微生物 考试重点 南工大
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一.原核微生物
1.G-细菌细胞壁有两层,内壁层,约2-3nm厚,以肽聚糖为主要成分,外层称为外壁层,约8-10nm厚,含有脂多糖成分。G+ 细菌的细胞壁有一层,其厚度为20-80nm ,磷壁酸是G+细菌细胞壁所特有的化学成分。G+与G-细菌细胞壁差异为前者G+肽聚糖含量高,后者G-脂类含量高。
2. 中间体:是由细胞膜局部内陷折叠形成的不规则的层状,管状或囊状结构。一般位于细胞的中间。
3. 革兰氏染色:丹麦科学家Gram发明的一种细菌染色法。染色方法为:在一个已固定的细菌涂片上用结晶紫染色,再加媒染剂---碘液处理,使菌体着色,然后用乙醇脱色,最后用蕃红复染。显微镜下菌体呈紫色者为
G+细菌,菌体呈红色者为G- 细菌。
Cell壁解释机制:革兰氏染色是原生质染色,染色后细胞内形成了深紫色的结晶紫-碘的复合物,而脱色与否则决定于细菌细胞壁的结构和组成
由于G+细菌细胞壁较厚,尤其是肽聚糖含量较高,网格结构紧密,含脂量又低,当它被酒精脱色时,引起细胞壁肽聚糖层网状结构的孔径缩小以至关闭,从而阻止了不溶性结晶紫-碘复体物的逸出,故菌体呈紫色。而G-细菌的细胞壁肽聚糖层较薄,含量较少,而脂类含量高,当酒精脱色时,脂类物质溶解,细胞壁透性增大,结晶紫-碘复合物也随之被抽提出来,故G-菌体呈复染液的红色。
4. 无电子显微镜,判断是否属于有鞭毛的菌? (1)通过特殊的鞭毛染色法,使鞭毛加粗后在光学显微镜下可见;(2)在暗视野中观察悬滴标本中细菌运动情况(3)在固体培养基中穿刺接种某一细菌,如果在其穿刺线周围有混浊的扩散区,说明该菌具有扩散能力,即可推测其存在着鞭毛,反之则无鞭毛
5.原生质体:在人工条件下用溶菌酶除尽原有细胞壁或用青霉素抑制细胞壁的合成后,所留下的仅由细胞膜包裹的脆弱细胞, 一般由G+菌形成。
球状体(原生质球):用人工方法去壁不完全所留下的部分,一般由G-所形成。
L型细菌:在某些环境条件下自发突变形成无细胞壁的缺壁细菌。
枝原体:自然界长期进化中形成的无细胞壁的细菌。
6. 芽孢抗逆性:芽孢的含水量低,特别是自由水远低于营养细胞,使核酸和蛋白质不易变性。芽孢的酶组成型与细胞的酶组成型有差别,芽孢只含有少量酶,并处于不活跃状态。含有2,6-吡啶二羧酸。芽孢壁厚。芽孢中含硫氨基酸高。
芽孢重要性:芽孢的有无在细菌鉴定中是一项重要的形态指标。芽孢的有无有利于这类菌种的筛选和保藏。由于芽孢有很强的耐热性和其他抗性,因此是否能杀灭一些代表菌的芽孢就成了衡量各种消毒灭菌措施的主要指标。
二.真核微生物
1.真菌:具有细胞壁,不含叶绿素,异养型并进行吸收营养,菌丝呈分枝的丝状和以孢子进行繁殖的单细胞或多细胞真核生物。
作用:真菌积极参与土壤有机物质的矿质化和腐质殖的形成,是土壤肥力必需的转化因子,是自然界物质循环的重要组成部分。在酿造业、发酵工业上被广泛用来生产酒、酱、豆腐乳,用来生产抗生素、有机酸、酶制剂、维生素、甾体激素等。在农业生产中用作饲料发酵、添加剂、生产植物生长激素、杀虫农药,与植物形成菌根吸收矿质营养。
弊:动植物病害的病源菌,使粮食及农副产品在贮藏运输中造成霉烂变质变坏,还引起衣物、器材、工具、仪器及工业原料的霉变。真菌还产生毒素物质,严重威胁人、畜的健康。
2.比较细菌、放线菌和真菌的个体和菌落形态特征。
(1)细菌的个体形态:单细胞球状、杆状或螺旋状。菌落形态:圆形或不规则,边缘光滑,或不整齐;大小不一,表面光滑或皱褶;颜色不一,常见颜色为灰白色、乳白色,湿润粘稠。
(2)放线菌的个体形态:呈分枝丝状体,宽度与细菌相似,为无隔膜多核菌丝,在固体基质上有基内菌丝、气生菌丝之分。菌落形态:呈干燥细致的粉末状或茸毛状,与培养基结合较紧。
(3)酵母菌的个体形态:呈圆形或卵圆形或形成假菌丝,个体比细菌大。菌落形态:颇似细菌菌落,但比细菌菌落大而且厚,湿润粘稠;多为乳白色;一般圆形;表面光滑
(4)霉菌的个体形态:呈分枝丝状,分枝丝状体与放线菌比较,菌丝宽度比放线菌大;有有隔膜菌丝和无隔膜菌丝之分;与细菌比较,有营养菌丝,气生菌丝和繁殖菌丝之分。菌落形态:表面呈绒毛状或棉絮状,如呈粉末状者则不及放线菌细腻致密,在固体基质上也有则差异显著。
三.病毒
1.烈性噬菌体入侵寄主的过程可分为吸附,侵入,复制,组装,释放等五个阶段。以核酸复制进行繁殖,
从生长曲线上可以将其分为潜伏期,裂解期,平稳期等三个时期。
2.检查细菌是否被噬菌体感染的方法,通常是观察菌苔是否能出现透明空斑,检查细菌液体培养物是否变清。3.噬菌体:是侵染细菌,放线菌的病毒,具有一般病毒的特征。
