2000年试题
一、简要解释下列名词概念
1．intron; exon
2．promoter; terminator
3．cDNA; antisense RNA
4．transposon; retrotransposon
5．hydrophilic; hydrophobic
6．leucine zipper; zinc finger
7．phosphorylation; glycosylation
8．rRNA; hnRNA
9．m7Gppp; poly(A)
10．restriction enzyme; ribozyme
二、简述原核生物和真核生物在染色体结构与DNA复制过程中的主要差异
三、何谓反转录?在何种情况下细胞内会发生反转录反应?举一例说明反转录反应在分子生物学研究技术中的应用。
四、何谓mRNA的二级结构?它有什么生物学意义?
五、举例说明DNA结合蛋白对基因转录的影响，另简述鉴别DNA结合蛋白在DNA分子上结合位点的两种常用方法。
六、简述质粒载体的结构与复制特征及其在分子生物学研究中的应用。
七、形态标记(morphological markers)分子标iE(molecular markers)都可用于基因定位，简要说明利用这两种标记进行基因定位的基本步骤。
八、在二十世纪，许多科学家因研究DNA、RNA或蛋白质而获得诺贝尔奖，举其中两例说明他们的成就对推动分子遗传学发展的重要意义。
2000年试题与参考答案
一、简要解释下列名词或概念
1．exon：外显子。原初转录物通过RNA拼接反应而保留于成熟RNA中的序列或基因中与成熟RNA 相对应的DNA序列。
intron：内含子。在原初转录物中通过RNA拼接反应而被去除的RNA序列或基因中与这种RNA序列相应的DNA序列。
2．promoter：启动子。DNA分子上结合RNA聚合酶并形成转录起始复合物的区域，在许多情况下还包括促进这一过程的调节蛋白结合位点。B. Lewin在Genes中这样定义启动子：“Promoter is a region of DNA involved in binding of RNA polymerase to initate transcription.”
terminator：终止子。促进转录终止的DNA序列，在RNA水平上通过转录出的终止子序列形成柄-loop 结构而起作用。又可分为依赖于ρ的终止子和不依赖于ρ的终止子两类。
3．cDNA：互补DNA。是指以RNA为模板在反转录酶作用下于体外合成的与该RNA分子互补的DNA 链。
antisense RNA：反义RNA。1983年，Mizuno和Simon等人差不多同时发现了反义RNA对基因表达的调控作用，从而提示了一种新的基因表达调控的机制。反义RNA是指与被调控的RNA或DNA序列互补的RNA，它通过配对碱基之间的氢键作用与特定的RNA或DNA形成双链复合物，影响RNA的正常修饰、翻译等过程，封闭或抑制基因的正常表达，起到调控作用。
4．transposon：转座子。能够进行复制并将一个拷贝插入新位点的DNA序列单位。
retrotransposon：反转录转座子。为了将RNA介导的转座作用与经典的DNA到DNA的转座相区别，
于是将RNA介导的转座作用称为反转录转座作用(retrotransposition)，被转移的遗传信息单位称为反转录转座子。
5．hydrophilic：亲水的。一个原子团被水溶剂化的倾向。用英语解释为：(1)Pertaining to molecule or groups that readily associate with H2O.(2)Pertaining to molecule that are solube in water. (指可溶性分子或基团表现出的易与水亲和的性质)
