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血脂及血浆脂蛋白检验

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第十章 血脂及血浆脂蛋白检验

第十章 血脂及血浆脂蛋白检验

pathway） （LDL receptor pathway）
LDL受体途径：LDL或其他含ApoB100、 LDL受体途径：LDL或其他含ApoB100、 受体途径 或其他含ApoB100 的脂蛋白如VLDL VLDL、 VLDL均可与 均可与LDL E的脂蛋白如VLDL、β-VLDL均可与LDL 受体结合，内吞入细胞使其获得脂类， 受体结合，内吞入细胞使其获得脂类， 主要是胆固醇，这种代谢过程称为LDL 主要是胆固醇，这种代谢过程称为LDL 受体途径。该途径依赖于LDL LDL受体介导 受体途径。该途径依赖于LDL受体介导 的细胞膜吞饮作用完成。 的细胞膜吞饮作用完成。 若胞内游离胆固醇浓度升高，则： 若胞内游离胆固醇浓度升高， 抑制HMGCoA还原酶， HMGCoA还原酶 ①抑制HMGCoA还原酶，以减少自身的 胆固醇合成； 胆固醇合成； 抑制LDL受体基因的表达，减少LDL LDL受体基因的表达 ②抑制LDL受体基因的表达，减少LDL 受体的合成，从而减少LDL的摄取； LDL的摄取 受体的合成，从而减少LDL的摄取； 激活内质网ACAT ACAT， ③激活内质网ACAT，使游离胆固醇在 胞质内酯化成胆固醇酯贮存， 胞质内酯化成胆固醇酯贮存，以供细 胞的需要； 胞的需要；
二、极低密度脂蛋白受体
结构与LDL受体类似。 LDL受体类似 ▲结构与LDL受体类似。 仅对含ApoE 的脂蛋白VLDL ApoE的脂蛋白 VLDL、 ▲ 仅对含 ApoE 的脂蛋白 VLDL 、 VLDL残粒有高亲和性结合， VLDL 残粒有高亲和性结合，对 残粒有高亲和性结合 LDL为显著的低亲和性。 LDL为显著的低亲和性。 为显著的低亲和性 在肝内几乎未发现， ▲ 在肝内几乎未发现 ， 广泛分 布在代谢活跃的心肌，骨骼肌、 布在代谢活跃的心肌 ， 骨骼肌 、 脂肪组织等细胞. 脂肪组织等细胞. ▲VLDL受体不受细胞内胆固醇 VLDL 受体不受细胞内胆固醇 负反馈抑制

临床生化检验 第四章 脂蛋白的测定

临床生化检验 第四章 脂蛋白的测定

评价：
➢优点：本法灵敏度高、准确度高、精密度好，线性范围宽。
➢主要缺点是：
①某些胆固醇酯酶对胆固醇酯的水解不完全，不能用纯胆固醇结晶以有机 溶剂配制的溶液作为TC分析的校准液，而应以准确定值的血清作为标准， 此校准液（品）相当于三级标准。 ②表面活性剂，如吐温-40可以干扰胆固醇酯酶的作用，而聚乙烯醇6000 可使结果提高1％～2％；
2.比色
加入物 血清上清液(ml) 标准液上清液(ml) 异丙醇(ml) 显色剂(ml)
空白管 － － 1.0 3.0
标准管 － 1.0 － 3.0
测定管 1.0 － － 3.0
充分混匀后继续60℃水浴15min，然后置室温冷却后530～ 550nm比色。
计算
血清
TG(mmol/L)＝
测定管吸光度 标准管吸光度
【临床意义】
TC除了作为高胆固醇血症的诊断指标之外，不能作为其它任何疾病的诊断 指标，对于动脉粥样硬化和冠心病而言，TC是一个明确的危险因子，与冠心 病的发病率呈正相关。
影响TC水平的因素
①年龄与性别； ②长期的高胆固醇、高饱和脂肪酸和高热量饮食可使TC增高； ③遗传因素； ④其它：如缺少运动、脑力劳动、精神紧张等可能使TC升高。
× 标准液浓度
参考值 犬：3.50-
?
意义 。?
?
评价
本法测定范围较宽，干扰因素多，准确测定有赖于 从标本中抽提、皂化、纯化过程，操作较繁，不适于 大批量标本分析及自动分析，一般很少用。
二、磷酸甘油氧化酶法（GPO-PAP法）
原理
试剂
1. 甘油三酯液体稳定酶试剂组成
GOODs缓冲液(pH7.2) 50mmol/L
一、高铁——硫酸显色法测TC （理解）

