高效液相色谱法测定维生素C注射剂的含量(精)

H P L C法测定维生素C注射液中维生素C的含量王奇年（江苏省泰州市第四人民医院药剂科 泰州 225300）【摘 要】摘要：目的:考察高效液相色谱法测定维生素C注射液中维生素C的含量的优点。

方法:高效液相色谱法测定维生素C注射液中维生素C的含量（色谱柱：Boston BosChrom Amino 5μm，柱长250mm，柱径4.6mm），流动相：0.01mol·L-1磷酸二氢钾（用磷酸调节pH值至 2.4）-乙腈（30∶70），柱温：35℃，流速：1.0mL·min-1，波长为 246nm。

结果：维生素 C 在9.97～39.88μg·mL-1的浓度范围内有良好的线性关系（r=0.9997）；平均回收率为100.6%，RSD为0.8%。

结论:由于维生素C在波长246nm处有最大吸收峰，确定246nm为本实验的测定波长。

维生素C具有水解性及强还原性，但其在酸性介质中由于受空气中氧的氧化速度减慢及生成单钠盐所以不致发生水解，故本文选取流动相A[0.5%亚硫酸氢钠溶液（用磷酸调节pH值至2.4）]稀释配备维生素C溶液，维持其稳定性。

另外，由于维生素C对光不稳定，故在检验操作及储存中应注意避光处理。

实验表明，本法简便，快速，准确，灵敏度高，回收率高，适合作维生素C的含量测定方法。

【期刊名称】北方药学【年(卷),期】2015(000)009【总页数】2【关键词】高效液相色谱法 维生素C注射液 含量测定1 资料与方法1.1 临床资料：维生素C（vitamin C）在临床上不仅用于眼科、口腔科及外科系统疾病药物治疗而且在心血管系统、消化系统疾病的辅助治疗中十分常用[1]。

维生素C是一种水溶性维生素，不但具有防治坏血酸的功能，还是一种强还原剂，脱氢维生素C的形成是由于分子中2位及3位碳原子的两个烯醇式羟基易解离而释放H+氧化而成[2]。

脱氢维生素C和维生素C共同形成了可逆的氧化还原系统，在人体内发挥着重要的作用：参与了体内的氧化还原反应，保持着谷胱甘肽的还原状态和巯基酶的活性，起到了解毒的作用；还参与体内多种羟化反应，既可以促进胶原蛋白的合成，又可以促进胆固醇的代谢；刺激免疫系统，可抑制病毒的增生，防治感染，阻止致癌物质的生成。

药物分析设计性实验设计方案维生素C及其制剂的含量测定药学2011级（2）班李智（1103501275）李集毅（1103501276）指导教师：***2014 年 4 月高效液相色谱测定维生素C片剂含量一、实验目的1. 掌握一般药物含量测定实验的设计方法2. 掌握维生素C高效液相色谱法含量测定的原理和方法3. 掌握标准曲线法在药品含量测定检验中的运用二、实验器材仪器：岛津高效液相色谱仪,色谱柱C18;电子天平;烧杯,棕色容量瓶（50ml*7）0.145μm滤膜，棕色容量瓶（20ml*2）试剂：维生素C片（0.1g/片）（市售），维生素C标准对照品（0.1mg/ml）;二次蒸馏水，甲醇（0.1mg/ml色谱纯），草酸（分析纯），磷酸二氢钾（分析纯），磷酸氢二钾（分析纯）三、实验原理1. 标准曲线法：采用梯度浓度稀释法，将对照品溶液稀释至不同浓度的待测溶液，制备成标准溶液，用高效液相色谱法按标准进样得样品吸收峰（峰面积），绘制成标准曲线。

2. 将供试品制剂制成规定含量的待测品，进行高效液相色谱测定，对比对照品溶液标准曲线，查看供试品是否符合含量测定要求四、实验内容1色谱条件色谱柱C18，流动相:磷酸盐缓冲溶液(pH=5.18):甲醇=95：5,流速0.18ml/min,紫外检测器,检测波长254 nm,进样10ul。

