小鼠淋巴细胞的分离培养

小鼠淋巴细胞的分离培养

一、血液中淋巴细胞的分离：

1在1.5ML离心管中加入淋巴细胞分离液0.7ML；

2眼部采集小鼠的抗凝血，抗凝剂20%.。

3轻轻将血液加入淋巴细胞分离液的表面，立即以2000—2500转/分离心10MIN。

4小心吸取上层细胞，转移至另一1.5ML离心管中,再用HANK’S 悬浮至1.5ML，再离心，去上清，再悬浮，等待分型用。

二、鼠脾脏中淋巴细胞的分离：

1无菌采集鼠的脾脏，且灭菌注射器的弯针头轻轻扎取，尽可能使单个细胞分离，再分别用4层灭菌纱布过滤2次。

2将滤液小心加入淋巴细胞分离液中。离心。

3 吸取上层淋巴细胞，HANK‘S液洗涤2次（尽可能去除淋巴

细胞分离液）。

4加入1640培养液进行培养。、

*淋巴细胞分离液不低于全部液体的50%