细菌计数板使用方法

大连荣邦医疗卫生用品有限公司 RB-QI051-B/0
1 JLQ 1-S 型菌落计数器操作规程
1. 接通电源，打开照明开关，将待检菌落平板翻转，底部朝上，放在灯光透射
处，调节放大镜到菌落看得最清楚后固定，探笔插入面板右上角孔插中。

2. 按以下步骤操作计数计算器，先按一下ON/C 键，显示器上显示“O ”，再按
一下“1”的数字键，显示器显示“1”，再按一下“+”号键，此时显示器显示“1”，再按一下“=”号键，显示器仍显示“1”，再按一下“O ”字键，此时显示器显示“O ”，这时即可用探笔在菌落平板上进行累加计数。

3. 在计数时，将探笔在平板上碰触一下，计数器即计一个数，与此同时探笔在
平板上点上一个色点，表示此菌落已被数过，以后每碰触一次，探笔点一个色点，计数器即累加一个数，直到所有的菌落都被点上色点，显示器中显示的读数即为该平板的菌落数。

4. 在计完某平板菌落数后，如需再计其它平板的菌落数，可继续直接累加，待
总的平板都数完后除以平板数即是平均数。

也可使用存储键求平均数，在数完一个平板后，按一下M ±键显示器上角显示“MEM ”表示此数已被存入，再按一下“O ”字键，显示器上角显板“MEM ”，右边显示“O ”，即可继续计数。

当数完第二个平板后，重复上述操作，能把每次的数均存储进去，待数完最后一个平板后，将计数器按一下M ±，再按一下“MRC ”，显示器上即显示所数平板菌落的总数，除以平板数，即得平均数，再按二下“MRC ”存储解除，重复“2”条操作，又可重新进行另外平板菌落的累加计数。

血球板计数法（25x16)
器材：血球计数板、显微镜、盖玻片、酒精、胶头滴管、吸水纸、纱布若干、蒸馏水、移液管
操作步骤：1.配置菌悬液：将样用单层纱布过滤，摇晃后用移液管取适量样品至容量瓶中稀释（稀释情况依菌数量定，一般蜡牙菌放罐时稀释400倍，酵母干粉取0.25g稀释至250ml）
2.镜检计数室：将干净的血球计数板放置显微镜下，视野内若有菌，重新清洗，直至完全清洁
3.制板：取干净的载玻片，放置血球计数板中央，用胶头滴管轻轻的沿盖玻片边缘滴入（两侧均滴），放平，用吸水纸吸取边缘多余菌液，静止约5min
4.计数：选取5个中方格（每个中方格内有16个小方格）计数，格线上的一般只数上方和右方的。

5.清洗血球计数板，轻轻放置酒精瓶中
计算：
每毫升细菌个数=50000 *菌液稀释倍数*5个小方格中的细菌个数
每克细菌个数=50000*菌液定容体积x*5个小方格中的细菌个数/菌重量/(1-干粉含水量）
注意事项：
1.计数时，轻轻转动细焦，以便把视野内不同形状的菌全部看到；
2.不可用力擦拭血球计数板，以免留下划痕
3.配制时一定要摇匀后再制片
4.干粉含有一定水分，最后计算结果要除去含水量。