2供试品溶液与对照品溶液的制备（1）取本品20片(规格0.1g),精密称定,研细,取本品1片(约相当于维生素C100mg)，将待测样品用0.1%的草酸溶解至20ml容量瓶，定容；取上述样品1ml 于50ml的容量瓶中，用0.1%的草酸精确定容，制成每1ml含0.1mg的溶液，分析前用0.145μm滤膜过滤。

（2）维生素C对照品溶液的制备:精密称取维生素C对照品适量,加0.1%的草酸使溶解制成0.1mg/ml的标准溶液。

3 标准工作曲线的绘制精密称取对照品50.80mg置50ml量瓶中,用0.1%草酸溶液稀释至刻度,精密量取0.5ml,2.5ml,5ml,12.5ml,25ml 分别置50ml量瓶中,用0.1%草酸溶液稀释至刻度,制成维生素C标准溶液,用0.45um滤膜过滤,用微量进样器进样10ul,依次测出峰面积,然后以维生素C标准溶液质量浓度(mg/ml)作自变量,相对应的峰面积作因变量,绘制标准工作曲线,标准曲线的相关系数R=0.9999,说明曲线的线性关系良好。

·药品鉴定·2011年9月第8卷第27期高效液相色谱法测定维生素C注射液含量刘国如，刘永锁，陈振玲，王伟，丰廷宗，周毓瑾中国民用航空局民用航空医学中心（民航总医院），北京100023[摘要]目的：建立高效液相色谱法测定维生素C注射液中维生素C含量的方法。

方法：采用Phenomenexluna-NH2分析色谱柱（4.6mm×250mm，5μm），流动相为磷酸二氢钾缓冲液-乙腈（1∶1，磷酸调至pH3.0）；流速：1.0ml/min；检测波长：245nm。

结果：维生素C的线性回归方程为Y=29560X-21310（r=0.9995），线性范围为5～30μg/ml，平均回收率为98.30%（n=9，RSD为2.1%）。

结论：该方法操作简便，结果准确，可用于测定维生素C注射液中维生素C的含量。

[关键词]高效液相色谱法；维生素C注射液；维生素C；含量测定[中图分类号]R917[文献标识码]A[文章编号]1673-7210（2011）09（c）-050-02 DeterminationofVitaminCInjectionbyHPLCLIUGuoru,LIUYongsuo,CHENZhenling,WANGWei,FENGTingzong,ZHOUYujin CivilAviationMedicineCentre(CivilAviationGeneralHospital),CAAC,Beijing100023,Ch ina[Abstract]Objective:TodevelopaquantitativemethodforthedeterminationofVitaminCinVi taminCInjection.Methods:Phenomenexluna-NH2column(4.6mm×250mm,5μm)wasusedaschromatographiccolumn,amixtureofaceton itrileanddibasicpotassiumphosphatebuffersolution(1∶1,v/v)wasusedasmobilephase,whi chwasadjustedtopH3.0byphosphoricacid,andthedetectionwavelengthwasat245nmwithafl owrateof1.0ml/min.Results:TheregressionequationwasY=29560X-21310(r=0.9995),whichwaslinearoverarangefrom5μg/mlto30μg/ml.Theaveragerecovery was98.30%(n=9,RSD=2.1%).Conclusion:Thismethodissensitive,rapidandaccurate,whic hiscanbeusedfordeterminationofVitaminCinVitaminCInjection.[Keywords]HPLC;Vita minCInjection;VitaminC;Determination维生素C在临床上不仅用于心血管系统、消化系统疾病的辅助治疗，而且在眼科、口腔科和外科系统疾病的药物治疗中也十分常用[1]。

维⽣素C制剂的鉴别、杂质检查、含量测定⽅法综述维⽣素C制剂的鉴别、杂质检查、含量测定⽅法综述维⽣素C制剂的鉴别、杂质检查、含量测定⽅法综述摘要:维⽣素C即L-抗坏⾎酸是⼀种⽔溶性维⽣素，具有多种剂型。

