实验——制备牛肉膏蛋白胨固体培养基、纯化大肠杆菌课后
练习(1)
1．在缺乏氮源的培养基上大部分微生物无法生长；在培养基中加入青霉素可以抑制细菌和放线菌；在培养基中加入10%酚可以抑制细菌和霉菌。利用上述选择培养基依次能从混杂的微生物群体中分离出( )
A．乳酸菌、金黄色葡萄球菌、放线菌
B．固氮细菌、大肠杆菌、放线菌
C．固氮细菌、霉菌、放线菌
D．固氮细菌、金黄色葡萄球菌、放线菌
2．下列关于配制培养基的叙述，正确的是( )
A．制作固体培养基必须加入琼脂
B．加入青霉素可得到放线菌
C．培养自生固氮菌时不需要氮源
D．发酵工程一般用半固体培养基
3．下列物质中，不能用作酵母菌碳源的是（）
A．含碳有机物 B．蛋白胨
C．含碳无机物 D．石油、花生粉饼等天然物质
4．利用稀释涂布平板法纯化的大肠杆菌，经培养后发现培养基上出现了多种菌落，不可能的原因是（）
A．培养基制备过程中被杂菌污染
B．接种过程中，无菌操作不符合要求
C．系列稀释时，无菌操作不符合要求
D．由大肠杆菌的种类不同造成的
5．大肠杆菌能够在哪种培养基上生长繁殖（）
A．无氮培养基
B．分解尿素的细菌的选择培养基
C．纤维素分解菌的选择培养基
D．牛肉膏蛋白胨培养基
6．下表是一种培养基的配方，请回答：
(1)此培养基的营养成分有________类，其中蛋白胨能提供的营养物质有________、________、________等，琼脂的作用是________。
(2)在培养基定容之后，必须进行的重要步骤是____________________。
(3)该培养基从物理性质看属于________培养基，能培养的细菌从同化作用看其代谢类型是
________。
(4)此培养基如要培养霉菌时需将培养基的pH调至________，如要培养细菌时需将培养基的pH 调至________。
(5)若用此培养基纯化大肠杆菌，最常用的方法是________、________。最终，使大肠杆菌在固体培养基上形成单个________，从而获得纯种菌株。
7．平板冷凝后，要将平板倒置，其原因是（）
A．接种时再拿起来方便
B．在皿底上标记日期等方便
C．正者放置容易破碎
D．可以使培养基表面的水分更好地挥发
8．以下关于菌种保藏的叙述，错误的是（）。
A．菌种保藏的目的是保持菌种的纯净
B．固体斜面培养基可用于菌种的临时保藏
C．菌种的长期保存一般采用甘油管藏
D．由于甘油管藏菌种在－20 ℃条件下进行，因此对甘油可不必灭菌
9．分离土壤中分解尿素的细菌，对培养基的要求是（）
①加尿素②不加尿素③加琼脂④不加琼脂
⑤加葡萄糖⑥不加葡萄糖⑦加硝酸盐⑧不加硝酸盐
A．①③⑤⑦ B．②④⑥⑧ C．①③⑤⑧ D．①④⑥⑦
10．有关平板划线操作的叙述不正确的是（）
A．第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物
B．每次划线结束，灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后接种环上残留的菌种
C．在第二区域内划线时，接种环上的菌种直接来源于菌液
D．划线结束后，灼烧接种环，能及时杀死接种环上的菌种
参考答案：
1．答案： C
解析：综合分析可知选择培养基依次选择的是：固氮细菌、霉菌和放线菌。
2．答案： C
解析：固体培养基需加入凝固剂，琼脂是常用的凝固剂，但不是唯一的；青霉素可抑制细菌和
放线菌的生长；发酵工程一般用液体培养基。自生固氮菌能够将空气中的氮还原成氨，故培养基配制时不需加氮源。
3．答案： C
解析：
4．答案： D
解析：大肠杆菌培养基中出现了多种菌落，说明污染了杂菌，杂菌可能来自培养基，也可能是因为操作过程中无菌操作不符合要求。
5．答案： D
解析：大肠杆菌在含碳源、氮源、水、无机盐的培养基上才能生长，A中没有氮元素，B、C中的氮元素和碳元素不能被大肠杆菌利用。
6．答案： (1)5 碳源氮源维生素使培养基凝固
(2)调节pH (3)固体异养型(4)酸性中性或微碱性(5)平板划线分离法涂布分离法
菌落
解析： (1)此培养基中牛肉膏和蛋白胨含有糖、维生素(属生长因子)和有机氮，再加上NaCl、水。所以共包括5类营养成分。琼脂只作为凝固剂，不起营养作用。(2)培养基中各种成分都溶化并定容后需根据所培养微生物的生长发育的需要调整好pH后再分装。(3)本培养基含有琼脂，属固体培养基，因培养基中含有有机物，培养的细菌的同化类型为异养型，若培养自养型生物，按照培养基配制时经济节约的原则，不需加有机碳。(4)如要培养霉菌，培养基的pH需调至酸性，培养细菌需调至中性或微碱性。(5)微生物接种方法很多，如平板划线分离法、涂布分离法，此外还有平面接种或穿刺接种等，但前两种是最常用的。最终目的是使聚集在一起的菌种分散到培养基表面，形成肉眼可见的子细胞群体，即菌落。
7．答案： D
解析：平板冷凝后，要将平板倒置，使培养基表面的水分挥发，防止皿盖上的冷凝水掉下污染培养基。
8．答案： D
解析：接种前培养基都需灭菌。
9．答案： C
解析：试题分析：分离土壤中分解尿素的细菌，培养基中要有尿素、琼脂糖、葡萄糖，尿素给分解尿素的细菌提供氮源，不加硝酸盐。
考点：本题考查分离土壤中分解尿素的细菌的知识。意在考查能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。
10．答案： C
解析：在操作的第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物，每次划线之前都要灼烧接种环，是为了杀死上次划线结束后接种环上残留的菌种，在操作结束后仍要灼烧接种环，是为了及时杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者。A、B、D对。在第二区域内划线时，接种环上的菌种直接来源于第一区域末端。C错。
