万寿菊叶斑病的发生及病原鉴定_王龙

对分离到的致病菌，在 ＰＤＡ 和 ＰＣＡ 平板培
该菌与万寿菊链格孢（Ａｌｔｅｒｎａｒｉａ ｔａｇｅｔｉｃａ）的形态明显
养基上培养，１周后的菌落形态是： 菌落墨绿色或 不同［３］，与侵染菊科植物的链格孢（Ａｌｔｅｒｎａｒｉａ ｓｏｎｃｈｉ）类
橄榄色，后期黑褐色，气生菌丝丰富，棉絮状，分 似，但有关其它链格孢为害万寿菊的报道还未见诸于文
色； 有２～４个横隔，０～３ 个纵隔，分隔处有缢 枯病的病原是真菌链格孢（Ａｌｔｅｒｎａｒｉａ ｓｐ．）。进一步摸清
了甘肃省武威黄羊河农场、古浪、白银地区景泰县万寿菊
叶斑病的病害发生、分布、为害情况。调查结果表明，该
病在上述地区普遍发生，发病率一般在５０％～８０％，轻者
也有２０％，严重地块达到９５％。发病率高，但早期没有引 起重视的原因是： 万寿菊栽培密度较大，早期不易被发现。
生产技术［Ｊ］． 黑龙江农业科学，２００５，（２）： ２６－２８ ［６］ 孟有儒． 甘肃省经济植物病害志［Ｍ］． 兰州： 甘肃科学技
术出版社，２００３
创 南方农业·园林花卉版 新研究
2007.2 总第 4 期
发病率（％） ７７ ８６ ５４ ５４ ２３ ６１ ３９ ７２ ５５ ７７ ８５ ７７ ８６ ７８ ９５
病情指数 ２１．５０ ２４．７５ １６．００ １５．７５ ５．７５ １７．００ １１．００ ２０．２５ １４．２５ ２１．２５ ２８．２５ ２７．２５ ２５．５０ ３１．５０ ４８．５０
菌株
接种株数
种药用植物）发病较轻。
病块组织，分离到１６０ 个菌落。根据菌落形态将其归为３
２．２ 万寿菊叶斑病的症状
类，其中链格孢属（Ａｌｔｅｒｎａｒｉａ ｓｐ．）为１４９株，占７４．５％，
万寿菊叶斑病在甘肃省万寿菊栽培区从幼苗 灰霉菌（Ｂｏｔｒｙｔｉｓ ｓｐ．）为４株，占２％，其他７株，占３．５％。
期到成株期均可发生，病菌主要为害叶、茎、花。 在链格孢中，根据菌落颜色分为Ｈ１ 和Ｈ２ 两类。
谱［Ｍ］． 北京： 蓝天出版社，２００１ ［３］ 张天宇． 中国菊科植物上链格孢属真菌的种［Ｊ］． 云南农
业大学学报，２００２，１７（４）： ３２０－３２４ ［４］ 吴利敏，赵梁军等． 三种草花种子寄藏真菌检测与鉴
定［Ｊ］． 种子，２００４，２３（７）： ３－９ ［５］ 贾兰虹，刘兆东等． 延寿县万寿菊生态栽培防治病害
Ｈ１
５０
Ｈ２
５０
ＣＫ
５０
摩擦接种 发病株数 ４１ ３７ ０
表２ 万寿菊叶斑病致病性测定
发病率（％） ８２．０ ７４．０ ０
接种株数 ５０ ５０ ５０
喷雾法接种 发病ຫໍສະໝຸດ Baidu数
２７ ２５ ０
发病率（％） ４７．０ ５０．０ ０
植株发病（表２），发病症状与田间一致，从接种 缩； 喙较短，柱状，大小为（２．７４～４．５）×（２．４～４．１６） μｍ，
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造成严重损失。为了搞清引起叶斑病的病原，以期为
在室内对植株不同发病部位（叶、茎、花）进行
生产上有效地控制该病提供依据。２００５年９月至２００６ 常规分离，即切取小块病组织，用７５％的酒精擦拭组
年９月我们在万寿菊栽培区对叶斑病的发生情况进行 织表面后用０．１％的升汞水溶液表面消毒１ ｍｉｎ，然后
了调查研究，并在室内对万寿菊叶斑病病原进行了 用无菌水冲洗３次，将病组织移植于ＰＤＡ平板培养基
生孢子梗单生或簇生，直或向一侧弯曲，浅褐色， 献。有关种类有待于进一步深入研究。
有分隔。分生孢子的大小为（１８．３～２５．４）×（８．８～
１２．０） μｍ， 平均为２１．６×１０．６ μｍ； 倒棍棒形、 ３ 小结