4. 病毒:病毒是一类个体微小的,没有细胞结构的,专性寄生于活细胞内的微生物,在细胞外具有大分子特征,在活细胞内部具有生命特征。病毒的核心为核酸,衣壳为蛋白质,包膜为脂类。
5. 溶源细胞:含有温和噬菌体的寄主细胞称为溶源细胞,或叫细胞溶源化,溶源细胞在正常情况下,以极低的频率(10-6)发生自发裂解,在用物理或化学方式处理后,会发生大量裂解。
6. 简述溶源性细胞的形成过程及其特点。
当温和性噬菌体侵入宿主细胞后,其DNA会附着或整合在宿主细胞的染色体上,随寄主细胞DNA的复制而复制,噬菌体蛋白质不合成,宿主细胞亦不裂解,形成的细胞(即溶源细胞)继续进行分裂繁殖,偶尔情况下,会以极低频率发生自发裂解或因外界因素诱发而裂解。(1)溶源性是可遗传的(2)可低频自发裂解或诱发裂解(3)具有免疫性。即溶源性细菌细胞对其本身产生的噬菌体或外来同源噬菌体不敏感(4)可以复愈(5)可以合成特殊的代谢产物,如白喉杆菌被 噬菌体感染以后产生白喉毒素
7.一步生长曲线:以培养时间为横坐标,噬菌斑数为纵坐标所绘制的曲线,用以测定噬菌体侵染和成熟病毒体释放的时间间隔,并用以估计每个被侵染的细胞释放出来的噬菌体粒子数量的生长曲线称为一步生长曲线。
8. T4噬菌体:头部,劲环,伸展的尾鞘,中空的核心,刺突,尾丝。
四.微生物营养
1.主动运输(好氧细菌),基因转位(兼性厌氧和厌氧)::逆浓度梯度,耗能,载体。
单纯扩散:顺浓度。协助扩散(真核生物):顺浓度,载体
2. 微生物生长需要碳素,氮素,矿质营养,生长因素等营养物质,其主要生理功能分别叙述如下:(1)碳素营养物质:主要用来构成细胞物质和(或)为机体提供生命活动所需要的能量,常用糖类物质作C源。
(2)氮素营养物质:用作合成细胞物质中含N物质如蛋白质,核酸等的原料,及少数自养细菌的能源物质,常用铵盐,硝酸盐等无机氮源和牛肉膏,蛋白胨等作有机氮源。
(3)矿质营养物质,提供必要的金属元素。生理作用:参与酶的组成,成酶活性中心,维持细胞结构,调节和维持细胞渗透压。常用无机盐有:SO42-,Cl-,PO43-及含K+,Na+,Mg2+,Fe2+,Fe3+等金属元素的化合物。大量矿质元素包括P,S,K,Mg,Ca,Fe等六种。主要微量元素包括Mn,Mo,Co,Zn等四种。
(4)生长因素:构成酶的辅酶或辅基,构成酶活性所需成分,构成蛋白质或核酸的组分。常见的有维生素,氨基酸,碱基等。
3. 水的生理功能(1)水是微生物及一切生物细胞中含量最多的成分,活细胞的含水量可达总重量的75%-90%以上。水的生理功能:a:水可以维持细胞的膨压,以维持细胞的正常形态,是细胞的重要组成成分。b:水是许多营养物质的溶剂,以利营养物质的吸收和废物的排泄。c:水是一切生理生化反应的介质及一切新陈代谢的介质。d:水还可作为供氢体参与呼吸作用和光合作用。(2)水可以调节细胞温度
试验证明:缺水比饥饿更易导致生物死亡。
五.微生物代谢
1. 异养微生物合成代谢所需要的能量和还原力来自己糖降解的EMP途径,HMP途径,ED途径,TCA循环。
2.微生物的次生代谢产物包括:维生素,抗生素,生长刺激素,毒素,色素。
3.微生物的产能方式:发酵产能,呼吸产能,氧化无机物产能,靠光合磷酸化产能。
4.发酵:是在微生物细胞内发生的一种氧化还原反应,在反应过程中,有机物氧化放出的电子直接交给基质本身未完全氧化的某种中间产物,同时放出能量和各种不同的代谢产物。
5.呼吸作用:葡萄糖在好氧和兼性好氧微生物里通过氧化作用放出电子,该电子经电子传递链传给外源电子受体分子氧或其它氧化型化合物生成水或其它还原型产物,并伴随有能量放出的生物学过程称为呼吸作用。
6巴斯德效应:.在有氧状态下酒精发酵和糖酵解受抑制的现象。
六.生长及控制
1.最适PH:酵母菌,霉菌:4.5~5.5。真菌:5~6。细菌:6.5~7.5。放线菌:7.5~8或7.0~7.5。
2. 光波杀菌最强的波长范围是250-280nm。消毒效果最好的乙醇浓度为.70%。升汞用于实验室非金属器皿表面消毒的浓度通常为:0.1%。防腐的盐浓度通常为:10-15%。好氧微生物生长的最适氧化还原电位(Eh)值通常为:0.3-0.4V。在0.1V以上,好氧性微生物,+0.1V以下,厌氧性微生物。
3. 巴氏灭菌的工艺条件是.62-63℃ 30min。
高压蒸汽灭菌法常用的工艺条件是:98kpa,121℃,30min。将待灭菌的物件放置在乘有适量水的高压灭菌锅内,盖上锅盖,并打开排气阀,通过加热煮沸,让蒸气驱尽锅内原有的空气,然后关闭锅盖上的阀门,在继