细菌计数板计数原理细菌计数板是一种用于测定液体中细菌数量的仪器，也称为细菌平板计数器。

它是一种简单、快速、准确的方法，被广泛应用于医学、食品、环境等领域。

本文将介绍细菌计数板的计数原理和使用方法。

一、细菌计数板的构成和原理细菌计数板由一块透明的塑料板和一层含有营养物质的琼脂层组成。

琼脂层的营养物质可以提供细菌生长所需的营养物质，而透明的塑料板可以方便观察细菌的生长情况。

使用细菌计数板时，首先需要将待测样品加入到琼脂层上，然后将细菌计数板放入恒温箱中，在适宜的温度下培养一定时间。

细菌在琼脂层上生长形成菌落，每个菌落代表着一定数量的细菌。

最后，用显微镜观察每个菌落的数量，就可以得到样品中细菌的数量。

二、细菌计数板的使用方法1. 准备细菌计数板和待测样品。

2. 打开细菌计数板的包装，将琼脂层朝上放在无菌工作台上。

3. 取出待测样品，使用消毒酒精灯或紫外线灯消毒。

4. 使用无菌的移液管将待测样品滴在琼脂层上。

5. 用无菌的铁环将琼脂层划分成四个区域，每个区域上滴一定量的待测样品。

6. 用无菌的铁环在琼脂层上划分出小块，每个小块上只留下一个菌落。

7. 将细菌计数板放入恒温箱中，在适宜的温度下培养一定时间。

8. 取出细菌计数板，用显微镜观察每个菌落的数量。

9. 记录每个区域中菌落的数量，并计算出样品中细菌的数量。

三、细菌计数板的注意事项1. 细菌计数板必须保持无菌状态，使用前应消毒。

2. 待测样品应在细菌计数板上均匀涂布，避免过多或过少。

3. 细菌计数板应在适宜的温度和时间下培养，否则会影响结果的准确性。

4. 观察菌落时应使用显微镜，避免肉眼观察造成误差。

5. 计算细菌数量时应注意单位的转换，避免计算错误。

细菌计数板是一种简单、快速、准确的方法，可以用于测定液体中细菌数量。

使用细菌计数板时需要注意保持无菌状态、均匀涂布样品、适宜的温度和时间、使用显微镜观察菌落、注意单位的转换等事项，才能得到准确的结果。

酵母菌的血球计数板计数方法酵母菌的血球计数板计数方法(2011-03-21 21:05:40)TE>转载TE>生物教学酵母菌的血球计数板计数方法血球计数板的构造和使用血球计数板是由一块比普通载玻片厚的特制玻片制成的.玻片中有四条下凹的槽,构成三个平台.中间的平台较宽,其中间又被一短横槽隔为两半,每半边上面,刻有一个方格网.方格网上刻有9个大方格,其中只有中间的一个大方格为计数室,供微生物计数用.这一大方格的长和宽各为1mm,深度为0.1mm,其体积为0.1mm3.计数室通常有两种规格.一种是大方格内分为16中格,每一中格又分为25小格;另一种是大方格内分为25中格,每一中格又分为16小格.但是不管计数室是哪一种构造;它们都有一个共同的特点,即每一大方格都是由16×25=25×16=400个小方格组成,见图.血球计数板的使用以计数酵母菌为例(1)用血球计数板计数酵母菌悬液的酵母菌个数.(2)样品稀释的目的是便于酵母菌悬液的计数,以每小方格内含有4-5个酵母细胞为宜,一般稀释10倍即可.(3)将血球计数板用擦镜纸擦净,在中央的计数室上加盖专用的厚玻片.(4)将稀释后的酵母菌悬液,用吸管吸取一滴置于盖玻片的边缘,使菌液缓缓渗入,多余的菌液用吸水纸吸取,捎待片刻,使酵母菌全部沉降到血球计数室内.(5)计数时,如果使用16格×25格规格的计数室,要按对角线位,取左上,右上,左下,右下4个中格(即100个小格)的酵母菌数.如果规格为25格×16格的计数板,除了取其4个对角方位外,还需再数中央的一个中格(即80个小方格)的酵母菌数. (6)当遇到位于大格线上的酵母菌,一般只计数大方格的上方和右方线上的酵母细胞(或只计数下方和左方线上的酵母细胞).(7)对每个样品计数三次,取其平均值,按下列公式计算每1ml菌液中所含的酵母菌个数.3.计算公式(1)16格×25格的血球计数板计算公式:酵母细胞数/ml=100小格内酵母细胞个数/100×400×104×稀释倍数(2)25格x16格的血球计数板计算公式:酵母细胞数/ml=80小格内酵母细胞个数/80×400×104×稀释倍数4.血球计数板的清洁血球汁数板使用后,用自来水冲洗,切勿用硬物洗刷,洗后自行晾干或用吹风机吹干,或用95%的乙醇,无水乙醇,丙酮等有机溶剂脱水使其干燥.通过镜检观察每小格内是否残留菌体或其他沉淀物.若不干净,则必须重复清洗直到干净为止.。

