云南省医学会病理学分会各位常委、委员，各有关单位： 为满足临床需求，提升我省病理诊断水平，有条件的病理科应开展临床分子病理检查。我分会经研究，委托成都军区昆明总医院病理科分子病理室对临床分子病理检查所需人员、设施、设备、试剂进行整理，提供给各位，供今后开展相关分子病理检查参考。
附：《临床分子病理检查所需人员、设施、设备、试剂》
云南省医学会病理学分会
2014-2-7
临床分子病理检查所需人员、设施、设备、试剂
一． 显色原位杂交
（一）可应用范围
（1）EBER病毒EBER1/EBER2原位杂交检测；
（2）人乳头瘤病毒HPV低危6/11型、高危16/18型原位杂交检测。
（二）人员基本要求
1. 签发报告医师：取得《医师资格证书》，执业范围为病理专业的本院在职医师。有2年以上病理诊断的工作经验，具有主治医师及以上专业技术职务任职资格，进行过相关技术的诊断培训或进修学习。
2. 配备专职分子病理技术员：大专以上学历，具备病理学、分子生物学的基础知识。
（三）场地要求：独立的分子病理室。
（四）所需仪器设备及试剂
1．仪器设备
（1）原位杂交仪（目前本实验室使用的型号为ThermoBrite S 500.24，下同）（2）室温离心机（eppendorf 5415D）
（3）移液器，10 ul、50 ul、1000ul量程（eppendorf、大龙、美国伯乐等）（4）原位杂交加热器（福建泰普生物科学有限公司M10061）
（5）37℃温箱
（6）切片机（HM325）
（7）光学显微镜（OLYMPUS BX41）
（8）4℃冰箱（海尔BYC-326A）
（9）-20℃冰箱（三洋MDF-U333）
2．试剂
（1）EBER原位杂交推荐试剂：福建泰普生物科学（中国）有限公司EBER1/EBER2原位杂交试剂盒。
（2）HPV原位杂交推荐试剂：北京中杉金桥生物技术有限公司HPV6/11、16/18原位杂交试剂盒。
二．荧光原位杂交
（一）可应用范围
（1）乳腺癌HER-2基因扩增荧光原位杂交检测；
（2）软组织肿瘤诊断等。
（二）人员基本要求
1. 签发报告医师：取得《医师资格证书》，执业范围为病理专业的本院在职医师。有2年以上病理诊断的工作经验，具有主治医师及以上专业技术职务任职资格，进行过相关技术的诊断培训或进修学习。
2. 配备专职分子病理技术员：大专以上学历，具备病理学、分子生物学的基础知识。
（三）场地要求：独立的分子病理室。
（四）所需仪器设备及试剂
1．仪器设备
（1）原位杂交仪（目前本实验室使用的型号为ThermoBrite S 500.24，下同）（2）室温离心机（eppendorf 5415D）
（3）移液器，10 ul、50 ul、1000ul量程（eppendorf、大龙、美国伯乐等）（4）原位杂交加热器（福建泰普生物科学有限公司M10061）
（5）37℃温箱
（6）切片机（HM325）
（7）荧光显微镜（OLYMPUS BX51）
（8）4℃冰箱（海尔BYC-326A）
（9）-20℃冰箱（三洋MDF-U333）
2．试剂
（1）HER-2/neu荧光原位杂交检测（FISH法）推荐试剂：美国雅培公司PathVysion HER-2 DNA Probe kit-FDA Approved(货号：02J01-030)；广州安必平医药科技有限公司等。
（2）软组织肿瘤诊断推荐试剂：美国雅培公司等。
三．基于PCR技术的基因检测
（一）可应用范围
（1）淋巴瘤辅助诊断：Ig/TCR基因重排技术。
（2）肿瘤靶向治疗靶点检测：EGFR基因和Kras基因突变检测等。
（3）结核分枝杆菌检测。
（二）人员基本要求
1. 签发报告医师：取得《医师资格证书》，执业范围为病理专业的本院在职医师。有2年以上病理诊断的工作经验，具有主治医师及以上专业技术职务任职资格，进行过相关技术的诊断培训或进修学习。
2. 配备专职分子病理技术员：大专以上学历，具备病理学、分子生物学的基础知识。
（三）场地要求
独立的PCR室，原则上至少分为3 个独立的工作区域: 试剂储存和准备区、标本制备区、扩增区。
（四）所需仪器设备及试剂
1．仪器设备
（1）微量恒温器（目前本实验室使用的型号为HW-8C型，下同）
（2）移液器，2.5ul、10 ul、20 ul、50 ul、200 ul、1000ul量程（eppendorf、大龙、美国伯乐等）
（3）振荡器（G-560E）
（4）室温离心机（eppendorf 5415D）
（5）低温离心机（eppendorf5810R）
（6）电热恒温三用水浴箱（光明SHHW21.420）
（7）紫外分光光度计（NANODROP 2000）
（8）PCR仪（eppendorf Mastercycler gradient）
（9）荧光定量PCR仪（BIO-RAD CFX96）
（10）水平电泳仪（BIO-RAD：POWERPAC HC）
（11）4℃冰箱（海尔BYC-326A）
（12）-20℃冰箱（三洋MDF-U333）
（13）电子称0.001g
（14）制胶模具（北京六一仪器厂：24DN制胶器梳子1.5mm，15teeth）（15）微波炉
（16）琼脂糖制胶模具（BIO-RAD）
（17）凝胶成像系统（GENE GENIUS）
2．试剂
（1）Ig/TCR基因重排技术推荐试剂：
①DNA提取试剂盒：德国凯杰公司QIAamp? DNA FFPE Tissue Kit(Cat.56404)
②北京思尔成生物技术有限公司代理的试剂盒：美国ivivoscribe 公司的IdentiClone? IGH Gene Clonality Assay（货号：9-101-0020）；
IdentiClone? IGK Gene Clonality Assay（货号：9-102-0020）；
IdentiClone? IGL Gene Clonality Assay（货号：9-103-0010）；
IdentiClone? TCRB Gene Clonality Assay（货号：9-205-0010）；
IdentiClone? TCRG Gene Clonality Assay（货号：9-207-0020）；
IdentiClone? TCRD Gene Clonality Assay（货号：9-206-0010）。
（2）EGFR基因和Kras基因突变检测（荧光定量PCR法）推荐试剂：
①DNA提取试剂盒：德国凯杰公司QIAamp? DNA FFPE Tissue Kit(Cat.56404)
②北京雅康博生物科技有限公司：
人EGFR基因突变检测试剂盒（荧光PCR法）10人份；
人Kras基因突变检测试剂盒（荧光PCR法）10人份。
③厦门艾德生物医药科技有限公司
（3）结核分枝杆菌检测（荧光定量PCR法）推荐试剂：
①中山大学达安基因股份有限公司结核分枝杆菌核酸检测试剂盒20人份（PCR-荧光法）（货号：DA-052）
②德国凯杰结核分枝杆菌核酸检测试剂盒48人份（PCR-荧光法）（货号：1061085）