血脂、脂蛋白及载脂蛋白测定

血脂、脂蛋白及载脂蛋白测定

医学ppt
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结果判断，直观区带的着色深浅， 宽窄，用浅染，稍浅染，深染及消失加 以描述；或用光密度扫描仪测定。
【参考范围】
α-Lp 30%～40% preβ-Lp 13%～25% β-Lp 50%～60% CM （－）
医学ppt
20
2、血清高密度脂蛋白测定
常以测定HDL-C含量代表HDL水平。测 定步骤包括①HDL的分离；②测定HDL中 胆固醇。
医学ppt
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（2）皂化：甘油三脂的水解 一般都
采用KOH乙醇或KOH异丙醇溶液，60℃， 5～15min可使TG完全水解。
（3）氧化：甘油的氧化 最常用的氧化 剂是HIO4，甘油在酸性条件下被氧化成 甲醛、甲酸。反应受α-磷酸甘油、葡萄糖、 丝氨酸的干扰，故抽提时应尽量除去此类 物质的干扰。
医学ppt
结果，但TG＞4.25mmol/L时不能应用此 公式计算，否则结果偏差太大。
医学ppt
26
（2）聚乙烯硫酸盐沉淀法 聚乙烯硫酸（PVS）能选 择性沉淀血清中LDL，再以血清TC减去上清液（含 HDL和VLDL）胆固醇，即得LDL-C值。试剂中加入 EDTA去除两价阳离子，避免VLDL共沉，辅以聚乙二 醇独甲醚（PEGME）可加速沉淀。
法）
LPL
TG ＋H2O 甘油 ＋ ATP
GK甘油 ＋ FA G3P-O磷D酸甘油 ＋ ADP
3-磷酸甘油 ＋ O2
P磷O酸D 二羟丙酮 ＋ H2O2
H2O2 ＋ 4-AAP ＋ 酚
红色亚胺醌 ＋ H2O
试剂较稳定，灵敏度高，线性范围宽，胆红 素、维生素C可消耗H2O2使结果偏低。
医学ppt
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（ 2 ） 乳 酸 脱 氢 酶 法 （ GK-PK-LDH

血脂及血浆脂蛋白检验

血脂及血浆脂蛋白检验

种类：
已有很多种，主要有LDL受体、残粒受体（remnant receptor） 及清道夫受体（scavenger receptor）其它有ApoE受体（CM） HDL受体和β-VLDL受体等。
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各种脂蛋白受体功能
LDL受体： 分布于肝细胞、动脉壁平滑肌细胞等细胞膜表面 识别结合ApoB100、E的脂蛋白如LDL、VLDL等。 合成受体内胆固醇的负反馈调节 残粒受体： 分布在代谢活跃的心肌、骨骼肌、脂肪等组织细胞。 识别、结合含ApoE的脂蛋白如CM残粒和β-VLDL残粒 清道夫受体： 存在于巨噬细胞表面 识别、结合修饰的LDL（氧化型LDL和β-VLDL）
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血清或血浆外观
（血清/浆静臵试验）
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血清（浆）静臵试验
将患者空腹12h后采集静脉血分离出血清臵4℃冰箱中过夜，然后 观察其分层现象及清澈度。
CM↑↑ TC N/↑,TG↑↑（I型）
TG↑↑
VLDL↑↑ TC N/ ↑,TG ↑↑ （IV型）
TC↑↑,TG↑↑ （ IIb型/III型） CM及VLDL↑↑ TC↑↑,TG↑↑ （III型/V型） TC、TG均正常（正常人） TC↑↑,TG正常 （IIa型） TC↑↑,TG↑ （IIb型）
原因：因某种原因使脂蛋白合成减少，另外分解代谢旺盛也可导致。
分类：原发性和继发性
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第二节

血脂、脂蛋白及载脂蛋白测定
TC测定 TG测定 HDL-C测定 LDL-C测定

血清脂质和脂蛋白检测的分析程序及项目选择
血清或血浆外观
（血清/浆静臵试验）
Lp（a）测定 ApoAI测定 ApoB测定
B100
C-Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ

血脂检测方法和临床意义专家讲座

血脂检测方法和临床意义专家讲座
临床上出现肾病，神经病变，视网膜病无法给出 解释
血脂检测方法和临床意义
第39页
WHO标准化OGTT
1.试验前三天, 受试者每日食物中糖含量应不低 于150g, 且维持正常活动。
2.影响药品应在三天前停用, 空腹10-16小时。
3.坐位去血后5分钟内饮入250ml含75g无水葡 萄糖糖水。（妊娠妇女为100g, 儿童按 1.75g/kg体重给予, 最大不超出75g）
血脂检测方法和临床意义
第36页
血糖临床意义
生理性或暂时性低血糖 饥饿和猛烈运动 等
病理性低血糖 可见于胰岛β细胞增生或肿 瘤引发胰岛素分泌过多、严重肝病不能调 整血糖。
药品影响①血糖升高药品: 口服避孕药，儿 茶酚胺，咖啡因，甲状腺素，肾上腺素等 ②血糖降低药品: 降糖药，酒精，普萘洛尔 等
血脂检测方法和临床意义
第17页
血清甘油三酯测定
酶法测定
磷酸甘油氧化酶法（灵敏度高, 试剂稳定, 线性范围比较宽）
乳酸脱氢酶法（结果准确, 灵敏度低, 试剂 不稳定）
甘油氧化酶法（直接测定甘油方法）
血脂检测方法和临床意义
第18页
磷酸甘油氧化酶法原理
用脂蛋白酯酶（LPL）使血清中TG水解成脂肪酸 和甘油, 甘油激酶（GK）及三磷酸腺苷（ATP） 将甘油磷酸化, 以磷酸甘油氧化酶（GPO）氧化 3-磷酸甘油（G-3-P）产生H2O2, 最终以 Trinder反应显色, A500nm值与TG浓度成正比。
第6页
胆固醇逆转运路径
血脂检测方法和临床意义
第7页
高脂蛋白血症WHO分型
血脂检测方法和临床意义
第8页
引发继发性高脂血症病因
1 、糖尿病 常表现为IV型高脂蛋白血症。 （胰岛素缺乏，不但促使肝脏生成VLDL增 加，而且因LPL活性降低，造成VLDL去除 降低，主要表现为血清TG、VLDL水平升 高，TG严重升高者有发生急性胰腺炎危险 性。）