长卵圆形、梭形等； 初色浅，后呈黄褐色、深褐
通过本次调查和病原菌鉴定，初步确定引起万寿菊叶
的健康万寿菊植株上均可重新分离获得同一病原 无分隔。
菌，说明病菌可以从伤口或自然孔口直接侵入，
分离到的 ２ 个菌株，尽管菌落颜色有一些差异，但在
但有伤口比无伤口发病速度更快，且致病率高。 主要形态特征方面没有显著差异，认为属于同一种，确定
２．５ 病原菌的形态特征
为链格孢（Ａｌｔｅｒｎａｒｉａ ｓｐ．）。
２ 结果与分析
逐渐扩大形成椭圆形或不规则形的紫褐色病斑。发病严重
２．１ 田间调查结果
时，病斑连片，造成叶片枯死。
从调查结果（表 １）可以看出，万寿菊叶斑
（３）茎部染病，多从叶腋处先发生，并向新生枝及主
病在甘肃省黄羊河农场、古浪县和景泰县万寿菊 茎扩展，造成病部变褐变紫，病斑多为圆形或长椭圆形。
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在调查时发现，所有底部叶片几乎都有叶斑发生，说明叶
斑病在早期就发病普遍，只是在生长后期才为害植株上
部，导致花器、心叶枯死。所以应注意及早观察底部叶片
的发病情况，以便及时有效地实施防治。
图１ 万寿菊叶斑病病菌分离出的菌落 图２ 万寿菊叶斑病分生孢子形态
【参考文献】
［１］ 鲁涤非． 花卉学［Ｍ］． 北京： 中国农业出版社，１９９８ ［２］ 吕佩坷，段半锁，苏慧兰，等． 中国花卉病虫原色图
重，武威市黄羊河农场次之，古浪县发病相对较 瓣染病，引起花瓣凋萎，严重时整朵花密布病斑，花瓣变
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轻； 从不同前茬作物与发病的关系看，前茬为胡 褐枯死，苞片变黑，严重影响产量和品质。 麻发病严重，荒地或贫瘠土地发病也较重，前茬 ２．３ 病原菌分离
种植大麦、小麦和玉米发病次之，前茬为百号（一
采用组织分离法，在 ＰＤＡ 培养基上先后分离 ２００ 个
按照分类系统确定病原菌的种类。对有些不产孢 从叶片缘处或从叶片中部开始发生。初期病斑如针尖大
子的种类，采用不同的营养要求和培养条件来诱 小，褐色，圆形或椭圆形，少数不规则形，中央灰白或黄
发和刺激产孢，根据相关文献鉴定病原种类。 白色，边缘黑褐色坏死，叶背面的病斑呈黄褐色。病斑一
般直径大小为 ０．５ ｍｍ，最大直径可达 ７．０ ｍｍ。以后病斑
调查、采样，采集不同阶段不同发病部位及不同症状 于２５ ℃温室内，连续观察并记录发病情况、发病症
表现的植株，将标本用吸水纸压干，填写好标本登记 状，之后再分离。
１．５ 病原菌形态特征
※通讯作者
对有致病性的菌株，依据真菌学常规方法，在
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创新研究 南方农业·园林花卉版
万寿菊叶斑病的发生及 病原鉴定
王 龙 １，张霄凌 ２，何冬云１，杨义荣 ２，王生荣 １ ※，王致和 ２，陈 乓１ （１ 甘肃农业大学草业学院，兰州 ７３００７０；２甘肃省农垦农业科学研究院，兰州 ７３３００６）
摘 要： ２００６年对万寿菊叶斑病在甘肃主要栽培区的武威黄羊镇、古浪、景泰等地发生情况的调查结果 表明，发病率在３３％～８５％，病情指数在５．７～４８．０。通过室内分离鉴定，确定引起当地万寿菊叶斑病的病原 为真菌类的链格孢Ａｌｔｅｒｎａｒｉａ ｓｐ．。
因素，特别是万寿菊叶斑病的发生，可导致万寿菊叶 １．２ 万寿菊叶斑病的症状描述
片早枯，花蕾凋萎。其发病率一般在２０％～３０％，严
在室内首先对标本进行症状描述： 病斑着生部位、
