石蜡免疫荧光实验步骤 (2)
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IF石蜡实验步骤
试剂:一抗:Ibα-1(Wako 01p-19741)
二抗:
试剂:蒸馏水(PH7.25~7.35)、TBS、柠檬酸PH6.0、二甲苯、100%酒精、95%酒精、75%酒精、正常驴血清、DAPI、防荧光淬灭剂。
免疫组化步骤:
1. 石蜡切片脱蜡至水。
2. 用柠檬酸PH6.0修复组织,室温冷却。TBS洗。
3. 10%驴血清孵育30min。
4. 滴加一抗Ibα-1(1-200)4°过夜。
5. 复温15min,TBS冲洗3次,每次5min。
6. 滴加相应荧光二抗(1:100)室温避光孵育1h。
7. TBS洗5min*3次。用DAPI(1:500)染核,避光孵育10min。
8. TBS洗5min*3次,用防荧光淬灭剂封片,镜检。