ChP2010收载有维⽣素C原料及其⽚剂、泡腾⽚、颗粒剂、泡腾颗粒剂、注射剂和复⽅制剂维⽣素C银翘⽚。

维⽣素C 银翘⽚系临床常⽤于治疗流⾏性感冒引起的发热头痛、咳嗽、⼝⼲、咽喉肿痛等症状的复⽅制剂，其组份为VitC、⾦银花、桔梗、连翘、对⼄酞氨基酚、芦根等成份，其中V itC易发⽣氧化导致含量显著降低。

根据其结构性质采⽤不同的⽅法对其进⾏鉴别、检查、含量测定。

关键词:维⽣素C制剂;鉴别;检查;含量测定内容:仪器及试剂(1)仪器紫外可见分光光度计;⾼效液相⾊谱仪;分析天平;薄层板;滴定管等。

(2)试剂硝酸银试液、⼆氯靛酚、碘滴定液、亚甲蓝⼄醇溶液、淀粉指⽰剂、草酸、醋酸、盐酸、硫酸等。

⼀维⽣素C⽚【鉴别】1. 与硝酸银的反应:⽅法:精密称取本品适量(约相当于维⽣素C 0.2g),加⽔10ml溶解。

取该溶液5ml，加硝酸银试液0.5ml，即⽣成银的⿊⾊沉淀。

2. 与2,6-⼆氯靛酚反应: ⽅法:取本品适量(约相当于维⽣素C 0.2g)，加⽔10ml溶解。

取该1溶液5ml，加2,6-⼆氯靛酚钠1,2滴，试液的颜⾊即消失。

3. 薄层⾊谱法: ⽅法:取本品细粉适量( 约相当于维⽣素C l0mg)，加⽔10 ml，振摇使维⽣素C溶解，滤过，取滤液作为供试品溶液;另取维⽣素C 对照品，加⽔溶解并稀释制成l ml 中约含1mg的溶液，作为对照品溶液。

照薄层⾊谱法，吸取上述两种溶液各2uL,分别点于同⼀硅胶GF254薄层板上，以⼄酸⼄酯-⼄醇-⽔(5:4:1)为展开剂，展开，晾⼲，⽴即置紫外光灯(254 nm)下检视。

供试品溶液所显主斑点的位置和颜⾊应与对照品溶液的主斑点相同。

【检查】1. 颜⾊检查:取本品的细粉适量(约相当于维⽣素C 0.1g)，加⽔20ml，振摇使溶解，滤过，滤液照分光光度法在440nm处测定，吸光度不得超过0.07。

维生素C含量的测定(高效液相色谱法)1．原理试样中的抗坏血酸用溶解超声提取后，以离子对试剂为流淌相，经反相色谱柱分别，其中L(+)-抗坏血酸和D(+)-抗坏血酸挺直用配有紫外检测器的液相色谱仪(波长245nm)测定；试样中的L(+)-脱氢抗坏血酸经L-半胱氨酸溶液举行还原后，用紫外检测器(波长245nm)测定L(+)-抗坏血酸总量，或减去原样品中测得的L(+)-抗坏血酸含量而获得L(+)-脱氢抗坏血酸的含量。

以色谱峰的保留时光定性，外标法定量。

2．试剂与设备 (1)试剂偏磷酸(HPO3)n：含量(以HPO3计)≥38% ,(Na3PO4·12H2O),(KH2PO4) ,(H3PO4) ; 85%, (C3H7NO2S)：优级纯，(C19H42BrN)：色谱纯，(CH3OH)：色谱纯。

(2)试剂配制偏磷酸溶液(200g/L)：称取2008(精确至0.1g)偏磷酸，溶于水并稀释至1L，此溶液于4℃的环境下可保存一个月；偏磷酸溶液(20g/L)：量取50mL 200g/L偏磷酸溶液，用水稀释至500mL; 溶液(100g/L)：称取100g(精确至0.1g)，溶于水并稀释至1L, 溶液(40g/L)：称取4g ，溶于水并稀释至100mL，临用时配制。

