实验十植物染色体标本的制备和观察优秀课件

4．水解 取出根尖，用蒸馏水洗净，放入1N HCl中60℃解离 14～15min，再用蒸馏水洗净
5 染色 改良苯酚品红染色液染色5-10min。 6 漂洗 漂洗液换洗2-3次，每次1-2min。 7 酶解 切取着色深的分生区放到小杯中，
加入混合酶液（2.5%纤维素酶+2.5%果胶 酶），25℃下酶解2～4小时。
三 实验仪器、材料和试剂
1 仪器、用具：培养箱、显微镜等 2 材料：蚕豆种子 3 试剂：
⑴ 秋水仙素 ⑵ 磷酸缓冲液 ⑶ 甲醇、冰醋酸 ⑷ 改良苯酚品红染色液 ⑸ 混合酶液
三 实验仪器、材料和试剂
3 试剂： ⑹ 70%、85%、95%乙醇 ⑺ 1mol/L HCL
四 实验方法（压片法制备染色体标本 ）
1 取材 把蚕豆种子预先浸泡6小时，然后转入 垫有湿润滤纸的培养皿中，置25℃温箱中发芽 ，幼根长至1～2cm左右，于上午13～14时剪 下根尖0.5cm。
2 预处理 将剪下的根尖置0.02%秋水仙素溶 液中，浸泡处理4小时。
3 固定 用水洗净处理过的根尖，经甲醇-冰醋 酸（3∶1）固定6～24小时，再经95%、85% 酒精各半小时，最后转入70%酒精中，4℃保 存备用。
四 实验方法（去壁法制备染色体标本 ）
1．取材 将蚕豆种子放在25℃温箱中发芽， 待根长到1～2cm时使用。
2．前处理 根尖用0.1%秋水仙素溶液处 理3～4小时。
3．固定 用水洗净处理过的根尖，经甲醇/ 冰醋酸（3∶1）固定2-24小时，换入70% 酒精保存。
四 实验方法（去壁法Байду номын сангаас备染色体标本 ）
四 实验方法（压片法制备染色体标本 ）
4 解离 取出根尖，用蒸馏水洗净，放入1N HCl 中60℃解离 8～10min，再用蒸馏水洗净。
5 染色 改良苯酚品红染色液染色5～10min 。 6 压片 把根尖放在载玻片上，切取分生区部分
，加一滴染液，用镊子捣碎，盖上盖玻片，然 后在盖玻片上放上一滤纸，用铅笔上的橡皮头 轻轻敲打盖片，使细胞和染色体分散。 7 镜检。
前处理的浓度和时间以及酶解的时间直接 影响染色体标本制备的质量。
四 实验方法（去壁低渗法制备染色体标本 ）
8． 洗涤 倒去酶液，用蒸馏水慢慢冲洗2次， 然后加入45%醋酸。
9 压片 吸取材料，置于载玻片， 盖上盖玻 片，然后在盖玻片上放上一滤纸，用铅笔上 的橡皮头轻轻敲打盖片，使细胞和染色体分 散。
10 镜检
五 作业
绘出植物中期细胞染色体图。
五 注意事项
实验十植物染色体标本的制备和 观察
二 实验原理
常规压片法仍是当今观察植物染色体常用的方法，其 程序包括取材、预处理、固定、解离、染色和压片等 步骤。但压片法的不足之处是染色体很难分散开，染 色体容易变形和断裂。
去壁低渗法是借助纤维素酶和果胶酶将细胞间的果胶 质和组成细胞壁的α-纤维素、半纤维素溶解掉，使植 物细胞只有质膜，然后按哺乳类动物染色体标本制备 的方法——低渗、火焰干燥法制备植物染色体标本。