血清脂质和脂蛋白检测以及方法

血清脂质和脂蛋白检测以及方法
每升高1mg使冠心病危险性增加1%～2% 高脂血症、甲减、肾病综合症、糖尿病等 减低：肝脏疾病、甲亢、贫血等
血清脂质与脂蛋白检测和 方法
（三）血清载脂蛋白检测
载脂蛋白分为： ApoA、ApoB、ApoC、ApoE、Apo（a） ApoA是HDL的主要蛋白结构，间接反映 HDL水平。 ApoB是LDL的主要蛋白结构，间接反映 LDL水平。
• 原理 测定HDL-C含量来反映HDL水平
• 参考范围 0.91 ~ 1.56mmol/L
血清脂质与脂蛋白检测和 方法
高密度脂蛋白胆固醇测定
临床意义 判断发生冠心病的危险性 其 水平与动脉管腔狭窄程度、冠心病发病率呈负相关
。 临床血清总胆固醇正常而HDL-C降低是冠心病的先兆
； 在估计心血管病的危险因子中，HDL-C比TC和TG的意
（一）总胆固醇测定
降低
严重肝脏疾病：急性肝坏死或肝硬化 严重的贫血：再障、溶贫、缺铁贫 营养不良 甲亢
血清脂质与脂蛋白检测和 方法
（二）甘油三酯测定
原理：由肝、脂肪组织及小肠合成 主要存在于前β-脂蛋白和乳糜颗粒中 参与胆固醇及胆固醇酯的合成 为细胞提供能量和贮存能量 是动脉粥样硬化的重要因素之一
血清脂质与脂蛋白 检测和方法
血清脂质与脂蛋白检测和方法
一、血清脂质与脂蛋白检测
血脂：血浆脂类物质的总称 ：胆固醇（TC）、甘油三酯 (TG）
磷脂（PL）、游离脂肪酸（FFA） 脂蛋白：脂质与蛋白质结合的复合物 载脂蛋白：脂蛋白中的蛋白部分
血清脂质与脂蛋白检测和 方法
一、血清脂质与脂蛋白检测
脂蛋白分类
女 0.8～1.55g/L 临床意义 升高水平与动脉粥样硬化、冠心病发病呈正相关
Apo-B100上升较LDL和CHO的上升对冠心病风险度 的预测更有意义

血浆脂蛋白概述、结构和作用

血浆脂蛋白概述、结构和作用

脂蛋白(α)Lp（ α ）
β－脂蛋白抗原成分 结构类似LDL，含Apo（ α ） 与纤溶酶原有高度同源性 促AS的独立危险因子 主由基因控制，不受性别、年龄、 体重、适度锻炼和降胆固醇药物的影响。
血脂测定项目
血清外观分析 总胆固醇（TC）测定 甘油三酯（TG）测定 血清脂蛋白（LP）分析 高密度脂蛋白胆固醇（HDL-Ch）测定 低密度脂蛋白胆固醇（LDL-Ch）测定 血清载脂蛋白（Apo）测定
载脂蛋白的生理功能
(1)结构功能 (2)调节功能 (3)识别功能
Apo在调节血浆Lp代谢中的作用
组合并维持脂蛋白结构 血浆脂类的运输及其在组织\细胞间的
再分配 脂类临床意义
载脂蛋白 合成场所
Apo-A
肝、肠
分布
HDL
功能
AⅠ激活 LCAT
脂类+载脂蛋白
脂蛋白
脂蛋白结构及组成
Lipid(TG、PL、FC和CE） + Apo 亲水表层 + 疏水核心 （Apo+PL亲水基）（TG+CE+PL疏水基） 水溶性多聚分散体 假性微胶颗粒（血） 颗粒大小CM>VLDL>LDL>HDL
血浆脂蛋白的分类
1．电泳分类法
2．密度分类法
1．电泳分类法
其它:标本收集与处理,如禁食状态、血液浓 缩、抗凝剂与防腐剂、毛细血管与静脉血标 本储存等
血脂与血栓
血浆脂蛋白异常代谢
原发性 继发性
原发性高脂蛋白血症分型及特征
分型
Ⅰ型
Ⅱa型 Ⅱb型
Ⅲ型 (宽β病)
Ⅳ型
Lp 血脂
CM TG
Apo
B48
LDL TC LDL TC VLDL TG IDL TC