(3)标准品L(+)-抗坏血酸标准品(C6H8O6)：纯度≥99%, D(+)-抗坏血酸(异抗坏血酸)标准品(C6H8O6)：纯度≥99%。

(4)标准溶液配制L(+)-抗坏血酸标准贮备溶液(1.000mg/mL)：精确称取L(+)-抗坏血酸标准品0.0lg(精确至0.01mg)，用20g/L的偏磷酸溶液定容至10mL。

该贮备液在2～8℃避光条件下可保存一周。

D(+)-抗坏血酸标准贮备溶液(1.000mg/mL )：精确称取D(+)-抗坏血酸标准品0.01g(精确至0.01mg)，用20g/L的偏磷酸溶液定容至10mL。

该贮备液在2～8℃避光条件下可保存一周。

维生素C含量测定方法一、荧光分析法荧光分析法是一种利用荧光物质与维生素C的特异性反应来进行定量测定的方法。

在一定条件下，维生素C能够激发荧光物质的荧光，通过测定荧光强度可以计算出维生素C的含量。

该方法具有较高的灵敏度和选择性，但需要使用荧光物质，且操作较为繁琐。

二、电化学法电化学法是一种利用电化学反应来测定维生素C的方法。

在一定条件下，维生素C可以被氧化或还原，产生电流或电位变化，通过测定这些变化可以计算出维生素C的含量。

该方法具有操作简便、快速、准确度高等优点，但需要使用电极和电解质溶液。

三、高效液相色谱法高效液相色谱法是一种分离和测定复杂混合物中各组分含量的方法。

维生素C可以通过高效液相色谱法与杂质分离，然后通过紫外检测器或荧光检测器进行检测。

该方法具有高分辨率、高灵敏度、高准确度等优点，但需要使用有机溶剂和复杂的仪器设备。

四、分光光度法分光光度法是一种利用物质吸收光能量特性进行定量测定的方法。

维生素C在特定波长下有吸收峰，通过测定吸收光谱可以计算出维生素C的含量。

该方法具有操作简便、快速、准确度高等优点，但需要使用显色剂和特定波长的光源。

五、滴定法滴定法是一种利用化学反应进行定量测定的方法。

维生素C与特定的试剂发生化学反应，通过滴定操作可以计算出维生素C的含量。

该方法具有操作简便、快速、准确度高等优点，但需要使用特定的试剂和操作技巧。

六、酶分析法酶分析法是一种利用酶的特异性催化作用进行定量测定的方法。

维生素C在特定酶的作用下可以生成产物，通过测定产物可以计算出维生素C的含量。

该方法具有高灵敏度、高准确度等优点，但需要使用特定的酶和试剂。

·药品判定·2011年 9月第 8卷第 27期高效液相色谱法测定维生素 C 注射液含量刘国如，刘永锁，陈振玲，王伟，丰廷宗，周毓瑾中公民用航空局民用航空医学中心（民航总医院），北京100023[纲要 ]目的：成立高效液相色谱法测定维生素 C 注射液中维生素 C 含量的方法。

方法：采纳 Phenomenexluna-NH2剖析色谱柱（ 4.6mm×250mm，5μm），流动相为磷酸二氢钾缓冲液-乙腈（1∶1，磷酸调至pH3.0）；流速：1.0ml/min ；检测波长：245nm。

结果：维生素C 的线性回归方程为Y=29560X-21310（r=0.9995），线性范围为 5～ 30μg/ml，均匀回收率为 98.30%（ n=9，RSD 为 2.1%）。

