 37℃，有氧保存方式 20%甘油，-­‐80℃基因型:F-­‐ endA1 glnV44 thi-­‐1 recA1 relA1 gyrA96 deoR nupG Φ80dlacZΔM15 Δ(lacZYA-­‐argF)U169, h sdR17(rK-­‐ m K+), λ–菌株简介:DH5α菌株是实验室最常用的感受态细胞。

缺失核酸内切酶(endA)，提高了质粒DNA的产量和质量；重组酶缺陷型(recA)减少插入片段的同源重组概率，保证了插入DNA的稳定性；lacZΔM15的存在使DH5α可用于蓝、白斑筛选。

DH5α菌株的缺点是生长缓慢，37℃需培12-­‐14小时才能看见克隆；如需加快试验速度，请选用TG1，Mach1-­‐T1，XL10-­‐Gold等生长速度快的感受态细胞。

操作说明：1，本品包含一份甘油菌，使用本甘油菌时可以不用完全融解，在甘油菌表面蘸取少量涂板或进行液体培养即可。

也可以完全融解后使用，但随着冻融次数的增加，细菌的活力会逐渐下降。

2，为保证菌种纯正，避免其它细菌污染，尽量先划平板，然后再挑单克隆菌落进行后续操作。

冷冻管开封：用浸过75%酒精的脱脂棉严格消毒冷冻管盖。

菌株复溶：无菌环境中旋开装有复溶液的滴瓶盖，吸取1ml 左右复溶液，加入到冷冻管中。

轻轻振荡，使冻干菌株溶解呈悬浮状。

菌株复壮：用无菌吸管吸取菌悬液，转移到复溶液滴瓶中。

做好标识，在适宜温度下培养。

细菌在30-­‐35℃培养箱中培养24-­‐48h，真菌在23-­‐28℃培养箱中培养24-­‐72h （必要时，可适当延长培养时间）。

1：DH5a菌株DH5a是一种常用于质粒克隆的菌株。

E.coli DH5a在使用pUC系列质粒载体转化时，可与载体编码的β－半乳糖苷酶氨基端实现α－互补。

可用于蓝白斑筛选鉴别重组菌株。

基因型：F-，φ80dlacZΔM15，Δ(lacZYA-argF)U169，deoR，recA1，endA1，hsdR17(rk-，mk+)，phoA，supE44，λ-，thi-1，gyrA96，relA12：BL21(DE3) 菌株该菌株用于高效表达克隆于含有噬菌体T7启动子的表达载体（如pET系列）的基因。

T7噬菌体RNA聚合酶位于λ噬菌体DE3区，该区整合于BL21的染色体上。

该菌适合表达非毒性蛋白。

基因型：F-，ompT，hsdS（rBB-mB－），gal，dcm（DE3）3：BL21(DE3) pLysS菌株该菌株含有质粒pLysS，因此具有氯霉素抗性。

PLysS含有表达T7溶菌酶的基因，能够降低目的基因的背景表达水平，但不干扰目的蛋白的表达。

该菌适合表达毒性蛋白和非毒性蛋白。

基因型：F-，ompT hsdS（rBB-mB－），gal，dcm（DE3，pLysS ，Camr4：JM109菌株该菌株在使用pUC系列质粒载体进行DNA转化或用M13 phage载体进行转染时，由于载体DNA产生的LacZa多肽和JM09编码的LacZΔM15进行α－互补，从而显示β－半乳糖苷酶活性，由此很容易鉴别重组体菌株基因型：recA1，endA1，gyrA96，thi－1，hsdR17，supE44，relA1，Δ（lac－proAB）/F’[traD36，proAB+，lacIq，lacZΔM15]5：TOP10菌株该菌株适用于高效的DNA克隆和质粒扩增，能保证高拷贝质粒的稳定遗传。