血球计数板使用方法
血球计数板介绍
使用方法
1．视待测菌悬液浓度，加无菌水适当稀释（斜面通常稀释100倍），以每小格的菌数可数为度。

5．计数时若计数区是由16个大方格构成，按对角线方位，数左上、左下、右上、右下的4个大方格（即100小格）的菌数。

假如是25个大方格构成的
计数区，除数上述四个大方格外，还需数中央1个大方格的菌数（即80个小格）。

为了保证计数的准确性，避免重复计数与漏记，在计数时，对沉降在格线上的细胞的统计应有统一的规定。

如菌体位于大方格的双线上，计数时则数上线不数下线，数左线不数右线，以减少误差。

即位于本格上线与左线上的细胞计入本格，本格的下线与右线上的细胞按规定计入相应的格中。

见右图：即本格中计数细胞为3个。

7．测数完毕，取下盖玻片，用水将血球计数板冲洗干净，切勿用硬物洗刷或者抹擦，以免损坏网格刻度。

洗净后自行晾干或者用吹风机吹干，放入盒内储存。

计数公式
细胞数/ml=100小格内细胞个数/100×400×10000×稀释倍数
1、25格×16格的血球计数板计算公式：
细胞数/ml=80小格内细胞个数/80×400×10000×稀释倍数
例1：用血球计数板对培养液中酵母菌进行计数，若计数室为1mm ×1mm×0.1mm方格，由400个小方格构成，假如一个小方格内酵母菌过多，难以计数，应先稀释后再计数。

若多次重复计数后，算得每个小方格中平均有5个酵母菌，则10mL该培养液中酵母菌总数有 5×400×10000×10＝2×108 个。

菌落计数器计数方法详解菌落计数器（Colony Counter）是一种用于快速计算微生物菌落数量的仪器，广泛用于微生物学研究、环境保护、食品工业、医学和农业等领域。