结论：该方法操作简易，结果正确，可用于测定维生素 C 注射液中维生素 C 的含量。

[重点词 ]高效液相色谱法；维生素 C 注射液；维生素C；含量测定 [ 中图分类号]R917[ 文件表记码 ]A[ 文章编号 ]1673-7210（ 2011） 09（c）-050-02 DeterminationofVitaminCInjectionbyHPLCLIUGuoru,LIUYongsuo,CHENZhenling,WANGWei,FENGTingzong,ZHOUYujin CivilAviationMedicineCentre(CivilAviationGeneralHospital),CAAC,Beijing100023,China[Abstract]Objective:TodevelopaquantitativemethodforthedeterminationofVitaminCinVi taminCInjection.Methods:Phenomenexluna-NH2column(4.6mm× 250mm,5μm)wasusedaschromatographiccolumn,amixtureofaceton itrileanddibasicpotassiumphosphatebuffersolution(1∶1,v/v)wasusedasmobilephase,whi chwasadjustedtopH3.0byphosphoricacid,andthedetectionwavelengthwasat245nmwithafl owrateof1.0ml/min.Results:TheregressionequationwasY=29560X-21310(r=0.9995),whichwaslinearoverarangefrom5μ g/mlto30 μ g/ml.Theaveragerecovery was98.30%(n=9,RSD=2.1%).Conclusion:Thismethodissensitive,rapidandaccurate,whic hiscanbeusedfordeterminationofVitaminCinVitaminCInjection.[Keywords]HPLC;Vita minCInjection;VitaminC;Determination维生素 C 在临床上不单用于心血管系统、消化系统疾病的协助治疗，并且在眼科、口腔科和外科系统疾病的药物治疗中也十分常用 [1] 。