基因型：F- ，mcrAΔ(mrr-hsd RMS-mcrBC)，φ80 ，lacZΔM15，△lacⅩ74，recA1 ，araΔ139Δ(ara-leu)7697，galU ，galK ，rps，(Strr) endA1，nupG6：HB101菌株该菌株遗传性能稳定，使用方便，适用于各种基因重组实验基因型：supE44，hsdS20（rB-mB－），recA13，ara－14，proA2，lacY1，galK2，rpsL20，xyl-5，mtl-1，leuB6，thi-17：M110或SCS110大多数大肠杆菌菌株中含有Dam甲基化酶和Dcm甲基化酶，前者可以在GATC序列中腺嘌呤N-6位上引入甲基，后者在CCA/TGC序列的第一个胞嘧啶C-5位置上引入甲基。

1：DH5a菌株DH5a是一种常用于质粒克隆的菌株。

E.coli DH5a在使用pUC系列质粒载体转化时，可与载体编码的β－半乳糖苷酶氨基端实现α－互补。

可用于蓝白斑筛选鉴别重组菌株。

基因型：F-，φ80dlacZΔM15，Δ(lacZYA-argF)U169，deoR，recA1，endA1，hsdR17(rk-，mk+)，phoA，supE44，λ-，thi-1，gyrA96，relA12：BL21(DE3) 菌株该菌株用于高效表达克隆于含有噬菌体T7启动子的表达载体（如pET系列）的基因。

T7噬菌体RNA聚合酶位于λ 噬菌体DE3区，该区整合于BL21的染色体上。

该菌适合表达非毒性蛋白。

基因型：F-，ompT，hsdS（rBB-mB－），gal，dcm（DE3）3：BL21(DE3) pLysS菌株该菌株含有质粒pLysS，因此具有氯霉素抗性。

PLysS含有表达T7溶菌酶的基因，能够降低目的基因的背景表达水平，但不干扰目的蛋白的表达。

该菌适合表达毒性蛋白和非毒性蛋白。

基因型：F-，ompThsdS（rBB-mB－），gal，dcm（DE3，pLysS，Camr4：JM109菌株该菌株在使用pUC系列质粒载体进行DNA转化或用M13 phage载体进行转染时，由于载体DNA产生的LacZa多肽和JM09编码的LacZΔM15进行α－互补，从而显示β－半乳糖苷酶活性，由此很容易鉴别重组体菌株基因型：recA1，endA1，gyrA96，thi－1，hsdR17，supE44，relA1，Δ（lac－proAB）/F’[traD36，proAB+，lacIq，lacZΔM15]5：TOP10菌株该菌株适用于高效的DNA克隆和质粒扩增，能保证高拷贝质粒的稳定遗传。

基因型：F- ，m crAΔ(mrr-hsd RMS-mcrBC)，φ80 ，lacZΔM15，△lacⅩ74，recA1 ，araΔ139Δ(ara-leu)7697，galU，galK，rps，(Strr) endA1，nupG6：HB101菌株该菌株遗传性能稳定，使用方便，适用于各种基因重组实验基因型：supE44，hsdS20（rB-mB－），recA13，ara－14，proA2，lacY1，galK2，rpsL20，xyl-5，mtl-1，leuB6，thi-17：M110或SCS110大多数大肠杆菌菌株中含有Dam甲基化酶和Dcm甲基化酶，前者可以在GATC序列中腺嘌呤N-6位上引入甲基，后者在CCA/TGC序列的第一个胞嘧啶C-5位置上引入甲基。

DH5a是一种经常使用于质粒克隆的菌株。

E.coli DH5a 在使用pUC系列质粒载体转化时，可与载体编码的β－半乳糖苷酶氨基端实现α－互补。

可用于蓝白斑筛选鉴别重组菌株。

之勘阻及广创作
基因型：F-，φ80dlacZΔM15，Δ(lacZYA-argF)U169，deoR，recA1，endA1，hsdR17(rk-，mk+)，phoA，supE44，λ-，thi-1，gyrA96，relA1
BL21(DE3) 菌株
该菌株用于高效表达克隆于含有噬菌体T7启动子的表达载体（如pET系列）的基因。