本文将详细介绍菌落计数器的使用方法及注意事项。

1. 菌落计数器的结构一般来说，菌落计数器包括菌落计数板、LED光源、灯罩、目镜、宽幅板调节钮、突起按钮等部分。

在计数过程中，将培养基平板放在菌落计数板上，开启LED光源照射培养基平板，目镜上方会出现大量菌落，使用突起按钮进行纪录和计数。

2. 菌落计数器的使用方法2.1 准备工作在开始使用菌落计数器前，需要进行以下准备工作：1.准备好待测样本，应按照标准操作流程进行操作。

2.准备好培养基平板，应在标准条件下进行制备，避免污染和偏差。

3.清洁菌落计数器，并将培养基平板放在菌落计数板上。

2.2 计数步骤1.打开菌落计数器，并调节合适的光源亮度。

2.选择一个适宜的倍率，一般为1-1.5倍，使用宽幅板调节钮使目镜聚焦。

3.开始计数前，应将菌落计数板上的菌落进行清点，以免重复计数或漏计。

4.用突起按钮逐个记录每个菌落的数目，轻按一下突起按钮记录一个菌落。

5.计数结束后，应将目镜反转清洗，以避免污染。

2.3 防止误差的注意事项1.尽量避免检测手部微生物的可能性，操作人员必须在洁净间内使用无菌手套等防护装备。

2.培养基平板质量和保存条件应符合标准，以保证菌落的形成和生长。

3.菌落计数板的数量应符合要求，并根据菌落的密度调整倍率和光源亮度。

4.计数过程中应切勿使用手指或其他物体触碰培养基平板或菌落计数板，避免污染和误差。

5.若发现菌落过多或过密，可采用分区方法计数，避免漏计或重复计数。

3. 菌落计数器的常见问题3.1 菌落计数结果偏低菌落计数结果偏低可能是因为培养基平板制备不当，或者是计数过程中操作不规范，应重新制备培养基平板并检查计数方法。

3.2 菌落计数与实际数量不符这可能是因为样本不均匀或者操作错误导致的，应重新操作，并注意操作规范。

型菌落计数器安全操作及保养规程型菌落计数器（俗称“菌落数”）是生物学和医疗领域经常用来测试细菌量的设备。

为了确保设备正常运行并保护使用者安全，本文介绍了型菌落计数器的安全操作和保养规程。

安全操作准备工作在使用型菌落计数器之前，请务必先做好以下准备工作：1.确保你已经戴好手套、口罩和实验服。

2.将型菌落计数器放在干净的工作区上。

3.准备适量的细菌培养物，用无菌吸管将其逐滴滴在琼脂平板上，涂匀后让其凉干。

使用型菌落计数器1.先将型菌落计数器开关调至“关”状态。

2.取出已经室温自然干燥的琼脂平板，细心地盖上取样器。

3.将型菌落计数器的转轮对准第一个小孔旁边的数字，并把计数板卡进去。

请仔细检查平板是否严密地固定在板架上，确保准确计数。

4.将计数板塞进计数器中，并将转钮顺时针旋转至一分钟后的时间处。

5.打开轮盘计数器，将游标拨至一开始的数字处。

6.轻轻旋转平板，转轮上的数字会依次加一。

7.当一个平板计数完成，将其标记并容易识别，然后将计数板从型菌落计数器中取出，并交给实验室管理员或回收站处理。

关闭设备在使用完型菌落计数器后，请按以下步骤关掉设备：1.将轮盘计数器都归零（请先确保设备安全，避免错误计数）。

2.将型菌落计数器的转轮调回“关”状态。

3.异常关闭型菌落计数器的方法是在机身下方的断路器上按下白色按钮，该按钮将会彻底断开计数器的电源。

保养规程为了保证型菌落计数器的长期稳定运行，请做好以下保养工作：1.定期检查型菌落计数器的电源线、插头和插座是否正常。

如果发现任何损坏，立即停止使用并联系维修人员。

2.定期检查型菌落计数器内是否有任何痕迹。

如果发现问题，请立即停止使用并清理掉残留物。

3.防水防潮。

不允许将型菌落计数器置于水和潮湿的环境中。

因此，建议在使用前将计数器表面擦拭干净，同时使用吹风机将表面完全吹干。

4.定期对型菌落计数器进行维护，包括定期清洁和润滑。

建议每六个月维护一次，并且由专业人员进行。

维护时间需要1-2天，相应的设备将不可用。