第十一章血脂及血浆脂蛋白检验

第十一章血脂及血浆脂蛋白检验
3. 作为脂蛋白受体的配体，参与对脂 蛋白受体的识别、结合和代谢过程。
（四）脂蛋白受体
存在于细胞膜表面能与相应脂蛋白特异结 合的一类糖蛋白。主要的有：
1. LDL受体（Apo B、E受体） 分布于肝 细胞、动脉平滑肌细胞膜表面，含Apo B100、 E的脂蛋白均能与LDL受体结合，通过内吞作 用使细胞获得脂质。
2. VLDL受体（Apo E受体） 分布于心肌、 骨骼肌和脂肪组织细胞膜，能识别、结合含 Apo E的脂蛋白，清除血液中CM、VLDL残粒。
3. 清道夫受体（SR） 主要存在巨噬细 胞及血管内皮细胞表面，介导对修饰型LDL （如氧化型LDL，oxLDL；乙酰化LDL， acLDL）从血液循环中清除，而oxLDL可导 致脂质沉积，促使巨噬细胞转变成泡沫细胞， 具有强烈的致动脉粥样硬化作用。另一方面， 也推测巨噬细胞通过清道夫受体清除细胞外 液中的修饰型LDL，尤其是oxLDL，是机体 的一种防御功能。
2. 代谢综合征 代谢综合征（MS）是多 种代谢成分异常聚集的病理状态，是一组复 杂的代谢紊乱症候群， 主要特点是高血脂、
高血压、高血糖和肥胖。
3. 抗动脉粥样硬化脂蛋白 HDL水平与 动脉粥样硬化呈负相关，HDL能逆转运胆固 醇；保护内皮细胞免受LDL的损伤；防止血 小板聚集； HDL能抑制LDL氧化，抑制泡沫 细胞脂肪斑块形成 。HDL-C小于被认为是早 发冠心病的独立危险因素。
临床表现，多见于中年人易发生冠心病。
6. Ⅴ型高脂蛋白血症 属常染色体显性 遗传病，病因不详，可能由几种遗传缺陷 所致，较罕见。生化检查特征：
①4℃冷置试验，血清上层为奶油状， 下层混浊。
②血清TG↑↑，TC↑。
③血清脂蛋白电泳，CM↑↑，preβ-LP↑。

血脂及血浆脂蛋白检验

血脂及血浆脂蛋白检验

高密度脂蛋白 （HDL）
脂蛋白（a） [Lp（a）]
载脂蛋白
LOGO
载脂蛋白定义及功能： 血浆脂蛋白中的蛋白质部分称为载脂蛋白。基本功能是运 载脂类物质及稳定脂蛋白的结构，某些载脂蛋白还有激活 脂蛋白代谢酶、识别受体等功能。主要在肝(部分在小肠) 合成，根据发现先后主要分A、B、C、D、E五类，各类 又可细分几个亚类，以罗马数字表示。 载脂蛋白是构成血浆脂蛋白的重要组分，赋予脂类以可溶 的形式，而且在血浆脂蛋白代谢中起重要作用： (1)促进脂类运输； (2)调节酶活性； (3)引导血浆脂蛋白同细胞表面受体结合。
脂酶与脂质转运蛋白
脂酶 脂蛋白脂肪酶LPL
LOGO
存在于全身毛细血管内皮细胞表面的LPL受体上， 由肝素释放入血。功能为水解CM和VLDL中的TG ，形成小分子脂蛋白残粒 存在于肝脏和肾上腺血管内皮细胞中，由肝素释放 入血。功能为水解VLDL残粒中的TG，参与IDL向 LDL转化 存在于血液循环，由肝脏合成，以游离或与脂蛋白 结合的形式存在。功能为使新生HDL转变为成熟 HDL 可将LCAT催化生成的CE由HDL转移至VLDL、IDL 和LDL中，决定HDL和LDL质和量的变化，在胆固 醇逆转运中起重要作用 促进磷脂由CM、VLDL转移至HDL 参与富含TG的VLDL和CM的组装和分泌
血脂及血浆脂蛋白
LOGO
脂蛋白的分类
CM 电泳位置 主要载脂蛋 白 合成部位 功 能 密度(kg/L) （由小到大 原点 B48 小肠粘膜细 胞 转运外源性 TG <0.95 VLDL 前β B100，CI， CII,E 肝脏 转运内源性 TG 0.95~1.006 IDL β和前β之间 B100 血浆 转运内源性 TG、TC 1.006~1.019 LDL β B100 血浆 转运内源性 TC 1.019~1.063 HDL α AI 肝肠、血浆 逆向转运TC 1.063~1.019

血浆脂蛋白

血浆脂蛋白

极低密度脂蛋白(VLDL)
VLDL是血液中第二种富含甘油三酯的脂蛋白，呈球 形，核心部分为非极性脂类，表面为单层极化 分子。VLDL主要在肝合成，是内源性甘油三酯
的转运形式。
低密度脂蛋白(LDL)
LDL是运载胆固醇的
主要脂蛋白。呈 圆球形核心部位 为非极性脂类， 主要是胆固醇酯。
低密度脂蛋白(LDL)
甘油三酯（TG）
TG的半衰期短（5-15分钟），进食高脂、 高糖、和高热量饮食后，外源性TG可 明显增高，且以乳糜微粒形式存在。
所以必须在空腹12－16h后静脉采集TG测定 标本,以排除和减少增高见于：①冠心病。②原发性高脂 血症、动脉粥样硬化症、肥胖症、糖 尿病、痛风、甲状旁腺功能减退症、 肾病综合征、高脂饮食和阻塞性黄疸 等。
是冠心病的危险因素，可用于评价冠心病 的危险性和降脂治疗效果，且其在预 测冠心病的危险性方面优于LDL和CHO
血脂测定项目
血清外观分析 总胆固醇（TC）测定 甘油三酯（TG）测定 血清脂蛋白（LP）分析 高密度脂蛋白胆固醇（HDL-Ch）测定 低密度脂蛋白胆固醇（LDL-Ch）测定 血清载脂蛋白（Apo）测定
高密度脂蛋白(HDL)
HDL水平增高有利于外周组织清除胆固醇， 从而防止动脉粥样硬化的发生，故 HDL被认为是抗动脉粥样硬化因子。
临床上一般检测HDL胆固醇(HDL-C)的含量 来反映HDL水平
HDL与甘油三酯、冠心病的发病呈负相关。
脂蛋白(α) Lp（α）
结构类似LDL，可携带大量的胆固醇，有促 进动脉粥样硬化的作用。
2.TG减低见于：①低β-脂蛋白血症和无β-脂 蛋白血症。②严重的肝脏疾病、吸收 不良、甲状腺功能亢进症、肾上腺皮 质功能减退症等。

