1.目的：
规范利福平检验操作，保证利福平的质量。
2.范围：
适用于公司的利福平的检验。
3.责任：
质量管理科、中心化验室主任、检验员对本规程的实施负责。
4.检验依据：
《英国药典》2015版。
5.取样依据：
按《成品取样标准操作规程》取样。
6.内容:
6.1性状
◆颜色
●测定方法：取本品适量，置白色背景下，平铺，检视。
●标准规定：为红褐色或棕红色的结晶性粉末。
6.2鉴别
◆紫外光谱法
●仪器：紫外可见分光光度计。
●试剂：甲醇、磷酸二氢钾、氢氧化钠、均为分析纯。
➢磷酸盐缓冲液（PH7.4）：取磷酸二氢钾1.36g，加0.1mol/L氢氧化钠溶液79ml，用水稀释至200ml，既得。
➢空白溶液：精密量取1ml甲醇，置50ml量瓶中，加磷酸盐缓冲液（PH7.4）稀释至刻度，摇匀，既得。
◆操作方法：
➢供试品溶液制备：精密称取本品约50mg，置50ml量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取1ml，置50ml量瓶中，加磷酸盐缓冲液（PH7.4）稀释至刻度，摇匀，制成每1ml中约含20ug的溶液，作为供试品溶液。
◆测定方法：照紫外-可见分光光度法测定。
➢参比池和样品池均加入空白溶液（用已配对的石英吸收池），在500nm～220nm波长范围内进行基线校正。
➢以空气为参比，在500nm～220nm波长范围内扫描空白溶液，吸光度应符合下表规定。
记录紫外光谱图。
◆标准规定：在237nm、254nm、334nm和475nm的波长处有最大吸收，在334nm与475nm吸收度比值约为1.75
◆红外光谱法
●试剂:溴化钾，为分析纯。
●仪器：红外分光光度计。
●测定方法：取供试品约1.5～2.5mg，置玛瑙研钵中，加入干燥的溴化钾细粉约200～300mg作为分散剂，充分研磨混匀，置压片模具中压制成供试片（目视检测，片子应呈透明状，其中样品分布应均匀，并无明显的颗粒状样品），至红外光谱测定仪中扫描，记录供试品的红外光谱，按6.2.2.4标准规定进行判断。
●标准规定：本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱一致。
◆3项
●试剂与溶液过硫酸铵的磷酸盐缓冲液（PH7.4）
●测定方法：取本品25mg，加25ml水稀释成混悬液，振摇5分钟，过滤，取滤液5ml，加100g/L过磷酸铵的磷酸盐缓冲液（PH7.4）1ml，振摇几分钟，观察；
●标准规定：溶液颜色由橘黄色变为红紫色，且无沉淀生成。
6.3检查
◆酸度
●仪器：酸度计。
●操作方法：
➢供试品溶液的制备：称取本品约100mg，置25ml烧杯中，加新沸放冷除去二氧化碳的纯化水10ml，制成每1ml中含10mg的悬浮液。
➢测定方法：
✧取PH4.00、PH6.86两种标准缓冲液做仪器校正。
✧测定供试品溶液的PH值。
●标准规定：PH值应为4.5～6.5.