细菌计数板和血细胞计数板的计数原理
细菌计数板和血细胞计数板是实验室常用的工具，用于帮助科
研人员和医学专业人员对细菌和血细胞进行计数。

下面将详细介绍
它们的计数原理。

1. 细菌计数板的计数原理：
细菌计数板是一种含有特定培养基的平板，通常被用于分析水
样或其他液体样品中的细菌数量。

其计数原理主要基于菌落计数法。

在实验中，将待测样品通过稀释系列后均匀涂布在细菌计数板表面，然后将其放入恒温培养箱中培养一段时间，使细菌在培养基上形成
可见的菌落。

最后，通过肉眼或显微镜观察并计数每个板上的菌落
数量，再根据稀释倍数和计数结果计算出原始样品中的细菌数量。

2. 血细胞计数板的计数原理：
血细胞计数板主要用于计数血液中的白细胞、红细胞和血小板
数量。

其计数原理基于血细胞计数法。

在实验中，将待测血液样品
与稀释液混合后装入计数板中，通过显微镜观察并计数每个小格中
的血细胞数量，再根据计数结果和稀释倍数计算出血液中各种细胞
的浓度。

同时，还可以通过染色方法区分不同类型的白细胞，从而
进一步了解血液的状况。

总的来说，细菌计数板和血细胞计数板都是通过对样品进行稀释、培养或染色处理后，利用显微镜观察和计数来确定细菌或血细
胞的数量。

这些计数板在医学诊断、环境监测和科研实验中都有广
泛的应用，为人们提供了重要的数据支持。

麦克马斯特计数板使用方法
麦克马斯特计数板是一种在实验室中广泛使用的细菌计数工具，以其精确性和便捷性著称。

本文将详细介绍麦克马斯特计数板的使用方法，帮助您准确、高效地进行细菌计数。

一、麦克马斯特计数板简介
麦克马斯特计数板是一种基于微孔板技术的细菌计数工具，由多个小孔组成，通常每个小孔的体积为0.1毫升。

通过在微孔中加入细菌悬液，然后在显微镜下进行观察和计数，可以快速、方便地得到细菌的浓度。

二、使用方法
1.准备工作
a.将麦克马斯特计数板清洗干净，用无菌吸水纸擦干。

b.准备无菌的细菌悬液。

c.准备显微镜和计数用的小滴管。

2.操作步骤
a.在麦克马斯特计数板的每个小孔中加入0.1毫升的细菌悬液。

b.静置2-3分钟，使细菌沉降到微孔底部。

c.在显微镜下观察微孔中的细菌。

d.选取5-10个小孔进行计数，计算每个小孔中的细菌数量。

e.根据以下公式计算细菌浓度：
细菌浓度（CFU/mL）=（每个小孔的平均细菌数×稀释倍数）/加入的细菌悬液体积
3.注意事项
a.在操作过程中，要确保无菌操作，避免污染。

b.加细菌悬液时，要缓慢滴加，避免产生气泡。

c.观察和计数时，要保持显微镜的清洁，避免影响观察结果。

d.计数时要选取多个小孔进行观察，以提高结果的准确性。

e.为避免实验误差，建议对同一细菌悬液进行多次重复实验。

三、总结
通过以上步骤，您已经掌握了麦克马斯特计数板的使用方法。

在使用过程中，请注意无菌操作和观察技巧，以确保实验结果的准确性和可靠性。

菌落计数器的操作方法菌落计数器如何操作菌落计数器的实在操作方法可按如下进行，赶快来围观吧～1．培育到时间后，计数每个平板上的菌落数。

可用肉眼察看，必要时用放大镜检查，以防遗漏。

在记下各平板的菌落计数器的实在操作方法可按如下进行，赶快来围观吧～1．培育到时间后，计数每个平板上的菌落数。

可用肉眼察看，必要时用放大镜检查，以防遗漏。

在记下各平板的菌落总数后，求出同稀释度的各平板平均菌落数，计算处原始样品中每克（或每ml）中的菌落数，进行报告。

2．到达规定培育时间，应立刻计数。

假如不能立刻计数，应将平板放置于0－4℃，但不得超过24h。

3．计数时应选取菌落数在30～300之间的平板（SN标准要求为25～250个菌落），若有二个稀释度均在30～300之间时，按标准方法要求应以二者比值决议，比值小于或等于2取平均数，比值大于2则其较小数字（有的规定不考虑其比值大小，均以平均数报告）。