T7噬菌体RNA聚合酶位于λ噬菌体DE3区，该区整合于BL21的染色体上。

该菌适合表达非毒性蛋白。

基因型：F-，ompT， hsdS（rBB-mB－），gal， dcm（DE3）
BL21(DE3) pLysS菌株
该菌株含有质粒pLysS，因此具有氯霉素抗性。

PLysS含有表达T7溶菌酶的基因，能够降低目的基因的布景表达水平，但不干扰目的蛋白的表达。

该菌适合表达毒性蛋白和非毒性蛋白。

基因型：F-，ompT hsdS（rBB-mB－），gal， dcm（DE3，pLysS ，Camr
最直接的区分就是克隆菌株和表达菌株的区别
大肠杆菌DH5α做克隆或保管质粒用，BL21用来做原核表达用。

当然也有人用DH5α做表达也能表达出来。

也有人用BL21保管质粒的，但时间久了，质粒容易丢失。

你要是做原核表达的话，应该会现用前者克隆得到重组质粒，转化入后者进行表达。

1：DH5a菌株DH5a是一种常用于质粒克隆的菌株。

E.coli DH5a在使用pUC系列质粒载体转化时，可与载体编码的β－半乳糖苷酶氨基端实现α－互补。

可用于蓝白斑筛选鉴别重组菌株。

基因型：F-，φ80dlacZΔM15，Δ(lacZYA-argF)U169，deoR，recA1，endA1，hsdR17(rk-，mk+)，phoA，supE44，λ-，thi-1，gyrA96，relA12：BL21(DE3) 菌株该菌株用于高效表达克隆于含有噬菌体T7启动子的表达载体（如pET系列）的基因。

T7噬菌体RNA聚合酶位于λ 噬菌体DE3区，该区整合于BL21的染色体上。

该菌适合表达非毒性蛋白。

基因型：F-，ompT，hsdS（rBB-mB－），gal，dcm（DE3）3：BL21(DE3) pLysS菌株该菌株含有质粒pLysS，因此具有氯霉素抗性。

PLysS含有表达T7溶菌酶的基因，能够降低目的基因的背景表达水平，但不干扰目的蛋白的表达。

该菌适合表达毒性蛋白和非毒性蛋白。

基因型：F-，ompT hsdS（rBB-mB－），gal，dcm（DE3，pLysS ，Camr4：JM109菌株该菌株在使用pUC系列质粒载体进行DNA转化或用M13 phage载体进行转染时，由于载体DNA产生的LacZa多肽和JM09编码的LacZΔM15进行α－互补，从而显示β－半乳糖苷酶活性，由此很容易鉴别重组体菌株基因型：recA1，endA1，gyrA96，thi－1，hsdR17，supE44，relA1，Δ（lac－proAB）/F’[traD36，proAB+，lacIq，lacZΔM15]5：TOP10菌株该菌株适用于高效的DNA克隆和质粒扩增，能保证高拷贝质粒的稳定遗传。

基因型：F- ，mcrAΔ(mrr-hsd RMS-mcrBC)，φ80 ，lacZΔM15，△lacⅩ74，recA1 ，araΔ139Δ(ara-leu)7697，galU ，galK ，rps，(Strr) endA1，nupG6：HB101菌株该菌株遗传性能稳定，使用方便，适用于各种基因重组实验基因型：supE44，hsdS20（rB-mB－），recA13，ara－14，proA2，lacY1，galK2，rpsL20，xyl-5，mtl-1，leuB6，thi-17：M110或SCS110大多数大肠杆菌菌株中含有Dam甲基化酶和Dcm甲基化酶，前者可以在GATC序列中腺嘌呤N-6位上引入甲基，后者在CCA/TGC序列的第一个胞嘧啶C-5位置上引入甲基。