血脂及血浆脂蛋白检验

血脂及血浆脂蛋白检验
血脂及血浆脂蛋白
脂蛋白代谢紊乱
血脂及血浆脂蛋白
定义：
血脂：是指血浆中脂类的总称。属于中性脂肪（甘油三酯和胆固醇）和类脂（磷脂、糖脂、固醇、类固醇）的总称 脂蛋白：脂类难溶于水，正常血浆脂类物质 与蛋白质结合成脂蛋白的形式存在。
（一）血浆脂蛋白的分类
电泳分离法：根据不同密度的脂蛋白所含蛋白质的 表面电荷不同，利用电泳将其分离， 并与血浆蛋白质的迁移率比较以判断 其部位。
血浆脂蛋白代谢分类：
外源性代谢途径：指食物中摄入的胆固醇和甘油三酯在 小肠中合成CM及CM代谢的过程 。
脂蛋白代谢紊乱
高脂蛋白血症
定义：
高脂血症是指血浆中胆固醇或和甘油三酯水平升高。血浆脂类以血浆脂蛋白形式存在，因此，高脂血症一定时会导致高脂蛋白血症。
分型：
表型分型法 主要是基于各种血浆脂蛋白升高的程度不同而进行分型。该分类法不包括病因学，故称表型分类。 Ⅰ型高脂蛋白血症 又称家族性高乳糜微粒血症 Ⅱa型高脂白血症 Ⅱb型高脂蛋白血症 Ⅲ型高脂蛋白血症 Ⅳ型高脂蛋白血症 Ⅴ型高脂蛋白血症
Ⅲ
家族性高甘油三酯血症
不清楚
以甘油三酯升高为主，可有轻度胆固醇升高，VLDL明显增加。
Ⅳ
家族性低α-脂蛋白血症
β-脂蛋白缺乏血症
家族性低β-脂蛋白血症
低脂蛋白血症
添加标题
第二节 血清胆固醇测定
简介
胆固醇是人体内重要的脂类成分，具有重要的生理功能。 游离胆固醇 30% 血清总胆固醇（TC） 胆固醇酯 70% 血浆胆固醇↑ 引起动脉粥样硬化，形成堵塞性血管疾病。
血清（浆）总胆固醇测定
添加标题
气相色谱法
比色法
酶法
高效液相色谱法

脂蛋白代谢的生物化学检验

脂蛋白代谢的生物化学检验

脂蛋白代谢的生物化学检验一、血浆脂质测定(一)总胆固醇(TC)是血液中各脂蛋白所含胆固醇之总和，分为酯化型胆固醇(CE)和游离型胆固醇(FC)，其中CE占60%～70%， FC占30%～40%，两种类型的比例在健康个体或个体之间是恒定的。

【测定方法】目前常规应用酶法测定，快速精确。

【参考范围】 2022年《中国成人血脂异样防治指南》规定成人TC水平：①在5.18mmol/L(200mg/dl)以下为合适范围;②在5.18～6.19mmol/L(200～239mg/dl)范围属于边缘上升;③在6.22mmol/L(240mg/dl)以上为TC上升。

【临床意义】1、TC浓度增高，冠心病等心血管疾病发生的危急性增高。

影响TC水平的因素：①年龄与性别：新生儿TC很低，哺乳后很快接近成人水平，之后常随年龄而上升，但到70岁后不再上升甚或有所下降。

中青年期女性低于男性，女性绝经后TC水平较同年龄男性高。

②饮食习惯：长期高胆固醇、高饱和脂肪酸摄入可造成TC上升。

③种族：黑人的总胆固醇水平要高于白人。

④遗传因素。

2、TC并不是越低越好，讨论显示：①TC水平降低时增加心衰时的死亡率，而增高时可增加生存率;②在冠心病中，低血总胆固醇会增加死亡率;③TC水平上升可能可以防止痴呆。

(二)总脂质主要包括FC、CE、PL和TG等。

所采纳的测定方法不同，正常参考值有肯定的差异【测定方法】脂质抽提法和径直测定法【参考范围】成人4.0～7.5g/L;儿童3.0～6.0 g/L。

【临床意义】1、上升：高脂血症、动脉粥样硬化、糖尿病、糖原贮积病、肾小球肾炎、肾病综合征、甲状腺功能减退、高血压等。

2、降低：甲状腺功能亢进症、急性肝炎、肝硬化、恶病质、汲取不良综合征等。

二、甘油三酯(TG)构成脂肪组织，参加TC、CE合成及血栓形成。

【测定方法】建议酶法(如GPO-PAP法)作为临床试验室测定血清TG的'常规方法。

【参考范围】目前《中国成人血脂异样防治指南》仍沿用1997年《血脂异样防治建议》的标准规定我国成人TG水平：①在1.7mmol/L(150mg/dl)以下为合适范围;②1.7～2.25mmol/L(150～199mg/dl)为边缘上升;③2.26mmol/L(200mg/dl)以上为上升。