高效液相色谱法测定维生素C的含量摘要高效液相色谱法已经成为解决生命科学、医药学发展中各种难题的重要手段,在实验室中也广泛应用于物质的定性定量分析;本实验中利用高效液相色谱法对维生素C进行定量分析,所采用的定量分析方法为外标法,通过做出标准溶液浓度与峰面积的标准曲线进而对样品中的维生素C进行定量检测;关键词高效液相色谱法、维生素C、含量1、引言维生素CVitaminC,Vc又叫抗坏血酸,是一种水溶性维生素;Vc在体内参与多种反应,如氧化还原过程,在生物氧化和还原作用以及细胞呼吸中起重要作用;人体内缺乏Vc时容易导致坏血病;同时,由于Vc是一种水溶性的强有力抗氧化剂并参与胶原蛋白的合成,它同时还具有防癌、预防动脉硬化、治疗贫血、抗氧化和提高人体免疫力等功效;Vc在蔬果中普遍存在,尤其是柑桔类水果中含量较高;樱桃、番石榴、辣椒、猕猴桃等水果中Vc含量在50-300mg/100g;溶于流动相mobilephase中的各组分经过固定相时,由于与固定相stationaryphase发生作用吸附、分配、离子吸引、排阻、亲和的大小、强弱不同,在固定相中滞留时间不同,从而先后从固定相中流出;高效液相色谱法HighperformanceLiquidChromatography,HPLC是在经典液相色谱法的基础上,于60年代后期引入了气相色谱理论而迅速发展起来的;它与经典液相色谱法的区别是填料颗粒小而均匀,小颗粒具有高柱效,但会引起高阻力,需用高压输送流动相,故又称高压液相色谱法HighPressureLiquidChromatography,HPLC;HPLC系统一般由输液泵、进样器、色谱柱、检测器、数据记录及处理装置等组成;其中输液泵、色谱柱、检测器是关键部件;有的仪器还有梯度洗脱装置、在线脱气机、自动进样器、预柱或保护柱、柱温控制器等,现代HPLC仪还有微机控制系统,进行自动化仪器控制和数据处理;制备型HPLC仪还备有自动馏分收集装置;2、HPLC测定维生素C的含量2.1、仪器试剂2.1.1、仪器高效液相色谱仪Agilent1260,色谱柱：C18柱250mm×4.6mm,I.D.5μm；平头进样器; 2.1.2、试剂乙腈色谱纯,冰乙酸,维生素C,磷酸二氢钾等均为分析纯,实验用水为超纯水;Vc标准溶液：快速准确称取0.025gVc,用1mol/L乙酸溶液溶解,定量转移至250mL容量瓶中,用1mol/L乙酸溶液定容,得到100mg/L标准溶液备用,现用现配;2.1.3、色谱条件流动相：3%的乙腈-0.05mol/L KH2PO4水溶液v/v；流速1mL/min；柱温30℃,紫外检测波长265nm；进样量10μL;2.2、实验步骤2.2.1、样品处理1、按操作说明开启液相色谱仪,设定方法参数;2、样品准备：取10片维生素C片,研匀;准确称取0.02g,用1mol/L乙酸溶液溶解,定量转移至50mL容量瓶中,用1mol/L乙酸溶液定容,用0.45μm滤膜过滤;3、标准曲线绘制：分别配制5,20,50,80,100mg/L的Vc样品溶液,待液相色谱稳定后进样分析,平行测定3次;以Vc色谱峰面积对浓度作图,绘制标准曲线;4、定量分析：供试品溶液经0.45μm微孔滤膜过滤后进行HPLC分析;平行测定2次,记录其Vc的色谱峰面积,根据校准曲线计算维生素片中Vc的含量;5、实验结束后,按要求清理好仪器;3、数据处理不同Vc浓度对应色谱峰面积图表y=30.58x-14.146R2=1ysample=1892.33813代入上式有x=62.34mg/L4、实验结果讨论本实验中所采用的定量分析方法为外标法,即标准校正法;该法直接,易于操作,计算简单;但是标样与测定组分为统一化合物,分离、检测条件的稳定性对定量结果影响较大;除此方法外,常用的定量分析方法还有内标法、峰面积归一化法;至于定性分析,常用的方法为保留值定性,与已知物对照定性,还有安保柳枝经验规律定性;此外还有选择性检测响应定性,色谱-结构分析仪器联用等方法;在分析未知物时,首先要知道这个化合物化学物理常数,然后选择合适的样品处理方法,使样品有较好的萃提回收率和较少的干扰成分存在；而对于分离分析,如果使用紫外检测器,在这之前应先做个化合物的吸收波长扫描,以找出其最大吸收波长,流动相先用纯水和乙腈或甲醇在不同比例时进行调节,保证出峰时无干扰和一定的分离度,然后依据峰形和化合物的pKa值进行水相的pH值调节,以找到最佳的流动相体系;气相色谱仪具有分离选择性好、柱效高、速度快、检测灵敏度高、试样用量少、应用广泛等特点;但气相色谱仪也具有一点局限性,在没有纯标样的条件下,对试样中未知物的定性定量较为困难,往往需要与红外光谱、质谱等结构分析仪器联用,对于飞沸点高、热稳定性差、腐蚀性和反应活性强的物质,气相色谱仪分析比较困难;高效液相色谱法与气象色谱法相似,具有高速、高效、高选择性、高灵敏度的特点,但仪器设备相对复杂,成本较高;高效液相色谱法尚缺少灵敏度高的通用型检测器,而且使用有机溶剂作为流动相容易污染环境,梯度洗脱操作复杂;。

药物分析设计性实验综述维生素C及其制剂的含量测定2015 年4 月摘要：本文简要介绍了维生素C的结构、性质，详述了维生素C的鉴别及含量测定的方法，如滴定分析法，分光光度法，电极法，薄层色谱法和高效液相色谱法等,并讨论各种方法的优缺点。

关键词：维生素C;鉴别；含量测定；前言：维生素C作为维持机体正常生理功能的重要维生素之一，不仅广泛参与机体氧化、还原等复杂代谢过程,还能促进体内胶原蛋白和粘多糖的合成,增加机体抵抗力。

缺乏时可引起造血机制障碍、贫血、微血管壁通透性增加，脆性增强，容易出血等坏血病症状,故其对人体健康有着重要的意义.维生素C是一种酸性己糖衍生物，具有烯醇式己糖内酯立体结构，分D和L两种立体构型,但只有L型有生理功效。