Code No. 9057 研究用E. coli DH5αCompetent Cells说明书v201412Da目录内容页码●制品内容 1 ●制品说明 1 ●使用方法 1 ●注意事项 1 ●转化效率 2 ●β-半乳糖苷酶的α-互补性 2 ● Genotype 2 ●细胞浓度 2 ●保存 2 ●参考文献 2 ●关联产品 2●制品内容E. coli DH5α Competent Cells 100 μl×10pUC19 plasmid (0.1 n g/μl) 10 μlSOC medium* 1 ml×10＊ SOC medium: 2% Bacto tryptone0.5% Bacto yeast extract10 mM NaCl2.5 mM KCl10 mM MgSO410 mM MgCl220 mM Glucose●制品说明Takara公司在Hanahan's method基础上进行了改良，制备出E.coli DH5α Competent Cells。

E.coli DH5α Competent Cells在使用pUC系列质粒载体进行DNA转化时，利用β-半乳糖苷酶活性（α-互补性），通过蓝白斑方法可以很容易地鉴别重组体菌株。

由于菌株无lac l q，故不需要IPTG。

因此，当制作基因文库或进行亚克隆时，可以使用X-Gal筛选重组DNA或重组质粒。

X-Gal : 5-Bromo-4-Chloro-3-Indolyl-β-D-Galactoside●使用方法质粒载体转化1.E.coli DH5α Competent Cells 使用前在冰上融化。

2. 轻微混匀，取100 μl装入14 ml 圆底 tube中（BD Falcon 352059 或352057）。

注意：不能剧烈振荡混合细胞。

3. 加入DNA样品（建议≤10 ng）。

4. 冰中放置30分钟。

5. 42℃放置45秒。

dh5a感受态细胞DH5α细胞是一种常用的大肠杆菌细胞株，广泛应用于分子生物学实验中的基因转化、基因克隆、基因表达和蛋白质生产等研究领域。

本文将从DH5α细胞的历史背景、特性、应用和感受态细胞的意义等方面介绍DH5α细胞的相关知识，旨在帮助读者更好地了解和应用这一细胞株。

一、DH5α细胞的历史背景DH5α细胞是由DH1株经过长期反复培养和筛选得到的一种特殊细胞株。

1989年，Arizona State University的J. Messing教授和其团队首次报道了DH5α细胞，它是对广泛应用的DH1株进行改良后得到的。

DH1是由Alfred Mirsky博士于1955年从Douglas Hanahan教授的实验室获取的，是另一种大肠杆菌细胞株。

DH5α株在DH1的基础上进行了进一步的改良，具有更高的转化效率和更好的克隆稳定性，因此被广泛应用于分子生物学领域的实验研究。

二、DH5α细胞的特性1. 高转化效率: DH5α细胞对外源DNA的转化效率非常高，能够高效地接收和表达外源基因。

2. 快速生长: DH5α细胞在常规培养条件下，生长速度较快，可以迅速扩增大量的细胞。

3. 高稳定性: DH5α细胞株经过长期的筛选和改良，具有较高的稳定性，适用于长时间的培养和保存。

4. 缺失F' 过剩负荷: DH5α细胞是F' (proAB lacIq lacZΔM15) 质粒，它缺失了碱性磷酸酶基因lacZ M15，因此在接受含有X-gal （5-溴-4-氯-3-吡啶酚）的培养基时，可以通过蓝白斑筛选的方式判断外源基因是否得到了正确的插入。

三、DH5α细胞的应用1. 基因转化与克隆: DH5α细胞是进行基因转化和基因克隆的理想宿主细胞。

通过将目标基因插入适当的载体，然后转化入DH5α细胞，可以得到大量含有目标基因的细胞克隆。

2. 基因表达与蛋白质生产: 通过将目标基因插入适当的表达载体，并在DH5α细胞中进行表达，可以获得大量的目标蛋白质产物，用于进一步的研究和应用。

DH5a是一种常用于质粒克隆的菌株。

E.coli DH5a在使用pUC系列质粒载体转化时，可与载体编码的β－半乳糖苷酶氨基端实现α－互补。

可用于蓝白斑筛选鉴别重组菌株。

基因型：F-，φ80dlacZΔM15，Δ(lacZYA-argF)U169，deoR，recA1，endA1，hsdR17(rk-，mk+)，phoA，supE44，λ-，thi-1，gyrA96，relA1
BL21(DE3) 菌株
该菌株用于高效表达克隆于含有噬菌体T7启动子的表达载体（如pET系列）的基因。