血脂及血浆脂蛋白检验

血脂及血浆脂蛋白检验

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第三节 血清三脂酰甘油的测定
（ 脂二肪）组、 织血 （Ⅱ浆 皮b脂 下型蛋 ，白 腹的 腔组大VLL成 网DD膜LL，脂肠类系和膜载，脂TT内蛋CG脏↑白↑↑周组围成组织）、B血C↑浆CⅢⅡ↑ ↑
少有混浊
深β带 深前β带
（3）参考方法的研究 老年所提出了HLPC法为TC的参考方法其各项技术指标达到了 ALBK法的要求
脂蛋白的结构
血浆脂蛋白的结构
§9.1 脂类的概述
血浆脂蛋白的组成特点
密度
脂 组类
蛋 成白
质
功能
CM
＜0.96
含TG最多， 80~95% 最少, 2%
从小肠转运外 源性甘油三酯 至肝脏及肝外 组织
VLDL
0.96~1.006
含TG 50~70% 10%
LDL
HDL
1.006~1.063
1.063~1.210
α脂蛋白相当于HDL、前β脂蛋白相当于VLDL、 β脂 蛋相当于LDL
（二）、血浆脂蛋白的组成 脂类和载脂蛋 白组成
（1）脂类：甘油三酯、磷脂、胆固醇和胆固醇 酯，其含量和比例在各类脂蛋白中差别极大。
（2）载脂蛋白（apo）：是指血浆脂蛋白中蛋白 质成分，分为apoA、apoB、apoC、apoD、apoE， 其主要功能是结合和转运脂类，此外不同载脂蛋 白还有其特殊功能。
脂蛋白血症的分型及特征
型别*
增加的脂 蛋白
血浆脂质
血浆载脂蛋白 血浆外观 电 泳
原因
从（奶肝1油）脏 上脂转层蛋运, 白下胆Ⅰ的层固型氧混醇化浊至各组Co织xMLDL的形成T是CT正炎G症常↑↑分或↑ 子↑强有力的B诱4C导8↓物↑↑A↑
奶油上层 下层透明

脂类测定

脂类测定
适于测单一蛋白，且适用于蛋白含量较 少的样品
4 比浊法 酸性试剂+蛋白质--------沉淀 5 染料结合法 酸性条件下，蛋白质------NH3+酪，与 染料中阴离子产生颜色反应。 氨基黑、考马斯亮兰
6 紫外分光光度法 色氨酸、酪氨酸 在280nm有吸收峰 保持蛋白活性 7 折光测定法
溶于溶液中的固体可增加它的光折射 率
3. 直接测定法：
封闭非LDL脂蛋白与酶的反应，从而 使LDL与酶反应
使非LDL脂蛋白与 LDL分二步水解，消 除非LDL脂蛋白
临床意义： 动脉粥样硬化 主要脂类危险因素
（四）脂蛋白（a)测定 一般用免疫化学法 临床意义： 肝脏合成。 一类独立的脂蛋白。 与动脉粥样硬化正相关。
五、血清载脂蛋白测定
血浆脂蛋白的组成特点
CM 密度 脂 组 类 成 蛋 白 质
＜0.95
VLDL
0.95~1.006
LDL
1.006~1.063
HDL
1.063~1.210
含TG最多， 80~90% 最少, 1%
含TG 50~70% 5~10%
含胆固醇及其 酯最多， 40~50% 20~25%
含脂类50%
最多，约50%
正常：清澈透明
混浊：甘油三酯高
上层奶油样，下层清澈：CM高
上层奶油样，下层混浊：CM高，VLDL高
均匀混浊：VLDL高
二、血清（浆）总胆固醇测定
（一）化学方法：
1. L-B法： 胆固醇---抽提纯化---醋酸-醋酐-硫酸 ------绿色化合物
2. ZaK反应： 胆固醇---抽提纯化---硫酸-醋酸-- Fe3+ ----紫色化合物 LRC：异丙醇沉淀蛋白--------提取胆醇----氧化铝吸附胆红素等