4．若全部稀释度均不在计数区间。

如均大于300，则取较高稀释度的平均菌落数乘以稀释倍数报告之。

如均小于30，则以较低稀释度的平均菌落数乘稀释倍数报告之。

如菌落数有的大于300，有的又小于30，但均不在30～300之间，则应以接近300或30的平均菌落数乘以稀释倍数报告之。

如全部稀释度均无菌落生长，则应按小于1乘以较低稀释倍数报告之。

有的规定对上述几种情况计算出的菌落数按估算值报告。

5．不同稀释度的菌落数应与稀释倍数成反比（同一稀释度的二个平板的菌落数应基本接近），即稀释倍数愈高菌落数愈少，稀释倍数愈低菌落数愈多。

如显现逆反现象，则应视为检验中的差错（有的食品有时可能显现逆反现象，如酸性饮料等），不应作为检样计数报告的依据。

6．当平板上有链状菌落生长时，如呈链状生长的菌落之间无任何明显界限，则应作为一个菌落计，如存在有几条不同来源的链，则每条链均应按一个菌落计算，不要把链上生长的每一个菌落分开计数。

如有片状菌落生长，该平板一般不宜接受，如片状菌落不到平板一半，而另一半又分布均匀，则可以半个平板的菌落数乘2代表全平板的菌落数。

细菌计数板使用方法1、准备细菌计数板准备计数时～磨光的表面小心地用擦镜纸擦干净。

盖玻片也要擦干净。

2、盖上盖玻片在需要盖的周边区域需要用蒸馏水弄的微湿然后盖玻片要慢慢的从计数板的前端推入～直到盖玻片的前端边缘与计数板的划格子的区域处于同位。

注意:盖玻片是很容易坏掉的:在外部支持和盖玻片之间的干扰线(牛顿环)的组成显示了盖玻片的准确位置。

3、计数板加样取一个良好混合型的吸管并且放置一些初期的几滴液体。

把吸管的外部擦干然后保持吸管一定的角度直到小滴液体被吸管尖端吸上去。

然后这滴液体被放置在盖玻片和计数板之间。

由于盖玻片和计数板之间的毛细管现象作用的结果～两个平面之间的缝隙被灌满。

在溶液要满出击数板截面的边缘之前～马上移走吸管的尖端。

如果有可见气泡或者液体已经满出边缘并且进入其他的沟里～那么计数板就要擦干净并且重新加样。

4、计数装载好的计数板被放置在显微镜台上然后计数格在低倍镜焦距中显示。

高倍物镜要非常小心的操作～因为计数板比常规的要更厚。

如果你不小心的话～会导致计数板或者物镜镜头的损伤。

如果可能的话～在作血细胞计数的时候使用机械平台的显微镜。

显微镜的照明是重要的～太亮了会影响划格线的观察。

光可以通过虹膜光圈减弱直到划得格子在背景中再次清晰可见。

细胞/质粒的计数应该充分稀释到他们不再互相重叠～并且均匀的分配。

要完成计数检测需要扩大到期望的可见的细胞/质粒。

细胞数量的计算推荐计数100方格作为排除少量的结果。

计数格在超过划线区域使用时需要均匀的分配～并且这个通过藉由三倍之数决定的方格支架在进入区段之内。

计数完100方格后总数除100(计数的方格数)～来得到每格的平均值。

乘稀释度～除1/4000(每个小方格的立方容积1/20 x 1/20 x 1/10 – 1/4000mm3)。

这次计算得到的数字是原非稀释流质的每立方毫米的细胞数量。

大肠菌群平板计数法
一、操作步骤
1.样品的稀释
2.选取2个～3个适宜的连续稀释度, 每个稀释度接种2个无菌平皿，每皿1 mL。

同时取1mL 生理盐水加入无菌平皿作空白对照。

3.及时将15 mL～20 mL冷至46 ℃的结晶紫中性红胆盐琼脂（VRBA）约倾注于每个平皿中。

小心旋转平皿，将培养基与样液充分混匀，待琼脂凝固后，再加3 mL～4 mLVRBA覆盖平板表层。

翻转平板，置于36 ℃±1 ℃培养18 h～24 h。

4.平板菌落数的选择
选取菌落数在15 CFU～150 CFU 之间的平板，分别计数平板上出现的典型和可疑大肠菌群菌落。

典型菌落为紫红色，菌落周围有红色的胆盐沉淀环，菌落直径为0.5 mm 或更大。

5.证实试验
从VRBA 平板上挑取10 个不同类型的典型和可疑菌落，分别移种于BGLB 肉汤管内，36 ℃±1 ℃培养24 h～48 h，观察产气情况。

凡BGLB 肉汤管产气，即可报告为大肠菌群阳性。

6.大肠菌群平板计数的报告
经最后证实为大肠菌群阳性的试管比例乘以8.3中计数的平板菌落数，再乘以稀释倍数，即为每g（mL）样品中大肠菌群数。

例：10-4样品稀释液1mL，在VRBA平板上有100个典型和可疑菌落，挑取其中10个接种BGLB肉汤管，证实有6个阳性管，则该样品的大肠菌群数为：
100×6/10×104/g（mL）=6.0×105CFU/g（mL）
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细菌计数器计数操作方法细菌计数器是一种用于快速、准确地计数细菌数量的工具。