T7噬菌体RNA聚合酶位于λ噬菌体DE3区，该区整合于BL21的染色体上。

该菌适合表达非毒性蛋白。

基因型：F-，ompT，hsdS（rBB-mB－），gal，dcm（DE3）
BL21(DE3) pLysS菌株
该菌株含有质粒pLysS，因此具有氯霉素抗性。

PLysS含有表达T7溶菌酶的基因，能够降低目的基因的背景表达水平，但不干扰目的蛋白的表达。

该菌适合表达毒性蛋白和非毒性蛋白。

基因型：F-，ompT hsdS（rBB-mB－），gal，dcm（DE3，pLysS ，Camr
最直接的区分就是克隆菌株和表达菌株的区别
大肠杆菌DH5α做克隆或保存质粒用，BL21用来做原核表达用。

当然也有人用DH5α做表达也能表达出来。

也有人用BL21保存质粒的，但时间久了，质粒容易丢失。

你要是做原核表达的话，应该会现用前者克隆得到重组质粒，转化入后者进行表达
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1:DH5a 菌株DH5a 是一种常用于质粒克隆的菌株。

E.coli DH5a在使用 pUC 系列质粒载体转化时,可与载体编码的β-半乳糖苷酶氨基端实现α-互补。

可用于蓝白斑筛选鉴别重组菌株。

基因型:F-, φ80dlacZΔM15, Δ(lacZYA-argFU169, deoR , recA1, endA1,hsdR17(rk-, mk+, phoA , supE44, λ-, thi-1, gyrA96, relA12:BL21(DE3 菌株该菌株用于高效表达克隆于含有噬菌体 T7启动子的表达载体(如 pET 系列的基因。

T7噬菌体 RNA 聚合酶位于λ 噬菌体 DE3区,该区整合于 BL21的染色体上。

该菌适合表达非毒性蛋白。

基因型:F-, ompT , hsdS (rBB-mB -, gal , dcm (DE33:BL21(DE3 pLysS菌株该菌株含有质粒 pLysS ,因此具有氯霉素抗性。

PLysS 含有表达 T7溶菌酶的基因,能够降低目的基因的背景表达水平,但不干扰目的蛋白的表达。

该菌适合表达毒性蛋白和非毒性蛋白。

基因型:F-, ompThsdS (rBB-mB -, gal , dcm (DE3, pLysS , Camr4:JM109菌株该菌株在使用 pUC 系列质粒载体进行 DNA 转化或用 M13 phage载体进行转染时,由于载体 DNA 产生的 LacZa 多肽和 JM09编码的LacZΔM15进行α-互补 ,从而显示β-半乳糖苷酶活性,由此很容易鉴别重组体菌株基因型 :recA1, endA1, gyrA96, thi -1, hsdR17, supE44, relA1, Δ(lac -proAB/F’[traD36, proAB+, lacIq , lacZΔM15]5:TOP10菌株该菌株适用于高效的 DNA 克隆和质粒扩增 ,能保证高拷贝质粒的稳定遗传。

DH5α菌株特点的描述来源：终于找回Google博客的内容了。

从07年开始写这个博客，其实是想把它作为一个教学辅助内容，因为我在研究生和本科生教学中发现许多同学的知识仅限于教材，对许多应该知道的知识一无所知，所以收集整理了我认为应该掌握的东西，放在网上，省得大家到处找。

以后我就把博客中的内容慢慢放上来吧。

在各种手册，专业期刊上都能看到对生物基因型的描述，所以作为专业人士，多少要知道点。

比如DH5α的基因型：F-,SupE44ΔlacU169(φ80 lacZΔM15) hsdR17 recA1 end A1 gyrA96 thi-1 relA1F-，F 因子缺失φ80dlacZΔM15，lacZDM15（Lactose）Map position：8 min功能：lacZM15是表达β-半乳糖苷酶α片断的一段基因，当M15缺失（△M15）时，lacZ基因虽然能表达ω片断，但不能表达α片断，β-半乳糖苷酶没有活性。