血浆脂蛋白的测定及临床意义

血浆脂蛋白的测定及临床意义

血浆脂蛋白的测定及临床意义摘要】血浆脂蛋白是血脂在血浆中的运输形式，密度分类法可将其分为乳糜微粒、极低密度脂蛋白、低密度脂蛋白和高密度脂蛋白四种成分。

血浆脂蛋白测定是临床上常规检测项目，是代谢障碍性疾病、动脉粥样硬化和心、脑血管疾病诊断、治疗和预防的重要指标；对高脂蛋白血症与异常脂蛋白的诊断具有重要价值。

【关键词】血浆脂蛋白低密度脂蛋白高密度脂蛋白高脂蛋白血症血脂是指血浆中脂类物质的总称。

包括三脂酰甘油（TG）、磷脂（PL）、胆固醇（Ch）、胆固醇酯（CE）和游离脂肪酸（FFA）。

由于脂类难溶于水，在血浆中会与载脂蛋白结合形成脂蛋白，以脂蛋白的形式运输。

用密度分类法（超速离心法）可将血浆脂蛋白分为乳糜微粒（CM）、极低密度脂蛋白（VLDL）、低密度脂蛋白（LDL）、和高密度脂蛋白（HDL）四种成分。

此外，还有中间密度脂蛋白（IDL），它是VLDL在血浆中的代谢产物，其组成和密谋介于VLDL与LDL之间。

正常人空腹血浆中的脂蛋白主要是低密度脂蛋白（占血浆脂蛋白总量的2/3）和高密度脂蛋白（占血浆脂蛋白总量的1/3）血浆脂蛋白测定是临床上常规检测项目，是代谢障碍性疾病、动脉粥样硬化和心、脑血管疾病诊断、治疗和预防的重要指标；对高脂蛋白血症与异常脂蛋白的诊断具有重要价值。

目前，通常以低密度蛋白胆固醇（LDL-C）和高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）分别作为测定LDL和HDL浓度的间接方法。

现将这两个项目测定的原理、操作及临床意义介绍如下：1 血清低密度脂蛋白胆固醇测定原理：空腹血清中主要含有HDL、LDL和VLDL，用聚乙烯硫酸盐-聚乙二醇甲醚选择性地沉淀LDL，离心后上清液中含HDL和VLDL。

测出上清液中胆固醇含量代表HDL-C与VLDL-C之和，同时测定血清总胆固醇，以总胆固醇减去上清液胆固醇含量即为LDL-C。

操作：1.LDL分离：于小离心管中加血清200μl和沉淀剂量100μl，混匀，置室温15分钟，然后3000rpm离心15分钟，取上清液与血清同时测定胆固醇。

人血浆脂蛋白检测方法

人血浆脂蛋白检测方法

人血浆脂蛋白检测方法
人血浆脂蛋白检测方法如下：
1、采集标本。

测定对象禁食12小时，清晨采血。

用EDTA抗凝，1小时内分离血浆，置4℃保存，3天内测定。

2、检测方法。

血浆总胆固醇（TC）用COD-PAP酶法测定，三酰甘油（TG）用GPO-PAP 酶法测定，高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）用磷钨酸镁沉淀后，以酶法测定。