◆有关物质：照高效液相色谱法测定。
●仪器：高效液相色谱仪
●试剂与溶液：辛基硅烷键合硅胶、乙腈、210.1g/L枸橼酸溶液、136.1g/L磷酸二氢钾溶液、174.2g/L磷酸氢二钾溶液、磷酸、1.9g/L高氯酸钠、5.9g/L枸橼酸、20.9g/L磷酸二氢钾
●流动相的制备：配制混合溶液1000ml〔0.1%（V/V）磷酸，1.9g/L 高氯酸钠、5.9 g/L枸橼酸、20.9g/L磷酸二氢钾〕，取其中650ml与350ml 乙腈混合均匀后用真空泵经0.45ul有机滤膜过滤，再用超声波清洗器清洗30min备用。
●混合溶剂的制备：取10ml 210.1g/L枸橼酸、23ml 136.1g/L磷酸二氢钾、77ml 174.2g/L磷酸氢二钾混合均匀后，加水640ml与250ml乙腈混合均匀后待用。
●色谱条件与系统适用性试验：
色谱柱： C8 5u（125mm×4.6mm）
流速：1.5ml/min
检测波长：254nm
进样量： 20μl
● 操作方法：
➢ 利福平供试品溶液：精密称取利福平样品0.1g,加乙腈溶解并稀释至50.0ml ，取5.0ml 用混合溶剂稀释至50.0ml;
利福平对照品溶液： 取20.0mg 醌式利福平标准品，用乙腈溶解并稀释至100ml ，取1.0ml 标准溶液与1.0 ml 供试品溶液，用混合溶剂稀释至100ml 。
● 操作：注入空白溶液一针，再注入供试品溶液，记录色谱图至主成分峰保留时间的2倍。最后注入对照品溶液，调整检测器灵敏度使两个主要峰的高度不低于记录仪最大范围的一半，要求利福平主峰和醌式利福平峰的分离度应不低于4.0。
● 标准规定：醌式利福平峰面积不得大于对应对照品溶液中醌式利福平峰面积的1.5倍（1.5%）；除主峰和醌式利福平峰外，任何单峰面积不得大于对照品溶液中利福平峰面积的（1.0%）；其单峰面积总和不得大于对照品溶液中利福平峰面积的3.5倍（3.5%）。
◆ 干燥失重
● 仪器：真空干燥箱。
● 测定方法：取供试品，混合均匀，取约1.0g ，置（80℃、压力不超过670pa ）干燥至恒重的扁形称量瓶中，精密称定，在（80℃、压力不超过670pa ）干燥至恒重（干燥器中的干燥剂为硅胶，放冷至室温时间一般需30～60分钟）。
● 计算公式：干燥失重（%）= ×100% 式中 W 1 为称量瓶恒重的重量，g ；
W 2 W 1＋W 2－W 3
W2为供试品的重量，g；
W3为（称量瓶＋供试品）恒重的重量，g；
●标准规定：减失重量应不得过1.0%。
◆炽灼残渣
●仪器：高温箱形电阻炉。
●测定方法：取供试品2.0g,置已恒重的石英坩埚中,加硫酸2ml 使湿润,先水浴加热，再低温加热至硫酸蒸气除尽后,在600℃炽灼至完全灰化,移置干燥器内,放冷至室温,加入3～5滴15.8% W/V碳酸氨溶液，蒸干后，再在600℃炽灼至恒重（干燥器中的干燥剂为硅胶，放冷至室温时间一般需60分钟）。
●计算公式：炽灼残渣（%）= W3—W1 ×100%
W2
式中 W1为空坩埚的重量，g；
W2为供试品的重量，g；
W3为（坩埚＋残渣）恒重的重量，g；
●标准规定：遗留残渣不超过0.1%。
◆重金属
●试剂：硫酸、盐酸、氨试液、酚酞指示液、醋酸盐缓冲液（PH3.5）、标准铅溶液、硫代乙酰胺试液、硫酸镁、冰醋酸
●醋酸盐缓冲液（PH3.5）：取醋酸铵25g，加水25ml溶解后，加7mol/L 盐酸溶液38ml，用2mol/L盐酸溶液或5mol/L氨溶液准确调节PH值至
3.5（电位法指示），用水稀释至100ml，既得。
●硫代乙酰胺试液：取硫代乙酰胺4g，加水使溶解成100ml，至冰箱中保存。临用前取混合液（由1mol/L氢氧化钠溶液15ml、水5.0ml及甘油20ml组成）5.0ml，加上述硫代乙酰胺溶液1.0ml，置水浴上加热20秒钟，冷却，立即使用。