当带有lacZ（α片断）基因的lac操纵子通过载体DNA（如pUC19 DNA）转化到lacZ△M15基因型的细胞(如E.coli JM109）时，在有IPTG (异丙基-β-D-1-硫代半乳糖苷)存在的情况下, β-半乳糖苷酶表现出活性,它能分解X-gal(半乳糖类似物)，使其呈现蓝色。

因此可以通过平板上的蓝白菌落进行克隆体的鉴定。

Δ(lacZYA-argF)U169，deoR功能：deoR是大肠杆菌中deo操纵子的调节基因，它表达的阻遏蛋白对deo操纵子具有重要的调控作用。

deo 操纵子位于大肠杆菌基因图谱100 min 的位置，它含有deoA、deoB、deoC 和deoD等结构基因，分别表达DNA代谢所需的酶类，即胸腺嘧啶磷酸化酶、磷酸转位酶、脱氧核糖磷酸醛缩酶和嘌呤核苷磷酸化酶。

deoR基因的变异，使deo操纵子的阻遏蛋白不能表达，宿主细胞合成大量的dCTP，可以选择性地改善大分子DNA的转化。

⼤肠杆菌BL21和DH5α的区别DH5a是⼀种常⽤于质粒克隆的菌株。

E.coli DH5a在使⽤pUC系列质粒载体转化时，可与载体编码的β－半乳糖苷酶氨基端实现α－互补。

可⽤于蓝⽩斑筛选鉴别重组菌株。

基因型：F-，φ80dlacZΔM15，Δ(lacZYA-argF)U169，deoR，recA1，endA1，hsdR17(rk-，mk+)，phoA，supE44，λ-，thi-1，gyrA96，relA1BL21(DE3) 菌株该菌株⽤于⾼效表达克隆于含有噬菌体T7启动⼦的表达载体（如pET系列）的基因。

T7噬菌体RNA聚合酶位于λ噬菌体DE3区，该区整合于BL21的染⾊体上。

该菌适合表达⾮毒性蛋⽩。

基因型：F-，ompT，hsdS（rBB-mB－），gal，dcm（DE3）BL21(DE3) pLysS菌株该菌株含有质粒pLysS，因此具有氯霉素抗性。

PLysS含有表达T7溶菌酶的基因，能够降低⽬的基因的背景表达⽔平，但不⼲扰⽬的蛋⽩的表达。

该菌适合表达毒性蛋⽩和⾮毒性蛋⽩。

基因型：F-，ompT hsdS（rBB-mB－），gal，dcm（DE3，pLysS ，Camr最直接的区分就是克隆菌株和表达菌株的区别⼤肠杆菌DH5α做克隆或保存质粒⽤，BL21⽤来做原核表达⽤。

当然也有⼈⽤DH5α做表达也能表达出来。

也有⼈⽤BL21保存质粒的，但时间久了，质粒容易丢失。

你要是做原核表达的话，应该会现⽤前者克隆得到重组质粒，转化⼊后者进⾏表达（此⽂档部分内容来源于⽹络，如有侵权请告知删除，⽂档可⾃⾏编辑修改内容，供参考，感谢您的配合和⽀持）编辑版word。

E.coli Competent CellsDH5α使 用 说 明 书Takara Code : D9057A 包 装 量 Competent Cells DH5α 100 μl × 10 支 Control DNA （pUC19，0.1 ng/μl ） 10 μl × 1 支 保 存 : -80℃ 制品说明 感受态细胞（Competent Cells ）是一种具有摄入外源DNA 能力的受容菌，它可以摄取外源的质粒DNA 等。