它的操作方法非常简单，通常包括以下几个步骤：1. 准备工作：首先，要确保细菌计数器处于良好的工作状态。

检查电池电量、屏幕显示、计数按钮等，确保全部正常运行。

如果有需要，可更换电池。

2. 校准设定：细菌计数器通常提供了一些可调节的参数，如分辨率、平滑度等。

在开始计数之前，根据实际需要对这些参数进行适当的调整和设定。

3. 准备细菌样品：使用无菌技术取得一个细菌样品。

可以是细菌培养物、感染组织等。

确保样品充分悬浮均匀，以避免细菌聚集或堆积导致计数不准确。

4. 取样：将取样枪或吸管放入样品中，吸取适量的液体样品。

取样过程中要注意避免气泡的产生，以免影响计数准确性。

5. 进行计数：将取得的样品液滴在细菌计数器的计数板上。

计数板上通常有一个网格，每个小格的面积已知。

使用计数器的放大镜功能将细菌放大到一个可以清晰观察的大小，并使用计数按钮进行逐个计数。

6. 记录：在计数过程中，使用计数器上的记录功能对每个计数事件进行记录。

这样可以方便后续的数据分析和结果统计。

7. 清洗和维护：计数完毕后，及时将计数板和取样枪进行清洗和消毒。

避免细菌残留和交叉污染。

同时，还要定期检查和维护计数器的各项功能，确保其正常工作。

细菌计数器的操作方法相对简单，但在实际使用中还需要注意以下几点：1. 样品处理：在进行细菌计数前，应该根据实际情况对样品进行适当的处理。

例如，对于固体样品，可以进行适当的研磨、稀释等操作，以便更好地观察和计数。

对于浓度较高的样品，可以适当稀释，以保证计数准确性。

2. 技术要求：使用细菌计数器时，应熟练掌握相关的技术要求。

比如，要能辨别出有效的细菌计数单位，避免重复计数或漏计，保证计数准确性。

此外，根据不同的细菌形态和颜色，可以调节计数器的对比度和亮度，以便更好地进行观察和计数。

3. 重复计数：为了保证计数结果的准确性，通常需要进行重复计数。

nature 细菌计数方法大家好呀！今天咱就来好好唠唠细菌计数方法这个事儿。

在咱们研究微生物的世界里，准确地知道细菌的数量那可是相当重要的，不管是做实验还是搞研究，都得把这个数给弄清楚。

下面咱就来看看都有哪些常见的细菌计数方法哈。

一、稀释平板计数法。

这可是个挺常用的方法哟。

简单来说呢，就是把含有细菌的样品先进行一系列的稀释。

比如说，咱先取一定量的样品，然后加入无菌水，充分混合后，再从这个稀释液里取一部分，再加入无菌水继续稀释，这样反复操作几次，就能得到不同稀释度的样品啦。

为啥要稀释呢？因为如果细菌太多了，长在平板上密密麻麻的，根本数不清呀。

稀释完了之后呢，就把这些不同稀释度的样品分别取一定量，接种到合适的固体培养基平板上。

然后把平板放在适宜的温度下培养，等细菌长出来形成菌落之后，就可以数菌落的数量啦。

不过这里面有个小要点哈，就是要选择合适的稀释度。

如果稀释度太低，菌落太多数不过来；如果稀释度太高，可能一个菌落都长不出来，那就白忙活啦。