低密度脂蛋
3、白胆固醇（LDL-C）以Fridewald公式计算，LP（a）用免疫比浊法测定。

仪器。

严格按照操作规程，在Olympusau2700全自动生化分析仪上进行。

通过以上步骤，就可以得出人血浆脂蛋白的检测结果。

需要注意的是，在采集标本和检测过程中，要保证操作的规范性和准确性，以免影响检测结果的准确性。

同时，对于异常的检测结果，需要进行复检和确诊，以确保诊断的准确性。

人血浆脂蛋白检测对于评估血脂水平和预防心血管疾病具有重要意义。

通过检测血浆脂蛋白水平，可以了解血脂的代谢状况，对于及早发现和预防心血管疾病具有重要的临床意义。

同时，根据检测结果，可以为患者制定个性化的治疗方案，有效控制血脂水平，减少心血管疾病的发生风险。

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➢残粒受体： 分布在代谢活跃的心肌、骨骼肌、脂肪等组织细胞。 识别、结合含ApoE的脂蛋白如CM残粒和β-VLDL残粒
➢清道夫受体： 存在于巨噬细胞表面 识别、结合修饰的LDL（氧化型LDL和β-VLDL）
（五）脂代谢有关的酶类与特殊蛋白质
酶：
LPL、肝脂肪酶（HL或HTGL）、LCAT、HMG-CoA还原酶 参与TG分解、FC合成和酯化
磷脂转运蛋白（PTP）：可促进磷脂由CM、VLDL转移至HDL
甘油三酯转运蛋白（TTP）：在富含TG的VLDL和CM组装和分泌中起主要 作用
二、血浆脂蛋白代谢
（一）CM的代谢
来源：由小肠粘膜细胞合成，经淋巴入血。 代谢过程：
食物TG
功能：转运外源性TG。
新生CM
B-48
正常人CM在血浆 中代谢迅速，半衰 期为5-15分钟，故 正常人空腹12-14h
（三）载脂蛋白
定义：
脂蛋白的蛋白部分称为载脂蛋白(apolipoprotein，Apo)
种类：
apo
A : I、 II、 IV B： 48、 100 C ： I、 II、 III
D E
CM VLDL LDL HDL
apoA apo B B48 B100 B100
A-Ⅰ,Ⅱ
apoC apo D apoE
蛋白质： 脂质转运蛋白
定义：
血浆中脂蛋白部分含有一种特殊的转运蛋白，能促进血浆各脂蛋白间 胆固醇酯、甘油三酯和磷脂的单向或双向转运和交换，这类特殊转运蛋 白称脂质转运蛋白（lipid transfer protein,LTP）。
组成：
胆固醇酯转运蛋白（CETP）：可将LCAT催化生成的胆固醇酯由HDL 转移至VLDL、IDL和LDL中，在胆固醇的逆向转运中起关键作用
分布及特点：
（四）脂蛋白受体
定义：
脂蛋白受体是一类位于细胞膜上的糖蛋白。它能以高 度的亲和方式与相应的脂蛋白配体作用，从而介导细胞对 脂蛋白的摄取与代谢，进一步调节细胞外脂蛋白的水平。
脂蛋白受体的作用：
位于各种细胞的膜上，脂蛋白转化分解后的残基主要通过脂 蛋白受体被摄入细胞。不仅是运送脂蛋白至细胞所必需，也是从 血和外周组织中有效清除具有潜在致动脉粥样硬化的脂蛋白所必 需的。
本章内容概要
第一节 概述 第二节 血脂、脂蛋白及载脂蛋白测定
第一节 概 述
一、血脂及血浆脂蛋白
定义：
血脂：是血浆中脂类（脂质）物质的总称。包括 中性脂肪（甘油三酯TG）和类脂（胆固醇Ch、胆固 醇酯CE 、磷脂、糖脂、游离脂肪酸）。
脂蛋白：脂类难溶于水，正常血浆脂类物质 与蛋白质结合成脂蛋白的形式运输和代谢 。
（三）HDL的代谢
来源：主要由肝细胞合成，此外，小肠也可合成 少量，还有血浆中CM、VLDL 脂解过程中 所释放的磷脂、胆固醇及apo也可产生新生 的HDL。
代谢过程：
功能：将胆固醇从肝外组织转运到肝进行代谢（逆向转运）。
三、脂蛋白代谢紊乱
（一）高脂蛋白血症（多见）
后血浆中不含CM。
CM 经淋巴入血 小肠
TG AC
apo C、apo E
A
E
P C
C
CM
B-48
TG C AC
E
胆固醇 脂酸
HL
肝 LRP受体
HDL
apo A、apo C
LPL
LDL受体
B-48 TG C
E
CM残粒
甘油
外周组织 脂酸
（二）VLDL 及LDL的代谢
来源：VLDL主要由肝细胞合成，分泌入血，少量来自 小肠；LDL是在血浆中由VLDL转变而来
种类：
已有很多种，主要有LDL受体、残粒受体（remnant receptor） 及清道夫受体（scavenger receptor）其它有ApoE受体（CM） HDL受体和β-VLDL受体等。
各种脂蛋白受体功能
➢LDL受体： 分布于肝细胞、动脉壁平滑肌细胞等细胞膜表面 识别结合ApoB100、E的脂蛋白如LDL、VLDL等。 合成受体内胆固醇的负反馈调节
＋
电
泳
原点 γ β α2 α1 清蛋白
血
浆
脂
蛋－
＋
白
电
泳
原点
β 前β α
（CM）
（二）血浆脂蛋白的组成与结构
脂类：甘油三酯、磷脂、胆固醇、胆固醇酯 血浆脂蛋白
蛋白质：载脂蛋白
各种血浆脂蛋白的组成及功能
密度
脂 组类
成
蛋 白
质
主要生 理功能
CM 乳糜微粒
＜0.95
98~99%
含TG最多
VLDL 前β脂蛋白
血脂、血浆脂蛋白及载脂蛋白检验的重要性 血脂代谢异常
动脉粥样硬化(atherosclerosis, AS) 冠心病（CHD）等心、脑血管疾病
临床常规血脂和脂蛋白测定项目: 总胆固醇（totalcholesterol，TC，包括FC和CE） 甘油三酯(TG) 高密度脂蛋白－胆固醇(HDL-C) 低密度脂蛋白－胆固醇(LDL- C) 载脂蛋白等。
（一）血浆脂蛋白的分类
超速离心法：
• 电泳法:
乳糜微粒 CM
－－－－－－－－－－ 乳糜微粒（CM） 电
密 度 极低密度脂蛋白 VLDL
从 低
中间密度脂蛋白 IDL
到 低密度脂蛋白 LDL 高 脂蛋白(a) Lp(a)
高密度脂蛋白 HDL
泳
β脂蛋白
速 度
由
前β脂蛋白
慢
到
Байду номын сангаас
快 α-脂蛋白
血
浆
蛋 白
－
0.95~1.006
90~95% TG多
（次于CM）
最少, 1%
5~10%
转运外源性TG 转运内源性 TG
LDL β脂蛋白
1.006~1.063
75~80% 含胆固醇及其 酯最多
20~25%
转运胆固醇 到肝外组织
HDL α脂蛋白
1.063~1.210
含脂类50%
最多，约50%
逆向转运肝外 胆固醇回肝
代谢过程：
功能： VLDL转运内源性TG ；LDL转运胆固醇到肝外组织
新生VLDL B-100
脂酸 胆固醇
HL
肝 LDL受体
E
TG C
C A
apo C、apo E
E
P C
C
HDL
apo C
VLDL
B-100 TG
E CC
LPL
B-100 CE
B-100 TG C E
IDL
甘油
外周组织 脂酸
LDL
LDL受体
C-Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ
E
功能：
①与脂质的亲和作用而使脂质溶于水性介质中。
②运转胆固醇和甘油三酯。
③作为脂蛋白外壳的结构成分，与脂蛋白外生物信息相联系。
④以配体的形式作为脂蛋白与特异受体的连接物。（如： apoB100和apoE参与LDL受体的识别；apoE能被CM受体识别）
⑤激活某些与血浆脂蛋白代谢有关的酶类（如：ApoAI和CI能 激活卵磷脂-胆固醇酰基转移酶LCAT，ApoCⅡ激活LPL）