动物细胞培养.PPT

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C.胚胎移植
D.动物细胞培养
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3、用于动物细胞培养的组织和细胞大都取自 胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织,
其主要原因是这样的组织细胞( D )
A.容易产生各种变异 B.具有更强的全能性 C.取材十分方便 D.分裂增殖的能力强
4.动物细胞培养与植物细胞培养的重要区别在
于( A )
A.培养基不同; B.动物细胞培养不需要在无菌条件下进行; C.动物细胞可以传代培养,而植物细胞不能; D.动物细胞能够大量培养,而植物细胞能培养 成植株。
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1.预习体细胞核移植技术 2.完成练习册及报纸相关习题
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原代培养
通常将动物组织消化后的初次培养称为 原代培养。
传代培养
贴满瓶壁的细胞需要重新用胰蛋白酶等处理 让细胞继续培养,这样的培养过程通常被称 为传代培养。(即从原培养瓶内转接到新的 培养瓶内过程。)
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细胞株
从原代培养细胞群中筛选出进行传代 培养的细胞,能传到40-50代,其遗传物质 没有发生变化。
就是从动物机体中取出相关组织,将 它分散成单个细胞,然后,放在适宜的培 养基中,让这些细胞生长和繁殖。
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2、培养过程:
为什么要把动物组织分散成单 个细胞?怎样分散成单个细胞 的?完成44页两个问号
成块的组织中细胞与细胞靠在 一起,彼此限制了细胞的生长 和增殖。另外,单个细胞所需 的营养容易供应,其代谢废物 容易排出。所以分散成单个细 胞后培养。
比较项目
植物组织培养 动物细胞培养
原理
细胞的全能性
细胞增殖
培养基性质
固体培养基
液体培养基
培养基特有成分
蔗糖、植物激素
葡萄糖、动物血清 促生长因子
培养结果
植物体
细胞株、细胞系
培养目的
快速繁殖、培育 无病毒植株等
获得细胞或 细胞分泌蛋白
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动物细胞培养
概念: 原理 细胞增殖
过程
细胞株
细胞系
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50
7
44页两个小问题的答案
用胰蛋白酶分散细胞,说明细胞间的物质主要是蛋 白质。胃蛋白酶作用的适宜pH约为2,当pH大于6时,胃 蛋白酶就会失去活性。胰蛋白酶作用的适宜环境pH为 7.2~8.4。多数动物细胞培养的适宜pH为7.2~7.4,胃 蛋白酶在此环境中没有活性,而胰蛋白酶在此环境中活 性较高,因此胰蛋白酶适宜用于细胞培养时的消化。
动物细胞培养都需要满足什么条件?
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4、动物细胞培养条件
无菌、无毒的环境
离体培养的细胞对微生物和 有毒物质没有防御能力。
(添加一定量的抗生素,定期更换培养液)保证细胞顺
营养
利的生长增 殖
(葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、
动物血清、微量元素等)
温度和PH
温度36.5+0.5度,pH 7.2~7.4
气体环境 O2和CO2(95%空气和5%CO2)
部分细胞“癌变”, 无限传代




贴 壁
培 养
细胞
50代细胞 剥离、分瓶 10代 细胞
动物细胞培养不能 最终培养成动物体
传Fra Baidu bibliotek培养
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随细胞增多, 出现接触抑制
细胞贴壁生长
部分细胞癌变, 失去接触抑制,
无限传代
细胞株
细胞系
细胞 悬浮液
10代 细胞
50代 细胞
无限 传代
原代培养
传代培养
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任务:阅读教材第46页黑体字后面 时间:4分钟 问题:
细胞系
传到40-50代后有部分细胞遗传物质发 生了变化,具有癌细胞的特点,失去接触抑 制,可能在培养条件下无限制的传代下去。
注意
目前使用的细胞通常为10代以内,以保持 细胞正常的二倍体核型。
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培养过程:
动物胚胎或 胰蛋白酶
幼龄动物的 组织、器官
剪碎
去掉组织 间蛋白
加培养液
单个细胞
细胞 悬浮液
分化程度低,增殖能力强
胰蛋白酶除了可以消化细胞间的蛋白外,长时间的 作用也会消化细胞膜蛋白,对细胞有损伤作用,因此必 须控制好胰蛋白酶的消化时间。
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3、几个重要的概念
细胞贴壁
悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上(单层)。 要求: 培养瓶(皿)内表面光滑、无 毒、易于贴附。
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接触抑制
当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时,细胞 会停止分裂增殖,这种现象称为细胞的接触抑 制。
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CO2培养箱
哺乳动物离体细胞培养和体内细胞一样,需 要在恒足温度下才能生存,温差变化一般不应超 过0.5度,因此培养箱对温度应具有较高灵敏度。
CO2培养箱的优点在于能恒定地供应一定量 的CO2,一般5%即可维持培养液PH值稳定。
培养基的类型
天然培养基: 营养价值高,成分复杂。 合成培养基:成分明确,便于控制试验条件。




适宜条件
细 胞
分瓶培养 细 胞
细 胞
原代培养
特点 贴壁生长,接触抑制
传代培养
培养条件 无菌无毒,营养,温度、PH,气体环境 21
1、在动物细胞培养过程中遗传物质发
生改变的细胞是( A )
A.细胞系
B.细胞株
C.原代细胞
D.传代细胞
2、动物细胞工程技术的基础是( D )
A.动物细胞融合 B.单克隆抗体
专题2.2动物细胞工程
1
动物细胞工程常用的技术手段
动物细胞培养—基础
核移植 动物细胞融合 生产单克隆抗体
2
2.2.1动物细胞培养和核移植技术
3
一、动物细胞培养
材料一:在治疗烧伤病人时,通常是取病人 的健康皮肤进行自体移植。对于大面积烧伤 的病人,自体健康皮肤为非什常么有要限进,行使动用他人 皮肤来源又不足,且会产物生细排胞斥培反养应?。怎样 才能获得大量的自体健康皮肤呢? 材料二:许多动物细胞能分泌蛋白质,如抗 体等。但是,单个细胞产生的蛋白质很少, 怎样才能获得大量的分泌蛋白呢?
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5、动物细胞培养技术的应用
(1)生产蛋白生物制品:病毒疫苗、干扰素、 单克隆抗体等; (2)获得大量自身的皮肤细胞,用于植皮; (3)作为基因工程的受体细胞。 (4)用于检测有毒物质; (5)用于生理、病理、药理等方面的研究, 为治疗和预防疾病提供理论依据;
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6、植物细胞和动物细胞培养的比较
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任务:阅读教材第44-46页第一段
时间:4分钟
问题:
1、什么是动物细胞培养? 2、具体培养过程 (1)为什么要把动物组织分散成单个细胞? 完成44页两个问号。 (2)什么叫细胞贴壁?什么叫接触抑制? (3)什么叫原代培养?什么叫传代培养? (4)总结出具体的培养过程?
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一、动物细胞培养
1、概念: