第六章革兰阳性球菌
第一节葡萄球菌属
一、生物学特性：
1、革兰阳性，球形,，葡萄状排列
2、营养要求不高
3、菌落较大，可有色素，脂溶性
4、可有溶血圈，菌体表面可有SPA
5、触酶阳性
6、甘露醇发酵+
7、产生血浆凝固酶和毒素。
血浆凝固酶：使含有抗凝剂的人或兔血浆发生凝固的酶类物质。意义：①鉴别有无致病性的重要指标。②抵抗吞噬细胞的吞噬。③使化脓性病灶出现典型特点：浓汁粘稠、病灶局限、不易扩散、界限分明。
8、可产生耐热核酸酶
9、抵抗力较强，耐10-15%氯化钠，对碱性染料敏感。
10、耐药菌株多见
二、分类：
1、按色素分：
金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、腐生葡萄球菌。
2、按血浆凝固酶有无分类：
血浆凝固酶阳性和血浆凝固酶阴性葡萄球菌。
3、根据噬菌体分型：26型。
三、临床意义：
四.微生物学检验
1、标本采集:应在抗菌药物治疗前采集细菌增殖部位的标本, 如脓, 血, 脑脊液, 呕吐物等。
2、直接涂片: 有参考价值。
3、分离纯种: 接种血平板,或高盐平板。根据菌落及镜下形态挑选。
鉴定：
菌落及镜下形态、触酶试验阳性、血浆凝固酶试验阳性、耐热核酸酶试验阳性、甘露醇发酵试验阳性。
（1）血浆凝固酶试验
玻片法：检测菌体表面的凝固酶。直接将菌落混于人或兔血浆中,立即观察有无凝固。
试管法：检测菌体外的凝固酶。培养物和血浆混合，37 º C 4h 后观察结果。
（2）耐热核酸酶试验
在含核酸甲苯胺蓝平板上打孔；培养物沸水浴15min后加入孔中；35℃1h 观察结果。甲苯胺蓝变为红色者为阳性
4、肠毒素检测：病人分离株培养物，煮沸30min，接种幼猫腹腔，4小时内出现症状为阳性。
第二节链球菌属
一、生物学特性
1、革兰阳性，球形，呈链状排列。
2、多数在培养早期有荚膜。
3、营养要求高, 需血液或血清
4、血平板上形成灰白色、小菌落。
5、血平板上分别形成α、β、γ三种特征性溶血现象。
6、触酶阴性
7、可产生透明质酸酶等多种酶：扩散因子是浓汁稀薄，病灶扩散，病灶界限不清。
8、可产生多种毒性物质
9、抵抗力较差，耐药菌株少见。
二、分类
1、按溶血情况分
乙型溶血链球菌:致病力强
甲型溶血链球菌:致病力差
丙型溶血链球菌: 无致病力
2、按细胞壁多糖C抗原抗原性分为20群(A-Z)，90%病原菌在A群
三、临床意义
四、微生物学检验n
1、标本采集：主要是咽拭子,脑脊液，痰，脓等。
2、直接涂片：有参考价值。
3、分离纯种：接种血平板，根据菌落及镜下形态挑选。
4、鉴定
（1）菌落及镜下形态
（2）触酶试验阴性
（3）杆菌肽敏感试验：A群敏感。将0.04U杆菌肽药敏纸片贴在涂布有待测菌的羊血琼脂平板上，35℃孵育过夜后，观察抑菌环以判断是否为敏感。＞10mm敏感，＜10mm不敏感。
（4）CAMP试验：B群阳性。B群链球菌能产生CAMP因子，它可促进葡萄球菌溶血的能力。先将金黄色葡萄球菌沿直径划线接种，再沿该线垂直方向接种B群链球菌，两线不得相接，间隔0.5cm，37℃孵育过夜，两种划线交界处出现箭头状溶血，即为阳性反应。（5）血清学试验定群：群特异性Ag
（6）抗O溶血素试验：活动性风湿热抗体效价＞1:400
五、肺炎链球菌鉴定
1、革兰阳性，个体成对排列，矛尖状，有荚膜。
2、菌落为草绿色溶血，有自溶酶，菌落顶部可下陷（脐窝状）。
3、胆汁溶菌试验阳性：胆盐能通过活化肺炎链球菌的自溶酶而将肺炎链球菌溶解。将0.5ml 的麦氏浓度细菌悬液和等量的2%去氧胆盐置于试管内，35ºC 孵育2h后，菌液变清为阳性。
4、对Optochin 敏感：5µg,>14mm
六、总结
1、链球菌是人和某些动物的寄生菌。
2、草绿色链球菌为正常菌群的成员, 可引起内源性感染。
3、A群化脓性链球菌菌落为β溶血,可引起多种疾病,诊断时,可分离细菌,也可检测ASO。
4、肺炎链球菌菌落为α溶血,但在生物学性状和致病性上与绿链有差异。
第八章肠杆菌科
第一节概述
一、共同特征
1、可能存在于人和动物肠道的革兰阴性杆菌，有的是正常菌群，有的是病原菌。可引起肠道外或肠道内的感染。临床检出率最高。
2、多有周鞭毛，能运动，有的有菌毛。
3、有H,O,K等抗原。
4、能发酵多种糖，乳糖有鉴别意义。
5、能抵抗胆汁和某些染料。
6、镜下形态几无鉴别意义,鉴定以生化反应和抗原性为主。
二、肠杆菌常用培养基
培养基鉴别物抑制物指示剂
●MAC 乳糖胆盐中性红
●EMB 乳糖伊红美兰伊红
●SS 乳糖胆盐中性红,枸櫞酸
●铁KIA 乳糖,葡萄糖酚红，硫酸亚铁
●糖发酵糖酚红
●枸橼酸枸橼酸溴麝香草酚兰
2、KIA（克氏铁琼脂）
上层下层解释
黄色黄色葡+，乳+ （KA——）
红色黄色葡+，乳—（AA+—）
红色黄色，黑色葡+，乳—，H2S+ （KA—+）
3、MIU：
半固体培养基加尿素,酚红,孵育后观察
M(MOTILE):观察半固体培养基中接种线情况
I(INDOL):加试剂
U(UREA): PH升高,指示剂变红
4、IMVC
I:胨水基培养物加试剂,红色为阳性
M(甲基红):葡萄糖胨水基培养物,加甲基红,红色为阳性
V-P:葡萄糖胨水基加试剂,红色为阳性
C:以枸櫞酸为碳源,生长,变兰为阳性
三、肠杆菌科和类似菌的区别：
葡萄糖发酵氧化酶鞭毛
肠杆菌 + —周
弧菌 + +单/丛
非发酵菌— + 单/丛/周
