血液凝固和影响血液凝固的因素
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血液凝固和影响血液凝固的因素
一、实验目的及原理:
通过测定某些条件下的血液凝固时间,加深理解影响血液凝固的因素。
内源性凝血和外源性凝血途径,影响血液凝固的因素。
内源性凝血是指参与血液凝固的凝血因子全部存在于血浆中;外源性凝血是指在组织因子参与下的血凝过程。
本实验采用动物颈动脉放血取血,血液几乎未与组织因子接触。
因此,凝血过程主要是内源性凝血系统的作用。
肺组织浸润液中含丰富的组织因子,加入试管观察外源性凝血系统的作用。
二、实验材料:
家兔;石蜡油,冰块,肝素,草酸钾,氨基甲酸乙酯;试管,动脉夹,动脉插管,恒温水浴槽,秒表
三、实验方法:
1.用200g/L氨基甲酸乙酯按5ml/kg体重剂量给家兔耳缘静脉注射麻醉,将兔仰卧固定于手术台上。
2.切开颈部皮肤后,分离一侧颈总动脉,头端用线结扎,向心端夹上动脉夹。
用剪在近结扎线处的血管壁剪一“V”形小口,向心方向插入动脉插管,用线结扎固定。
以备取血之用。
3.取试管8支,编号。
按下实验条件准备完毕。
试管编号实验条件凝血时间(结果)
1 空管、对照管18分04秒
2 粗糙面放棉花少许7分18秒
3 石蜡油涂管内壁65分26秒
每管加血2 ml 4 NaCl 2ml42分45秒
5 温度置于冰浴槽中不凝
6 加肝素8单位(加血后摇匀)不凝
7 加38g/L草酸钾3滴(加血后摇匀)不凝
8 加肺组织浸液0.1ml(加血后摇匀)15秒
小烧杯放血10ml 放血时用竹签不断搅动,2~3min后血液不凝,
用水冲洗竹签后观察之竹签上有丝状纤维小烧杯放血10ml 对照血液凝固
4.立即用秒表计时,每隔15s将试管倾斜一次,观察血液是否凝固,至血液成为凝胶状时,记下所历时间。
5.实验观察记录各管的凝血时间。
四、实验结果:
(如上表所记录,数据为班上各组的平均值。
)
五、实验讨论:
1,室温基准时间,一号及其他管血液凝固,是因为血液与管壁接触,
启动了内源性凝血过程
2,试管内有少量棉花比1时间短,血液和物体表面接触面越粗糙,凝血越快
3,试管壁涂有石蜡油比1时间长,血液和物体表面接触面越光滑,凝血越慢
4,生理盐水2ml 比1时间长,因为血液被稀释了,凝固时间加长
5,有冰块的烧杯比1时间长,关于凝血的生物酶的在低温下活性低
6,加肝素8单位比1时间长,肝素是抗凝剂,能增强抗凝血酶Ⅲ与凝血酶的
亲和力,加速凝血酶失活;抑制血小板粘附、聚集
7,加草酸钾3滴比1时间长,草酸钾是抗凝剂,与血中钙离子结合形成难解
离的草酸钙沉淀,钙离子是凝血过程中所需的物质之一,减
少钙离子,抑制凝血过程
8,肺组织浸液0.1ml 比1时间短,肺组织浸液含组织因子,启动外源性凝血过程,
加速血液凝固
9,竹丝搅拌影响血液凝固,就是用竹丝表面(毛糙)把因子I(纤维蛋白原)迅速的变成纤维蛋白并卷走,失去纤维蛋白,血液的凝血过程打断,血液就不会凝固了。
六、实验结论:
七、参考文献:
1. 王卓强.徐震.刘秀珍.范里莉.体外不同程度生理盐水稀释血液对凝血功能的影响[J].解放军医学杂志,2008,33(10):—1268—1271
2. 陆源.林国华.杨午鸣.机能学实验教程(第二版)科学出版社2010.P106。