重时可达９５％以上，尤其７月中旬以后显著加重，而 形状、颜色、大小及其它特征等。 且蔓延迅速，短时间内即可蔓延至全田，普遍发生， １．３ 病原菌的分离与纯化
（１）苗期发病，叶片正面产生针尖大小褐色 ２．４ 致病性测定
或红褐色圆形、近圆形病斑，病斑中央灰白色或
对链格孢的２种菌株采用摩擦和喷雾接种方法均可使
调查地点 武威市黄羊河农场 古浪县土门新胜村
景泰县草窝滩
农户 刘永吉 张建辉 田全华 张海德 何宝祥 胡某 王某 董明堂 贺中祥 刘忠财 张守元 黄育忠 王宝月 仁学燕 仁学银
关键词： 万寿菊； 叶斑病； 病害调查； 病原鉴定； 链格孢
万寿菊（Ｔａｇｅｔｅｓ ｅｒｅｃｔａ Ｌ．）作为观赏植物和药 卡，以备室内鉴定。
用植物在世界上有广泛分布，是园林中常见的草本
调查分级标准如下： ０级—植株无症状； １级—
花卉。作为药用植物，其花和根可入药，有清热解毒、 植株下部叶片有零星病斑，发病叶片少于１％； ２级
表１ 万寿菊叶斑病田间调查结果
前茬 大麦 大麦 大麦 玉米 百号 小麦 小麦 荒地 洋芋 不详 歇地 洋芋 杨树林 胡麻 小麦
调查株数 １００ １００ １００ １００ １００ １００ １００ １００ １００ １００ １００ １００ １００ １００ １００
发病株数 ７７ ８６ ５４ ５４ ２３ ６１ ３９ ７２ ５５ ７７ ８５ ７７ ８６ ７８ ９５
分离鉴定。
上，在２５ ℃下培养，待长出菌落后将分离物进行编
１ 材料与方法
号； 利用２％琼脂培养基进行稀释纯化，将配好的孢 子液滴移到琼脂平板培养基，镜检只有单个孢子的部
１．１ 万寿菊叶斑病田间调查
位，做好标记再移植，从而得到纯培养菌株［２－６］。
２００５ 年９ 月至２００６ 年９ 月，先后对甘肃省武威 １．４ 致病性测定
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ＰＣＡ 平板培养基上培养 ５～７ 天，观察并记录各 黄白色，边缘黑褐色，叶片背面的病斑边缘不规则。温湿
菌株的菌落形状、色泽； 用显微镜镜检测定分生 度适宜时，病叶上密布褐色小点，并可愈合成片，严重时
孢子梗的大小、着生部位、形态，记载分生孢子 造成叶片枯死，导致死苗。
纵横隔膜的数目、颜色，喙的有无、长短及形态。 （２）成株期叶片发病，自下部叶片逐渐向上部蔓延，
市黄羊镇、古浪县和白银市景泰县万寿菊栽培基地
将获得的各菌株用ＰＤＡ培养基培养于２５ ℃温箱
万寿菊叶斑病的发生情况（病害的发生、为害程度、 中培养５～７天，配成浓度为１０５～１０６个孢子／ｍＬ的
产量损失估计）进行了专项调查。调查采用５点取样 孢子悬浮液，分别采用普通喷雾法、高压喷雾法及摩
法，每样点取样２０株。对栽培区不同发病类型进行 擦接种法对健康万寿菊植株进行接种［３－５］。接种后置
化痰止咳、解毒消肿之功能［１，２］。近年来，其鲜花又 —植株中部、下部叶片发病，发病叶片在１％～５％
成为提取天然食用色素的一种工业原料，市场应用 之间； ３级—植株叶片发病在５％～２０％之间，病斑
前景广阔，国际需求量不断增加。但是随着种植面积 有愈合发生； ４级—植株发病严重，叶片枯死，花及
的扩大，病虫害的严重发生成为其发展的一个限制 花萼受到侵染枯死变黑。
栽培基地普遍发生，发病率一般在２３％～９５％。 严重时，病斑可以布满茎表，使茎的表皮呈紫褐色，造成
但发病的严重程度各地差异较大，病情指数低的 植株生长衰弱。摘花后常从摘口处向下变黑干枯。
只有５．７５，病情指数最高的地块可达４８．５； 从各地
（４）花部受害，多从花萼开始，初为褐色小点，中央
的发病情况来看，白银市景泰县病害发生较为严 灰白色，边缘有紫褐色坏死线，以后逐渐扩展，并引起花