1、限制性核酸内切酶、DNA连接酶、载体
2、限制性内切酶、磷酸二酯键、黏性末端、黏性末端、平末端
3、细菌的质粒、噬菌体的衍生物、动植物病毒、DNA、能够在宿主细胞中复制并稳定地保存、载体DNA必须有一个或多个限制酶切点，以便目的基因插入到载体上去、
具有某些标记基因，便于进行筛选
4、目的基因的获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定
5、人工合成法、反转录法、根据已知的氨基酸序列合成DNA、基因文库、基因组文库、部分基因组文库、PCR、DNA
6、聚合酶链式反应、体外复制特定DNA片段的核苷酸合成、DNA双链复制、指数、引物、高温变性解螺旋、低温复性恢复双链、中温延伸
7、目的基因、启动子、终止子、标记基因
8、转化、农杆菌转化法基因枪法、花粉管通道法、植物细胞组织培养、细胞的全能性、显微注射技术、动物细胞培养9、Ga2+（GaCl2）、感受态
10、检测转基因生物染色体的DNA上是否插入目的基因、DNA 分子杂交技术、检测目的基因是否转录了mRMA、DNA分子杂交技术、检测目的基因是否翻译成蛋白质、抗原－抗体杂交、个体生物学水平鉴定
11、正常基因、遗传病、
12、基因工程能够打破种属的界限、在基因水平上定向改变生物遗传性、
已有基因的重新组合,产生的蛋白质是自然界已经存在的
13、从预期的蛋白质功能出发、设计预期的蛋白质结构、推测应有的按基酸序列、
找到相对应的脱氧核苷酸序列、基因、蛋白质、蛋白质、第二代基因工程
选修三专题二细胞工程填空
1、细胞工程：
研究的水平: 细胞整体水平或细胞器水平
种类: 植物细胞工程、动物细胞工程
2、植物细胞工程技术有：植物体细胞杂交和植物组织培养；植物细胞工程所采用技术的理论基础是细胞的全能性。
动物细胞工程技术有动物细胞融合、动物细胞培养、单克隆抗体技术、核移植、胚胎移植等。
3、生物体的细胞具有使后代细胞形成完整个体的潜能的特性叫细胞的全能性。其原理是生物体的细胞一般地包含有该物种所特有的全套遗传物质，都有发育成为完整个体所必需的全部基因，。细胞全能性的大小依次为受精卵＞生殖细胞＞体细胞。细胞表达全能性的条件是：①离体状态；②有一定营养物质、激素和其他外界条件
4、让已经分化的细胞,经过诱导后,失去其特有的结构和功能而转变成未分化细胞的过程叫脱分化；愈伤组织由一团排列疏松而无规则,高度液泡化的呈无定形状态的薄壁细胞组成，在组织培养诱导其形成时的光照条件必需是避光培养。脱分化产生的愈伤组织继续进行培养,又可以重新分化成根或芽等器官,这个过程叫再分化。
5、组织培养过程（流程图）
离体的植物器官、组织或细胞---------------愈伤组织
----------------胚状体或丛芽--------试管苗
6、植物体细胞杂交是指将不同的植物体细胞,在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成新的植物体的技术。与传统的
有性杂交相比，其优点在于：打破了不同种生物间的生殖隔离限制，大大扩展了可用于杂交的亲本组合范围、克服不同生物的远缘杂交的不亲和性。
7、植物体细胞杂交中用酶解法（纤维素酶、果胶酶）先去细胞壁得到原生质体，然后再让其融合，诱导融合的方法有物理法（包括离心、振动、电刺激）和化学法（一般用聚乙二醇（PEG）），标志着两原生质体融合成功的是杂种细胞再生细胞壁。
9、植物细胞工程的实际应用
(一)植物繁殖的新途径
①微型繁殖：快速繁殖优良品种的植物组织培养技术。
其特点是: 保持优良品种的遗传特性;高效快速地实现种苗的大量繁殖.
②作物脱毒：材料: 无病毒的茎尖
(2)切取茎尖进行组织培养获得脱毒苗，用之进行繁殖的作物不会或极少感染病毒。
③神奇的人工种子
优点:后代无性状分离不受气候、季节和地域限制、方便贮存和运输(与植物组织培养相比)。
(2)技术: 植物组织培养
(3)结构人工薄膜（可提供营养，似胚乳成分）+胚状体或不定芽或顶芽或腋芽。
(二)作物新品种的培育
①单倍体育种：
方法: 花药的离体培养
优点: 后代稳定遗传,都是纯合体; 明显缩短育种年限
②突变体的利用
产生: 植物组织培养
利用: 筛选对人们有利突变体,进而培育新品种
(三)细胞产物的工厂化生产
1.种类:蛋白质,脂肪,糖类,药物,香料,生物碱等.
2.技术: 植物的组织培养（一般在在愈伤组织时的细胞中可以获得相应细胞产物）
10、动物细胞培养：就是从动物有机体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞，然后，放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。
11、悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上称细胞贴壁：
12、当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制。
13、动物细胞培养过程；
胰蛋白酶、胶原蛋白酶加培养液稀释制成
动物胚胎或幼龄动物的组织、器官
----------------------------------单个细胞
----------------------------
原代培养
细胞悬液--------------------10代细胞------50代细胞---------无限传代（传代培养）
细胞株细胞系
（遗传物质未改变）（遗传物质已改变）
14、动物细胞培养的条件
（1）无菌、无毒的环境
•（添加一定量的抗生素，定期更换培养液）
（2）营养：葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清等。（3）温度和pH：温度36.5+（-）0.5度；pH：7.2-7.4 （4）气体环境：所需的气体主要是O2和CO2（95%空气和5% CO2）
15、植物细胞和动物细胞培养的比较
16、动物核移植是将动物的一个细胞的细胞核，移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中。使其重组并发育成一个新的胚胎,这个新的胚胎最终发育为动物个体.用核移植的方法得到的动物称为克隆动物
17、体细胞核移植过程流程图
供体体细胞－－－细胞培养－－供体细胞核