维生素C具有较强的还原性，在一定条件下氧化型和还原型可以互变，两者均具有生物活性.其C2和C3位上两个相邻的烯醇式羟基极易解离而释放出H+，故维生素C虽然不含自由羧基，仍具有有机酸的性质。

维生素C呈无色无臭的片状结晶体，易溶于水，不溶于脂。

在酸性环境中稳定,遇空气中氧、热、光、碱性物质,特别是有氧化酶及痕量铜、铁等金属离子存在时可促进其破坏速度。

维生素c的剂型主要有片剂、颗粒剂、泡腾剂、注射剂等维生素C分子结构图1 鉴别鉴别方法有：与氧化剂反应、薄层色谱法、紫外光谱法、红外光谱法等,本综述只讲述其中具有代表性的两种。

1.1与硝酸银反应：：除维生素C钙、维生素C钠、维生素注射液、维生素C银翘片,其余制剂均可用此方法.1。

1。

1原理维生素C与硝酸银发生氧化还原反应，产生黑色金属银沉淀1.1。

2方法取维生素C 0。

2 g，加水10 mL溶解。

取该溶液5 mL，加硝酸银试液0.5 mL,即生成金属银的黑色沉淀。

1。

2与二氯靛酚钠反应：除维生素C注射液和维生素C钠制剂，其余均可用此方法。

1.2.1原理2，6-二氯靛酚是一种染料，其氧化型在酸性介质中呈玫瑰红色，在碱性介质中显蓝色，与维生素C反应后生成还原型无色的酚亚胺。

实验二维生素C含量的测定一、原理维生素C又称抗坏血酸，是所有具有抗坏血酸生物活性的化合物的统称。

结晶抗坏血酸在空气中稳定，但它在水溶液中易被空气和其他氧化剂氧化，生成脱氢抗坏血酸；在碱性条件下易分解，见光加速分解；在弱酸条件中较稳定。

维生素C不仅具有广泛的生理功能,能防止坏血病，关节肿，促进外伤愈合，使机体增强抵抗能力。

而且在食品工业上常用作抗氧化剂、酸味剂及强化剂。

因此，测定食品中维生素C的含量以评价食品品质及食品加工过程中维生素C的变化情况具有重要的意义。

目前测定维生素C的方法很多，常用的有2，6-二氯靛酚滴定法、荧光法、高效液相色谱法等。

紫外测定法是维生素C快速测定的方法，操作简单，不受其它还原性物质等成分的干扰。

其原理是根据维生素C具有对紫外光产生吸收、对碱不稳定的特性，在243nm处测定样品液与碱处理样品液两者吸光度值之差，并通过标准曲线，即可计算出维生素C的含量。

二、材料、试剂与仪器材料：各种水果蔬菜、果汁及饮料试剂：（1）10%HCl：取133mL浓盐酸，加水稀释至500mL；（2）1% HCl：取22mL浓盐酸，加水稀释至100mL；（3）1mol/L NaOH溶液：称取40g 氢氧化钠，加蒸馏水，不断搅拌至溶解，然后定容至1000mL。

仪器：紫外分光光度计，离心机，分析天平，容量瓶（10、25mL），移液管（0.5、1.0mL），吸管，研钵。

三、操作步骤（一）标准曲线的制作1、维生素C标准溶液的配制：在分析天平上准确称取抗坏血酸10mg，加2mL10%HCl，再蒸馏水定容至100mL，混匀，即为100μg/mL维生素C标准溶液。

2、测定并制作标准曲线：取具塞刻度试管8支，依序加入100μg/mL维生素C标准溶液0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.8、1.0mL，分别补加蒸馏水至10.0mL，摇匀。

以蒸馏水为空白，在243nm处测定标准系列维生素C溶液的吸光度。

以维生素C的量（μg）为横坐标，以对应的吸光度（A243）为纵坐标作标准曲线。