一般来说，咱们选择的平板上的菌落数最好是在30 300个之间，这样数出来的结果会比较准确哟。

最后呢，根据平板上的菌落数和稀释倍数，就能算出原来样品里的细菌数量啦。

二、滤膜过滤计数法。

这个方法适用于那些样品中细菌数量比较少的情况哈。

咱先把含有细菌的样品通过一个滤膜过滤器，这个滤膜的孔径很小，细菌会被截留在滤膜上，而样品中的其他成分就会通过滤膜流走啦。

然后呢，把这个带有细菌的滤膜放在合适的固体培养基上培养。

细菌就会在滤膜上生长形成菌落，咱再数菌落的数量就可以啦。

这种方法的好处就是能把细菌集中在滤膜上，就算样品里细菌很少，也能比较准确地数出来。

而且因为滤膜的面积是固定的，计算起来也比较方便哟。

三、显微镜直接计数法。

这个方法就比较直观啦。

咱把含有细菌的样品制成涂片或者悬液，然后放在显微镜下观察。

通过显微镜的目镜和物镜，咱就能看到细菌啦。

不过这里面有个小麻烦，就是咱看到的细菌可能有的是死的，有的是活的，它可不管这些，统统都算进去啦。

操作步骤l．编号取无菌平皿9套，分别用记号笔标明10-4、10-5、10-6。

(稀释度)各3套。

另取6支盛有4.5mL无菌水的试管，依次标是10-1、10-2、10-3、10-4、10-5、10-6。

2．稀释用lmL无菌吸管吸取lmL已充分混匀的大肠杆菌菌县液(待测样品)，精确地放0.5ml 至10-1的试管中，此即为10倍稀释。

将多余的菌液放回原菌液中。

将10-1试管置试管振荡器上振荡，使菌液充分混匀。

另取一支lml吸管插入10- 1试管中来回吹吸菌悬液三次，进一步将菌体分散、混匀。

吹吸菌液时不要太猛太快，吸时吸管伸人管底，吹时离开液面，以免将吸管中的过滤棉花浸湿或使试管内液体外溢。

用此吸管吸取10-1菌液lmL，精确地放0.5mL至10-2试管中，此即为100倍稀释。

……其余依次类推。

放菌液时吸管尖不要碰到液面，即每一支吸管只能接触一个稀释度的菌悬液，否则稀释不精确，结果误差较大。

3.取样用三支1mL无菌吸管分别吸取10-4、10-5和10-6的稀释菌悬液各lmL，对号放入编好号的无菌平皿中，每个平皿放0.2mL。

不要用lmL吸管每次只靠吸管尖部吸0.2mL稀释菌液放入平皿臼，这样容易加大同一稀释度几个重复平板间的操作误差。

4．倒平板．尽快向上述盛有不同稀释度菌液的平皿中倒入融化后冷却至45℃左右的牛肉膏蛋白胨培养基约15毫升/平皿，置水平位置迅速旋动平皿，使培养基与菌液混合均匀，而又不使培养基荡出平皿或溅到平皿盖上。

由于细菌易吸附到玻璃器皿表面，所以菌液加入到培养皿后，应尽快倒入融化并于已冷却至45℃左右的培养基，立即摇匀，否则细菌将不易分散或长成的菌落连在一起，影响计数。

待培养基凝固后，将平板倒置于37℃恒温培养箱中培养。

5．计数培养48h后，取出培养平板，算出同一稀释度三个平板上的菌落平均数，并按下列公式进行计算，每毫升中菌落形成单位(cfu)=同一稀释度三次重复的平均菌落数×稀释倍数×5。