在进行基因重组实验时，使用感受态细胞的转化实验应用十分广泛。

在制作基因文库、重组质粒体以及进行亚克隆实验时，特别是在目的基因含量十分低的情况时，使用高效的感受态细胞显得十分重要。

Takara 公司在Hanahan 方法的基础上进行了改良，制备出了高效的感受态细胞（都为EK1系列的宿主大肠杆菌）。

Genotype F -,φ80d lac Z △M15, △(lacZYA-argF )U169, deoR , recA 1, endA 1, hsdR 17(r k -,m k + ), phoA , supE 44, λ-, thi -1, gyrA 96, relA 1 细胞种类 α-互补性选择宿主 E.coli DH5α E.coli DH5α在使用pUC 系列质粒载体进行DNA 转化时，由于载体DNA 产生的LacZ α多肽和DH5α编码的lacZ △M15相结合，从而显示β-半乳糖苷酶活性（α-互补性）。

利用这一特性，可以很容易鉴别重组体菌株。

DH5α可以用于制作基因库、进行亚克隆等，由于DH5α具有decR 变异，可以作为较大质粒的宿主菌使用。

细胞浓度 : 1～2×109 Bacteria/ml 质量标准 1. 使用1 ng 的质粒DNA 进行转化时： 100 μl Competent Cells DH5α/1 ng pUC19 Plasmid 进行转化时产生的菌落＞1×108 transformants/1 μg pUC19 Plasmid 2. β-半乳糖苷酶、α-互补性的确认 对E.coli Competent Cells DH5α使用pUC19 DNA 进行转化后，在含有100 μg/ml 的Ampicillin 、40 μg/ml 的X-Gal 的L-琼脂平板培养基上，产生蓝色菌落。

大肠杆菌dh5a菌株特征
大肠杆菌DH5α是一种广泛用于基因克隆和表达等方面的实验室菌株。

它是一种无色、革兰阴性、杆状菌，能够在常规培养基上生长，并且在37℃条件下易于培养。

DH5α菌株具有多种优越性能，如高转化效率、高稳定性、易于操作等，在基因工程实验中被广泛应用。

此外，DH5α菌株还具有一些独特的生物学特性，如缺乏外膜蛋白A、能利用某些不同的碳源等，这些特性使得它成为一种理想的基因工程宿主菌株。

总之，大肠杆菌DH5α菌株是一种被广泛应用于基因工程实验室的优良菌株，其特殊的生物学特性为基因工程实验提供了重要的保障。

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DH5a是一种常常使用于质粒克隆的菌株.E.coli DH5a 在使用pUC系列质粒载体转化时，可与载体编码的β－半乳糖苷酶氨基端实现α－互补.可用于蓝白斑筛选鉴别重组菌株.之青柳念文创作
基因型：F-，φ80dlacZΔM15，Δ(lacZYA-argF)U169，deoR，recA1，endA1，hsdR17(rk-，mk+)，phoA，supE44，λ-，thi-1，gyrA96，relA1
BL21(DE3) 菌株
该菌株用于高效表达克隆于含有噬菌体T7启动子的表达载体（如pET系列）的基因.T7噬菌体RNA聚合酶位于λ噬菌体DE3区，该区整合于BL21的染色体上.该菌适合表达非毒性蛋白.
基因型：F-，ompT， hsdS（rBB-mB－），gal， dcm（DE3）BL21(DE3) pLysS菌株
该菌株含有质粒pLysS，因此具有氯霉素抗性.PLysS含有表达T7溶菌酶的基因，可以降低目标基因的布景表达水平，但不干扰目标蛋白的表达.该菌适合表达毒性蛋白和非毒性蛋白.
基因型：F-，ompT hsdS（rBB-mB－），gal， dcm（DE3，pLysS ，Camr
最直接的区分就是克隆菌株和表达菌株的区别
大肠杆菌DH5α做克隆或保管质粒用，BL21用来做原核表达
用.
当然也有人用DH5α做表达也能表达出来.也有人用BL21保管质粒的，但时间久了，质粒容易丢失.
你要是做原核表达的话，应该会现用前者克隆得到重组质粒，转化入后者停止表达。