hydrophobic：疏水的。水介质中球状蛋白质的折叠总是倾向于把疏水基团埋藏在分子的内部，躲开与溶剂水的接触，这一现象是疏水相互作用。也就是说疏水的是指一个原子团抗水溶剂化的倾向。用英语解释为：(1)Literaly, water-hater, used to describe molecules or founctional groups in molecules that are, at best, only poorly Soluble in water. (2)Pertaining to molecule that do not mix with water. (用来描述只能微溶于水的分子或分子中某些功能团所表现出的与水互不相溶的性质。)
6．leucine zipper：亮氨酸拉链。是一类DNA结合结构域的新花式，这类蛋白质的主要代表为酵母的转录激活因子GCN4、癌蛋白Jun、Fos、Myc、增强子结合蛋白C/EBP等。所有这些蛋白都含有4或5个亮氨酸残基，精确地相距7个氨基酸残基。这样在α-螺旋的某一侧面每两圈就出现一个Leu，这些Leu排成一排，两个蛋白质分子的两个α-螺旋之间依赖亮氨酸残基之间的疏水作用力形成一条拉链。尽管亮氨酸拉链对于蛋白质二聚体的形成是十分重要的，但参与DNA直接作用的序列不在拉链区域。不同的亮氨酸拉链蛋白都有一个相同保守的区域参与DNA结合，通过亮氨酸拉链形成的二聚体可以与更广泛的基因片段相互作用，并且成为调控基因表达的一种模式。
zinc finger：锌指结构，在研究非洲爪蟾RNA聚合酶Ⅲ介导的5S rRNA基因转录因子TFⅢA蛋白的氨基酸序列时，发现该蛋白含有一个接一个小的重复单元，每一个重复单元结合一个Zn原子，形成一个独立的结构域，此后在RNA聚合酶Ⅱ转录基因的其他转录因子中也发现相似结构单元，因为这类结构域含有Zn原子，形状像指形，所以根据其结构特征将此类结构域称为锌指结构。
7．phosphorylation：磷酸化。在生物化学的反应中，涉及到磷酸基团的转移的过程叫磷酸化。分为两种，氧化磷酸化和底物水平磷酸化。氧化磷酸化是指A TP的生成基于与电子传递相偶联的磷酸化作用。底物水平磷酸化是指A TP的形成直接与一个代谢中间物上的磷酸基团转移相偶联的作用。
glycosylation：糖基化。在多肽合成后，在内质网的小腔中要经过很多修饰，其中一个修饰是糖基化，通过载体长萜醇的磷酸酯将寡聚糖核带到多肽上，形成糖蛋白，从而产生分布在膜上的本体蛋白及抗原蛋白。
8．rRNA：核糖体RNA。它是组成核糖体的主要成分，rRNA一般与核糖体蛋白结合在一起，形成核糖体。rRNA是单链，它包含不等量的A和U，以及G与C，有广泛的双链区域，在那里，碱基由氢键相连，表现为发夹式螺旋。rRNA主要有5S、16S、23S、5.8S、18S等几种。
hnRNA：核内不均一RNA。编码序列不连续的间断基因为断裂基因。不连续的断裂基因的表达程序是：先转录为初级转录物，即hnRNA，也就是带有内含子产物的前体mRNA，在hnRNA进入细胞质时，内含子转录产物被切割，只有外显子转录的区段重新连接起来，成为成熟的mRNA。
9．m7Gppp：在真核细胞mRNA的5′末端还有一个称为“帽子”的特异结构。这就是在5′末端的鸟嘌呤的N-7位上被甲基化成7-甲基鸟苷(m7G)，这个甲基鸟苷的5′位C通过三个磷酸残基与相邻的2′-O-甲基核苷的C-5′连接，具有这样结构的“帽子”称为帽子0，其符号为m7Gppp。
poly(A)：在大多数的真核mRNA3′末端都有一条150～200个腺苷酸的序列称为多聚A，也即polyA。具有这种特征的mRNA表示为poly(A)+；不具有这一特征的则写作poly(A)-。多聚(A)尾巴大约为200b，poly(A)尾巴不是由DNA编码的，而是在一个300kDa的RNA末端腺苷酸转移酶催化下，以A TP为前体，一个一个地聚合到mRNA的3′末端。poly(A)对mRNA的稳定性有一定作用，而且可能对mRNA进入细胞质有帮助。
10．restriction enzyme：限制性内切核酸酶。指那些可识别特异的DNA短序列并可在识别位点完成对DNA分子切割的内切核酸酶。
ribozyme：核酶。核酶表示这类酶的化学本质是核糖核酸，是RNA所具有的催化性质。它仅在化学本质上不同于传统的“蛋白质酶”(proteineous enzyme)，而在催化功能及其特点上和蛋白质催化剂却没有什
